Consejo Nacional de Rectores (CONARE) División de Coordinación Área de Investigación Ficha del proyecto Título del proyecto Desarrollo y comparación de dos estrategias de vacunación de aves de corral contra la enteritis necrotizante causada por Clostridium perfringens Período de ejecución 2011-2013 Universidades participantes UCR, UNA Nombre y apellidos (investigador principal) Nombre y apellidos (investigadores asociados) Marietta Flores Díaz Alberto Alape Girón (UCR) Elias Barquero Calvo (UNA) Marcia Ramírez Marín (UNA) Asistentes Resumen/Abstract (máximo 300 palabras) Introducción La enteritis necrotizante (EN) es una infección severa producida por Clostridium perfringens que afecta aves de corral. Esta enfermedad causa disminución en la producción y muerte en las parvadas de pollos de engorde y gallinas ponedoras. C. perfringens es parte de la microbiota de las aves; sin embargo, bajo ciertas circunstancias, prolifera y produce toxinas extracelulares que causan una severa necrosis de la mucosa intestinal. En este proyecto se aislaron cepas de C. perfringens netb+ de agua, alimento, superficies e intestino de animales sanos de granjas avícolas de Costa Rica, durante un periodo de 1 año. Usando técnicas bioquímicas y métodos moleculares las cepas de C. perfringens se identificaron por PCR amplificando ARNr 16S y la secuencia que codifica por netb, una de las principales toxinas producidas por la bacteria asociada a virulencia. Dos de las cepas C. perfringens netb+ aisladas se usaron para tratar de reproducir el cuadro de enteritis necrótica en un modelo experimental lo cual se logró. Posteriormente pollitos de engorde fueron inmunizados con las proteínas de sobrenadantes de cepas de C. perfringens netb+ y la respuesta inmune se determinó por ensayos de ELISA y Western Blot. Finalmente se determinó si la inmunidad generada en los animales inmunizados les confería protección del cuadro de EN al retarlos con una cepa control de C. perfringens que causa EN experimental. Los resultados por análisis Consejo Nacional de Rectores (CONARE) División de Coordinación Área de Investigación macroscópico e histológico de la necropsia de los animales mostraron protección parcial del cuadro de EN. Objetivo general Resultados principales (los que considera más significativos) Se estableció que las cepas de C. perfringens netb + aisladas de granjas de Costa Rica son introducidas al animal a través de alimento o agua. Se desarrolló un modelo experimental de EN en pollos con 2 cepas de C. perfringens netb + aisladas de granjas de Costa Rica. La inmunización de pollos Cobb con cepas de C. perfringens netb+, les confiere protección parcial de la EN inducida experimentalmente. Más Información (referencias impresas o digitales) Tesis del estudiante Luis Abarca para optar por el título profesional de Dr. en Medicina Veterinaria UNA (2011) Tesis del estudiante Yerlin, Fernández para optar por el título de Licenciada en Microbiología y Química Clínica, Facultad de Microbiología, UCR. (2013). Publicaciones Flores Díaz, M., Ramirez, Marín. M., Alape Giron , A.(2011) La enteritis necrotizante causada por Clostridium perfringens en aves de corral. Folleto de divulgació.n dirigido a médicos veterinarios y productores avícolas. Flores Díaz, M., Ramirez, Marín. M., Barquero Calvo, E., and Alape Giron , A Necrotic enteritis in poultry (Artículo sometido a publicación). 4) Isolation of C. perfringens strains from clinical cases of necrotic enteritis in laying hens in Costa Rica (manuscrito en preparación). Contacto marietta.floresdiaz @ gmail.com Consejo Nacional de Rectores (CONARE) División de Coordinación Área de Investigación