--u MUESTREO y PUREZA * DAVID GEORGE EDW ARDS PRIMERA PARTE: MUESTREO calidad de la muestra remitida para análisis. Esto se aplica a cualquier tipo de ensayo, ya sea para pureza, germinación, peso, contenido de humedad. Rayos X o cualquier otro que usted desee realizar. Por lo tanto. todo esfuerzo debe ser hecho para asegurar que la muestra enviada al labo~ ratorb para el ensayo, representa en forma precisa la composición del lote de semillas del cual ha sido tomada. así se pueden obtener re~ sultados uniformes y precisos, la Asociación In~ ternacional para el Ensayo de Semillas (1ST A) ha detallado algunos métodos de muestreo. Yo describiré los principios de estos métodos y al~ gunos de los detalles principales. Para una mayor información sobre ellos. es conveniente leer las reglas para los ensayos de semillas e!{Jborados por 1ST A, que actualmente han sioo traducidas al español. Existen dos objetivos principales en el mues~ treo; el primero consiste en obtener una mues~ tra de un tamaño tal que sea adecuada para los ensayos, y el segundo es estar seguro de que los constituyentes de la muestra sean del mismo tipo y estén en la misma proporción que en el lote principal de semillas. El segundo objetivo es el más importante. La cantidad de semillas probadas en el la~ boratorio es muy pequeña comparada con el tamaño del lote de semillas que se está inten~ tando representar. No importa qué tan cuida~ dosamente esté realizado el trabajo de labora~ torio, el resultado únicamente puede cubrir la * Traducida la Garza. al español por: F. Patiño y P. De Un lote es una cantidad especifica de semiIlas. Esta puede ser muy pequeña. Como en el caso de lote de semillas A. o algo grande como el lote de semUlas B. el cual requiere de muchos envases: 77 tt Cuadro 2A. Parte n. Semillasde Arboles (página 73 de las Reglas de 1STA) Peso mínimo de 1a muestra Especie Abies alba MilI. Abies amabilis (Dougl. ex Loud.) Forb. * Abies balsamea (L.) Mill.* Abies cephalonica Loud. * Abies cilidca (Ant. et Kotschy) Carro * Abies concolor (Gord.) Engelm. * Abies firma Síeb. et Zucc. * Abies fraseri (J'ursch) Poir.* Abies grandis(Dougl. ex D. Don) Línd1.* Abies homolepis Sieb. et Zucc. * Abies lasiocarpa (Hook.) Nutt. * Abies magnifica A. Murr.* Abies nordmanniana (Steven) Spach Abies numidica De Lannoy ex Caor * Abies pinsapo Boiss. * Abies procera Rehder Abies sachalinensis Mast. * Abies veitchii Lind1.* Acacia spp. Acer negundo L. Acer palmatum Thunb. Acer platanoides L. Acer pseudoplatanus L. Acer rubrum L. Acer saccharinum L. Acer saccharum H. Marsh. Aesculus hippocastanum L. Ailanthus altissima (MilI.) Swingle [= A. glandulosa DesE.J Alnus cordata (Loise1.) [= Duby *J DesE. Ainus Alnus Alnus Betula Betula Betula glutinosa (L. ) Gaetn. incana (L.) Moench rubra Bong.* papyrifera H. Marsh.* ~ndula Roth. * pubescens Ehrh. * Caragana arborescens Lam. * Peso máximo -Muestra remidel lote. Capi- tida. Capítulo tulo 2 2 Muestra de trabajopara análisís de pureza. Capítulo 3 2 Kg 3 9 4 9 1000 240 120 1000 1000 1000 200 40 360 100 20 180 1000 1000 1000 1000 1000 160 200 50 500 80 100 20 1000 1000 1000 1000 1000 100 80 70 400 320 50 40 35 200 160 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 5000 500 320 160 60 40 70 200 100 900 400 100 1000 360 500 semillas 1000 160 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 25 25 15 15 10 10 10 1000 160 250 160 80 30 20 35 100 50 450 200 50 500 180 500 sem. 80 6 (0.25) 1 (0.20) 2 (O.1P) 2 (0.10) 3 (0.05) I (0.02) 1 (0.02) 80 E! tamaño máximo que un Jote de semillas puede alcanzar se especifica en las reglas de ISTA. El cuadro. nos muestra parte del cuadro 2A de las reglas. la primera columna de números indica el tamaño máximo del lote que para la mayoría de las especies en esta página es de mil kilogramos. Si la recolección de semillas excede al máximo especificado. la recolección deberá ser dividida en lotes no mayores que el máximo especificado y a cada porción se le deberá considerar como un lote de semillas. Este cuadro se verá otra vez posteriormente y serán explicadas las otras columnas de números. 78 COMO OBTENER LA MUESTRA Se deben reconocer diferentes tipos de muestras. repre~ sentando las diferentes etapas del proceso de muestreo. Primero. la muestra porción de semillas de semillas. primaria. la cual es una pequeña tomadas de un punto en el lote Segundo. la muestra compuesta. la cual consiste de un número de muestras primarias combinadas y mez~ cladas. Muestra primaria Una pequeña porción de semillas tomadas de un punto en el lote de semillas. Muestra compuesta Todas las muestras primarias combinadas y mezcladas. Muestra remitida Una porción de la muestra compuesta enviada al laboratorio. Tercero. la muestra remitida. la cual es una porción de la muestra compuesta que es enviada al Laboratorio. Cuarto. muestra de trabajo. la cual es una porción de la muestra remitida y en la cual son realizados los ensayos. Muestra de trabajo Una porción de la muestra remitida en la cual son hechos los ensayos. 79 Uno de los métodos lizando la mantienen mano. rectos más simples del muestreo,' es uti- Los dedos,incluyendo el pulgar se y juntos. . .. la mano es empujada hasta la profundidad requerida del envase. Los dedos se cierran ción de semillas Este firmemente alrededor de una por- y la mano es retirada. procedimiento debe repetirse en muchas posicio- nes en el envase. La parte más baja de un envase muy profundo no puede alcanzarse por este método. Los envases profundos deberán vaciarse total o parcialmente a fin de facilitar este tipo de muestreo. 80 Un método más común de muestreo es empleando muestreadores de tubo. Existen diferentes tipos de estos instrumentos. los que se exhiben en la fotografia son relativamente pequeños. El muestreador consiste de un tubo hueco, el cual- se encuentra dentro de otro tubo que termina en punta. Ambos tubos tienen aberturas en sus paredes. Cuando las aberturas en ambos tubos coinciden, las semillas penetran a la cavidad dentro del tubo. Una media vuelta del tubo, cierra las aberturas como se muestra en la figura de abajo de la fotografia. En esta fotografia se muestra un lote de semillas grande, de aproximadamente 100 kg en varios envases, en espera de ser muestreado. Las semillas están contenidas en bolsas de plástico dentro de cajas de cartón. 81 La bolsa es abierta y el muestreador tado entre las semillas. El muestreador se introduce un ángulo, no verticalmente. dor está cerrado. cerrado es inser- dentro de las semillas en Nótese que el muestrea- El muestreador debe alcanzar la capa inferior de las semillas, pero se debe tener cuidado de no introducido hasta el final de la bolsa o el envase. 82 El muestreador es abierto por una media vuelta del tubo interno. Un ligero movimiento del muestreador permite que las semillas se introduzcan dentro del tubo. El muestreador se vuelve a cerrar dándole media vuelta al tubo y se saca. El muestreador ha sido removido del envase y ha sido abierto para mostrar las semilas muestreadas en diferentes niveles del envase. 83 Las semillas han sido vaciadas del muestreador. comprenden una muestra primaria. Estas Cada envase es muestreado a su vez y se obtiene una muestra primaria. Aqui hay cinco muestras primarias. una de cada uno de los cinco envases. La muestra primaria ha sido combinada constituye una muestra compuesta. ,. 84 ,.. y mezclada. y "'---- Se toma una purción de 1a muestra compuesta... . .. y esta porción constituye 1a muestra a remitir. Esta se empaca para enviar al 1aboratorio. 85 PESO DE LA MUESTRA A REMITIR Los pesos minimos de las muestras remitidas están prescritos en las reglas. Si la muestra es para determinar el contenido de humedad, se dehe remitir al laboratorio por 10 menos 50 9 de semillas. Esta incrementa a 100 9 para especies tales como Faglls y QlIerclls, cuya semilla debe ser molida antes de que el contenido de humedad pueda ser medido. PESOS MINIMOS DE LAS MUESTRAS REMITIDAS 1. Determinación de humedad: 50 9 para todas las especies que no requieren ser molidas. 100 9 para especies que deben ser molidas. (Faglls. Quercus). 2. Ensayos ~ ~::f de germinación Como se prescribe y pureza' Si la muestra es para ensayos de pureza y germinación, el tamaño de la muestra está especificado en el Cuadro 2A de las reglas de ISTA. en la tabla 2A. Cuadro 2A. Parte n. Semillas de Arboles (página 73 de las Reglas de ISTA) Peso mínimo de la muestra Especie Abies alba Mili. Abies ama bilis (Doug!. ex Loud.) Forb. * Abies balsamea (L.) Mill.* Abies cephalonica Loud. * Abies cilicica (Ant. et Kotschy) Carro Abies concolor (Gord.) Engelm.* Abies trma Sieb. et Zucc. * Abies fraseri (Pursch) Poir. * Abies grandis (Dougl. ex D. Don) LindL * Abies homolepis Síeb. et Zucc. * Abies lasiocarpa (Hook.) Nutt.* Abies magnifica A..Murr.* Abies nordmanniana (Steven) Spach Abies nllmidica De Lannoy ex Carro * Abies pinsapo Boiss. * Abies procera Rehder Ab:es sachalinensis Mast. * Abies veitchii Lindl. * Acacia spp. Acer negundo L. Acer palmatum Thunb. Acer platanoides L. Acer pselldoplatanlls L. Acer rubrum L. Acer saccharinllm L. Acer .saccharum H. Marsh. Aesculus hippocastanllm L. La columna 2 del Cuadro muestra a remitir. 86 prescribe, Peso máxímo del lote. Capítulo 2 Muestra remítida. Capítulo 2 Muestra de trabajo para análisis de pureza. Capítulo 3 2 Kg -- 3 9 4 9- 1000 240 120 1000 1000 1000 200 40 360 100 20 180 1000 1000 1000 1000 1000 160 200 50 500 80 100 20 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 11000 1000 5000 100 80 70 400 320 500 320 160 60 40 70 200 100 900 400 100 1000 360 500 semillas 50 40 35 200 160 250 160 80 30 20 35 100 50 45,,) 200 50 500 180 500 sem. para especies individuales, el tamaño mínimo de la INTENSIDAD DE MUESTREO En algunos casos las semillas pueden estar a granel en un envase muy grande como un vagón de ferrocarril o una bodega de buque de carga. No es usual que las semillas forestales se almacenen a granel. Para cantidades de semilla a granel mayores de 50 kg se requieren por lo menos cinco muestras primarias. Entre 51 y 500 kg son necesarias por 10 menos cinco muestras primarias. Entre 501 y 3 000 kg se debe tomar una muestra primaria por cada 300 kg con un minimo de cinco muestras, y entre 3001 Y 5000 kg se debe tomar una muestra primaria por cada 500 kg con un minimo de 10 muestras. 5 000 kg es el tamaño máximo para un lote de semillas forestales. MUESTREO DE SEMILLAS A GRANEL Más de 51 501 - Tomar por lo menos tres muestras primarias. 500 kg Tomar por lo menos cinco muestras primarias. 3000 kg Tomar una muestra primaria por cada 300 kg pero no menos de cinco muestras. - 3001 Más frecuentemente las semillas forestales están empacadas en envases del mismo tipo y tamaño. Sin considerar cuánto tiene cada envase. En el caso de hasta cinco envases, cada uno debe ser muestreado y se deben tomar por lo menos cinco muestras primarias. Esto significa que un envase debe ser muestreado más de una vez. Es preferib.le muestrear cada envase el mismo número de veces para que cada uno esté igualmente representado en la muestra compuesta. Entre seis y 30 envases, se debe muestrear uno de cada tres, con un mínimo de cinco. Para 31 o más envases, uno de cada cinco, con un mínimo de diez. 50 kg 5000 kg Tomar una muestra primaria por cada 500 kg, pero no menos de 10 muestras. MUESTREO DE ENVASES DE TAMA:f'lO UNIFORME Hasta .5 .'-' r::. 5 envases c¡ 6 ., -' iS Muestrearcadaenvase y siempre tomar por lo menos cinco muestras primarias. sO ¡;D 30 envaces ~ .;.; f'J- If)!~ , 110-- ió- ,., ;~.ryl' . l, '1> ") Muestrear por lo menos uno de cada. tres envases, pero nunca menos de cinco. ~ 31 envases o más ¡; Muestrear por lo menos uno de cada cinco envases, pero nunca menos de diez. 87 Algunas veces es necesario queños envases de diferente MUESTREO DE ENVASES PEQUEÑOS 100 kg de semillas = "Unidad básica de muestreo". usar una variedad de petamaño. Se debe combinar un número de envases de manera que no 100 kg. Por ejemplo 20 envases de 5 kg c/u ses de 3 kg. Considerar cada combinación como una unidad de muestreo y aplicar para el muestreo de envases antes descritas. exceda de o 33 envade 100 kg las reglas Combinar pequefios envases hasta que el peso total :1> 100 kg E. G., 20 envases de 5 kg, 33 envases de 3 kg. Considerar cada "unidad de muestreo" envase y aplicar la regla de muestreo vases. TRANSPORTE como un para en- AL LABORATORIO Si la muestra es para ensayos de pureza y germinación no debe estar empacada en un envase a prueba de humedad. Una envoltura de papel como se muestra en la parte superior de la foto, es adecuada. Esta ha sido impresa de manera que se pueda escribir directamente en ella toda la información necesaria acerca de la muestra. Si la muestra es para contenido de humedad, ésta debe empacarse en un envase a prueba de humedad del cual se haya sacado todo el aire posible. En ésta, se ha colocado un sobre en la bolsa de plástico sellable. Otra vez, el sobre lleva toda la información acerca de ]a muestra. 88 MARCADO Y SELLADO Después de que los envases han sido muestreados. deberán cerrarse si el muestreo fue hecho con la intención de extender un certificado naranja de calidad de semillas. el envase debe ser marcado y sellado oficialmente. Este es el método usado en el Centro de Investigación Forestal del Pacífico en Canadá. Un marcador de metal estampado en el nombre de nuestro departamento. es usado como la marca oficial (izq.). El envase es sellado usando un sellador (derecha inf.) el cual consiste de un disco de plomo unido a un alambre enrollado. Para cerrar el envase se usa una cinta de plástico (centro) como la que usan los electricistas para unir cables. Esta cinta es autoadherible. El uso de las agujas y las pinZas se explicará después. 89 . La punta de la bolsa de plástico llada. La cinta de claramente) llada de la través de la es fuertemente enro- plástico (coloreada para que se vea más está colocada alrededor de la parte enrobolsa. El extremo de la cinta se pasa a cabeza para el cierre formando un anillo. El anillo es empujado para cerrar fuertemente. Las porciones finamente aserradas. visibles en parte de la cinta. a la derecha. son pequeñas protuberancias que unen el dispositivo metálico de cierre. en la cabeza de la cinta. 90 Aunque la cinta es muy dificil de remover, ésta puede ser abierta; para prevenir esto, la cinta es atravesada con una aguja cerca de la cabeza de cierre. El alambre de! sello de plomo se pasa a través del hoyo y la etiqueta de metal es atravesada por e! alambre. Entonces e! alambre es pasado a través del otro agujero en el sello de metal. Las pinzas de plomo. para sellar se colocan alrededor de! sello 91 Cuando las pinzas están cerradas, fuerzan comprimir el alambre muy firmemente. al plomo a Las puntas de las pinzas selladoras están hechas de tal manera que imprimen las iniciales de 1ST A sobre el sello de plomo. Aqui el alambre ha sido pasado por ambos agujeros del sello de plomo para mayor seguridad, el alambre puede ser jalado del sello, pero éste deformará al sello y el alambre no podrá ser re~ puesto. Se cree que este sistema es a prueba de alte~ raciones. Las semillas de arboles forestales a menudo presentan problemas especiales para el mues~ treador, ya que muchos lotes contienen altos porcentajes de semillas vacias. En algunos gé~ neros de coníferas (incluyendo Abies y Larix) las semillas vacías frecuentemente presentan un tejido leñoso que hace que su densidad sea similar a la de semillas viables, haciendo difícil su separación durante el procesamiento de la semilla. Aún cuando los lotes de semilla son mezclados para homogeneizarlos, la experien~ cia nos ha mostrado que la presencia de un gran número de semillas vacías puede hacer extremadamente difícil .}a obtención de mues~ tras representativas. Lo anterior puede tener un doble efecto: uno, la calidad de la muestra (en cualquier manera que ésta sea medida) puede no representar el lote de semillas como un todo y Iodos, puede existir demasiada variación entre las repeticiones empleadas en la 92 prueba como para hacer que los resultados no sean utilizables. En consecuencia, el analista de semillas deberá asegurarse de que los procedimientos de muestreo sean seguidos correctamente en todas las ocasiones. Las técnicas de rayos X permiten una rápida identificación de semillas vacías así como de otros tipos de características de las semillas; aun cuando no existan semillas vacías, algunas otras condiciones de la semilla pueden hacer que una porción de un lote no pueda utilizarse para la producción de plán~ tula. La muestra deberá representar esta condición. Debe de subrayarse que no importa que tan bien se realice el ensayo de laboratorío, los resultados exhibirán únicamente la calidad de la muestra ensayada. Deberán hacerse todos los esfuerzos necesarios para asegurar que la muestra ensayada representa verdaderamente la composición del lote de semillas en cuestión.