Indice pag 1. Introducción 1.1 Enunciado del problema 2. Anatomía 6 7 11 2.1 Embriología 11 2.2 Macroscópica 13 2.3 Microscóspica 15 2.3.1 Células 16 2.3.2 Matriz Extracelular 19 2.3.2.1 Colágeno 20 2.3.2.2 Proteoglicanos 22 2.3.2.3 Matriz glicoproteica 23 2.4 Vascularización 24 2.5 Inervación 27 3. Funciones del tejido meniscal 28 4. Tipo de lesiones 33 5. Fisiopatología de la lesión meniscal 35 5.1 Fase reactiva 36 5.2 Fase proliferativa 40 5.3 Fase remodelación 41 6. Opciones de tratamiento 43 6.1 Abstinencia terapeútica 43 6.2 Resección 44 Indice pag 6.2.1 Meniscectomia total 44 6.2.2 Meniscectomia parcial 44 6.3 Reparación 6.3.1 Sutura 47 47 6.3.1.1 Factores 49 6.3.1.2 Tecnicas 53 6.3.1.3 Sistemas de ayuda 6.3.2 Ingeniería de tejidos 56 68 6.3.2.1 Células 68 6..3.2.2 Plataformas 70 6.4 Transplante meniscal 72 7. Células madre 75 7.1 Definición 75 7.2 Células madre mesenquimales 78 7.3 Células madre mesenquimales de la grasa 79 7.4 Estudios experimentales 81 7.5 Métodos administración 83 8. Plasma rico en plaquetas 84 8.1 Definición 87 8.2 Factores de crecimiento 87 8.3 Estudios experimentales 96 9. Objetivos de la tesis 99 10. Material y métodos 100 Indice pag 10.1 Fase experimental 100 10.1.1 Animales experimentación 100 10.1.2 Validación plasma rico en plaquetas 101 10.1.3 Técnica quirúrgica 101 10.1.3.1 Anestesia 102 10.1.3.2 Cirugía 103 10.1.3.3 Postoperatorio 112 10.1.4 Tipo de lesiones 113 10.1.5 Tratamientos 118 10.1.6 Preparación células madre 124 10.1.6.1 Cultivos primarios 124 10.1.6.2 Subcultivos 126 10.1.6.2.1 Despegado 126 10.1.6.2.2 Congelación 127 10.1.6.2.3 Descongelación 127 10.1.6.2.4 Marcaje 128 10.1.6.2.5 Transporte 128 10.1.7 Concentrado de plaquetas 10.1.7.1 Preparación 130 131 10.2 Análisis macroscópico 133 10.3 Histología e inmunohistoquímica 133 10.3.1 Fijación e inclusión 133 10.3.2 Coloración 134 10.3.3 Inmunohistoquímica 135 10.4 Análisis de datos y estadística 137 Indice pag 11. Resultados 139 11.1 Validación plasma rico en plaquetas 139 11.2 Células madre 145 11.2.1 Análisis de datos 145 11.2.1.1 Lesiones agudas cortas 145 11.2.1.2 Lesiones crónicas cortas 147 11.2.1.3 Lesiones agudas largas 150 11.2.1.4 Lesiones crónicas largas 152 11.2.1.5 Globales 154 11.2.2 Macroscopía 157 11.2.3 Microscopía 159 11.2.4 Inmunohistoquímica 171 11.3 Plasma rico en plaquetas 12. Discusión 12. 1 Material y métodos 173 177 177 12.1.1 Modelo experimental 177 12.1.2 Vía de abordaje 179 12.1.3 Lesión meniscal 180 12.1.4 Lesión corta y larga 181 12.1.5 Lesión crónica y aguda 182 12.1.6 Sutura meniscal 183 12.1.7 Manejo postoperatorio 184 12.1.8 Células madre 186 12.1.9 Plasma rico en plaquetas 192 Indice pag 12.2 Resultados 12.2.1 Células madre 196 196 12.2.1.1 Tamaño lesión 197 12.2.1.2 Tiempo evolución lesión 198 12.2.1.3 Globales 199 12.2.1.4 Reparación parcial 207 12.2.1.5 Inmuno e histología 208 12.2.1.6 Hipótesis justificatoria 208 12.2.2 Plasma rico en plaquetas 210 13. Conclusiones 215 14. Bibliografía 216