LABORATORIO DE LIPIDOS DANIELA ALEJANDRA ACOSTA TORRES JULIANA ALEJANDRA GARZON JIMENEZ KAROLL XIMENA RODRIGUEZ UNIVERSIDAD DE CUNDINAMARCA FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE ENFERMERIA GIRARDOT, CUNDINAMARCA 2015 LABORATORIO DE LIPIDOS JAIME TRUJILLO VIDAL DOCENTE UNIVERSIDAD DE CUNDINAMARCA FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE ENFERMERIA GIRARDOT, CUNDINAMARCA 2015 OBJETIVO GENERAL 1. Identificar ciertas propiedades de los lípidos, algunas de las cuales pueden servirnos para su identificación. 2. Reconocer la presencia de lípidos mediante coloración con Sudan III. 3. Comprobar la solubilidad de los lípidos en diferentes solventes INTRODUCCION / JUSTIFICACION: Los lípidos son biomoléculas insolubles en agua que se encuentran en los seres vivos y desempeñan funciones diversas como: ser componentes estructurales de membranas, almacenan energía, separan, por sus condiciones de insolubilidad en agua regiones donde tiene lugar reacciones diferentes. Funcionan también como cubierta protectora en el caso de algunos animales mamíferos. Los lípidos son sustancias orgánicas que poseen en su molécula largas cadenas hidrocarbonadas, lo que las hace insolubles en sustancias polares por la imposibilidad de formar puentes de hidrógeno con las moléculas del disolvente. En cambio, sí se disuelven con facilidad en disolventes orgánicos como el cloroformo y el éter. Cuando se trata de disolver lípidos en un disolvente polar, ambas fases se separan en función de su densidad y son fácilmente identificables en un tubo de ensayo. Si el disolvente es apolar, no se separan. La presencia de lípidos se puede poner de manifiesto porque se tiñen específicamente con el colorante Sudán III, adquiriendo una coloración rojiza característica que no desaparece tras el lavado con agua. DIAGRAMA O MONTAJE DE LA PRÁCTICA LIPIDOS Propiedades Saponificación Tinción Aceite NaOH 20% Sudan III Jabón Tinta roja Solubilidad Agua Disol orgánico PLANTEAMIENTO Y PROCEDIMIENTO 1. SAPONIFICACIÓN FUNDAMENTO Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina y ácidos grasos. Éstos se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. En los seres vivos, la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicos (lipasas) que dan lugar a la formación de ácidos grasos y glicerina. TÉCNICA . Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%. . Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos. . Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semisólida que es el jabón formado y una superior lipídica de aceite inalterado. Observaciones: Observamos tres fases: la inferior clara con la solución que sobra de NaOH junto con la glicerina que se ha formado, algo que nos revela que se ha producido la reacción de saponificación perfectamente al haber obtenido un alcohol, y otra fase intermedia semisólida con el jabon formado, otro aspecto que nos aclara definitivamente que si se ha producido esa reacción de saponificación, puesto que ya hemos obtenido los dos productos de ese proceso: el jabón y un alcohol. 2. TINCIÓN FUNDAMENTO Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III. TÉCNICA 1. Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de aceite. 2. Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán III. 3. Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja. 4. Agitar ambos tubos y dejar reposar. 5. Observar los resultados: en el tubo con Sudán III todo el aceite tiene que aparecer teñido, mientras que en el tubo con tinta, ésta se irá al fondo y el aceite no estará teñido. Observaciones: Cuando mezclamos el aceite con el Sudan III, aparece todo teñido de rojo pero sin embargo, cuando lo mezclamos con la tinta china se depositará en el fondo ya que a diferencia del Sudan III, no es soluble en grasas y se encontraran por tanto separados el aceite y la tinta , en una solución heterogénea . 3. SOLUBILIDAD FUNDAMENTO Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua. Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgánicos, como el éter, cloroformo, acetona, benceno, etc. TÉCNICA 1. Poner 2ml de aceite en cuatro tubos de ensayo. 2. Añadir en el primero 2ml de agua, en el segundo 2ml de solución de detergente, en el tercero 2ml de acetona y en cuarto 2ml de alcohol etílico. 3. Agitar fuertemente los cuatro tubos y dejar reposar. OBSERVACION: COMPUESTO SOLUBILIDAD No es soluble porque se forman dos capas, AGUA en la primera capa se observa el aceite y en la segunda el agua. Es insoluble, ya que ACETONA es una mezcla No hay solubilidad, ya que se observan como burbujas en el ALCOHOL ETILICO medio del alcolhol y se observan dos capas. No se solubilizan, lo que sucede es que se emulsionan. El detergente, es una sustancia tenso activa, que tiene dos polaridades en las partes opuestas de su cadena alifática, DETERGENTE una que es polar y se une al agua, y otra apolar, que se une al aceite, formando de esa forma, una emulsión lechosa, y a la unión de una molécula de agua +detergente +aceite, se le llama micela. POLARIDAD Apolar Apolar Apolar Polar CUESTIONARIO 1. ¿Qué son los jabones? El jabón es la sal (generalmente de sodio) de varios ácidos grasos provenientes del sebo y grasas animales incluyendo aceite de coco, palma, semilla de algodón y otros en la formulación para darle alguna propiedad extra en función del tipo de aceite. El jabón es soluble en agua y la solución tiene excelentes propiedades limpiadoras. 2. ¿Cómo se pueden obtener jabones? En la actualidad hay dos métodos de obtención del jabón, ambos basados en la saponificación. -Primer método: En el primer método se produce la saponificación directamente sobre la grasa, se hace reaccionar el álcali con la grasa, y se obtiene el jabón y glicerina. Este método tiene como desventaja que es más difícil la separación de la glicerina y el jabón. -Segundo método: En este método primero se produce la ruptura química de la grasa, y se obtiene la glicerina y los ácidos grasos; éstos se separan fácilmente. Luego se produce la sal del ácido graso y el álcali. 3. ¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa? Porque la glicerina no es liposoluble. Tiene que ver con su solubilidad. Recuerda que es un producto secundario, lo importante es el jabón, es decir, que para la saponificación, se utiliza grasas y estas están compuestas por acido grasos y glicerina. Como resultado se obtiene una fase semisólida que es la sal del sodio de los ácidos grasos (el jabón), por lo tanto, en la fase acuosa quedara el alcohol (glicerina) como subproductos de la elaboración del jabón puesto que es parcialmente soluble en agua. 4. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de agua? Es la lipasa, es una enzima ubicua que se usa en el organismo para disgregar las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su función principal es catalizar la hidrólisis de triacilglicerol a glicerol. Las lipasas se encuentran en gran variedad de seres vivos. 5. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite – Sudan III y aceite – Tinta y explica a qué se debe la diferencia entre ambos resultados. • El sudan III - aceite presenta una coloración rojo vino: Este resultado se debe a que el aceite y las grasas son un grupo de compuestos orgánicos existentes en la naturaleza que consiste en ésteres formados por tres moléculas de ácidos grasos y una molécula del alcohol glicerina. De tal manera que el Sudan III, lo reconoce y lo tiñe Tinta china – aceite presenta una coloración rojo sangre: Las diferencias entre ambos es que en el sudan III con el aceite todo el aceite aparece teñido y en la tinta china aceite este se fue poco a poco destiñendo suavemente pero no del todo. 6. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurrido unos minutos de reposo? ¿Y con la de los otros compuestos empleados y aceite? ¿A qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones? Luego de unos minutos de reposo notamos que el aceite sube y agua se encuentran abajo. El agua es más densa que el aceite. En el caso del aceite y la acetona, no se disolvió del todo porque la acetona es impura, entonces utilizamos glicerina en la cual se disolvió. A que deben a la diferencia de densidades entre los componentes. CONCLUSIONES En el experimento de solubilidad de los lípidos, se podrá observar que el aceite se ha disuelto en el éter y no en el agua ya que este subirá debido a su menor densidad al separarse el almidón. Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua.
