HOSPITAL NACIONAL “DOS DE MAYO” PROCEDIMIENTO CODIGO: VERSION:001 Paginas: DETERMINACION CUALITATIVA Y CUANTITATIVA DEL EXAMEN DE ORINA COMPLETA AUTOMATIZADA I. FINALIDAD Estandarizar los procedimientos para la determinación cualitativa y cuantitativa del examen completo de orina en un analizador automatizado de orina. II. OBJETIVO COMPLETAR III. ALCANCE Para todo el personal que labora en el Servicio de Uroanálisis. IV. RESPONSABILIDAD El profesional Tecnólogo Medico es responsable de: Dar mantenimiento diario al equipo automatizado de orina. Verificar que las muestras sean óptimas para el proceso. Calibrar cuando sea necesario para gravedad específica. Reconstituir los controles y reactivos que requiera el equipo. Verificar que los controles de calidad se encuentren en los niveles permitidos. Procesar las muestras de orina de los pacientes. Verificar y dar la conformidad de los resultados de los pacientes. El médico Patólogo Clínico es el responsable de validar los resultados. V. DEFINICIONES AUTION Check I y II: para el control de calidad Química, presentación en dos niveles (bajo-alto). AUTION Control Sol L y H:para el control de calidad del Sedimento, presentación en dos niveles (bajo-alto) Shutdown: Lavado que se realiza para apagar el equipo. Rack: Gradilla con 10 posiciones numeradas para trabajar muestras en modo automático. Siglas de los parámetros del sedimento: o RBC : Hematíes o WBC : Leucocitos o CAST : Cilindros o EC : Células epiteliales. Elaborado por Haydee Heredia Revisado por Fecha Firma Fecha Firma Aprobado por Luz María Huaroto Valdivia Fecha Firma HOSPITAL NACIONAL “DOS DE MAYO” CODIGO: VERSION:001 Paginas: Alarmas : o XTAL : Cristales o YLC : Levaduras o SRC : Células redondas pequeñas o PATH CAST: Cilindros patológicos. o MUCUS : Filamento mucoide o ESPERM : Espermatozoides. VI. CONSIDERACIONES GENERALES COMPLETAR VII. PROCEDIMIENTO a) Emplear tubos cónicos/cóncavos standard de orinas b) Colocar el código de barra al tubo que viene en el frasco de orina c) Homogenizar con movimiento circulares el frasco de orina y colocar la orina en los tubos. Volumen mínimo de la muestra 7.5 ml (para muestras de menor volumen o pediátrico utilizar modo muestra manual). d) Colocar en un rack los tubos cónicos con orina en forma secuencial. e) Activar el MUESTREADOR (doble click en el ícono del muestreador) f) Colocar el rack en el muestreador con la hendidura del rack al lado derecho que coincida con el sobresaliente del muestreador. g) El rack se deslizará automáticamente a lo largo del muestreador. h) Retirar el rack una vez procesada la muestra. Para dar la conformidad del resultado: a) Verificar los resultados del analizador interpretando los parámetros tanto de la parte química como del sedimento y hacer correlación con cada dispersograma. b) Ante un resultado con alarmas, proceder a su verificación en el microscopio. Los resultados obtenidos del equipo pasan automáticamente al SOFTWARE ENTERPRISE. 7.1. DESCRIPCIÓN DEL TIPO DE ENSAYO O PRUEBA Método de reflectancia: Tiras de ensayo Método de refractometrìa: Gravedad específica Método de medición de dispersión de la luz: Matiz del color/turbidez Método de Citometria de Flujo: Componentes celulares 7.2. PARAMETROS, MAGNITUDES Y RANGOS A SER DETERMINADOS RBC : Hematíes WBC : Leucocitos CAST : Cilindros EC : Células epiteliales. XTAL : Cristales YLC : Levaduras Elaborado por Haydee Heredia Revisado por Fecha Firma Fecha Firma Aprobado por Luz María Huaroto Valdivia Fecha Firma HOSPITAL NACIONAL “DOS DE MAYO” CODIGO: VERSION:001 Paginas: SRC : Células redondas pequeñas PATH CAST: Cilindros patológicos. MUCUS : Filamento mucoide 7.3. EQUIPOS, REACTIVOS Y CONSUMIBLES EQUIPOS: ARKRAY AU-4050 REACTIVOS Y CONSUMIBLES: AUTION Sheath Solution 20 L AUTION Diluent (SED) 2.1 L AUTION Diluent (BAC) 2.1 L AUTION Staining Solution (SED) 29 ml AUTION Staining Solution (BAC) 25 ml Concentrated Washing Solution 1 L 7.4. MATERIALES DE REFERENCIA REQUERIDOS CONTROLES: AUTION Check I y II: para el control de calidad Química, presentación en dos niveles (bajo -alto). AUTION Control Sol L y H: para el control de calidad Del Sedimento, presentación en dos niveles (bajo-alto) 7.5. CONDICIONES AMBIENTALES Temperatura: 15 – 30°C. Temperatura óptima: 25°C Humedad relativa: 30 – 60% 7.6. ESPECIFICACIONES DE DESEMPEÑO CV RBC: +-10% o menos. CV WBC: +-10% o menos CV células epiteliales: +-30% o menos CV cristales: +-10% o menos. 7.7. TIPO DE MUESTRA Orina CONSERVACIÓN DE LA MUESTRA: Temperatura ambiente: Menos de 2 horas tras su emisión. Temperatura de 4°C: Hasta 24 horas. 7.8. TIPO DE TUBOS CONTENEDORES El recipiente primario o contenedor debe ser limpio, libre de partículas, preferiblemente hecho de material desechable, inerte con respecto a los componentes urinarios. Capacidad mínima de 50 ml, boca ancha (apertura al menos 4.0 cm), cierre hermético. Elaborado por Haydee Heredia Revisado por Fecha Firma Fecha Firma Aprobado por Luz María Huaroto Valdivia Fecha Firma HOSPITAL NACIONAL “DOS DE MAYO” CODIGO: VERSION:001 Paginas: Pueden emplearse muestras obtenidas por otros métodos como recolección en bolsas adhesivas para niños que no controlan la micción, punción supra púbica, orina de catéter, sondaje. 7.9. PREPARACION DEL PACIENTE Lavado genital previo a la recolección de la muestra. 7.10. CRITERIOS DE ACEPTACIÓN Y RECHAZO DE MUESTRAS Muestras que deben ser rechazadas: Identificación inadecuada del paciente. Muestra contaminada con heces. Tiempo prolongado desde la toma de muestra. Volumen insuficiente. Recipientes de colección defectuosos. 7.11. PROCEDIMIENTOS DE CALIBRACION DE EQUIPO Calibración del equipo a cargo del personal de ingeniería de la casa comercial. 7.12. OPERACIÓN DEL ANALIZADOR Revisar el manual de usuario del Arkray AU 4050 7.13. PROCEDIMIENTO TECNICO DEL EQUIPO Revisar el manual de usuario del Arkray AU 4050 7.14. PROCEDIMIENTO DEL CONTROL DE CALIDAD Control de calidad diario, los cuales deben estar dentro de los límites permisibles. Control de calidad externo: 1 vez al mes. Los resultados son entregados al área de control de calidad para su archivo. PROCESAMIENTO DE CONTROLES: Reconstituir los controles siguiendo las recomendaciones del inserto Colocar el control reconstituido en un tubo de muestra nuevo, almacenarlo siempre en sitio oscuro y refrigerado. Antes de procesar Retire de la refrigeradora el rack con los 2 tubos de controles AUTION CHECK I Y II, dejar atemperar por 30 minutos. Retire de la refrigeradora los 2 frascos de controles AUTION Control Sol L y H .dejar atemperar por 30 minutos. CONTROL QUIMICO: Registrar el lote de control (para controles nuevos) para ello: Hacer Click en QC FILES – CHM-editar Escanear primero el lote del control y luego los rangos de cada analito. Finalmente Click en ACEPTAR Elaborado por Haydee Heredia Revisado por Fecha Firma Fecha Firma Aprobado por Luz María Huaroto Valdivia Fecha Firma HOSPITAL NACIONAL “DOS DE MAYO” CODIGO: VERSION:001 Paginas: Colocar en un tubo de muestra nuevo al menos 5 ml de AUTION CHECK I Y II y estos dos tubos colocarlos en el rack. Click en VER-QC En el diálogo QC hacer Click en ANALISIS QC de la columna CHM Se selecciona primero el control I y luego el control II (es importante respetar este orden de selección), luego ACEPTAR Aparece un diálogo de control de calidad, seleccione el alimentador con el que desea trabajar y luego Click en INICIAR MUESTREADOR. CONTROL SEDIMENTO: Registre el lote de control (para controles nuevos), para ello: Click en QC FILES-FCM-editar Escanear primero el lote del control y luego los rangos de cada analito. Finalmente Click en ACEPTAR Click en VER-QC En el diálogo QC hacer click en ANALISIS QC de la columna FCM Se selecciona primero el control (I) y luego aceptar Mezclar vigorosamente por inversión el control I (mínimo 20 veces) Vaciar 1 ml a un micro cubeta y colocarlo en la boquilla de aspiración y pulsar el interruptor de inicio de análisis manual. Aparecerá una pantalla de resultados QC FCM En el diálogo QC hacer click en ANALISIS QC de la columna FCM Se selecciona ahora el control (II) y luego aceptar Mezclar vigorosamente por inversión el control I (mínimo 20 veces) Vaciar 1 ml a un micro cubeta y colocarlo en la boquilla de aspiración y pulsar el interruptor de inicio de análisis manual. Aparecerá una pantalla de resultados QC FCM GRAFICA DE LEVEY-JENNINGS Los resultados obtenidos de los controles son evaluados a través de las curvas de Levey Jennings, debiendo estar ubicados dentro de los límites permisibles. 7.15. PROCEDIMIENTO PARA EL CALCULO DE RESULTADOS La formulación del cálculo de resultados va a depender de la curva de calibración y es calculada por el equipo. La transmisión de los resultados del analizador se encuentra interfasado con el sistema Enterprise. 7.16. INTERFERENCIAS O REACCIONES CRUZADAS En la determinación de tiras reactivas: FALSOS POSITIVOS: GLUCOSA: Sustancias oxidantes como hipoclorito cloro, orina acida (pH < 4) PROTEINAS: Oriana alcalina (pH>8), grandes cantidades de hemoglobina, medios de contraste, sustancias moleculares elevadas, desinfectantes como el compuesto de amonio cuaternario. Elaborado por Haydee Heredia Revisado por Fecha Firma Fecha Firma Aprobado por Luz María Huaroto Valdivia Fecha Firma HOSPITAL NACIONAL “DOS DE MAYO” CODIGO: VERSION:001 Paginas: BILIRRUBINAS: Urobilinogeno, etodolac UROBILINOGENO: carbapenem SANGRE: sustancias oxidantes como hipoclorito y cloro. CETONAS: L-DOPA, BSP, PSP, FENIL CETONA, CEFALOSPORINA, ENZIMA ALDOSA – REDUCTASA, BUSILAMINA. LEUCOCITOS: formaldehido, bilirrubinas FALSOS NEGATIVOS: GLUCOSA: Grandes cantidades de ácido ascórbico. PROTEINAS: Oriana acida (pH<3). BILIRRUBINAS: Ácido ascórbico, ácido úrico, nitritos. SANGRE: grandes cantidades ascórbico, orina con gravedad especifica elevada, orinas con proteínas elevadas. NITRITOS: ácido ascórbico, orina con gravedad específica elevada. LEUCOCITOS: glucosa (>500mg/dl), proteínas (>300mg/dl), orina acida, orina con gravedad especifica elevada. OTROS FACTORES QUE ALTERAN LOS RESULTADOS DE LA PRUEBA: Orina diluida o altamente concentrada. Bilirrubina: la bilirrubina es inestable en la luz. Urobilinogeno: orina con alto nivel de bilirrubina podría provocar la aparición de color verde. pH: la orina no reciente aumenta la alcalinidad. Sangre, nitritos, leucocitos: si se deja la orina durante largo periodos de tiempo estos podrían afectar los resultados. 7.17. INTERVALOS BIOLÓGICOS DE REFERENCIA Leucocitos: 0-4xc Hematíes: 0 – 2 x c Células epiteliales: 0 – 4 x c Parámetros de tira reactiva: Negativo. 7.18. VALORES ALERTA O CRÍTICOS No se consideran. 7.19. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS POR EL LABORATORIO La interpretación de las pruebas de laboratorio se basa en comparar los valores obtenidos a través de una muestra de orina de un paciente, con valores normales obtenidos de una media que cae entre dos desviaciones estándar del valor de la mediana para la población normal. Este valor normal abarca el 95% de la población. Los resultados serán validados por el médico patólogo clínico 7.20. DATOS A SER REGISTRADOS EN EL INFORME DE PACIENTES Se considerara dentro del informe de pacientes los siguientes parámetros: Color, Aspecto, Densidad, Ph Orina, Bilirrubina, Urobilinogeno, Cuerpos Cetónicos, Glucosa, Proteínas, Sangre, Nitritos, Células Epiteliales, Elaborado por Haydee Heredia Revisado por Fecha Firma Fecha Firma Aprobado por Luz María Huaroto Valdivia Fecha Firma HOSPITAL NACIONAL “DOS DE MAYO” CODIGO: VERSION:001 Paginas: Leucocitos, Hematíes, Cilindros, Cristales, Filamento Mucoide, Hongos 7.21. PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Para el procedimiento se tomara las siguientes medidas de seguridad: Lavado de manos Uso de equipos de protección personal, entre ellos guantes, mandilones y mascarilla Mantener el orden y limpieza del área 7.22. FUENTES POTENCIALES DE VARIABILIDAD No Homogenizar bien la muestra de orina dentro de su contenedor antes del proceso. Muestras contaminadas con heces. Recipiente de transporte de muestra inadecuado. Fallas mecánicas del analizador 7.23. COMUNICACIÓN A LOS USUARIOS DE LOS CAMBIOS DE PROCEDIMIENTOS DE EXAMEN. Se comunicara a todos los usuarios mediante informe y/o memorándum de realizarse alguna modificación del examen VIII. RECOMENDACIÓN COMPLETAR IX. REFERENCIAS NORMA ISO 15189:2012 NORMAL ISO 9001:2015 Manual del Sistema de Gestión de Calidad. Manual para la toma, identificación, manejo de desechos infecciosos. Manual del equipo ARKRAY AU 4050. Inserto de reactivos. Protocolo CLSI EP 15 A3, EP 12 Elaborado por Haydee Heredia Revisado por Fecha Firma Fecha Firma Aprobado por Luz María Huaroto Valdivia Fecha Firma