IZASA LAB www.izasa.es REVISTA DEL GRUPO INSTRUMENTACIÓN CIENTÍFICA 02/09 EDITORIAL Izasa Lab 2/2009 Editorial Estimado lector, Este número de septiembre viene cargado de noticias importantes a pesar de la crisis económica que padecemos. Es interesante destacar en primer lugar el acuerdo que hemos firmado con la empresa sueca Perten Instruments AB, fundada en 1962 y especializada en el control de calidad de grano, harina, alimentación y piensos. El origen de la compañía fue la innovación del método “Falling Number”. Desde entonces ha colaborado con organizaciones tales como ICC, AACC, AOM y el US Department of Agriculture. Gran parte de su desarrollo de producto se ha realizado en colaboración con sus usuarios para resolver las necesidades que se han ido planteando. Macro foto del interior de una flor gigante Autor: Diego Barucco Teléfonos de interés En la página 4 de este ejemplar encontrará información sobre esta compañía, sus áreas de actividad y la gama de instrumentación que actualmente comercializa. También merece mención especial el lanzamiento por parte de Beckman&Coulter de su nueva gama de Citometría de Flujo y de la que podemos destacar el Gallios, analizador con 3 láseres y 10 colores con prestaciones muy avanzadas, y el Astrios, el Sorter más potente y rápido del mercado, con hasta 7 láseres y 49 detectores. Atención al Cliente (DAC) Tfno: 902 20 30 80 • Fax: 902 20 30 81 e-mail: dac2@izasa.es Centro de Recepción de Avisos (CRA) Tfno: 902 12 04 89 • Fax: 934 01 03 30 e-mail: stgic@izasa.es Sumario Shimadzu. BioSpec Nano 3 Nueva representación de Izasa para el sector Agroalimentario: Perten Instruments AB 4 Nuevos espectrómetros de Absorción Atómica Serie AA-7000 de Shimadzu 6 ICPE-9000 de Shimadzu 8 Medida de potencial Z en soluciones concentradas y superficies sólidas 10 Recuento y distribución de tamaño de células y partículas en agua de mar 11 Oxidación de ácidos grasos en miocitos C2C12 y respuesta agonista a inhibidor de ACC2 y a metformina 12 Nuevo Rotor-Gene Q Edita: Redacción: Dpto. Marketing GIC Edición: APRIORI ❀ Papel ecológico 2 14 Citometría con muchos colores… pero ¿para qué…? 16 ForteBio: Una alternativa a SPR 19 Plataforma de informática de laboratorio unificada ELN - cuaderno electrónico para laboratorio 20 Hamilton Storage Technologies 21 Nuevo sistema de hidrólisis automática de Gerhardt: Hydrotherm 22 Nuevos VAPODEST 50os y 50osC 23 Serie Mini: Pequeños en tamaño pero grandes en prestaciones 24 Analizadores XRF de mano de Oxford Instruments 26 Nueva interfaz TLC-MS 27 Biostation CT de Nikon 28 Nuevo sistema de microscopía láser confocal macro Nikon AZ-C1 29 MiniScan®EZ: El espectrofotómetro colorímetro portátil de más fácil manejo 30 Espectrómetro FTIR modelo IRAffinity-1 de Shimadzu 31 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 Shimadzu. BioSpec Nano Espectrofotómetro de microvolúmenes para Ciencias de la Vida. Determinación rápida y sencilla de ácidos nucléicos. se coloca en el portamuestras, el equipo se encarga automáticamente mediante tensión superficial de centrarla en el paso óptico y realizar un espectro de absorbancia uvvisible de 220 a 800nm. Un vez colocada la muestra tan sólo hace falta presionar un botón y dejar que el equipo proceda al análisis. Si fuera necesaria la recuperación de la muestra puede hacerse fácilmente ya que presenta un sisteBioSpec Nano. ma de autolimpieza que permite El software incluido con el equipo permite empezar a trabajar inme- que la óptica se encuentre lista y diatamente ya que presenta las l nuevo equipo de E Shimadzu Biospec asegure que no haya contaminaciones cruzadas con muestras previas. Sin necesidad de calibrar, el opciones disponibles de una forma intuitiva y sencilla pudiendo elabo- Nano se presenta en el BioSpec-Nano permite mercado aplicando todos los conocimientos de la casa en un campo en el que son líderes indiscutibles “La Espectrofotoscopía”. cuantificar la concentración de Ácidos Nucleicos de manera rápida y sencilla en dos Años de investigación y desarrollo rangos complementa- han permitido lanzar al mercado un rios equipo completamente automatiza- cubrir todas las con- do, simplemente se toma una mues- centraciones necesa- tra de tan sólo 1-2µL de volumen y rias en un laboratorio. que aseguran Software BioSpec Nano. rar informes y exportarlos directaPasos Ópticos: • 0,2mm: 1-75 OD (50-3,700 ng / µL) mente en formato pdf asegurando que no puedan ser manipulados • 0,7mm: 0.3-21 OD (15-1,000 ng / µL) involuntariamente y protegiendo su • Opcional Cubetas 5 mm : 0.04-3 OD (2-150 ng / µL) contenido. Hoja respuesta Ref. 1 3 ALIMENTACIÓN Izasa Lab 2/2009 Nueva representación de Izasa para el sector Desde que en 1962, Harald Perten fundó la empresa al lanzar el método entonces. Para Harald Perten, su misión era ayudar a los clientes a mejorar que fueran asequibles, y fáciles de usar así como de interpretar. Esta sigue soluciones completas desarrolladas específicamente para satisfacer las rápidos y precisos. erten proporciona el equipamiento para el control de calidad, supervisión de proceso e I + D para las industrias del grano, harineras, alimentación y piensos. Su amplia experiencia en una amplia gama de aplicaciones les avala. P ten hasta información reológica, Perten dispone de las herramientas necesarias para el pleno control de calidad. Malteado Mejora de la calidad de la malta y el rendimiento a través de un mayor conocimiento de la calidad Alimentación de la cebada y la malta así como de su proceso mediante tecnologías Nuestras soluciones para el control NIR y RVA. de calidad de los alimentos son ¿Qué puede hacer Perten Instruments por Ud.? diversas e incluyen una amplia Fábricas de mezclas gama de aplicaciones para panadería y bollería, lácteos, carnes, pata- Perten ofrece instrumentación para Producción de etanol tas fritas, pastas, snacks, cereales su uso en plantas de mezclas de Instrumentación analítica que permite determinar la calidad de las materias primas, controlar la fermentación y verificar las especificaciones de productos derivados tales como el DDGS (destillers dried grains with solubles) para el desayuno y mucho más. panadería. Analizan los ingredientes para conocimiento de sus pro- Lácteos piedades funcionales y químicas, vigilan el proceso de mezcla, e Desde la leche en polvo hasta el yogur, la mantequilla o el queso, una amplia gama de productos den- incluso comprueban los ingredientes que faltan en las mezclas finales. tro de la industria láctea se controMejora genética lan con las soluciones aportadas Identificación de los genotipos más prometedores utilizando la amplia gama de analizadores disponibles de Perten Instruments. Varios de los instrumentos se diseñaron para su uso con muestras pequeñas. por Perten. sas Productos de panadería Determinación de la composición Fábricas de piensos de las semillas oleaginosas a la Verificación de materias primas y control de calidad de productos acabados. Con nuestras herramientas tendrá información tanto cuantitativa como cualitativa. Control de ingredientes a la entrada para la determinación del valor energético, proteína y demás, en sólo 6 segundos. Optimización de las fórmulas, control del proceso, y verificación de la calidad del producto acabado. Análisis del grado de cocción en piensos extruídos. 4 Procesamiento de oleagino- Recolección y comerciantes de grano entrada para una decisión inmediata de su precio, seguimiento y optimización de los procesos de extracción y refinado y verificación de que los aceites y derivados acabados cumplen las especificaciones. Alimentos para animales de De pequeños comerciantes de compañía grano rurales hasta grandes instala- Mejorar la calidad del producto y ciones portuarias, ayudamos a las reducir los costes al mismo tiempo. cooperativas, los comerciantes pri- Nuestros analizadores prueban la vados, los laboratorios y agencias calidad y composición de los ingre- Molienda de harina gubernamentales para vigilar la dientes, procesos intermedios y Desde el Falling Number, análisis calidad, la segregación y la optimi- producto acabado tanto en húmedo de cenizas y caracterización de glu- zación del uso del grano. como en seco. Hoja respuesta Ref. 2 ALIMENTACIÓN Izasa Lab 2/2009 Agroalimentario: Perten Instruments AB “Falling Number”, Perten Instruments ha venido innovando desde la calidad de los productos mediante el suministro de métodos analíticos siendo la piedra angular de nuestro negocio. Nuestro objetivo: ofrecer necesidades de los productores en agroalimentación con resultados Gama de productos DoughLAB Reómetro flexible con entrada de temperatura y de energía variables Diode Array 7200 Análisis NIR en 6 segundos para las aplicaciones más exigentes. Es rápido, preciso y fácil de usar. Con una flexibilidad incomparable, tiene la capacidad de analizar en el mismo instrumento grano entero, molturados, pastas, granza, pastosos y líquidos. para emular la mezcla comercial. SKCS 4100 El único instrumento para la clasificación de la dureza y la determinación de la uniformidad en granos pequeños. Mide la absorción de humedad, tiempo de mezcla, la estabilidad y más. Micro-doughLAB Reómetro para masa de harina que proporciona datos reológicos de muestras de tan sólo 4 gramos. El Micro-doughLAB proporciona Inframatic 9200 Análisis NIR de grano entero y oleaginosas en 40 segundos. Medidas de humedad, proteína, peso específico, grasa y mucho más. resultados reológicos altamente correlacionados a instrumentos de Aquamatic 5100 El medidor de humedad para grano entero más exacto disponible. Análisis en 10 segundos de humedad, peso específico y temperatura en todo tipo grano entero y oleaginosas. Falling Number El método normalizado internacional para la determinación de la actividad alfa-amilasa en grano y harina. gran escala. Rápid Visco Analyser (RVA) El RVA es un viscosímetro rotacional de temperatura y cizalla variable. Sus métodos estándar incluyen pegado del almidón, grado de cocción y daños por meteorología en grano. Glutomatic El procedimiento normalizado mundial para el análisis de la cantidad y calidad de gluten en el trigo. Mide el contenido de gluten húmedo, gluten seco y el índice de gluten. Hoja respuesta Ref. 2 Inframatic 8600 Instrumentación NIR resistente y fiable así como de bajo coste para el análisis de la harina, grano entero, en alimentación y piensos. Molinos de laboratorio Gama de molinos laboratorio tanto de martillo como de disco para una preparación de muestra adecuada y conveniente en diversas pruebas de control de calidad en la industria agroalimentaria. 5 ESPECTROMETRÍA/AA Izasa Lab 2/2009 Nuevos espectrómetros de Absorción Atómica Serie Los nuevos espectrómetros de la Serie AA-7000 de Shimadzu alcanzan a configuraciones y un altísimo nivel de seguridad en su operación. os nuevos espectróme- L de luz y filtro digital, así como al existente, combinando atomizado- tros de absorción atómi- uso de elementos ópticos que mini- res de llama y horno de grafito en el ca de la Serie AA-7000 mizan las pérdidas de luz. El paso mismo compartimento. Con el uso destacan por su sensibilidad, flexi- de luz por el sistema se ha incre- del cambiador automático de ato- bilidad, seguridad y diseño com- mentado un 60% respecto a otros mizador, ambos atomizadores de pacto, asegurando una operación diseños, proporcionando una sensi- llama y horno de grafito permane- eficiente y confortable en su labo- bilidad no comparable con ningún cen instalados, realizándose el ratorio. En combinación con soft- sistema existente. cambio de uno a otro de forma ware de muy sencillo manejo y el automática y sin necesidad de ajus- potente automuestreador ASC- Para medidas en llama, se emplea tes. 7000, la Serie AA-7000 es la elec- automáticamente el sistema foto- La Serie AA-7000 posee un único ción para análisis tanto en llama métrico de doble haz óptico, mien- automuestreador de alto rendimien- como en cámara de grafito. tras que para medidas en cámara de to, el ASC-7000, válido tanto para grafito se selecciona el sistema de llama como para cámara de grafito, Los espectrómetros AA-7000 haz simple de alto rendimiento. incorporan un sistema óptico 3D Con un nuevo diseño del horno de capaz de proporcionar un máximo grafito, la Serie AA-7000 consigue rendimiento tanto en detección por unos límites de detección mejora- llama (0,015 ppm Pb) como en dos en todo tipo de aplicaciones. ahorrando costes, tiempo y espacio. cámara de grafito (0,05 ppb Pb). Esta altísima sensibilidad es posi- El AA-7000 es el espectrómetro de ble gracias al ajuste óptimo del haz absorción atómica más compacto Sistema de lavado continuo de la punta del automuestreador ASC-7000 que elimina cualquier posibilidad de contaminación entre muestras. El ASC-7000 incorpora funciones de mezcla de la muestra con hasta 4 soluciones distintas, para adición de modificadores de matriz, realización de diluciones o adición estándar, con un altísimo grado de automatización. Respecto a la corrección de fondo, Nuevo espectrómetro de Absorción Atómica Serie AA-7000 de Shimadzu. 6 estos espectrómetros incorporan, Hoja respuesta Ref. 3 ESPECTROMETRÍA/AA Izasa Lab 2/2009 AA-7000 de Shimadzu un nivel de sensibilidad sin precedentes, una gran flexibilidad en cuanto además del método estándar por te en caso de notar una vibración lámpara de deuterio, el sistema de fuerte. Otras medidas de seguridad corrección auto-reverso de alta incluyen un control automático velocidad, que permite corrección multimodo de detección de fugas en el rango completo desde 185 nm de gas y cambio automático de aire hasta 900 nm, así como corrección a N2O, en instrumentos con atomi- de interferencia espectral, tanto en zador de llama, y monitor de pre- llama como en cámara de grafito. sión de argón y protección frente a sobrecorrientes para instrumentos La seguridad es un aspecto muy con atomizador de cámara de grafi- importante en los espectrómetros to. de absorción atómica, y la Serie Sensibilidad sin precedentes en la Serie AA-7000. AA-7000 cumple con las últimas El software WizAArd es muy sen- normas europeas al respecto. Es el cillo de manejar, y cumple con primer espectrómetro del mundo en FDA 21 CFR Part 11. Permite fun- incorporar un sensor de vibración cionalidad QA/QC, así como vali- que apaga la llama automáticamen- dación del hardware. Sistema de cambio automático de atomizador de llama a cámara de grafito sin necesidad de ajustes manuales. Hoja respuesta Ref. 3 Características principales de la Serie AA-7000: Sensibilidad sin precedentes • 60% más de paso de luz • Óptica con menos espejos Tamaño compacto • Óptica 3D • Instrumento de menor tamaño en su categoría Sistema fotométrico inteligente • Doble haz para llama • Haz simple para cámara de grafito Flexibilidad en las configuraciones • Sistema modular • Llama continua y micromuestra • Cámara de grafito • Generador de hidruros • Posibilidad de crecer Seguridad • Cumple las últimas normas europeas para equipos AA • Primero en el mundo que incorpora sensor de vibración Doble sistema de corrección de fondo • Método D2 • Método autoreverso de alta velocidad Emplea el mismo automuestreador para llama y cámara de grafito Software WizAArd • Facilidad de operación • Funcionalidad QA/QC • Validación del hardware 7 ESPECTROMETRÍA/ICP Izasa Lab 2/2009 ICPE-9000 de Shimadzu El nuevo espectrómetro de emisión por plasma de acoplamiento inductivo alto rendimiento analítico con bajos costes de operación y gran facilidad himadzu, uno de los líderes mundiales en instrumentación analítica, añade a su rango de instrumentos el ICPE9000, un nuevo espectrómetro de emisión por plasma de acoplamiento inductivo (ICP-OES). El instrumento combina alto rendimiento y alta velocidad, con un sistema óptico único. S El ICPE-9000 incorpora un detector CCD de gran formato y muy alta resolución. La bancada óptica a vacío asegura una estabilidad sin precedentes, así como tiempos de arranque muy cortos. Antorcha de bajo consumo La antorcha de bajo consumo que incorpora de estándar el sistema de introducción de muestras acuosas del ICPE-9000 posee un diámetro las de la antorcha convencional. Mientras que una antorcha convencional necesita un caudal de argón de unos 20 L/min, la antorcha de bajo consumo solo necesita 12 L/min. Configuración del plasma El ICPE-9000 puede estar configurado con visión del plasma axial, o bien dual (axial y radial). La configuración del plasma axial proporciona una mayor sensibilidad y es adecuada para conseguir los mejores límites de detección posibles. Por su parte, la configuración axial es muy útil cuando se analizan muestras con una matriz compleja, ya que éste tipo de visión es más inmune a las interferencias que se producen en éste tipo de muestras, y que hacen muy difícil su análisis en visión axial. de 2/3 respecto a la antorcha convencional. Es capaz de reducir el Posición de la antorcha cosumo de argón en un 40%, consi- Sea cual sea la visión del plasma, tanto axial como radial, la antorcha guiendo sensibilidades similares a ICPE-9000 de Shimadzu. siempre está en posición vertical en el ICPE-9000. Las antorchas verticales solo se encuentran normalmente en equipos radiales. Es conocido que la posición vertical de la antorcha hace a ésta mucho más resistente a problemas de contaminación y bloqueos, incluso con muestras con alto contenido en sales disueltas, mientras que la posición horizontal propicia que parte de la muestra caiga por gravedad y provoque muchos más problemas de contaminación y bloqueos en todo tipo de muestras. Los problemas son aún mayores en muestras de alto contenido en sales disueltas. propósito, el ICPE-9000 posee una óptica a vacío, que elimina el coste del gas de purga y consigue una estabilidad en las medidas no igualada por los sistemas con purga. Asimismo, el tiempo necesario para estabilizar el sistema al arrancar es mucho más corto, al ser el vacío capaz de eliminar el aire presente de forma mucho más rápida que la purga.. Espectrómetro a vacío La antorcha de bajo consumo reduce el consumo de argón en un 40%. 8 En la bancada óptica de un ICPOES, es necesario extraer el aire para poder observar correctamente las líneas de emisión en la región UV, que es la más importante en emisión atómica. En lugar de emplear un gas de purga con tal La antorcha del ICPE-9000 está en posición vertical, incluso para visión axial. Hoja respuesta Ref. 4 ESPECTROMETRÍA/ICP Izasa Lab 2/2009 ICPE-9000 de Shimadzu, con sus características únicas, proporciona un de uso. Asistente para desarrollo de métodos Uno de los aspectos más importantes del ICPE-9000 es el asistente para el desarrollo de métodos, que es capaz de desarrollar un método analítico completo a partir de la información del análisis cualitativo de varias muestras. Podemos selec- Detector CCD de gran formato (1”x1”) y alta resolución (1 megapíxel) cionar los elementos a analizar, y el asistente entonces determina de forma automática la línea o líneas analíticas mejores, en función del rango de concentraciones a cubrir y La antorcha en posición vertical plantea muchos menos problemas de obturación que la antorcha en posición horizontal. de las posibles interferencias encontradas. Se genera de forma automática información sobre los CCD de gran formato y alta patrones a emplear para realizar las resolución calibraciones y se realizan automá- El CCD incorporado en el ICPE9000 es de gran formato, de 1 x 1 pulgadas, con una resolución de 1 megapíxel. La alta resolución permite separar cómodamente líneas adyacentes y minimiza por tanto la necesidad de emplear correcciones ticamente todas las correcciones de fondo necesarias. También se programan las correcciones interlelementales que sean necesarias y se proporciona información sobre los patrones que habrá que preparar para aplicarlas. Características más importantes del ICPE-9000: interelementales, que de otra forma serían necesarias. Asistente para diagnóstico de métodos Selección automática de la Si el método analítico se ha creado longitud de onda óptima manualmente, sin emplear el asis- De todas las líneas de emisión de tente para desarrollo, es posible un elemento, el ICPE-9000, gracias realizar un diagnóstico del mismo a la base de datos de interferencias, con el fin de encontrar posibles es capaz de seleccionar aquella que problemas. El asistente de diagnós- sea más adecuada para la concen- tico realiza esta tarea, e informa tración del elemento y que no tenga sobre los problemas encontrados y interferencias por la presencia de sus posibles soluciones, ordenadas otro elemento. de mejor a peor. Hoja respuesta Ref. 4 La alta resolución del detector CCD permite separar líneas de emisión muy cercanas, reduciendo la necesidad de correcciones interelemantales. • ICP simultáneo con detector CCD de gran formato. • Bajo consumo de argón con el empleo de la antorcha de bajo consumo. • Dos asistentes para desarrollo y verificación de métodos. • Espectrómetro de vacío, altísima estabilidad sin necesidad de emplear gas de purga. • Adquisición del espectro de emisión completo, sin ninguna restricción de líneas. • Selección automática de la longitud de onda óptima. • Correcciones automáticas. • Plasma axial con antorcha vertical. • Opción de visión radial. 9 CARACTERIZACIÓN DE PARTÍCULAS Izasa Lab 2/2009 Medida de potencial Z en soluciones concentradas y superficies sólidas La Serie Delsa Nano de Beckman Coulter abre nuevas posibilidades en la medida de potencial Z en soluciones tanto diluidas como concentradas, así como en superficies sólidas. Una nueva generación La Serie DelsaNano es una nueva generación de instrumentos que emplean dispersión de luz dinámica (DLS) y espectroscopía de correlación fotónica (PCS) para la determinación del tamaño de partículas en el rango submicrométrico, así como dispersión de luz electroforética (ELS) para la determinación del potencial Z. Analizador Delsa Nano de Beckman Coulter. Medida de distribución de potencial Z en suspensiones concentradas en suspensión a concentraciones de desde 6 ángstrom hasta 7 micras. • Titración automática de pH o adi- hasta el 40%, dependiendo del Medida de tamaño de partículas en tivos, tanto para medidas de tama- tamaño de partícula. suspensión, en un rango de concen- ño como para potencial Z. El DelsaNano es el primer instru- tración desde 0,001% hasta 40%. mento que permite la medida de Medida de potencial Z de distribución de potencial Z en solu- superficies sólidas planas ciones concentradas empleando dispersión de luz electroforética (ELS). Emplea la tecnología de dispersión de luz frontal a través de electrodo transparente (FST) para medir el potencial Z de partículas • Medida de potencial Z de partículas en suspensión, en un rango de • Medida de potencial Z de superficies sólidas o películas. • Trabajo mediante métodos de operación estándar (SOMs) y pro- El DelsaNano es también el primer concentración desde 0,001% hasta cedimientos de operación estándar instrumento capaz de medir el 40%. (SOPs). potencial Z de superficies sólidas y películas, empleando dispersión de luz electroforética. El DelsaNano permite medir la carga superficial o potencial Z de superficies sin tratar, tratadas o recubiertas de materiales tan diversos como vidrio, metal, óxidos metálicos, cerámica, etc. Características más importantes Medida de potencial Z en soluciones concentradas mediante tecnología FST empleando un electrodo transparente. 10 • Medida de tamaño y potencial Z de alta sensibilidad de partículas Celda de medida de potencial Z en superficies sólidas planas. Hoja respuesta Ref. 5 CARACTERIZACIÓN DE PARTÍCULAS Izasa Lab 2/2009 Recuento y distribución de tamaño de células y partículas en agua de mar El recuento y cálculo de la distribución de tamaño de células y partículas en agua de mar proporciona una información muy valiosa en estudios oceanográficos y medioambientales. l principio Coulter se ha empleado durante años para el recuento y la determinación de la distribución de tamaño de células y partículas en agua de mar en muchos laboratorios alrededor del mundo. El uso de los analizadores de tamaño de partícula MultisizerTM 3 y MultisizerTM 4 de Beckman Coulter proporciona un método rápido, sencillo, exacto y automático para el recuento y la determinación de tamaño de células y partículas, sea cual sea la concentración en la que E Un tubo de apertura de 100 µm será capaz de analizar la concentración de partículas y su distribución de tamaño en un rango entre 2 µm y 60 µm. Si se necesita analizar otro rango de tamaños, es posible hacerlo empleando otro tubo diferente. El instrumento se calibra empleando un patrón de látex de tamaño nominal 10 µm. La calibración conseguida no cambia al variar la conductividad del electrolito, ni ningún otro factor. Esto se consigue gracias al empleo de tecnología de medida a intensidad de corriente constante. El Multisizer 4 de Beckman Coulter es el instrumento para recuento y determinación de la distribución de tamaño más avanzado. necesario emplear ningún electrolito adicional. La muestra de agua de mar se pone directamente en el vaso de medida de fondo redondo y se analiza, sin realizar ninguna dilución adicional. Análisis de muestra La muestra se analiza empleando un tubo de apertura de 100 µm. Se emplea el agitador a una velocidad moderada para mantener la homogeneidad de la muestra. Resultados Esquema de funcionamiento de un instrumento que emplea el principio Coulter para el recuento y determinación del tamaño de células y partículas. estén presentes en el agua. El instrumento ofrece resultados fiables y objetivos, no dependientes del criterio del operador. Materiales y métodos Existe una variedad de tubos de medida, que se selecciona en función del rango de tamaños a analizar. El rango dinámico lineal de cualquier tubo va desde el 2% hasta el 60% del diámetro de su apertura. Hoja respuesta Ref. 6 Los resultados se expresan en células/mL. El gráfico muestra la distribución de tamaño y los datos esta- dísticos de una población de células de alga en agua de mar. Además de la concentración total de células, mediante el empleo de los puntos de interpolación que permite el programa, es posible determinar la concentración de células en intervalos de tamaño previamente fijados por el usuario. Conclusiones Dado que el principio Coulter es la tecnología que ofrece una mayor resolución para el recuento y la determinación de tamaño de células y partículas, es una excelente herramienta para estudios oceanográficos y medioambientales. Para la determinación de concentración y distribución de tamaño de células de algas en agua de mar, los resultados se obtienen en número/mL. El modo de control del instrumento se ajusta a volumétrico, con un volumen de medida de 1000 µL. Procedimiento Dado que el agua de mar es conductora de la electricidad, no es Gráfico de distribución de tamaño de células de alga. 11 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 Oxidación de ácidos grasos en miocitos C2C12 y metformina El nuevo modelo de SEAHORSE, XF24 es un instrumento totalmente integrado, rendimiento de las dos principales rutas energéticas celulares, la respiración sta rápida y sensible Este método rápido, sensible y libre medición de los niveles de la etiqueta de ensayo detecta el energéticos aumento de metabolismo aeróbico E celulares, permite realizar un análisis en celular asociada a FAO. tiempo real y la reutilización de las muestras celulares tras la finaliza- La medición del flujo extracelular ción del experimento. XF, produce un rendimiento comparable a los métodos radiométri- Frente a sus precursores, capaces cos, con un superior throughput de medir un solo parámetro, XF24 (hasta 96 muestras simultáneamen- ofrece un mayor rendimiento en el te) y sin el uso de materiales radiac- campo del descubrimiento de nue- tivos. vos fármacos. Identificación de agonistas XF24 ofrece la posibilidad de: de FAO - Medir de forma simultánea la tasa Con el Analizador de Seahorse, de consumo de oxígeno (OCR) y la XF24, se midió el impacto de dos tasa de acidificación del medio agonistas de la FAO, la metformina extracelular (ECAR) en un periodo y el inhibidor ACC2 CP-640186. de tiempo tan corto como cinco Este ensayo se llevó a cabo en minutos. líneas celulares C2C12 del múscu- - Realizar medidas a tiempo real lo esquelético en ratones. sobre una población celular durante minutos, horas o incluso días. Se usaron miocitos C2C12 diferen- - Reutilización de las muestras ciados durante 6 días, posterior- celulares tras la finalización del mente fueron preincubados duran- análisis. te 24 horas, bien con inhibidor de ACC2 a 10µM o bien con metfor- FAO (Fatty Acid Oxidation) mina 1mM en microplacas de 24 y Flujo Extracelular (XF) pocillos. Analizador XF24 de Seahorse Bioscience. los de 8 minutos para establecer las Para confirmar que el aumento en rutas y tasa metabólica basal. la tasa de consumo de Oxígeno se debió a la oxidación del Palmitato A continuación se inyectó Palmitato frente a la Glucosa, añadimos 150 µM asociado a ácido graso 50µM Etomoxir, un inhibidor de la libre de BSA, en pocillos por tripli- CPT-1. Después de la adición de cado y sobre miocitos C2C12 tra- Etomoxir, los valores de OCR dis- tados y no tratados. Se midieron los minuyeron considerablemente lo valores existentes a intervalos de 8 que confirma la especificidad para minutos para la detección de un la FAO (datos no mostrados). cambio a favor de la respiración aerobia, síntoma indicativo de la Una medición fisiológica FAO. La FAO está estrechamente vinculada a la cadena respiratoria mito- La figura 1 muestra que el trata- condrial y requiere oxígeno mole- Utilizando el analizador XF24, se miento overnight con inhibidor de cular para producir ATP. El Seahorse, permite la medición del establecieron tres mediciones de la ACC2 a 10µM o bien con metfor- Analizador de XF24 mide y com- efecto de diferentes compuestos en tasa de consumo de oxígeno (OCR) mina 1mM produjo 4,6 veces y 3,2 para las tasas de consumo de oxíge- la oxidación de ácidos grasos y de la tasa de acidificación extra- veces el aumento en OCR, respec- no (OCR), una medida de metabo- (FAO) en células de mamíferos. celular (ECAR) hechas en interva- tivamente. lismo aeróbico, y la acidificación El sistema de medición de flujo extracelular (XF) de la casa 12 Hoja respuesta Ref. 7 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 respuesta agonista a inhibidor de ACC2 y a capaz de medir de forma simultánea y sobre un formato de microplaca, el aeróbica y la glicolisis. extracelular (ECAR), una medida Oleato. También es posible medir Palmitato como elemento de nor- de la glicólisis, ambos indicadores la cantidad de agua radiactiva pro- malización. clave de la energética celular. ducida por el metabolismo de estos sustratos marcados con H3. El XF24 utiliza biosensores ópticos Para comparar la calidad de los para medir la tasa de cambio en el datos y la relativa sensibilidad de contenido de oxígeno y pH en el los ensayos XF y radiométricos, medio próximo a las células y, por medimos la inhibición de la FAO tanto, es totalmente no invasivo. con un inhibidor de la CPT-1, Etomoxir. Paralelamente, cultivos En contraste con los ensayos de celulares de miocitos C2C12 , radiométricos, con el Seahorse expuestos a Palmitato150 µM , fue- XF24 no se requieren materiales ron tratados 60 minutos más tarde radiactivos, ácidos fuertes y alcali- con 50µM de Etomoxir (Fig. 2) nos, largos tiempos de ensayo, o contadores de centelleo. Las células pueden medirse varias veces para configurar un perfil cinético de inducción de la FAO, y pueden ser reutilizadas después de la prueba. Una gran variedad de células, tanto Conclusión Ambos métodos produjeron una inhibición significativa de la FAO en presencia de Etomoxir. La calidad de los datos son realmente comparables entre los dos métodos. Esto nos permite afirmar que la nueva plataforma XF24 para el estudio de los cambios metabólicos celulares es un sistema revolucionario que permite al usuario obte- La FAO se evaluó mediante el ner resultados comparables a los XF24 y mediante ensayos radiomé- obtenidos por métodos tradiciona- tricos estándar. La cinética obteni- les, con la ventaja de trabajar con da con el XF24 y el valor único células en monocapa y en placas de endpoint del ensayo radiométrico hasta 96 pocillos. se pudieron comparar teniendo en cuenta la respuesta máxima del hígado y el tejido adiposo, se han utilizado con éxito para medir el efecto de diferentes compuestos sobre la FAO. Comparación minados a medir la cantidad de CO2 marcado, concretamente C14, producida por el metabolismo de áci- 4.00 3.00 2.00 1.00 0.00 in rm hr fo 24 et M M, 1m te ita lm Pa dos para medir la FAO, están enca- XF24 Metformin 5.00 . Inb hr C2 , 24 AC µM 10 te ita lm Pa Los ensayos radiométricos realiza- 6.00 ACC2 Inhibitor Figure 1: Agonist Response to Pretreatment with Metformin and an ACC2 Inhibitor for 24 hours Day 7 C2C12 myocytes pretreated for 24 hours with other 10µM ACC2 inhibitor or 1 mM Metformin were exposed to 150µM Palmitate complexed to BSA. The results are expressed as fold increase overpalmitate alone +/Standar Deviation Radiometric 120 % Maximum Response das de músculo esquelético, el Fold Increase Over Palmitate primarias como inmortales, deriva- 100 80 60 40 20 0 ET Pa O lm (5 ita 0µ te M ) ET Pa O lm (5 ita 0µ te M ) Figura 2: Direc Comparison of the XF24 and 3HP Palmitate Fatty Acid Oxidation Assays Day 7 C2C12 myocytes were exposed to 150 µM Palmitate co plexed to BSA followed by incubation with 50 µM Etomoxir (ETO). Fatty acid oxidation was measured either by the XF24 or a standard radiometric assay. The results are expressed as a percentage of the maximum response +/- Standard Deviation. dos grasos como el Palmitato o el Hoja respuesta Ref. 7 13 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 Nuevo Rotor-Gene Q El equipo Rotor Gene Q es un sistema de detección de amplificación de ADN muestras. Puede detectar la mayoría de los fluoróforos, incluyendo sondas sondas de hibridización como Molecular Beacons, Scorpion y FRET. logra a través de unas rejillas de Las muestras se excitan desde ventilación que favorecen la entra- abajo de la cámara mediante un da del aire a temperatura ambiente. LED (Light Emitting Diode). La De esta forma se logra calentar y energía se transmite a través de las enfriar la cámara de forma muy delgadas paredes en la base del rápida. tubo. La fluorescencia emitida pasa a través de los filtros de emisión El equipo tiene seis fuentes de hacia el costado de la cámara y excitación y seis detectores lo que finalmente es detectado por un le permite realizar reacciones mul- fotomultiplicador. tiplex sin problemas de calibración Funcionamiento o compensación y con una variabi- Este sistema garantiza la reproduci- lidad de fluorescencia muy reduci- bilidad absoluta de los Run ya que da entre las muestras. Incorpora siempre se lee en las mismas condi- tecnología multifiltro, con fuentes ciones de temperatura y el ángulo de excitación mediante diodos de incidencia del LED sobre la LED de alto poder y capacidad de muestra y desde la emisión de ésta detectar la práctica totalidad de los hasta el PMT detector, es exacta- fluoróforos del mercado. mente el mismo. Consta de un rotor que asegura que la temperatura sea uniforme entre las muestras y de un sistema de calentamiento sofisticado. Las muestras giran en forma constante durante todo el RUN, a 400 rpm y la interrogación del fluoróforo es exactamente la misma para todos los tubos. Cámara de reacción Filtros de detección La centrifugación no genera un gradiente del fluoróforo ni un pellet Detector fotomultiplicador de ADN sino que impide que esto se produzca a la vez que elimina las burbujas de aire. Existe un elemen- Tubos de reacción para muestras Fuente de excitación LED to de cromo-níquel que calienta la masa de aire de la cámara (como si fuera un horno). El enfriado se 14 Hoja respuesta Ref. 8 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 en tiempo real. Se puede emplear para detectar, cuantificar y genotipar intercalantes como SYBR Green, sondas de hidrólisis como Taqman y Canales de Fluorescencia Tipos de rotores y tubos Tipo de rotor Nº de muestras Tipo de tubo Volumen de reacción Capacidad 36 Well Rotor 36 0.2ml 15-50ul 10-100ul 72 Well Rotor 72 0.1ml strip tube 5-30ul 10-50ul Gene Disc 72 Rotor 72 0.1ml Gene Disc 72 10-25ul 10-50ul Gene Disc 100 Rotor 100 0.3ml Gene Disc 100 10-25ul 10-25ul Diferentes formatos de rotores permiten trabajar con tubos de diferentes capacidades para adaptarse a las necesidades del usuario. HRM (High Resolution Melting) SNP’s De la misma forma, existe un LED Este canal es tan sensible que per- específico para aplicaciones HRM mite visualizar cambios de una sola (High Resolution Melting). base en la secuencia del ADN usan- • Cambios de A a T • 1 SNP (test predictivo no heterogéneo) Con este canal es posible llevar a cabo do tan solo fluoróforos de cadena aplicaciones basadas en el estudio doble como el SyBr Green, no sien- de la temperatura a la que el ADN do necesario el uso de sondas fluo- conserva su estructura tanto de rescentes. doble cadena como de cadena sen- • 2 SNP’s • Multiples SNP’s (tipaje HLA) Detección de mutaciones • Mutaciones genéticas (BRCA1, HNPCC) • Mutaciones adquiridas/somáticas ( p53, JAK2) Ensayos de sensibilidad • Pooling de muestras. Hasta 10 simultáneas Identificación de especies • Library banking Metilaciones cilla en una proporcion idéntica. • Identificación de metilaciones “low level” • Metilaciones presentes/ausentes • Mosaico Hoja respuesta Ref. 8 15 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 Citometría con muchos colores… pero ¿para qué…? El número de colores que los citómetros de flujo pueden analizar progresión imparable. Ante la respuesta de ¿para qué tantos colores? puede”. Desde luego, no deja de ser una mala razón, y así es cierto que los 49 detectores de fluorescencia que puede montar. demás, el número de A deprisa su capacidad de cálculo. En estimación se incrementa en uno o fluorocromos disponi- definitiva, hacemos citometría con dos colores, y en este momento no bles para su utilización “más colores” porque se puede, eso es infrecuente oir hablar de 12, 16 ó en citometría (y en general en ensa- esta claro, pero sigue en el aire la 18 colores simultáneos. Aquí la yos celulares) se incrementa igual- pregunta “para que”... La primera limitación ya no la plantean las mente a una velocidad creciente. respuesta parece muy obvia. La máquinas, tanto como el software Junto con esto, el desarrollo de complejidad de los problemas bio- de análisis, en la actualidad tam- software hace posible la utilización lógicos que se pueden resolver, bién está dejando de ser un proble- sencilla de un número de paráme- depende directamente del número tros en constante aumento, y los de parámetros que podamos medir ordenadores incrementan aún más simultáneamente en una única Figura 3: Software de análisis gráfico de múltiples sub-poblaciones. célula. La famosa progresión 2n ma, y el número de fluorocromos disponibles, que hay razones para pensar que seguirá creciendo. siendo n el número de parámetros simultáneos que podemos medir, nos da el cálculo del número de poblaciones diferentes que podemos definir y valorar en un único experimento, y nos ofrece la tremenda gráfica exponencial de la figura 4. A poco que la miremos con detenimiento, y con una calculadora en la mano nos daremos cuenta que si fuese posible utilizar simultáneamente los 49 detectores del equipo Astrios que se muestra en la figura 1, podríamos definir simultáneamente la friolera de 562.949.953.421.312, para simpliFigura 1: Equipo Astrios de Beckman Coulter mostrando los 49 detectores de fluorescencia que puede montar simultáneamente. FITC PE APC ECD Alexa700 PC5 APCAlixa700 PECy5.5 APC-H7 PC7 APCAlexa750 Figura 4: Número de subpoblaciones que se pueden definir simultáneamente en un experimento, en función del número de parámetros utilizados. ficar 5 x 1014 , poblaciones simul- En este punto podría parecer que el táneamente. Afortunadamente solo incremento en el número de colores puede llegar a adquirir simultánea- con los que se hacen los experi- mente 32 y por tanto 4 x 109 pobla- mentos en citometría ha llegado a ciones simultáneas. su techo, y que no tiene sentido seguir incrementando la compleji- Pacific Blue Pacific Orange Figura 2: Los flourocromos disponibles en el mercado están en constante expansión. En este ejemplo, distintos marcajes para un anti-CD8 humano. 16 Con la anterior idea en mente, dad de los experimentos. La ver- habría que preguntarse cuál es el dad es que no hay nada más lejos número máximo de colores que es de la realidad, y en contra de lo que realista hacer simultáneamente. En la lógica parece decirnos, el incre- este sentido, cada año que pasa la mento en el número de canales de Hoja respuesta Ref. 9 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 simultáneamente viene creciendo en los últimos años, con una la primera reacción es contestar con un porque, es decir, “porque se por una parte existen citómetros, como el de la figura 1, que muestra cromo. Esto simplificaría mucho la más sencillo nos resultará combi- BCI, ha sido clásicamente líder en vida a la hora de realizar ensayos nar ambos marcadores en un el desarrollo de tándems de PE con multi-color. mismo experimento, sin la necesi- fluorocromos que no pueden ser dad de realizar delicadas compen- excitados de modo natural con un Un ejemplo típico es la utilización saciones electrónicas entre ambas láser azul. conjunta de marcadores de poca señales. Actualmente pleno desarrollo de expresión (emisión débil) , conjun- tándems de APC para mayor rendi- tamente con otros que presentan Afortunadamente, es evidente que miento de láser rojo. En la figura 8 elevados niveles de expresión. Si la proliferación de colorantes como se muestra una comparativa de los utilizamos para marcar ambos las Cyaninas, los Alexa o los Q- tándems de Beckman Coulter con medida, realmente redunda en una moléculas con espectros de emi- dots, así como una completa colec- simplificación de los experimentos sión que se encuentren muy próxi- en el día a día. Detrás de los ensa- mos (mayor grado de solapamien- yos con múltiples colores, siempre to), el nivel de interferencia del se encuentra el problema de la marcador más expresado, en la compensación para emisión del más débil, puede supo- corregir el solapamiento de los ner un auténtico problema de com- Figura 5: Phycoeritrina conjugada con Cyanina5. necesaria ción de moléculas que marcan Ácidos Nucleicos, tanto en células vivas como muertas, y que se excitan desde el UV hasta el Rojo, hacen cada día más viable la utili- los mismos conjugados de otro fabricante muy introducido en el mercado. En cualquier caso, ninguno de los anteriores desarrollos hubiese tenido efecto de no ser porque la tecno- pensación entre ambos. Por tanto, zación del mayor número de láse- logía láser está experimentando en la mejor solución es utilizar marca- res posibles. Además, la tecnología los últimos años un rapidísimo derado ardua, y especialmente dores que empleen láseres diferen- de fabricación de tándems, o siste- desarrollo, especialmente en lo aquellos que no han tenido la oca- tes, con distintos trayectos ópticos. mas de Transferencia Resonante de referente a los láseres de estado sión de trabajar con un buen citó- Energía (más conocida por sus sólido. En la actualidad, el catálo- metro que siglas en inglés: FRET) como el go de líneas de emisión que se pue- Beckman Coulter lanzó el primero que se muestra en la figura 5, con den encontrar en láseres de este hace 17 años. niveles de emisión más intensos, tipo, es amplio entre el UV y el rojo marcajes más limpios, y menor lejano, permitiendo alojar un gran espectros. Esta es una tarea que los usuarios de citómetros han consi- digital. Recordar Una buena alternativa a la compen- número de interferencias con otros sación digital de los espectros, es la colorantes, expande aún más el separación de las líneas de excitación de los fluorocromos a emplear. empleo de citómetros con un Figura 6: Una auténtica “joya” de ingeniería. La nueva óptica del ISx de Amnis, capaz de alojar 5 láseres, y adquirir simultáneamente fluorescencia con imagen en 12 canales. Se trata del citómetro de flujo más sofisticado del mercado en la actualidad. Todas las ópticas están montadas sobre servos automáticos con picomotores (motores de precisión picométrica) número creciente de láseres y tanto de las compensaciones. La Es decir, si seleccionamos dos marcadores que se excitan en líneas de láser lo más separadas posibles, a detectores. número de fluorocromos dentro de este espectro. Pero lo que es más importante, este tipo de láseres fríos, económicos, de larga vida útil y muy miniaturizados han permitido una serie de desarrollos de ingeniería muy interesantes, como el Beckman Coulter, en respuesta a la que se muestra en la figura 6, una creciente necesidad del sector de auténtica joya de ingeniería, que le investigación y del entorno clínico, convierte en el citómetro más sofis- Cuanto más alejados se encuentren está en pleno lanzamiento de los ticado del mundo, no solo por sus 5 situación ideal sería disponer de estos colorantes tanto en su espec- marcadores que demanda el merca- láseres y 12 canales de análisis, una línea de láser para cada fluoro- tro de excitación, como de emisión, do. sino porque es capaz de adquirir no su vez separamos estas en el espacio, minimizamos el grado de solapamiento de los espectros, y por Hoja respuesta Ref. 9 17 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 solamente datos de intensidad de también Beckman Coulter ha pre- zación a 40 Mhz y un rango diná- cia, sin necesidad de costosos fluorescencia, sino también la ima- sentado este año dos nuevas series mico de 6 décadas logarítmicas upgrades, y realizando estas recon- gen de la célula en cada uno de representadas en la figura 7. (con resolución de 1.048.576 cana- figuraciones les) medios. estos 12 canales, sustituyendo los por sus propios convencionales tubos fotomultipli- GALLIOS cadores (PMTs), por CCDs. Este óptico tremendamente novedoso, Los citómetros ASTRIOS, permi- La electrónica de ASTRIOS es equipo es capaz de adquirir 50.000 que garantiza el mantenimiento de ten incorporar hasta un máximo de heredera del MoFlo XDP, con un imágenes por minuto. Con el pro- modo continuo y las máximas pres- 6 láseres de estado sólido, guiados grama de análisis de imagen, pode- tiempo muerto prácticamente cero, taciones. El compartimento óptico por fibra hasta las lentes formado- mos llegar a representar cualquier permite adquisiciones a velocida- esta dotado de dos unidades Peltier, ras de foco (pero permitiendo una des muy superiores a los 100.000 a fin de mantener la estabilidad tér- formación real del mismo). Un sép- eventos /segundo, sin abortos por mica de la óptica, con independen- timo pinhole, permite la utilización coincidencia electrónica, por lo que de láseres de UV (que no pueden incluso utilizado como analizador, guiarse por fibra) con foco directo sería el más potente del mercado en el punto de interrogación. Un para su empleo en muestras muy total de 7 líneas de iluminación raras. Todos los parámetros están simultáneas y con trayectos ópticos dotados de amplificación lineal y independientes hace que sea el logarítmica, así como de los proce- equipo más potente que se ha dise- sadores de pulso correspondientes ñado hasta el momento. para su empleo en modo integral o parámetro, encontrando poblaciones muy poco representadas (bien fenotipicamente, o bien funcionalmente), y con un valor estadístico muy robusto. No solamente Amnis acaba de lanzar al mercado la nueva gama ISx incorpora un sistema cia de las condiciones de instalación. La eliminación de la componente de estrés térmico en la óptica, tanto de iluminación, como de colección de fluorescencia, evita las perdidas de sensibilidad y resolución que se producen en todos los citómetros de alineado fijo, con el paso del tiempo. Los citómetros GALLIOS, están equipados con láseres de estado sólido enfocados directamente sobre la cámara de flujo. Existen configuraciones de dos y tres láseres. Todos los láseres se controlan desde ordenador, con un sistema de encendido y estabilización rápida. Permite obtener hasta 10 Fluorescencias (en función de la Figura 7: Los nuevos equipos de este año: Gallios, un analizador de Beckman Coulter con 3 láseres y 10 colores. Astrios: El sorter más potente del mercado, hasta 7 láseres y 49 detectores. También es con diferencia el más rápido. Finalmente el Amnis ISx el analizador más sofisticado que existe. Combina citometría de flujo con adquisición de imagen. Los tres comparten características como una sofisticada tecnología multi-láser, ópticas de muy elevada precisión y electrónicas de última generación. 18 pico. Se trata de un citómetro comASTRIOS permite obtener hasta 49 pletamente digital, con una elec- Fluorescencias (32 simultáneas) trónica de adquisición de 32 Bits. con ópticas de emisión muy fácilmente intercambiables por el usuario. El sistema se basa el diseño de bloques ópticos llamados PODs (de centes recogidas en cada pinhole sión muy fácilmente intercambia- mediante una fibra óptica (sin per- bles por el usuario. Utiliza tubos didas), y que pueden montar hasta fotomultiplicadores 7 última S/N=51.5 S/N=83 S/N=28 los que llegan las señales fluores- configuración), con ópticas de emi- de S/N=73.5 Optical Precission Device), hasta tubos Fotomultiplicadores generación, con una excepcional (PMTs) con sus correspondientes sensibilidad en el rango rojo del sistemas de filtros dicroicos y BP. espectro, lo que permite su adapta- Tanto los PODs como los PMTs, ción al trabajo en la zona donde se están dotados de un sistema de están desarrollando más flouoro- autoreconocimiento, que permite al cromos nuevos, al tiempo que man- usuario intercambiar PMTs entre tiene una excelente linealidad en los diferentes PODs de forma que todo el rango. con una configuración limitada de Se trata de un citómetro completa- detectores, el usuario puede reasig- mente digital, con una electrónica nar los mismos a cualquier láser y de adquisición de 20 Bits, digitali- para recoger cualquier fluorescen- S/N=159 S/N=36.8 S/N=282 S/N=100 Figura 8: Comparación de la Tecnología de Beckman Coulter para la preparación de conjugados, tanto de Phycoeritrina (PE) como de Alophycocianina (APC), con otro fabricante de la competencia líder de mercado. En todos los casos, la relación Señal/Ruido es muy superior a la de cualquier otro fabricante. Hoja respuesta Ref. 9 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 ForteBio: Una alternativa a SPR Queremos aprovechar el lanzamiento de esta edición de Izasa Lab, para presentar la compañía americana ForteBio. Hace ya más de dos años que apareció en el mercado con la primera opción alternativa seria a los ensayos de Surface Plasmon Resonance, conocida por sus siglas SPR. micropipeta, consiste en una fibra 1.0 de vidrio, a cuyo extremo se sitúa RELATIVE INTENSITY Reflected Beams la superficie activa, sobre la que tiene lugar la inmovilización de uno de los ligandos de la reacción. Biocompatible surface Immobilized molecule 0.8 0.6 0.4 0.2 400 450 500 550 600 650 700 Un array de estos sensores (de 1 a 8) se sumerge directamente en plaFigura 2. cas de formato 96 pocillos termosl principio de funciona- E miento es muy semejante en principio a los sis- tatizadas, en las que tienen lugar las reacciones de binding y disociación. De este modo, el sistema per- temas clásicos de SPR, pero con mite algo impensable en los siste- una serie de ventajas adicionales, mas SPR clásicos, como trabajar que hace que ForteBio esté despla- con lisados crudos, o muestras zando a nivel mundial a los siste- poco purificadas, o incluso más mas SPR. Quizá su rasgo más dis- importante, con compuestos disuel- tintivo es la ausencia de complica- tos en elevadas concentraciones de dos sistemas microfluídicos, lo que DMSO sin interferencia. Ni proble- simplifica mucho tanto el funciona- mas de obstrucciones. Por otra miento, como el mantenimiento de parte, al trabajar en formato de los equipos. Como se muestra en la microplaca, permite una fácil auto- figura 1, aquí el sensor, que recuerda en cierto modo a la punta de una nes simultáneas, tanto para el acon- curvas clásicas de las cinéticas de dicionamiento de los sensores, unión, que se muestran en la figura 3. como para la realización de las reacciones de unión y disociación. Con unos niveles de sensibilidad, y rangos de tamaño molecular seme- La fibra óptica del sensor, actúa de jantes a los que se utilizan clásica- guía para un haz de luz blanca, que mente en SPR, una utilización es reflejada en la superficie activa mucho más sencilla, un manteni- del sensor (como se muestra en la miento mucho más económico, la figura 2) así como en la capa mole- ausencia total de problemas fluídi- cular que representan los distintos cos y una tolerancia mucho mayor compuestos cuya cinética de bin- en cuanto a la preparación de la ding quiere medirse. El resultado es muestra, hay pocas dudas que el una variación en los patrones de futuro de los equipos de SPR acabe matización, así como el empleo de interferencia de los dos haces refle- siendo pasar estas técnicas a la múltiples condiciones y disolucio- jados. Esta variación es proporcio- solución de ForteBio. Nosotros nal a la cantidad de masa unida o estaremos encantados de enseñar- desplazada durante la reacción. De les esta opción, y no dudamos que este modo, nos proporciona será de su interés. 600µm BLI Biosensor tip surface Loading Baseline Association Dissociation Binding (nm) Baseline las Biocompatible surface Immobilized molecule Time Figura 1. Hoja respuesta Ref. 10 Figura 3. 19 LIMS Izasa Lab 2/2009 Plataforma de informática de laboratorio unificada ELN cuaderno electrónico para laboratorio El cuaderno electrónico - ELN - de STARLIMS se ha diseñado para aquellas industrias que deben cumplir con un gran número de normas reglamentarias, como los laboratorios que funcionan bajo normas GxP, y de garantía y control de calidad (QA/QC). s una herramienta eficaz La plataforma de STARLIMS per- Cuaderno electrónico de • Integración con infraestructuras para garantizar que se mite a las organizaciones adminis- STARLIMS – ELN de TI de la empresa. trar de forma centralizada los datos Funciones y beneficios: • Completamente basado en la y la información que se crean y uti- • Reemplazo de cuadernos de papel Web. Se ejecuta en Internet estándar y se registre la informa- lizan en el laboratorio, a través de difíciles de gestionar. ción relacionada con las normas una única plataforma escalable • Mejora de la integridad de datos y reglamentarias de forma correcta. completamente basada en la Web. reducción de errores de transcrip- El cuaderno electrónico de STAR- Como resultado, todos los usuarios ción. ven los mismos datos e informa- • Datos disponibles inmediatamen- ción al mismo tiempo, y cualquier te para toda la empresa. E definan los pasos de los procesos de laboratorio, se realicen los procedimientos operativos LIMS se utiliza para supervisar y controlar una gran variedad de procesos de laboratorio: la preparación y el vencimiento de lotes de reacti- usuario autorizado puede tener vos, la calibración de instrumentos, acceso a través de un navegador la calificación del analista, los métodos analíticos etc. web estándar. Además, la solución integrada de STARLIMS minimiza los requisitos de mantenimiento, capacitación y asistencia, ya que no hay necesidad de mantener múlti- Parte de una plataforma ples plataformas informáticas, apli- integral de informática caciones o interfaces costosas entre para laboratorios los diferentes sistemas. • Incentivo para el cumplimiento de normas regulatorias. • Cumplimiento de los SOP. • Guía paso por paso para los analistas a través del proceso de análisis. • Cálculo automático de resultados explorer. • Compatibilidad con técnicas de seguridad estándares. • Rendimiento escalable con alta disponibilidad. • Asistentes para una implementación simple y rápida de flujos de trabajo. • Parte de la plataforma unificada de STARLIMS. • Implementación eficiente. • Sin la necesidad de crear y admitir varias interfaces costosas. • Los usuarios sólo deben aprender derivados. una aplicación e interfaz de usua- • Captura automática de datos rio. desde instrumentos analíticos com- • Actualizaciones sin interrupcio- plejos y simples (como las interfa- nes para los componentes de la pla- ces RS232 y de serie) taforma unificada. • Compatibilidad con firmas elec- • Una solución única para toda la trónicas. empresa. El cuaderno electrónico de STARLIMS es parte de la plataforma de informática para laboratorios unificada de STARLIMS, que incluye además, las funciones de LIMS ( Sistema de Gestion de la infor- Al basarse en una tecnología estándar como Web Services y .NET, STARLIMS simplifica de manera significativa la integración con sis- mación del laboratorio) y SDMS temas de terceros como el software (Sistema de Gestion de Datos de recursos y planificación empre- Cientificos) de STARLIMS. sarial (ERP), etc… 20 Hoja respuesta Ref. 11 CIENCIAS DE LA VIDA Izasa Lab 2/2009 Hamilton Storage Technologies Almacenamiento automatizado de muestras a – 80 ºC SAM (Sample Access Manager). diseño atractivo junto a una efi- Para organizar tal cantidad de ciencia inmejorable gracias a su muestras dispone de un sistema software de fácil manejo e interpre- integrado de selección de tubos tación para cualquier usuario y a la junto con lectores de códigos de robustez de los mecanismos moto- barras 1D y 2D. El software flexi- res internos situados fuera del espacio de almacenamiento. La atmósfera interna inerte formada por Nitrógeno o Aire seco permite almacenar a temperaturas entre -40ºC y -80ºC. En este ble, permite al usuario crear listas personalizadas de muestras así como tratamiento de datos y copias de seguridad. El objetivo global de Hamilton, maximizar el número de aplicacio- ambiente, el sistema ofrece una nes con las que poder trabajar, amplia variedad de formatos (SBS) vease: con los que trabajar: - Librerías de DNA/RNA - 810 Microplacas - Oligonucleótidos - 56.450 Tubos de 0.5mL. - Células - 41.000 Tubos de 1mL. - Plasmas/Sueros - 34.000 Tubos de 1.4mL. - Tejidos - 20.000 Crioviales de 2 mL. - Proteínas - 10.000 Tubos Vacutainer de 4mL. - Clones de origen bacteriano os avances de la investi- L gación biológica en DNA, células, proteínas, tejidos… conducen a la necesidad de adquirir sistemas de almacenamiento de muestras los cuales cada vez son más sofisticados. Paralelo a este desarrollo, Hamilton contribuye con su SAM HST -80ºC. El HST -80ºC une dos conceptos, un Hoja respuesta Ref. 12 21 ALIMENTACIÓN Izasa Lab 2/2009 Nuevo sistema de hidrólisis automática de Gerhardt: Hydrotherm Con el lanzamiento de Hydrotherm, Gerhardt es el único fabricante del mundo en presentar un equipo de estas características que pueda hacer una hidrólisis ácida de forma automática antes de la clásica determinación de grasa según Weibul-Stold. e basa en método típico de S diseño de análisis asegura una gran Gracias a un sistema integrado de digestión con ácido clor- reproducibilidad reduciendo la pre- limpieza, las muestras con excesiva hídrico seguido de filtra- sencia del usuario al mínimo. formación de espuma se pueden análisis automático se ha registrado Principio de trabajo con patente y abre nuevas vías a La muestra se digiere en un reci- este tipo de análisis. Se ha puesto el piente de digestión de tamaño ade- mayor énfasis posible en la seguri- cuado, después de añadir la mues- dad a la hora de construir el equipo tra y de insertar el filtro, el instru- caliente hasta que todas las partícu- así como la tecnología del sensor. mento se cierra y arranca el análi- las de grasa se hayan arrastrado Se ha podido evitar de forma com- sis. hacia el filtro y éste llegue a pH pleta que el usuario manipule y res- Después de dosificar una cantidad neutro. Se saca entonces el filtro forma individual. Es extremada- pire ácidos fuertes. Se puede traba- definida de ácido clorhídrico, se del sistema y se pone dentro de un mente fácil de usar dando posibili- jar con el sistema sin necesidad de inicia el programa de digestión cartucho para proceder a su extrac- dad al usuario de desarrollar méto- utilizar campana de extracción. Su bajo condiciones controladas. ción. dos y seguir los análisis de forma enjuagar en las paredes del recien- ción con un filtro plegado. Este Hydrotherm Manager Software de aplicación sencillo para el trabajo diario de análisis. El te. Una vez completada la diges- Hydrotherm Manager se usa para tión, la muestra se diluye y filtra desarrollar métodos así como para cuantitativamente por medio de un la documentación de los procedi- filtro húmedo. El recipiente de mientos. Hay un total de seis posi- digestión se enjuaga con agua ciones que se dividen en tres módulos de dos posiciones cada uno. Cada módulo se puede arrancar de sencilla. • De un vistazo se pueden ver todas las funciones y procedimientos lo que le hace extremadamente fácil de usar. • Se pueden compilar cualquier número de métodos para diferentes tipos de muestra. • Los tres distintos módulos se pueden seguir con una misma pantalla. • Si es necesario, es posible hacer intervenir de forma manual durante el procedimiento de extracción. • Se pueden documentar tablas de datos, métodos, usuarios, comentaros etc… 22 Hoja respuesta Ref. 13 ALIMENTACIÓN Izasa Lab 2/2009 Nuevos VAPODEST 50os y 50osC. Usted elige cómo valorar: por giro colorimétrico o por electrodo potenciométrico en ambos casos con o sin carrusel Sistema completamente automatizado con destilación y valoración de punto final por determinación colorimétrica con la posibilidad de añadir un carrusel de 20 muestras. lo largo de los 160 años • Importación y exportación de Principio Ventajas Vapodest 50os está equipado con • Se puede optimizar la duración Kjeldahl, el número de un chip sensor de color de alta reso- del proceso de valoración. usuarios de Gerhardt en todo el lución, que ofrece la capacidad de • Valoración de velocidad extraor- mundo que han ido apareciendo ha detección precisa para todos los dinaria. • Documentación y registro de los llegado a una considerable y gran colores. El algoritmo de valoración • Bomba micro-dosificadora sin datos y procesos pertinentes del cantidad. Sus aportaciones a través analiza de forma constante las mantenimiento que puede calibrar. análisis de las muestras. de los años han conducido al características de color durante la • Software de control Vapodest- • Biblioteca de métodos para diver- desarrollo de un nuevo modelo valoración, por lo tanto, optimiza la Manager en entorno Windows para sas aplicaciones y… muchas más Vapodest con características úni- velocidad del proceso de valora- máxima facilidad de uso. funciones. cas. Además de la determinación ción. El análisis se puede hacer más A de vida del método de potenciométrica de punto final, que ya utiliza Gerhardt, el Vapodest ofrece también la determinación colorimétrica requerida por la AOAC. Este nuevo modelo Vapodest es, de en línea balanza, código de barras o sistemas LIMS por ejemplo. rápido. Una bomba micro-dosificadora muy precisa de cerámica, práctica- Configuración estándar mente inerte y sin desgaste, se Determinación del valor del pH por punto final colorimétrico ocupa de la dosificación de la diso- Valoración por bomba micro-dosificadora lución valorante. El control y procesamiento de datos, así como la Adicción automática de H3BO3 automático Adicción automática de H2O Adicción automática de NaOH hecho, idéntico al Vapodest 50s. compilación de los métodos se rea- Tiempo de reacción programable Sin embargo tiene su opción única liza utilizando un PC con un soft- Tiempo de destilación programable para seleccionar el método de ware de control de fácil uso: el Generador de vapor automático detección preferido. VAPODEST-Manager. La generación de vapor se ajusta variablemente Succión de los residuos de muestra automática Aspiración automática de residuos de valoración Control a través de PC / Vapodest Manager Selección de idioma Control automático de los depósitos de reactivos Función de espera Mensajes de error de forma óptica y acústica Puerta de protección con interruptor de seguridad Se pueden usar de digestión tubos Kjeldatherm Se pueden usar matraces Kjeldahl Juegos completo de tubos Tubos de digestión Kjeldatherm de 250ml Interfaces RS 485 + USB CD-ROM con Vapodest-Manager Conexión para PC Conexión para balanza Automuestreador (carrusel) Juego de depósitos de reactivos Hoja respuesta Ref. 14 datos de muestra para poder utilizar VAP 50os VAP 50osC 1 20 23 RAYOS X Izasa Lab 2/2009 Serie Mini: Pequeños en tamaño pero grandes en Difracción de rayos X en polvo (XRD), Cristalografía de rayos X en longitud de onda (WDXRF), Fluorescencia de rayos X por reflexión odas ellas son técnicas T muy utilizadas para la caracterización estructu- ral y química de los materiales o Por el contrario, algunos de los como cuantitativa. MiniFlex II, es En el nuevo XtaLab mini de equipos de más alta tecnología ins- un difractómetro de sobremesa con Rigaku, este proceso está guiado talados se utilizan para el análisis geometría θ/2θ, muy útil para por el software de forma que el de muestras que no requieren unas caracterizar este tipo de muestras. Puede utilizarse para una variedad usuario menos experimentado para su visualización. Cuando pen- prestaciones elevadas, produciendo samos en el instrumental asociado una infrautilización de los recursos. ción de patrones de difracción de desde la colocación del cristal, a estas técnicas se nos vienen a la Conscientes de esta situación, algu- materiales policristalinos, muestras medición y análisis de los datos de cabeza dos características comunes nas de nuestras representadas más de polvo y placas metálicas, en forma rápida y sencilla, obteniendo a todos ellos: el gran tamaño de importantes JEOL Ltd., Rigaku análisis cualitativo y cuantitativo o datos de calidad para sus publica- estos equipos y su alto precio. Estas Corp. y SkyScan n.v., mundial- en la gestión de calidad de mate- ciones. dos características suelen suponer mente conocidas por estar en la rias primas y productos. Dispone un obstáculo para los laboratorios vanguardia del desarrollo y la inno- de control de calidad y de investi- vación de la microscopía electróni- gación y desarrollo en la industria, ca y de las técnicas de análisis por en los que es muy importante la rayos X, están apostando fuerte por relación entre el coste de inversión las líneas de equipos de sobremesa, y el beneficio generado por ella. Lo con muy buenas prestaciones pero, Cristalografía de rayos X mismo sucede en los centros de además, asequibles para aquellos en monocristal (SCX): investigación presupuestos limitados. y universidades, de aplicaciones desde la compara- pueda realizar todo el proceso, de accesorios adicionales como cambiadores de muestras automáticos y un monocromador secundario que permiten mejorar la productividad. SuperMini XtaLab Mini La cristalografía de rayos X permite obtener la estructura molecular de las sustancias cristalizadas en forma de monocristal. Mediante la Fluorescencia de rayos X por dispersión de longitud de onda (WDXRF): SuperMini exposición del cristal al haz de Es una técnica de análisis elemen- rayos X en todas las orientaciones tal, que nos da información cualita- posibles se obtiene mediante un tiva y cuantitativa de los elementos detector bidimensional una imagen que contiene la muestra indepen- de los puntos correspondientes a diente de la forma en que estos las reflexiones del haz difractado. estén combinados. En particular, la MiniFlex II fluorescencia por dispersión de donde estos equipos se encuentran Difracción de rayos X de longitud de onda, utiliza cristales centralizados en los servicios gene- muestras en polvo (XRD): analizadores para aislar la radia- rales y el acceso está más restringi- MiniFlex II ción fluorescente de cada elemento do de lo deseado, lo que implica La difracción de rayos X es una y poder así identificarlo y cuantifi- medir menos muestras de las que técnica de caracterización de mate- car la cantidad presente en la mues- nos gustaría. riales cristalinos tanto cualitativa 24 XtaLab Mini tra. Hoja respuesta Ref. 15 RAYOS X Izasa Lab 2/2009 prestaciones monocristal (SCX), Fluorescencia de rayos X por dispersión de total (TXRF), microscopía electrónica de barrido (SEM). Para esta técnica destacamos el punto a punto para obtener una necesidad de recubrirlas de mate- nuevo sistema de Rigaku, el imagen que nos muestra el contras- rial conductor. SuperMini, con un tubo de alta te en función de la topografía de la En esta línea de productos “mini”, muestra (detección de electrones JEOL ha lanzado al mercado un potencia (200W) y un cambiador automático de 12 muestras que per- secundarios) o en función del mite satisfacer las demandas de los número atómico de los componen- laboratorios de empresas petroleras tes (detección de electrones retro- y cementeras además de ser un gran apoyo en los laboratorios de análi- Skyscan 1174 investigación. nos mayores pero es más sencillo de manejar. Microtomografía de rayos X (µCT): Skyscan 1174 Microscopía electrónica de barrido (SEM): NeoScope Este método de análisis no destruc- que permite trabajar en modos de alto y bajo vacío, con tres tensiones de aceleración de los electrones del dispersados). Permite trabajar en un amplio rango de aumentos que sis de universidades y centros de SEM de sobremesa, el NeoScope, haz y con un rango de aumentos de hasta 20.000x. Comercializado en puede llegar hasta 1.000.000x en Europa por Nikon (también repre- los sistemas de alta gama. sentado en España por IZASA), Generalmente trabajan en alto está dirigido a dos tipos principales vacío y con muestras que sean con- de usuarios, aquellos que utilizan ductoras o bien recubiertas con una un microscopio óptico y les gusta- tivo permite el estudio de la micro- Hoy en día es la técnica de refe- delgada capa de algún elemento ría obtener imágenes a más aumen- estructura interna de los objetos a rencia para el estudio y visualiza- conductor, normalmente oro o car- tos y con mayor profundidad de través de la reconstrucción tridi- ción de pequeñas estructuras gra- bono. Sin embargo existen modelos campo, y aquellos usuarios de mensional de las imágenes obteni- cias a su gran profundidad de preparados para trabajar en presión microscopios electrónicos conven- campo. Utiliza un haz de electrones controlada (bajo vacío) que permi- cionales que no necesitan trabajar a que irradia a la muestra y la recorre ten ver muestras no conductoras sin muchos aumentos. das tras exponer la muestra a un haz de rayos X. Permite visualizar defectos microestructurales, cavidades, o cualquier otra característica estructural en huesos, minerales, piezas poliméricas, componentes de circuitos integrados, etc, con resoluciones incluso inferiores a la micra. El modelo 1174 es el microtomógrafo de sobremesa más pequeño y compacto del mercado, permite obtener imágenes de objetos de hasta 3cm de diámetro con una resolución de hasta 6 micras. Utiliza el mismo software de análisis y reconstrucción que sus herma- Hoja respuesta Ref. 15 NeoScope 25 ESPECTROMETRÍA/XRF Izasa Lab 2/2009 Analizadores XRF de mano de Oxford Instruments La gama de analizadores XRF de mano de Oxford Instruments incluye los analizadores X-MET5000 y X-MET5100, que permiten un análisis elemental rápido y fiable en una gran variedad de aplicaciones. os analizadores XRF de L mano X-MET5000 y X-MET5100 de Oxford Instruments aseguran un análisis rápido y fiable en aplicaciones como análisis de aleaciones, identificación positiva de materiales, suelos, minería, RoHS, juguetes, etc. Análisis de suelos La importancia de la determinación de metales pesados en suelos va en aumento, así como la necesidad de un conocimiento previo de las zonas contaminadas con el fin de reducir costes. Los X-MET5000/5100 son capaces de Incorporan tecnología exclusiva de definir rápidamente los límites de detección de rayos X que le permi- “puntos calientes” en cuanto a con- te conseguir una velocidad de aná- taminación. lisis insuperable, alta precisión y muy bajos límites de detección. Minería El X-MET5000 puede medir direc- El X-MET5100 permite además el análisis de elementos ligeros, como Al, Si y Mg, sin necesidad de emplear purga de He o sistemas de vacío. Los instrumentos son de construc- tamente en probetas de prospección, o bien se puede preparar la muestra para una mayor precisión. Análizadores X-MET5000 y X-MET5100 con certificación IP54 (NEMA3) para trabajar bajo las condiciones más duras. Es posible analizar diferentes elementos en el mineral. El modo de ción robusta, poseen el certificado análisis por parámetros fundamen- IP54 de protección frente a polvo y tales permite analizar muestras sin salpicaduras, y permiten su uso en necesidad de realizar una calibra- las condiciones más duras. ción previa con patrones. Análisis rápido de metales pesados en suelos contaminados. Plomo en juguetes La medida de plomo en juguetes se Análisis de metales pesados en juguetes. 26 ción para los niños, tales como vajillas, prendas de vestir, textiles o realiza de una forma rápida y senci- material de embalaje. Los lla. Además de juguetes, cada vez X-MET5000/5100 permiten una cobra mayor importancia la medida medida muy rápida y fácil de meta- de plomo en otros materiales que les pesados en todos estos materia- pueden ser fuente de contamina- les. Hoja respuesta Ref. 16 CROMATOGRAFÍA/TLC-MS Izasa Lab 2/2009 Nueva interfaz TLC-MS La nueva interfaz TLC-MS de Camag es un instrumento versátil para la extracción de compuestos de una placa de cromatografía en capa fina y su alimentación directa a un espectrómetro de masas, para identificación de substancias o elucidación de estructuras. lidad del MS con los disolventes conexiones, entre la bomba HPLC necesarios para la separación y el MS. Las substancias de interés HPLC. En estos casos, la separa- se extraen directamente de la placa ción previa en capa fina puede ser empleando el disolvente impulsado la solución ideal. En el pasado, las por la bomba, y se introducen en el substancias separadas en la placa MS, produciendo en menos de un eran extraídas mediante rascado y minuto un espectro de masas de la elución, antes de ser transferidas al zona de interés. Se extrae en pro- espectrómetro de masa. Ahora está fundidad la zona completa de la disponible una interfaz TLC-MS placa en la que está la substancia, sencilla y universal que permite, de lo que permite sensibilidades com- forma semiautomática, la extrac- parables a las conseguidas en ción de zonas de interés de la placa HPLC, dentro del rango pg/zona. y su transferencia directa al sistema MS. El dispositivo se puede conectar a cualquier espectrómetro de masas acoplado a HPLC, de cualquier fabricante. La interfaz TLC-MS se El láser indica la zona que será extraída para su análisis en el espectrómetro de masas. conecta fácilmente mediante dos o todas las muestras ejemplo, a baja sensibilidad para pueden ser analizadas algunos compuestos en el rango • Compatible con todos los sistemas HPLC-MS. por sistemas HPLC- UV, a la presencia de una matriz • Extracción rápida y sencilla. MS o HPLC-DAD, debido, por compleja, o a la falta de compatibi- • Identificación de substancias desconocidas. N • Confirmación de la presencia de compuestos. • Funcionamiento semi automático. • Alta reproducibilidad. • Detectabilidad similar a HPLC-MS. • Compatible con las placas TLC/HPTLC más comunes. • Extracción en viales para RMN o (ATR)FTIR, nanospray estático, inyección directa EI-MS y MALDI. • ¡No más rayado de placas! A partir de la placa con bandas de 4mm, se extrae la banda con RF 0.15, que es identificada como cafeína en el espéctrometro de masas. Hoja respuesta Ref. 17 27 MICROSCOPÍA ÓPTICA Izasa Lab 2/2009 Biostation CT de Nikon El entorno ideal para la monitorización de sus cultivos celulares. esde hace más de 100 D lumínico, choques térmicos y • Documentación clásica de creci- años, tanto investigado- variaciones químicas del entorno miento de cultivos . res como fabricantes de quedan a partir de ahora excluidos • Células madre embrionarias / instrumentación han desarrollado del proceso mediante la introduc- medicina regenerativa. sistemas más o menos complejos, ción de los sistemas BIOSTATION. • Investigación farmacéutica y bio- capaces de asegurar la superviven- Éstos han sido concebidos ponien- tecnológica. cia de sus cultivos celulares. do a la célula en el centro de la idea • Fecundación In Vitro. Asumiendo, siempre, que un cierto y construyendo a su alrededor un • Estandarización de análisis. nivel de estrés celular es un factor entorno confortable, estable y segu- • Validación de líneas celulares. inherente a tal proceso. Sólo ro que permita la completa monito- • Test toxicológicos. recientemente el mantenimiento de rización de procesos de crecimien- •… condiciones ambientales iguales a to, diferenciación, selección, … Y además las presentes en el tejido in-vivo ha cobrado una importancia relevante, y hoy en día su impacto como factor de experimentación es ya incuestionable en la obtención e interpretación de resultados. Tomando conciencia de este hecho, NIKON ha desarrollado específicamente una serie de sistemas de cul- BIOSTATION CT • Flexibilidad de soporte para culti- La Biostation CT combina un incu- vo : placas, botellas, multipocillo, bador y un microscopio Nikon • Automatización total y repetibili- … automatizado en un entorno mul- dad máxima de la adquisición de • Flexibilidad en técnicas de obser- tiusuario / multiexperimento, a fin datos en modo multidimensional vación : contraste de fases, epi- de evitar la extracción de los culti- (x, y, z, multicanal). fluorescencia multicanal. vos para su documentación gráfica • Control remoto de la monitoriza- • AutoFocus. y su exposición a otras condiciones ción a través de LAN o Internet. • Magnificación variable de 2x, 4x, ambientales. • Manejo sencillo y confortable. 10x, 20x y 40x. Ventajas Aplicaciones mento. • Control ambiental total y monito- • Monitorización estándar en célula • Desplazamiento de soportes de rización de temperatura, humedad viva (time lapse). cultivo mínimo, robotizado. tivo, mantenimiento de condiciones ambientales, observación, • Sencilla programación del experi- adquisición de imágenes y monitorización, que eliminan todos aquellos “daños colaterales” causantes de estrés celular hasta ahora asumidos por defecto. Estrés mecánico, y concentraciones en el medio. • Mínimo movimiento de las células (alta resolución x-y) a la platina de observación sin efectos físicos de desplazamiento o vibración. • Exposición lumínica mínima, sólo la necesaria para la documentación a través de sistemas LED. • Sin trasiego de puertas, lo que maximiza la estabilidad térmica. • Máxima calidad de imagen NIKON. 28 Hoja respuesta Ref. 18 MICROSCOPÍA ÓPTICA Izasa Lab 2/2009 Nuevo sistema de microscopía láser confocal macro Nikon AZ-C1 Nikon e Izasa se complacen en presentales el nuevo microscopio confocal macro modelo AZ-C1. a del del intervalo de magnificación de microscopio multizoom 5x a 400x del microscopio AZ100. L combinación Nikon AZ100 y el equipo confocal Nikon C1 permite la El pequeño tamaño del cabezal de obtención de imágenes confocales escaneo del confocal C1 permite su en un amplio intervalo de aumen- combinación con el microscopio tos, desde una vista macro de la AZ100 y permite la obtención de muestra hasta una vista micro de imágenes confocales macro de la las microestructuras de la misma. más elevada resolución. El microscopio confocal Nikon La combinación del microscopio AZ-C1 permite a los usuarios AZ100 con el equipo confocal C1 visualizar no solamente especíme- si permite asimismo la obtención nes vivos enteros de gran tamaño de imágenes espectrales de 32 sino asimismo subestructuras de canales y permite su posterior sepa- células individuales gracias al uso ración espectral. Microscopio confocal macro Nikon AZ-C1. Hoja respuesta Ref. 19 Imágenes confocales obtenidas con el microscopio confocal macro AZ-C1. 29 ESPECTROMETRÍA/COLOR Izasa Lab 2/2009 MiniScan®EZ: El espectrofotómetro colorímetro portátil de más fácil manejo HunterLab ha sacado al mercado un nuevo espectrofotómetro colorímetro portátil con un intervalo espectral que cubre desde los 400nm a los 700nm y con una resolución de 10nm. Trabaja con baterías o pilas y es de gran facilidad de manejo, El MinScan®EZ sustituye al veterano MiniScan XE PLus que tan buenos resultados dió a todos sus usuarios. jo, etc), la estandarización Hitch, etc. Los aspectos principales de este nuevo modelo son: • Gran facilidad de manejo ya que el aparato se puede manejar con • Almacenamiento de infinidad de una sola mano y con sólo apretar medidas de patrones y muestras. un botón con el dedo pulgar se • Fácil medida de pasa/falla. puede navegar en el software para • Posibilidad múltiple de idiomas. ejecutar todas las funciones que se • Disponibilidad de las dos geome- necesitan para trabajar. trías: direccional 45°/0° o esfera • Al igual que el anterior mantiene d/8º y área de lectura pequeña una gran pantalla gráfica LCD para también. fácil lectura de la aplicación y • Mejor repetibilidad de medidas resultados. así como acuerdo inter-instrumen- • Incluye todas las escalas de color to. e índices tales como CIE XYZ, • Baterías de alimentación de gran Hunter Lab CIE L*a*b*, L*c h, duración con la posibilidad de on este nuevo portátil, PC vía software EasyMatch QC y, Yxy, componente y color, índice de hacer hasta 5000 medidas sin nece- se mejorado al igual que su predecesor, el usua- amarilleo (ASTM D1925), índice sidad de recarga. muchas características rio tiene la ventaja de poder definir de blancura (E313), Brillo Z%, 5- • Ligero de peso y diseñado ergo- respecto al anterior obteniendo sus formatos de trabajo a medida 5-5 Shade Numbering, índice de nómicamente para mejor confort unos resultados francamente intere- que va podiendo fijar las condicio- metamerismo (MI), Tint Index del operador. santes, no sólo en dimensiones y nes de medida, la escala de color, (E313-96), ISO Grey Change Scale • Interfase USB. peso sino también en el software de las diferencias de color, el formato (ISO 105-A05.2), ISO Grey Stain • Posibilidad opcional de trabajo trabajo y su interfase con el opera- de salida de la información con Scale (ISO 105-A04) con software de PC gracias al soft- dor. resultados numéricos o gráficos, las • Selección por software de ilumi- ware Puede trabajar tanto como equipo tolerancias para el pasa/falla, el nantes (A, C, D65, F, TL84) y EasyMatch QC. autónomo así como controlado por tipo de patrón (numérico, de traba- observadores (CIE 2° y 10°) C han de análisis de color • Determinación de diferencias de color de forma sencilla: diferencias (FMC2), total color diferencias (ΔE, ΔE*, ΔCMC con relación ajustable del ratio L:c), diferencias hue (ΔL*,ΔC*, ΔH*), tolerancia CMC 30 Hoja respuesta Ref. 20 ESPECTROMETRÍA/FT-IR Izasa Lab 2/2009 Espectrómetro FTIR modelo IRAffinity-1 de Shimadzu La respuesta para el análisis IR del laboratorio actual. cación y análisis de contaminantes, de principal uso en la actualidad en el FTIR. Características • La más alta relación señal ruido en su clase: 30.000:1 IRAffinity-1 con Pc - Programa Contaminant Analy- - Fuente de luz de cerámica de sis (pendiente de patente): alta energía con control de temperatura. ● con alto grado de exactitud. - Detector DLATGS de alta sensibilidad. ● - Optimización del sistema eléc- Contiene más de 300 espec- tros de sustancias inorgánicas, orgánicas y poliméricas detectadas • Fácil mantenimiento (preserva- a menudo como materiales extra- ción frente a la humedad) ños. l IRAffinity-1 (nombre que sugiere "la amistad") (JPN: registro de modelo de utili- está ya en el mercado ana- dad No.3116465). lítico. Es el instrumento FTIR de ● trico. - Desecador interno incorporado E Generación automática del informe tras el análisis. - Óptica de alto rendimiento. IRAffinity-1 Identifica la materia extraña - Programa PharmaReport: ● Hace juicios de pasa/falla en muestras según pruebas especifica- - Divisor de haz recubierto con das en la Farmacopea. mayor demanda de uso general que protector de humedad. se desarrolló como el sucesor del • Programas de apoyo para análi- nes de entradas y pre-envíos. FTIR-8400S pero con unas especi- sis • Diseño inteligente ● Se puede usar para inspeccio- ficaciones de hardware que mejo- - Permiten que usuarios con poca El IRAffinity-1 consigue una ran significativamente. Por ejem- experiencia en FTIR usen toda la reducción de un 20% del área de plo, la relación señal ruido es funcionalidad IRAffinity: trabajo sobre todo en anchura 30.000:1 o mayor lo cual le permi- corrección atmosférica, medida (comparado con otros modelos de te ser el mejor en su clase. También continua, etc. Shimadzu). del cuenta con una resolución máxima de 0,5 cm-1 y un auto secador incorporado interno. Además, se ha miniaturizado gracias a las mejoras del sistema óptico, lo que proporciona alrededor del 20% de reducción en la anchura del espacio de trabajo en comparación con su predecesor. Junto a las mejoras tanto de hardware como de software, se ha equipado al IRAffinity-1 con programas de pruebas de identifi- Hoja respuesta Ref. 21 IRAffinity-1 con microscopio y Pc 31