MECANISMOS DE HERENCIA CRUCE DE Drosophila melanogaster (Curly (Cy/Cy+)-YELLOW) EN CONDICIONES DE LABORATORIO Galindo Claudia, García Isabel, Rodríguez Mónica y Rodríguez Alfonso. UNIVERSIDAD DEL TOLIMA RESUMEN. La Biología y la Genética del Desarrollo se centran en entender los mecanismos por los cuales una célula acaba convirtiéndose en un organismo multicelular. Este proceso morfo genético requiere la determinación de múltiples tipos celulares y la organización de estas células siguiendo patrones elaborados. En este experimento se trata de establecer un cruce mono hibrido para estudiar la herencia de un solo par de alelos autosómicos. Este ejercicio es similar a uno de los experimentos realizados por Gregorio Mendel, en donde será posible obtener los resultados que le sirvieron a Mendel para deducir la ley sobre la segregación de los caracteres de un individuo. PALABRAS CLAVE. Biología, Caracteres, Células, Genética, Patrones. INTRODUCCIÓN. Drosophila melanogaster es considerada una de las especies existentes más importantes para el estudio de la biología. Esto se debe principalmente a su facilidad de cultivo, corto tiempo de generación, grandes cantidades de descendencia, tamaño pequeño, bajo costo en su manejo y mantenimiento (Mora et al., 2000). Esta especie pertenece al orden Díptera, tiene una distribución cosmopolita, y al igual que todos los organismos holometábolos, el desarrollo ontogénico presenta varios estadios: huevo, larva, pupa, adulto (Alvarado, 2000). Se ha evidenciado que factores ambientales como la temperatura, la humedad relativa y el tipo de medio de cultivo, ejercen una influencia en la productividad y desarrollo de D. melanogaster (Alvarado, 2000). La influencia que ejerce el medio de cultivo se debe principalmente a sus características físico-químicas y microbiológicas, tales como el porcentaje de nutrientes, el pH y la interacción existente entre microorganismos como bacterias y levaduras (Balbín et al.,2000). Otro factor de gran influencia en la productividad es el genotipo de los individuos. Como las moscas adormecidas (anestesiadas, para esto utilizar un frasco con algodón humedecido levemente en éter) pueden pegarse en forma permanente al medio de cultivo húmedo y pegajoso y en definitiva morir, es importante no dejarlas caer sobre la superficie del cultivo. Para ello, ponga el frasco de cultivo acostado y coloque las moscas con cuidado dentro de este. Todos los cultivos deben estar etiquetados con su nombre, el tipo de cruzamiento (indicando el fenotipo de las hembras y el de los machos) y la fecha del cruzamiento. Alrededor de una semana después de haberse realizado el cruzamiento, los adultos (moscas parentales) deben sacarse para no ser confundidos con la progenie la cual será F1. Fíjese siempre que los tapones queden bien ajustados a la boca del frasco de cultivo; para evitar que las moscas puedan escaparse. La F2 se obtiene cruzando la F1 x F1. Una vez obtenida se contabilizaran y se registrarán. RESULTADOS. Tras el cruce de las moscas YELLOW-CURLY, encontramos que las modificaciones en el fenotipo se presentaron en el experimento fueron: Se han reportado diferencias marcadas, en términos tanto de productividad como de la viabilidad entre los diferentes mutantes utilizados en D. melanogaster (Bonnier y Jonson, 1957). Esto se debe a que en muchos mutantes se ven afectadas características estructurales y funcionales como el comportamiento de cortejo, la capacidad de cópula, la oviposición y la viabilidad tanto del esperma como de los diferentes estadios de la metamorfosis (Mora et al., 2000), que influencian la tasa de mortalidad, la viabilidad y/o el tiempo de desarrollo de la especie (GluecksohnWaelsch, 1953; Shearn et al., 1971). Mutantes como white (w//w), vestigial (vg//vg) y Curly-Lobe-vermillion (CyL//+L v//v) se encuentran entre los más utilizados en la experimentación genética, por lo que son de suprema importancia los conocimientos en términos de productividad para estas mutaciones (Ramos, 1993) Sin embargo, las condiciones que se presentaron en el experimento nos arrojaron más moscas de ojos rojos y alas largas, aspecto que se debate en la discusión. MATERIALES. DISCUSIÓN. Éter etílico Lámpara Cajas de Petri Cepas de Drosophila. Frasco MÉTODOS. Para realizar un cruzamiento experimental se necesita utilizar hembras vírgenes. La manera más fácil de obtener hembras vírgenes está basada en el hecho de que los machos rara vez copulan con hembras cuya edad es menor a 8 horas de emergidas (a 25ºC). Entonces, si todas las moscas adultas se eliminan del frasco de cultivo y el frasco se deja no más de 8 horas, todas las hembras que se obtengan en esta segunda oportunidad serán vírgenes. El período que se puede colectar hembras vírgenes se puede extender incubando los cultivos a 18ºC en vez de a 25ºC. Conviene "limpiar" el frasco de hembras en la mañana temprano y colectar vírgenes en la tarde puesto que la mayor parte de la emergencia de las moscas se realiza en horas de luz, principalmente en la mañana. Machos de cualquier edad pueden ser utilizados en un cruzamiento. Este experimento se enfocó en establecer un cruce mono hibrido, en donde las características de los F1 arrojaran híbridos con fenotipos de los individuos paternos. Sin embargo, encontramos que para cumplir con estos objetivos, se deben tener en cuenta parámetros fundamentales como: 1. Las condiciones ambientales, tales como temperatura, sustrato y humedad, pues bien durante el experimento nos encontramos que muchos de los individuos utilizados fallecieron en los intentos de cruzar las dos cepas. 2. El cruce de los híbridos, ya que en este procedimiento, al no sedar bien las cepas, muchos de los individuos escaparon. BIBLIOGRAFÍA. Balbin y Martínez-Arias A. (2000). The embryonic origin of imaginal discs in Drosophila. Development 112: 755-761. Fristrom D. y Fristrom J.W. (1975). The mechanism of evagination of imaginal discs of Drosophila melanogaster. Developmental Biology 43: 1-23. Fristrom D. y Fristrom J.W. (1993). The metamorphic development of the adult epidermis. En “The development of Drosophila melanogaster” Vol. II (Ed. M. Bate y A. Martínez Arias). New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press. 14: 843-897. García-Bellido A. (1977). Inductive mechanisms in the process of wing vein formation in Drosophila. Wilhelm Roux’s Archives of Developmental Biology 182: 93- 106. Ramos,. (1993). Cell interactions in the control of size in Drosophila wings. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 10222-10226. García-Bellido A. y de Celis J.F. (1992). Developmental genetics of the venation pattern of Drosophila. Annual Rev. Genet. 26: 277-304. García-Bellido A. y Merriam J.R. (1971). Parameters of the wing imaginal disc development of Drosophila melanogaster. Developmental Biology 24: 61-87.