Trabajo Interdisciplinario Química/Biología TP 1: EXTRACCIÓN Y OBTENCIÓN DE ADN El ADN (ácido desoxirribonucleico) es una molécula que contiene la información para constituir cada organismo vivo, desde una planta, un insecto o hasta mamíferos (incluidos los seres humanos). Guarda la información genética y se encuentra en el núcleo de las células eucariotas. Una sola molécula de ADN es muy pequeña para verla a simple vista, pero muchas moléculas de ADN juntas se pegan unas a otras y forman filamentos pegajosos blancos. Se extraerá ADN de banana, humano y de cucaracha. Usaremos diferentes sustancias sencillas y fáciles de conseguir en casa como sal, detergente, solución para lentes de contacto, alcohol, por lo que no se necesitará un equipamiento especial de laboratorio. EXTRACCIÓN DE ADN BANANA MATERIALES Mortero Agua de canilla Sal Detergente líquido Banana Solución limpiadora de lentes de contacto Alcohol etílico al 96% frio Pipeta Pasteur Tubo de ensayo Varilla de vidrio Vaso de precipitado PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Poner en un mortero una porción de banana. Agregarle 5 ml de agua de canilla y una cucharada de sal. Con el pilón del mortero, aplastar la banana con la intención de romper todo el tejido hasta formar una pasta homogénea. Colar la mezcla con un colador de metal sobre un vaso de precipitados. Se sugiere utilizar el pilón para aplastar la mezcla de nuevo en el colador para cooperar con la colación. Agregar 2 gotas de detergente Mezclar y dejar reposar aproximadamente 10 minutos Verter parte del extracto en un tubo de ensayo Agregar 6 gotas de solución limpiadora de lentes de contacto y agitar por inversión suavemente para no romper el ADN. Verter por las paredes del tubo de ensayo alcohol frio al 96%. Dejar reposar durante 3 minutos. Sumergir la varilla hasta que roce el límite entre las dos capas y girarla, siempre en la misma dirección y sin rozar las paredes del tubo, para recoger hebras de ADN. EXTRACCIÓN DE ADN HUMANO MATERIALES Vaso de precipitado Agua de canilla Detergente líquido al 25% Solución de NaCl al 6% Solución limpiadora de lentes de contacto Alcohol etílico al 96% frio Pipeta Pasteur Tubo de ensayo Varilla de vidrio METODOS: - Preparación de Soluciones Detergente al 25%: 100 ml de Agua + 25 ml Detergente NaCl al 6%: 0,5 gr de NaCl + 20 ml de Agua PROCEDIMIENTO. 1. 2. 3. 4. 5. 6. Enjuagarse la boca agua durante 30 segundos y luego echarla en el vaso de precipitado. Trabajar con 20 ml finales. Agregar 2 gotas de solución de NaCl al 6% y 2 gotas de Detergente al 25%, mezclarlo y verterlo en el tubo de ensayo. Colocar alcohol etilico 96% frio en un tubo de ensayo, hasta la mitad de su volumen. Con el tubo inclinado, dejar resbalar por la pared la solución con la muestra. Dejar reposar el tubo 3 minutos mínimamente. Sumergir la varilla hasta que roce el límite entre las dos capas y girarla, siempre en la misma dirección y sin rozar las paredes del tubo, para recoger hebras de ADN. EXTRACCIÓN DE ADN DEL COLEÓPTERO MATERIALES Vaso de precipitado Agua de canilla Detergente líquido al 25% Solución de NaCl al 6% Solución limpiadora de lentes de contacto Alcohol etílico al 96% frio Pipeta Pasteur Tubo de ensayo Varilla de Vidrio 20 patas de cucaracha y antenas PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. 7. 8. 9. 10. Poner en un mortero las patas y antenas de cucaracha y agregarle un poco de agua de canilla. Agregar 1 cucharada de sal. Con el pilón del mortero, aplastar con la intención de romper todo el tejido hasta observar la menor cantidad de tejido animal posible. Agregar 2 gotas de solución de NaCl al 6% y 2 gotas de Detergente al 25%, mezclarlo y verterlo en el tubo de ensayo. Colocar alcohol etilico 96% frio en un tubo de ensayo, hasta la mitad de su volumen. Con el tubo inclinado, dejar resbalar por la pared la solución con la muestra. Dejar reposar el tubo 3 minutos mínimamente. Sumergir la varilla hasta que roce el límite entre las dos capas y girarla, siempre en la misma dirección y sin rozar las paredes del tubo, para recoger hebras de ADN.
