ESPECIALIZACION EN REPRODUCCIÓN BOVINA INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC) Jerónimo Luis de Cabrera 106 (5000) Córdoba, Argentina Telefax: 54 351 471 5418 e-mail: irac@iracbiogen.com,ar Curso de Transferencia de Embriones. Fecha:_21/junio/2011 Nombre: EDILSON ANTONIO ARREDONDO GONZALEZ 1. 20 puntos. Formule dos protocolos de superovulación: uno para vacas Holstein y otro para vacas Brahman. Fundamente cada uno de los procesos y drogas a utilizar y las ventajas y desventajas del tratamiento elegido para cada caso. 1R/. Tratamiento superovulación Holstein El protocolo que se propone para superovular una vaca Holstein contiene como gonadotrofina extracto de pituitaria (folltropin); administrado vía intramuscular y con una dosis total de 400mg (20ml) en dos aplicaciones diarias decrecientes durante 4 días consecutivos. A continuación se muestra el protocolo completo de superovulacion. Día 0 Día 4 Día 5 Dia 6 Dia 7 Dia 8 Dia 9 Dia 15 Am Am Pm Am Pm Am Pm Am Pm Am Pm Am Disp. P4 + 2.5mg BE + 50mg P4 4ml folltropin 4ml 3ml 3ml 2ml + Pgf 2ml + Pgf 1ml + retiro disp. P4 1ml Celo GnRH (24h) IA IA colecta El día 0 (am) se coloca un dispositivo con progesterona, acompañado de una inyección intramuscular de 50mg de progesterona y otra de 2.5mg de benzoato de estradiol im, con el fin de inducir el desarrollo sincrónico de una nueva onda folicular cuatro días después aproximadamente. Del día 4 del protocolo, al día 7, se realiza la aplicación de folltropin en dos dosis diarias y decrecientes. 1 El día 6 (am y pm) se aplica la prostaglandina y para el día 7 (am) se retira el dispositivo con progesterona. El día 8(am), 24 horas después de retirado el dispositivo se administra una dosis de GnRH para inducir la ovulación. El día 8 (pm) y día 9(am) se realizan las IATF a las 12 y 24 horas después de la GnRH El dia 15 se realiza la colecta de los embriones. Ventajas del protocolo. Garantiza una buena sincronía de la onda folicular y la ovulación lo cual aumenta la cantidad de ovocitos y embriones colectados. No es necesario detectar celo para realizar la inseminación artificial. Es un protocolo corto en comparación con muchos protocolos anteriormente realizados para superovular vacas. Desventajas: Aumenta el stress en los animales puesto al número de entradas al corral y a la cantidad de inyecciones continuas. Tratamiento superovulacion brahmán El protocolo propuesto para superovular ganado brahmán es similar al protocolo anterior ya que se compone de las mismas hormonas y los tiempos de aplicación son muy similares pero con algunas variables de tiempo y tamaño de la dosis. Día 0 Día 4 Día 5 Dia 6 Dia 7 Dia 8 Dia 9 Dia 15 Am Am Pm Am Pm Am Pm Am Pm Am Pm Am Disp. P4 + 2.5mg BE + 50mg P4 2ml folltropin 2ml 1.5ml 1.5ml 1ml + Pgf 1ml + Pgf 0.5ml 0.5ml + retito disp. P4 (opcional) Celo GnRH (12h) IA IA colecta El día 0 (am) se coloca un dispositivo con progesterona, acompañado de una inyección intramuscular de 50mg de progesterona y otra de 2.5mg de benzoato de estradiol im, con el fin de inducir el desarrollo sincrónico de una nueva onda folicular cuatro días después aproximadamente. 2 Del día 4 del protocolo, al día 7, se realiza la aplicación de folltropin en dos dosis diarias y decrecientes. El día 6 (am y pm) se aplica la prostaglandina y para el día 7 (am) se retira el dispositivo con progesterona. El día 8(am), 12 horas después de retirado el dispositivo se administra una dosis de GnRH para inducir la ovulación, esta aplicación se recomienda para ganado Bos indicus ya que se pueden producir más embriones grado 1 y 2. El día 8 (pm) y día 9(am) se realizan las IATF a las 12 y 24 horas después de la GnRH El dia 15 se realiza la colecta de los embriones. Ventajas del protocolo. Garantiza una buena sincronía de la onda folicular y la ovulación lo cual aumenta la cantidad de ovocitos y embriones colectados. No es necesario detectar celo para realizar la inseminación artificial. Desventajas: Las vacas Bos indicus por su temperamento pueden manejar mayores niveles de stress por su temperamento. 2. 10 puntos. Si Ud. decide superestimular una vaca de Simmental con un tratamiento de 8 dosis decrecientes cada 12 horas. Porque vía administraría la Folltropin? A: Intramuscular B: Subcutánea en la tabla del cuello C: Subcutánea detrás de la paleta 3. 10 puntos. Si Ud. decide superestimular una vaca Angus qué dosis utilizaría? A.- 200 mg NIH-FSH-P1 B.- 320 mg NIH-FSH-P1 C.- 500 mg NIH-FSH-P1 4. 20 puntos. Ud. debe programar la sincronización de receptoras para 4 vacas Simmental que va a colectar. Describa un tratamiento de sincronización de estas receptoras utilizando prostaglandina e indique cuántas receptoras debe sincronizar para transferir todos los embriones frescos. R/. Debemos partir de la base del número de embriones en promedio que podemos colectar por vaca que es 5.8 E/vaca, si esto lo multiplicamos por 4 que son el numero de vacas a superovular, tendríamos un total de 23,2 embriones para transferir y si decimos que la tasa de aprovechamiento en sincronización con PGF es del 50%, tendríamos que multiplicar el número de embriones a transferir (23.2) x 2 teniendo como resultado 47 receptoras aproximadamente para sincronizar. El tratamiento con PGF consiste en aplicar dos dosis de 0.15mg de prostaglandina im, una él (día 0 am) y otra el (día 14 m), para provocar la regresión del cuerpo lúteo. 3 Las receptoras deben ser tratadas 18 a 24 h antes que la donante cuando se van a transferir embriones frescos. Solo se sincronizan receptoras con PGF si estas están ciclando es decir que presenten CL. Los celos de las receptoras ocurrirán entre las 60-72 h después de la segunda dosis de PGF pero estos deben ser observados a partir de las 12 h después de la PGF. Se debe contar con personal suficiente y capacitado para realizar la detección de celo, ya que es una de las principales limitantes que tiene este protocolo. La transferencia de los embriones se realiza el día 21 del protocolo de la receptora. 5. 20 puntos. Ud. debe programar la sincronización de receptoras para 4 vacas Brahmam que va a colectar. Describa un tratamiento de sincronización de estas receptoras utilizando progestágenos, estrógenos y eCG e indique cuántas receptoras debe sincronizar para transferir todos los embriones frescos. R/. Igual al punto anterior, partamos del número promedio de embriones que se pueden colectar por vaca que son 5.8, al multiplicarlo por 4 que es el número de donantes, obtendríamos 23.2 embriones para transferir. Para este caso, vamos a tener una mejor tasa de aprovechamiento que el caso anterior puesto a la eficiencia del protocolo con progestágenos, estrógenos y eCG, esta tasa de aprovechamiento es de 77% para un total de 30 receptoras para sincronizar. Dia 0 Dia 8 Dia 17 Disp. P4 + BE + 1/2PGF Retiro disp. P4 + ECP + PGF + eCG TE La idea de este protocolo es gracias al cipionato de estradiol, que tiene una vida media más larga que el benzoato de estradiol, es acortar un día de encierre de los animales en el día 9. 6. 20 puntos. Se colectan embriones de 10 vacas para transferirlos frescos en vaquillonas y/o congelarlos. De las 10 vacas se obtuvo un total de: 10 blastocistos grado 1 10 blastocistos tempranos grado 1 10 mórulas grado 1 10 mórulas grado 2 Se revisan las receptoras y se determinan como aptas 30 vaquillonas de las cuales: 5 estuvieron en celo hace 5.5 días 5 hace 6 días, 10 hace 7 días, 5 hace 8 días y 5 hace 8.5 días. 4 Determine cuáles embriones congela y cuáles transfiere tratando de que coincida el estadío del embrión con el día del ciclo de la receptora. R/. Tenemos un total de 40 embriones, de los cuales vamos a transferir 30 en fresco y 10 embriones para congelar. Día del ciclo y # de vaquillonas 5 hace 5.5 días 5 hace 6 días 10 hace 7 días 5 hace 8 días 5 hace 8.5 días Estadio y # de embriones 5 mórulas grado 1 5 mórulas grado 1 10 mórulas grado 2 5 blastocitos tempranos grado 1 5 blastocitos grado 1 Para congelar tendremos 5 blastocitos tempranos grado 1 y 5 blastocitos grado 1. 5