XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico OBTENCIÓN DE PARÁMETROS CINÉTICOS DE LEVADURAS NO-CONVENCIALES Anabel Herrera Rodríguez. Instituto Tecnológico de Morelia “José María Morelos y Pavón”. anny_dolphin@hotmail.com. Dr. en C. Juan Carlos González Hernández. Instituto Tecnológico de Morelia “José María Morelos y Pavón”. jcgh1974@hotmail.com. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA En los últimos años, la producción biotecnológica de etanol y xilitol ha presentado gran interés debido a su aprovechamiento en diversos productos, éstos pueden obtenerse mediante procesos fermentativos utilizando levaduras no-convencionales como, Clavispora lusitanie, Kluyveromyces marxianus y Zigosaccharomyces bailli que puedan metabolizar glucosa y xilosa como fuente de sustrato, sin embargo las levaduras convencionales, como Saccharomyces cerevisae no metabolizan xilosa, por lo que el objetivo de esta investigación es determinar los parámetros cinéticos de las levaduras no-convencionales utilizando xilosa como fuente de sustrato y que sirvan como base para realizar estudios sobre identificación de genes responsables del tranporte de xilosa en aquellas que presenten mayor afinidad por este sustrato. METODOLOGÍA Se utilizó medio YPD (xilosa 2% o glucosa 2%; extracto de levadura 1%; peptona 1%) para estudiar el comportamiento cinético de levaduras no-convencionales propiedad del Laboratorio de Bioquímica del Instituto Tecnológico de Morelia, las cuales fueron: Lev1 (Saccharomyces cerevisiae), Lev6 (Clavispora lusitanie), Lev8 (Klyveromyces marxianus) y Lev11 (Zygosaccharomyces bailli). Se realizaron matrices de fenotipos en agar YPD para ver el crecimiento de cada levadura con dos fuentes de carbono diferentes a pH 4. Se realizaron cinéticas de crecimiento nivel matraz, para lo cual se realizó un preinóculo a nivel matraz con 125mL de medio al agregar 5 asadas de colonias de la cepa de estudio cultivada en agar YPD y se incubaron a 30ªC por 12h a 180rpm. Después se realizó la determinación del número de células para realizar las cinéticas de cada cepa con concentraciones iniciales de 3*10 6 cel/mL y se incubaron en matraces con 125mL de medio con las mismas condiciones del preinóculo por 36h. Las variables de estudio fueron el tipo de levadura y la fuente de sustrato (glucosa y xilosa). Las variables de respuesta evaluadas en cada ensayo fueron: el crecimiento celular (cámara de Neubauer), la determinación de biomasa (peso seco), la producción de etanol (técnica espectrofotométrica por dicromato de potasio), la cuantificación de azúcares reductores (método DNS) y el pH (potenciómetro). CONCLUSIONES GENERALES Los resultados de los parámetros cinéticos obtenidos en esta investigación permitirán contribuir a estudios posteriores sobre biología molecular para la identificación de genes responsables de la asimilación de xilosa de las levaduras no-convencionales que presentaron mayor afinidad por este sustrato y realizar modificaciones genéticas. Se agradecen los donativos parciales otorgados por CONACYT 2012 (Proyecto 176199). © Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico Agosto 2014