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INSTRUCCIONES DE USO Revisión 1 Feb.2014 AGAR XLD Agar XLD presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1080 Agar XLD presentación placas de 90 mm Caja 20 unidades. Catálogo 930 Agar XLD presentación Frascos 100 ml Caja 20 unidades. Catálogo 5121 USO PREVISTO Agar XLD (Agar Xilosa Lisina Desoxicolato) es un medio moderadamente selectivo y de diferenciación recomendado para el aislamiento y la diferenciación de patógenos entéricos gram negativos (Salmonella y Shigella) a partir de muestras clínicas. FORMULA EN g/l Lactosa Monohidrato 7.50 Extracto Levadura 3.00 Sacarosa 7.50 Desoxicolato Sódico 2.50 Tiosulfato Sódico 6.80 Citrato férrico de amonio 0.80 Cloruro Sódico 5.00 Rojo fenol 0.08 L-Lisina 5.00 Agar Bacteriológico Xilosa 3.50 13.50 Final pH 7.4 ± 0.2 a 25ºC PREPARACION Agar XLD presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1080 (Medio deshidratado) Suspender 55.2 gramos del medio en un litro de agua destilada. Calentar agitando frecuentemente. Dejar hervir durante un minuto o hasta disolución completa. EVITAR SOBRECALENTAMIENTO. NO AUTOCLAVAR. Distribuir en recipientes adecuados. Las placas preparadas deben almacenarse entre 8-15°C. El color del medio preparado es rojizo naranja El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color rosado. Si hay algún cambio físico no utilizar el medio. La presentación de Agar XLD placas de 90 mm Caja 20 unidades. Catálogo 930 (Medio preparado). Listo para su uso Frascos 100 ml Caja 12 unidades. Catálogo 5121. Medio preparado. Listo para su uso (Fundir y dispensar en placas) PRINCIPIO Y APLICACION AGAR XLD fue desarrollado principalmente para el aislamiento y diferenciación de bacilos entéricos Gram-negativos, particularmente Salmonella y Shigella, a partir de muestras clínicas. Se ha comprobado que es más efectivo que otros medios diferenciales para bacilos entéricos. La xilosa se incorpora en el medio dado que la fermentan prácticamente todos los entéricos, excepto Shigella, y esta propiedad hace posible la diferenciación de dicha especie. La lisina se incluye para permitir la diferenciación del grupo Salmonella de los organismos no patógenos, dado que, sin lisina, Salmonella fermentaría rápidamente la xilosa y no se distinguiría de las especies no patógenas. Cuando la Salmonella agota el suministro de xilosa, la lisina es atacada por la enzima lisina decarboxilasa, lo que genera un cambio a un pH alcalino que imita la reacción de Shigella. Para evitar el cambio similar en los organismos coliformes positivos a la lisina, se añaden lactosa y sacarosa para producir ácido en exceso. El Rojo fenol es el indicador de pH. El extracto de Levadura es la fuente de vitaminas, particularmente del grupo-B esencial para el crecimiento bacteriano. El Cloruro sódico mantiene el balance osmótico. Para aumentar la capacidad de diferenciación de la fórmula, se incluye un sistema indicador de H2S, formado por tiosulfato sódico y citrato férrico amónico, para la visualización del ácido sulfhídrico producido, lo que origina la formación de colonias con centros de color negro. Los organismos no patógenos no productores de H2S no decarboxilan la lisina; por tanto, la reacción ácida producida por dichos organismos evita el oscurecimiento de las colonias, lo que sucede solo con pH alcalino o neutro. TIPO DE MUESTRAS 3 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com Fecales o torundas rectales La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en Microbiología Clínica. PROCEDIMIENTO 1.- Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo 2.- Incubar en condiciones aeróbicas a 35 ± 2°C durante 18-24 horas. 3.- Lectura e interpretación de los resultados CARACTERISTICAS DE COLONIAS ORGANISMOS Arizona Citrobacter E. coli, Enterobacter, Serratia Edwardsiella Klebsiella Proteus mirabilis and P.vulgaris Proteus morganii and P. rettgeri Salmonella Providencia and Shigella CARACTERISTICAS COLONIA Rojo transparente con centro negro Amarillo y opaco. Puede presentar un centro negro y bordes claros. Amarillo y opaco. Zona de precipitación amarilla alrededor de la colonia Roja con centro negro y bordes claros Grande, amarillo claro, mucoide u opaca. Zona de precipitación amarilla alrededor de la colonia Amarilla, transparente con bordes claros. Centro negro especialmente el P. miriabilis. Roja y transparente Roja y transparente con centro negro, si produce H2S Roja y transparente CONTROL MICROBIOLOGICO Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de células tipo, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 18-24 horas. Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Escherichia coli ATCC 8739 Salmonella typhimurium ATCC 14028 Shigella flexneri ATCC 12022 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Staphylococcus aureus ATCC 6538 Desarrollo Color Colonia Moderado Moderado Bueno Bueno Inhibido Inhibido Amarillo (precipitado) Amarillo (precipitado) Rojo Claro (centro negro) Rojo BIBLIOGRAFIA Taylor, A. J. Clin. Path. 44:471. 1965. Taylor and Harris, A.J. Clin. Path. 44:476. 1965.Rollender, W. U. Beckford; R.D. Belsky, B. Krostoff (1969) Comparison of Xylose Lysine desoxycholate agar and MacConkey agar forthe isolation of Salmonella and Shigella from clinical specimens (tech. Bull. Reg. Med. Tech, 39 (1) 8-p)European Pharmacopoeia. 6.5 Diagnostico in vitro Solo para uso profesional Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com EP ALMACENAMIENTO Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación. Utilizable hasta la fecha de caducidad. Placas preparadas almacenar entre 8-15°C Frascos preparados almacenar entre 2-8°C Utilizable hasta la fecha de caducidad. Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 4 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com
