CAPÍTULO II MARCO TEÓRICO Antecedentes de la Investigación A nivel internacional: Domínguez (2001) desarrolló un “Estudio microbiológico de las incrustaciones y corrosiones en captaciones de agua subterránea”, cuyo objetivo fue establecer qué parámetros podían ocasionar la formación de incrustaciones de origen biológico en una serie de acuíferos ubicados en la cuenca terciaria de la mina As Pontes y aguas carboníferas de Hard-rocks, en España, con el apoyo de la Universidad Complutense de Madrid y la empresa TRAGSATEC. Los principales grupos bacterianos estudiados fueron: las ferrobacterias, las bacterias sulfatoreductoras, los aerobios totales y bacterias formadoras de exopolímeros (Pseudomonas, Proteus). A su vez se aplicaron análisis químicos para determinar la presencia de iones de Na, Ca, Mg, K, Cl, CO3, HCO3, SO4. La identificación mineralógica se realizó en el departamento de cristalografía y mineralogía de la Universidad Complutense, mediante el programa informático WATEQF y los diagramas oxido reducción (Eh/Ph) de Pourbaix, cuyo objetivo era estimar la estabilidad de las incrustaciones. En relación con los análisis microbiológicos se emplearon tres metodologías, la primera conocida como B.A.R.T TM (Biological Activity Reaction Test), no efectuada antes en España, la segunda el método NMP (número más probable) destinada para medios de cultivo líquidos y finalmente el método de disoluciones seriadas para medios de cultivos sólidos. La metodología señalada anteriormente permitió al investigador llegar a las siguientes conclusiones: en primer lugar, que las bacterias formadoras de biopelículas y bioincrustaciones están presentes en todas las captaciones; en segundo lugar, las ferrobacterias y las bacterias formadoras de exopolímeros ven limitados su desarrollo 8 por la conductividad del agua, mientras que se ven favorecidas por el oxígeno disuelto; en tercer lugar, las bacterias sulfatoreductoras no tienen ningún parámetro químico que relacione su presencia o ausencia y, finalmente, que a mayor profundidad la microbiota correspondiente a ferrobacterias es mayor en las captaciones del pozo. De este estudio se puede tomar como aporte para esta investigación las bases teóricas y la metodología aplicada, específicamente el método de disoluciones seriadas y el método de número más Probable (NMP) para los análisis bacteriológicos, justificándose en la identificación microbiana. A nivel nacional: Barrientos, González y Urbani (2001), realizaron una investigación denominada “Estudio hidroquímico de los manantiales: Cumbotico y Cumbote, Colonia Tovar, estado Aragua, Venezuela”, cuyo objetivo principal fue caracterizar químicamente el agua de las nacientes respecto al ión dominante, estudiando su grado de mineralización y en función de esto determinar su uso potencial. Para lograr el análisis fue necesario aplicar nueve muestreos. La toma de las muestras se realizó en botellas de polipropileno de 250 ml de capacidad, las cuales posteriormente se acidificaron con ácido nítrico concentrado para la determinación de los cationes de: calcio, magnesio, sodio y potasio. Los parámetros físico–químicos medidos “in situ” fueron la temperatura del agua y la del ambiente, mientras que los parámetros “ex situ” fueron: el pH, el potencial redox, conductividad, sólidos totales disueltos (STD) y oxígeno disuelto, este último a través del método iodométrico de Winkler Lavestu. A su vez se realizaron análisis volumétricos para la determinación de alcalinidad total, bicarbonatos, dureza cálcica y total. La concentración de sodio, potasio, calcio y magnesio fue obtenida por espectrometría de absorción atómica mientras que las concentraciones de sulfatos, sílice y ortofosfato disuelto se estimaron por espectrofotometría de luz visible. En relación con los análisis microbiológicos estos se efectuaron siguiendo la metodología APHA Standard Methods (1985) para 9 ambos manantiales, obteniendo presencia de coliformes fecales en un orden de 80 a 30 CF/100 ml para los manantiales Cumbotico y Cumbote, respectivamente, análisis que fueron ejecutados por Hidrocapital en el Laboratorio de Agua La Mariposa. Los resultados obtenidos permitieron a los investigadores tipificar estas aguas como hipotermales, bicarbonatadas, de origen continental provenientes de aguas de infiltración. De igual forma, los investigadores llegaron a la conclusión que dichas aguas contienen niveles de contaminación apreciables por ortofosfatos originarios de áreas agrícolas. En relación con los análisis bacteriológicos se reportó la presencia de coliformes fecales, descartando su uso como agua potable, ubicándola como un agua del sub-tipo 1-A con base a lo establecido por el Ministerio del Ambiente y de los Recursos Naturales (MARNR, 1995). Como aporte para esta investigación, se toma el hecho que es un estudio aplicado a nacientes, igual al que se elaboró, sirviendo de apoyo correlativo a los fundamentos teóricos, debido a que es un estudio realizado en el país, además considerando que es poca la literatura sobre el tema sirviendo como guía para la evaluación de los parámetros químicos en cada una de las muestras a analizar. No obstante, para la investigación se tomó en cuenta otras normativas no señaladas en la investigación de Barrientos, Gonzales y Urbani, entre las que resalta el Decreto 883 y la Gaceta N° 36.395 sobre “Normas sanitarias de calidad del agua potable”. A nivel regional: Castellanos (2011), realizo en la Universidad Nacional Experimental del Táchira un estudio titulado “Proponer medidas para la valoración y conservación de las nacientes de agua ubicadas en la ciudad de San Cristóbal, municipio San Cristóbal, estado Táchira, Venezuela”, siendo el objetivo de esa investigación indagar sobre los parámetros físicos, químicos y bacteriológicos de las nacientes estudiadas, con la finalidad de establecer su posible uso para consumo humano y al mismo tiempo estudiar alternativas que permitan valorarlas y protegerlas. Durante el desarrollo de esa investigación se logró conocer que la totalidad de las muestras analizadas presento contaminación de origen fecal, concluyendo que 10 dichas fuentes no pueden ser destinadas para consumo humano sin tratamiento alguno, de acuerdo con el Decreto N° 883 que establece las “Normas para la clasificación y el control de la calidad de los cuerpos de agua y vertidos o efluentes líquidos” en Venezuela; de igual forma se determinó que la carga orgánica era elevada para algunas de las fuentes comprobando así su contaminación. Con base en estos resultados el investigador logró establecer una serie de medidas entre las que destacan la implementación de sistemas de captación y tren de tratamiento con lecho de filtrado de arena y flujo descendente lento, el cual irá acompañado por un sistema de cloración simple. Del estudio realizado por Castellanos (2011) se puede tomar como guía para la presente investigación las medidas correctivas y preventivas formuladas para la valoración, preservación y uso de las nacientes, junto con la metodología aplicada para la determinación de caudales, apoyado en el hecho de que es un estudio regional que puede permitir establecer comparaciones entre las distintas fuentes de agua y su aporte para cada una de las poblaciones, facilitando la creación de lineamientos estratégicos para el manejo y conservación de estas importantes fuentes alternativas de agua, que forman parte de la zona metropolitana de San Cristóbal, capital del estado Táchira, que es administrada por la misma empresa hidrológica. Bases Teóricas Ciclo Hidrológico Es el proceso natural mediante el cual parte de las aguas presentes en la tierra, como cuerpos superficiales: ríos, lagos, mares, entre otros, se desplazan a la atmósfera en forma de vapor, se condensa y regresa en precipitaciones, constituyendo el denominado ciclo del agua, en donde parte de las precipitaciones regresa directamente a la atmósfera, y la otra alimenta primero esas masas de agua, o se percola enriqueciendo los estratos porosos del subsuelo (Rivas, 1983). Este ciclo ocurre indefinidamente debido a la energía solar y su distribución, a la acción de la gravedad y a la rotación de la tierra. Dentro de los fenómenos más 11 relevantes que constituyen el ciclo hidrológico están: la precipitación pluvial, evaporación, transpiración y percolación (Rivas, 1983). Aguas Subterráneas Se entiende por aguas subterráneas a todas aquellas aguas que se infiltran en el suelo hasta la zona de saturación. La explotación de éstas dependerá de las características hidrológicas y de la formación de los acuíferos. Las captaciones de aguas subterráneas se pueden realizar a través de manantiales, galerías filtrantes, pozos (excavados y tubulares) (Lampoglia, et al. 2008). Manantial De acuerdo, con la descripción realizada por Lampoglia, et al. (2008), se entiende por manantial al lugar donde se produce el afloramiento natural del agua subterránea, donde por lo general el agua fluye a través de la formación de estratos de grava, arena o roca fisurada. En los lugares donde existen estratos impermeables, estos bloquean el flujo subterráneo del agua y permiten que aflore a la superficie. Los manantiales se clasifican por su ubicación y afloramiento; por su ubicación son de ladera o de fondo y por su afloramiento son de tipo concentrado o difuso. En los manantiales de ladera el agua aflora en forma horizontal, mientras que en los de fondo el agua aflora en forma ascendente hacia la superficie. Para ambos casos si el afloramiento es por un solo punto y sobre un área pequeña, es un manantial concentrado y cuando aflora el agua por varios puntos es un manantial difuso (Lampoglia, et al. 2008). La medición de caudal en este tipo de fuente según la Organización Panamericana de la Salud (OPS, 2004) debe realizarse en meses de estiaje y lluvias con la finalidad de conocer los caudales máximos y mínimos. Vulnerabilidad de los Acuíferos en Venezuela Se entiende por vulnerabilidad, al conjunto de características del acuífero que determinan cuánto podrá ser afectado por la descarga de un contaminante. La 12 vulnerabilidad de las aguas subterráneas a la contaminación fue definida por el National Research Council, (1993), como “la tendencia o probabilidad que tiene un contaminante para alcanzar un sitio específico en el sistema de agua subterránea, después de su introducción en alguna localización por la parte superior del acuífero”. En este sentido, todo acuífero es capaz de presentar vulnerabilidad intrínseca entendiéndose ésta como la que depende directamente de las propiedades del acuífero (conductividad hidráulica, porosidad, gradiente hidráulico, tipo de suelo o roca y profundidad) y las fuentes de agua asociadas (recarga, interacción con el agua superficial, tránsito a través de la zona no saturada, sitios de descarga), siendo independiente de las características químicas del contaminante y su fuente (Ferrara, et al. 2007). En Venezuela, las aguas subterráneas ocupan el 16 % del volumen total del agua que se consume anualmente para satisfacer las necesidades de la actividad económica y social, esta estadística refleja la importancia de proteger el recurso vital. Es por ello que en los últimos años ha sido creciente la preocupación de la sociedad ante la degradación de la calidad de los recursos hídricos subterráneos, por lo que es necesario desarrollar una gestión ambiental segura en las aguas en general. Como resultado de esta situación, en Venezuela se está generalizando el uso de técnicas o métodos que permitan evaluar los acuíferos, tal es el caso de la cartografía que es usada actualmente como herramienta para apreciar cualitativamente y cuantitativamente la carga contamínate generada por actividades antropogénicas y la capacidad del medio acuífero para soportar la misma sin perjuicio, diferenciando las características naturales del terreno a fin de proteger al acuífero de la acción de múltiples contaminantes que pueden infiltrase desde la superficie (Márquez, et al. 2006). Calidad Requerida para que el Agua sea Potable La calidad del agua debe ser evaluada antes de la construcción del sistema de abastecimiento, ya que el agua en la naturaleza contiene impurezas que pueden ser de naturaleza físico-química o bacteriológica y varían de acuerdo al tipo de fuente. 13 Cuando las impurezas presentes sobrepasan los límites recomendados, el agua deberá ser tratada antes de su consumo. Además de no contener elementos nocivos a la salud, el agua no debe presentar características que puedan rechazar el consumo. Por lo tanto se define como agua potable: “Aquella que puede ser consumida sin restricciones y para esto deberá cumplir con las características físicas, químicas y microbiológicas establecidas en la normativa legal de cada país”, la cual se basa generalmente en las Guías para la Calidad de Agua Potable de la Organización Mundial de la Salud (OMS, 2006). Con la finalidad de ajustar la calidad del agua a los criterios establecidos en la normativa de cada país, las autoridades sanitarias competentes establecen los sistemas o procedimientos que se requieran para el tratamiento de las aguas, es decir, los procesos de potabilización, es así como surge la necesidad de las plantas o estaciones potabilizadoras, con las que se busca eliminar el riesgo para la salud provocado por el contenido de sustancias físicas y/o químicas y el contenido de organismos vivos que pueden existir en el agua. Parámetros Medidos para la Determinación de Agua Potable · Parámetros físicos. Son aquellos que miden los aspectos externos que sirven de grado de aceptación del individuo, tales como: sabor, olor, temperatura, turbidez, color, sólidos totales y en suspensión. Los parámetros descritos a continuación siguen la descripción realizada por Roa, (2005). Turbidez. Es una medida de la capacidad del agua para trasmitir o absorber luz, debido a la cantidad de materia en suspensión y coloidal presente en la misma; las partículas que generalmente afectan este parámetro son: la arcilla, el limo, la materia orgánica o microorganismos, condicionando muchas veces su uso por razones estéticas. Color. Es la respuesta visual a la presencia de sustancias orgánicas e inorgánicas en el agua como taninos, ácido húmico, óxidos de hierro o manganeso, procedentes de agroquímicos, colorantes, mataderos, entre otros. 14 Olor. Es la respuesta fisiológica del sentido del olfato a la presencia en el agua de sustancias volátiles, tanto orgánicas como inorgánicas. Temperatura. Es una propiedad física muy importante por su influencia sobre la velocidad de las reacciones químicas que se dan en el agua, los procesos metabólicos de las células, el desarrollo de la vida acuática, la amplificación de sabores y olores, y finalmente la solubilidad de los gases disueltos. Sólidos. Son sustancias presentes en el agua que producen condiciones indeseables o agresivas en el cuerpo receptor, por esta razón se deben eliminar a través de procesos de tratamiento; reciben el nombre de sólidos totales, en suspensión, disueltos, sedimentables, coloidales, volátiles y fijos. Los sólidos totales pueden ser de naturaleza orgánica e inorgánica y pueden estar presentes en solución o en suspensión. Oxígeno disuelto. El oxígeno es uno de los elementos más importantes de las aguas naturales, de su presencia depende la vida de los organismos aerobios, al igual que las actividades físico-químicas propias del cuerpo de agua. Por esta razón, es un indicador importante de la calidad del agua. Las aguas superficiales en su estado natural pueden contener cantidades próximas a la saturación (9 mg/l), caso opuesto a las aguas profundas que contienen por lo general una concentración en el orden de los 2 mg/l, llegando a desaparecer en muchos casos en la zona de fondo (Ferrara, et al. 2007). Es por ello que en algunas ocasiones es necesario implementar unidades o sistemas que permiten aumentar la disponibilidad de este gas, siendo una de ellas el uso de sistemas de resalto hidráulico el cual se basa en aplicar discontinuidad a la superficie del agua aumentando el contacto con el lecho o con las paredes de otro cuerpo. Las unidades más conocidas que permiten sistemas hidráulicos son: canaletas Parshall, vertederos, aireadores por gravedad (tipo cascada y tableros), entre otros. · Parámetros Químicos. Miden la presencia de sustancias que afectan directa o indirectamente la salud de los consumidores, clasificándose en sustancias inorgánicas y sustancias orgánicas. 15 Sustancias inorgánicas. - Alcalinidad y dureza. - Contenido salino, conductividad. - pH. - Sustancias tóxicas. Sustancias orgánicas. - Agroquímicos y - Trihalometanos (THM), como subproductos de la cloración. En relación con los paramentos químicos inherentes al proyecto de investigación, se menciona la descripción realizada por Ferrara, et al. (2007): pH. Es un parámetro importante en el control de calidad en aguas naturales y residuales, debido a que expresa la concentración de protones presente en el agua, representando el grado de su acidez o basicidad. El pH de las aguas naturales se debe a la composición de los terrenos atravesados durante la infiltración y varía generalmente entre 7,2 y 7,6. Sin embargo, las aguas muy calcáreas tienen un pH elevado a diferencia de las provenientes de terrenos pobres en caliza o silicatos que tienen un pH próximo a 7,0 pudiendo ser menor o igual a 6. Alcalinidad. Se entiende como la capacidad del agua para neutralizar ácidos. En aguas naturales se debe principalmente a la presencia de sales de ácidos débiles. Sin embargo, si estuviera presente alguna base fuerte ésta también aporta alcalinidad. Aunque muchas especies pueden contribuir a la alcalinidad, la mayor proporción en aguas naturales se debe a hidróxidos, carbonatos y bicarbonatos; otras especies que también pueden contribuir y que generalmente están presentes en pequeñas concentraciones son silicatos, boratos, amonio, fosfatos y bases orgánicas. En la tabla a continuación se presentan los valores de alcalinidad en aguas cruda. 16 Tabla 1 Rangos de alcalinidad en aguas crudas. Rango Alcalinidad (mg CaCO3/l) Baja < 75 Media 75 – 150 Alta > 150 APHA (1989). Dureza. Se debe a la presencia de cationes polivalentes en el agua, especialmente el calcio (Ca+2) y magnesio (Mg+2). Otros cationes que pueden proporcionar dureza son estroncio (Sr+2), hierro (Fe+2) y manganeso (Mn+2). En aguas naturales, salvo excepciones muy particulares, la dureza tiene carácter natural y corresponde al lavado de los suelos que atraviesa. En ciertas condiciones la descomposición del tejido vegetal puede conducir a la liberación de grandes cantidades de CO2 que, arrastrado en las aguas subterráneas por infiltración de las aguas de lluvia, puede disolver el calcio del suelo y contribuir a la variación de la dureza. Según el contenido de dureza, las aguas para abastecimiento municipal se clasifican como se muestra en la tabla 2. Tabla 2 Clasificación del agua por dureza total. Dureza (mg/L CaCO3) 0-75 76-150 151-300 ≥ 300 Clasificación Suaves Moderadamente duras Duras Muy duras Ferrara, Najul y Sánchez, (2001). Las formas de dureza se clasifican de acuerdo con el catión que la origina en cálcica y magnésica; relacionada con la alcalinidad y según el anión al cual está asociada en carbonática y no carbonática. Para su cuantificación se utilizan las siguientes relaciones: 17 DT = DC + DM Donde: DT = Dureza Total, mg/L CaCO3 DC = Dureza Cálcica, mg/L CaCO3 DM = Dureza Magnésica, mg/L CaCO3 Si la alcalinidad total es igual a la dureza total, entonces se dice que toda la dureza es carbonática; si la alcalinidad total es menor a la dureza total, entonces: Dureza Carbonática = Alcalinidad Total Dureza No Carbonática = Dureza Total – Alcalinidad Total Sulfatos. Son unos de los aniones más abundantes en las aguas naturales, sin embargo, los niveles de concentración son muy variables; en terrenos que no contengan una proporción importante de sulfatos minerales, este puede alcanzar valores entre 30 y 50 mg/l a diferencia de zonas que contienen yeso o cuando el tiempo de contacto con la roca es elevado, adquiriendo valores de hasta 300 mg/l. Los métodos analíticos para la determinación de sulfatos incluyen el que se basa en la cromatografía iónica capaz de detectar concentraciones bajas y los métodos gravimétricos, basados en la formación de sulfato de bario insoluble a partir de la adición de un exceso de cloruro de bario a la muestra. También se disponen de métodos turbidimétricos y automatizados con azul de metileno. Hierro. En general las aguas superficiales bien aireadas contienen bajas concentraciones de hierro (hasta 1 mg/l), mientras que las aguas subterráneas y drenajes de minas del metal pueden contener concentraciones mucho mayores (10 mg/l o más). Bajo condiciones reductoras, el hierro se presenta en su estado ferroso (Fe+2) el cual es bastante soluble en el agua, el hierro ferroso en presencia de oxígeno u otro agente oxidante pasa a hierro férrico (Fe+3), prácticamente insoluble en agua, a menos que se encuentre en presencia de iones formadores de complejos o valores de pH muy bajos. Es por ello que en algunas ocasiones el hierro presente en una muestra de agua puede parecer en solución verdadera en estado coloidal peptizado por materia orgánica, en combinación de hierro y material partículado. 18 La determinación de hierro se puede realizar por métodos espectrofotométricos (absorción atómica) y colorimétricos (método de fenantrolina). Nitrógeno. Es un elemento complejo que puede aparecer bajo siete estados de oxidación, pudiéndose transformar de uno a otro como consecuencia de la actividad y bioquímica que ocurre en la naturaleza. Desde el punto de vista de calidad del agua, los compuestos de mayor interés son aquellos que contiene nitrógeno orgánico, amoniaco (NH3), nitritos (NO2-), nitratos (NO3-), urea (CO(NH2)2) y el nitrógeno gas. Siendo de gran importancia para el presente proyecto su cuantificación, debido a que la zona de estudio cuenta con áreas destinadas a actividades agrícolas. En virtud de lo expuesto anteriormente se decidió solo determinar nitritos y nitratos, fundamentados en el Decreto 883 el cual señala valores máximos para estos dos parámetros como formas de nitrógeno para aguas destinadas al consumo humano. Los nitritos, representa un estado intermedio de oxidación del nitrógeno en su paso de oxidación de amonio a nitrato y reducción de este último, por lo tanto es una forma muy inestable químicamente, lo que hace que los niveles de concentración encontrados en las aguas naturales sean muy bajos a diferencia de los nitratos que es una forma mas estable del nitrógeno, producto de la asociación al proceso de nitrificación del material orgánico. · Parámetros Bacteriológicos. Se fundamenta en comprobar la presencia de organismos en el agua, como: bacterias, hongos, virus, protozoos y algas, los cuales generalmente se encuentran en el agua cruda, en menor proporción, facilitando a la fuente su capacidad de auto-purificación. Sin embargo, estos organismos en mayor cantidad actúan como agentes causantes de enfermedades hídricas (agentes patógenos), de ahí la necesidad de estudiar este parámetro, sirviendo como apoyo a la clasificación de las fuentes e identificando su posible uso (APHA, 2002). El análisis comúnmente aplicado a muestras de agua para consumo humano es el método del número más probable (NMP), técnica que permite estimar la población viva de microorganismos que pueden multiplicarse en un medio líquido (Roa, 2005). 19 En la Tabla 3 se señalan los valores máximos permisibles en diferentes normativas a nivel nacional e internacional sobre la calidad del agua para consumo humano. Tabla 3 Parámetros fisicoquímicos y bacteriológicos establecidos en normas nacionales e internacionales para agua destinada al consumo humano. Parámetro OMS (2004) Decreto 883 (1995) EPA(2000) Color real 15 UC < menor de 50 U pt-co 15 UC pH 6.5 – 8.5 6 – 8.5 6.5 - 8.5 Turbidez 5 NTU Menor de 25 NTU 1 NTU y no >5 NTU Oxígeno Disuelto No se recomienda Mayor a 4 mg/l ---ningún valor Sulfatos 250 mg/l 400 mg/l 250 mg/l Fluoruros 1.5 mg/l Menor a 1.7 mg/l Máximo 4 mg/l Hierro 0.3 mg/l 1 mg/l 0.3 mg/l Nitritos y nitratos 50 mg/l de N-NO3 y Nitros + nitratos igual a 10 mg/l 3 mg/l N-NO2 10 mg/l Dureza expresada 500 mg/l 500 mg/l ---como CaCO3 Coliformes 2000 NMP/ 100 ml Promedio mensual ---Totales menor a 2000 NMP/100 ml Coliformes fecales 0 ---0 Manganeso 0.1 mg/l 2 mg/l ---Cloruros 250 mg/l 600 mg/l 250 mg/l Sólidos disueltos ---1500 mg/l ---totales U pt-co: unidades platino cobalto. NTU: unidades Nefelométricas de turbiedad. C.U: unidad de color verdadero. Especies Microbianas Idóneas en Aguas Crudas Según Tampo (2004), es común hallar indicios de flora microbiana en el agua cruda o natural debido a que éstas no son estériles. La sola presencia de microorganismos viables no patógenos es una prueba de protección de la fuente contra toda contaminación y una prueba de los procesos que en ella se llevan a cabo. La flora bacteriana autóctona en este tipo de aguas se caracteriza por ser de tipo heterótrofo y por lo tanto poco numerosa, ya que el agua en su estado puro 20 contiene poco carbono orgánico, indispensable para el metabolismo de las bacterias. El grupo principalmente está constituido por bacterias no formadoras de esporas gramnegativas y grampositivas, entre las que destacan los géneros: Pseudomonas alcaligenes, P. vesicularis, P. fluorescens, P. maltophilia, Flavobacterium, Moraxella, Acinetobacter, Agrobacterium sp, entre otras (Tampo, 2004). En la última década ha sido inminente la aparición y desarrollo de otros microorganismos con características similares a las anteriores sobre los matos acuíferos, producto de la alteración y filtración de efluentes contaminados, desplazando en muchos casos la microbiota autóctona, tal y como ocurre con las bacterias que forman el grupo coliforme fecal, grupo que se caracteriza por producir aldehídos a partir de la fermentación de la lactosa caso específico de E. coli, que se encuentra casi siempre en contaminaciones recientes procedentes de animales de sangre caliente; sin embargo, también pueden hallarse otros coliformes en casos de contaminación en los que E. coli. no existe (APHA, 2002). En la actualidad los géneros Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter y Escherichia, suelen representar la mayor parte de los microorganismos aislados en las aguas naturales y suministros de agua municipales tratadas, producto de la contaminación de los cuerpos de agua, actuando en algunos casos como indicadores ambientales. En relación a esto, ha sido necesario aplicar pruebas específicas o puntuales que permitan la identificación microbiana, tal es el caso de las pruebas IMVIC que son las más utilizadas para esta identificación, incluyendo la prueba de indol, rojo de metilo, Voges-Proskauer y citrato, desafortunadamente estas no proporcionan una total caracterización de la bacteria, razón por la cual es necesario recurrir a pruebas bioquímicas adicionales como TSI (triple azúcar-hierro), motilidad, urea, entre otras (APHA, Op. Cit.). Organismos Indicadores de Interés Sanitario Según Ferrara, et al. (2007), la identificación y cuantificación de organismos presentes en el agua resulta de difícil realización, por la peculiaridad que los sustratos 21 requieren para ello. Especialmente en el caso de organismos patógenos, estos son escasos y difíciles de aislar, es por eso que se recurre a la selección de organismos indicadores cuya presencia refleja la probabilidad de existencia de organismos patógenos, específicamente aquellos característicos del intestino de los animales de sangre caliente, incluyendo los seres humanos. Entre las características que deben cumplir un indicador de esta naturaleza están las siguientes: · Aplicables a todo tipo de aguas. · Fáciles de determinar. · Inocuos. · Más resistentes que los patógenos en el medio y ante desinfectantes. · Su densidad debe estar relacionada con la probabilidad de la presencia de patógenos, entre otros. Los organismos coliformes son los indicadores de contaminación fecal más utilizados debido a que cada persona descarga entre 100 y 400 millones de organismos por día, por tanto su presencia en el agua es una señal de contaminación. Sin embargo, presentan algunas limitaciones, que hasta el momento no han podido ser superadas por ningún otro indicador (Ferrara, et al. 2007). El grupo coliforme incluye los pertenecientes al género Escherichia y Enterobacter, que también pueden existir en el agua, aire y suelo, por tanto su presencia no siempre significa contaminación fecal, no obstante significan contaminación que no debe ser aceptada en agua para consumo humano. En el agua pueden estar presentes otros organismos con los mismos atributos del grupo coliforme. Algunos protozoarios como Giarda lamblia y Entamoeba histolitica, son más resistentes a la desinfección con cloro que los coliformes, igual que otras especies presentes en heces de humanos y animales, tales como: Streptococcus faecalis, Clostridium perfringens y ciertas especies de lactobacilos anaeróbicos, condicionando aún más el consumo del agua. 22 Enfermedades de Origen Hídrico Las enfermedades de origen hídrico son, por lo general, de tipo agudas, caracterizadas por síntomas gastrointestinales por exposición a un agente patógeno que proviene habitualmente de aguas contaminadas no tratadas. El brote de la enfermedad puede variar desde dos días o menos, posterior al consumo de agua para los siguientes microorganismos: Salmonella, Shigella y virus Norwalk, a una semana o más para: Cryptosporidium, Giarda y virus de Hepatitis A. (Ferrara, et al. 2007). En la Tabla 4 se presentan los organismos potencialmente causantes de enfermedades de origen hídrico. Tabla 4 Organismos potencialmente causantes de enfermedades de origen hídrico. Organismo Enfermedad principal Origen principal Bacterias Salmonella typhi Fiebre tifoidea Heces humanas Shigella Disentería bacilar Heces humanas Patogeno Escherichia coli Gastroenteritis Heces humanas y animal Yersina enterocolítica Gastroenteritis Heces humanas y animal Pseudomonas aeruginosa Dermatitis Aguas naturales Virus entéricos Rotavirus Gastroenteritis Heces humanas Virus de la hepatitis A Hepatitis infecciosa Heces humanas Virus Norwalk y otros calicivirus Gastroenteritis Heces humanas Poliovirus Entamoeba histolítica Acantamoeba Microspora Poliomielitis Heces humanas Protozoos y otros microorganismos Disenteria amebiana Heces humanos y animal Infección de ojos Tierra y agua Gastroenteritis H. humanos y animal Modificado de Calidad y tratamiento del agua, American Water Works Asociation (2002) Métodos de Aforo para Aguas Superficiales Aforos con Trazadores. También conocidos como aforos químicos, esta técnica consiste básicamente en inyectar en el cauce una sustancia química para después determinar la concentración de la misma aguas abajo y la velocidad con la 23 que fue arrastrado por la corriente, debiendo estar a cierta distancia del sitio de inyección. Una de las ventajas de esta técnica es que los análisis pueden aplicarse in situ o ex situ y no se requiere saber el área de la sección de medición. Existen diversos tipos de trazadores químicos entre los cuales resaltan: cloruro de sodio, dicromato de sodio, cloruro de litio, rodamina W, fluoresceína y elementos radioactivos (Romero, 1999). Aforadores de Resalto. Son dispositivos hidráulicos que provocan la contracción del fluido a ser analizado siguiendo el principio de un dispositivo Venturi aumentando la velocidad del fluido permitiendo analizar la altura húmeda efectiva del dispositivo. Dentro de este tipo de dispositivos se destacan la canaleta Parshall y aforador de cresta ancha, generalmente son utilizados para fuentes con caudales elevados (Streeter y Benjamín, 1987). Vertedero. Es una obstrucción hecha en una canal para que el líquido retroceda un poco atrás de ella y fluya sobre o a través de la misma, por lo general son construidos con una hoja de metal u otro material, que permita que el chorro o manto caiga libremente. Estos se clasifican en vertederos de cresta aguda o vertederos de cresta gruesa, sin embargo se puede encontrar otra clasificación como la de vertederos rectangulares y vertederos triangulares (Streeter y Benjamín, 1987). Entre estos se pueden citar: · Vertederos rectangulares. Generalmente se utilizan para caudales entre 200 y 1600 l/s. · Vertederos triangulares. Se caracterizan por el ángulo de la abertura entre sus paredes, estos generalmente se aplican para caudales menores a 30 l/s y cargas hidráulicas entre 6 y 60 cm. Para determinar el caudal que atraviesa el dispositivo se hace uso de la siguiente formula: 24 Donde: Q: caudal (m3/s) Cd: coeficiente de carga. g: aceleración debida a la fuerza de gravedad (m2/s) ß: ángulo de apertura. H: carga hidráulica sobre la cresta. A continuación, en la Tabla 5 se indica los valores de carga hidráulica respecto al ángulo de apertura en el vértice o muesca. Tabla 5. Valores promedio de Coeficientes de carga (Cd), en relación al ángulo de apertura en la muesca. Valores característicos del coeficiente de descarga Ángulo ß Cd 15 ° 0,50 - 0,75 30° 0,55 - 0,72 45° 0,55 - 0,69 60 ° 0,50 - 0,54 90 ° 0,50 - 0,62 Departamento de Hidráulica (s/f). Universidad del Cauca Método de la Trayectoria. El método de la trayectoria fue originalmente desarrollado en la Universidad de Purdue por Greeve en 1928. Consiste en describir la trayectoria parabólica de una descarga libre, la cual es proporcional a la velocidad de salida del chorro, para ello generalmente se usa una escuadra con la que se logra medir la distancia “X”, desde la salida de la tubería hasta el filo de agua superior de la salida. La condición del método es que la coordenada “Y” se puede tomar como una constante igual a 12 pulgadas o un pie (Lampoglia, et al. 2008). Método Volumétrico. Es una de las técnicas más sencillas para obtener y calcular el caudal y se entiende como la relación directa proporcional del tiempo que tarde en llenarse un recipiente de volumen conocido, por lo general es utilizado para fuentes que se presumen para poco caudal (Lampoglia, et al. 2008). 25 Toma de Muestras en Nacientes La toma de muestras para la determinación de parámetros físico-químicos en nacientes según García (2011), se debe realizar de la siguiente forma: 1. Extraer un volumen mínimo de 1 a 1,5 litros de la muestra de agua a ser analizada, envasándose en recipientes de vidrio o plástico con tapa a rosca, los cuales deberán ser llenados por completo sin la presencia de burbujas. 2. El envase deberá estar limpio, siendo necesario enjuagar previamente con el agua con que se va a muestrear por lo menos tres veces antes de tomar la muestra final. 3. Una vez extraída la muestra se recomienda guardarla en un lugar fresco para ser trasladada al laboratorio lo antes posible. Para el caso de análisis bacteriológicos el mismo autor señala que el envase debe estar esterilizado y que el análisis se debe hacer dentro de las primeras 10 horas de tomadas las muestras, siguiendo ciertas indicaciones: primero la muestra debe mantenerse a una temperatura de 4°C y segundo debe mantenerse en la oscuridad a fin de evitar el desarrollo microbiano. Variables Hidrológicas que Pueden Afectar la Calidad del Agua Según Ferrara et al. (2007), para efectuar una evaluación completa de la calidad del agua es necesario relacionar los parámetros físicos, químicos y bacteriológicos descritos anteriormente con algunas de las variables hidrológicas a fin de establecer los balances de materia indispensable para la evaluación integral de la calidad del ambiente acuático, Partiendo con la: Velocidad. Expresada en m/s y cuantificada por lo general a través de estudios de trazadores, es una de las variables que determina la capacidad asimilativa y de transporte de materiales en los cuerpos de agua, presentándose en variaciones horarias, diarias y estacionales dependiendo de las condiciones hidrometeorológicas y de las características de la cuenca. 26 Cabe aclarar que, para este proyecto, la cuantificación de esta variable no se llevó a cabo debido a las condiciones de las nacientes en sus puntos de afloramiento; sin embargo, es posible su determinación en ríos, quebradas, y riachuelos. Caudal. Entendido como el volumen que fluye durante un periodo de tiempo dado, se expresa en m3/s y se determina por el producto entre la velocidad y la sección transversal del flujo. La determinación de los valores promedio y sus variaciones resultan indispensables para los balances de materiales con respecto a los diferentes constituyentes en los cuerpos de agua, así como las condiciones de sedimentación y resuspención del material partículado. No obstante, la OPS (2004) lo define como la medida de agua o fluido que pasa por río, tubería, y canal en una unidad de tiempo, normalmente se identifica como flujo volumétrico. Dinámica del material suspendido. Es particularmente importante su evaluación cuando el transporte del material partículado es el responsable del transporte de compuestos contaminados. Usualmente la carga y concentración de sedimentos varía exponencialmente con el caudal por las variaciones en las condiciones de sedimentación y resuspencion de los materiales. Se evalúa a través de la determinación del contenido de sólidos suspendidos totales y granulometría del material, parámetros que deben estar asociados a la velocidad de flujo, donde los mismos deben ser evaluados paralelamente (Ferrara, et al. 2007). Bases Legales Las bases legales del proyecto se conformaron siguiendo como línea base la pirámide de Kelsen, la cual constituye el punto de origen en la construcción del basamento jurídico en el país. La Constitución de la República Bolivariana de Venezuela (1999) en su capítulo IX de los Derechos ambientales, artículo 127 y 129 señala que es un derecho y un deber de cada generación proteger y mantener el ambiente en beneficio de sí misma y del mundo entero, basados en que toda persona tiene derecho individual y 27 colectivamente a disfrutar de una vida y un ambiente seguro, sano y ecológicamente equilibrado, siendo su deber y de las autoridades actuar en contra de cualquier actividad capaz de generar daño al ecosistema, debiendo ser la actividad previamente acompañada por un estudio de impacto ambiental y socio cultural. La Ley Orgánica del Ambiente (2006), tiene por objetivo principal establecer y desarrollar la gestión del ambiente en un marco del desarrollo sustentable, como derecho y deber fundamental comprometida con la protección del área de estudio, al ser un ecosistema frágil y ampliamente modificable conservándose suelos, áreas boscosas, formaciones geológicas y capacidad de recarga de los acuíferos. La Ley Orgánica de Ordenación del Territorio (1983), tiene por objeto establecer las directrices que seguirán el proceso de ordenación del territorio tomando como base el desarrollo económico y social de la nación, permitiendo avanzar de la mano del ambiente, al hacer uso racional de los recursos naturales renovables y no renovables. Ley de Aguas (2007), establece la reglamentación específica para el manejo de las aguas subterráneas atendiendo los principios de participación ciudadana a través de la adaptación a las necesidades regionales y locales de la comunidad, en su artículo 18 establece que el manejo de agua comprenderá la conservación de las cuencas hidrográficas, mediante la implementación de programas, proyectos y acciones, dirigidos al aprovechamiento armónico y sustentable de los recursos naturales tomando en cuenta las interacciones e interdependencias de los componentes bióticos, abióticos, culturales y económicos de la sociedad con que está en contacto, considerando las provincias y cuencas hidrografías como unidades especiales para el manejo de las aguas subterráneas. La Ley de Gestión de la Diversidad Biológica (2008), el contenido de esta ley es servir como apoyo a las medidas propuestas durante la investigación, basados en que es un área que provee de sustento a diversas especies, constituyendo un ecosistema nato proveedor de alimentos y agua. La Ley Forestal de Suelos y Aguas (1966), en su artículo 17 señala como zona protectora a todo espacio físico alrededor del afloramiento de un cuerpo de agua 28 (naciente), en un radio aproximado de 200 metros en proyección horizontal, adoptándose ésta como una medida de conservación que podría ser implementada en el área de estudio. Decreto No. 883, establece las normas para la clasificación y el control de la calidad de los cuerpos de agua y vertidos o efluentes líquidos, este texto permitirá la clasificación de la fuente y determinar su posible uso, basados en los parámetros físicos, químicos y bacteriológicos. Decreto No. 1.400, Normas sobre regulación y control de aprovechamiento de los recursos hídricos en cuencas hidrográficas, este documento señala las pautas a seguir para el aprovechamiento de los recursos hídricos ante cualquier actividad desarrollada por en hombre, estableciendo estrategias y mecanismos que permitan conocer la cantidad, ubicación y potencial de la fuente, a fin de compatibilizar la oferta del recurso con la demanda actual, sin comprometer las necesidades futuras, garantizando una mejor calidad de vida a la población. 29