TECNOLOGÍA SUMA Enzimoinmunoensayo (EIE) Son aquellos cuyos resultados se miden evaluando los cambios en la concentración en el producto de una reacción enzimática. Varios eventos importantes transcurren en el enzimoinmunoensayo: La reacción antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) La reacción enzima-sustrato (E-S) A su vez hay sucesos claves que definen la continuidad del inmunodiagnóstico que son: La muestra (¿Ag o Ac?) El conjugado que es el enlace entre propiedades inmunológicas y enzimáticas. El sustrato con su presencia evidenciará la ocurrencia de las reacciones las que podrán ser visualizadas por diferentes métodos Varios Eventos importante ocurren en el EIE Reacción Ag-Ac E Sustrato Conjugado Fluorescencia Muestra? Los cambios en el producto de la reacción enzimática se detectan por Color Fluorescencia Turbidez Luz Radiaciones Una sencilla clasificación los considera como de dos tipos: Homogéneos Heterogéneos Heterogéneos Fueron los primeros en ser descubiertos, son conocidos como ELISA (enzyme-linkedimmunoabsorbent assay) Pueden ser: Directo Indirecto Sándwich Captura. Características Son los más utilizados Transcurren en dos fases sólida y líquida Utilizan un soporte sólido (placas de polivinilo y poliestireno) Requieren incubaciones y lavados intermedios Automatización limitada: tener presente el valor del analista en la interpretación de cada paso del ensayo. Elevada sensibilidad, detectabilidad y especificidad Se puede instrumentar con facilidad y bajo costo. Rápidos Adaptables a procesos micro y ultamicroanalítico. Estandarización con anticuerpos monoclonales. Sensibilidad Capacidad de una prueba de detectar la enfermedad que se investiga, en todas las personas que efectivamente la padecen. Sensibilidad Verdaderos positivos Verdaderos positivos + Falsos negativos x 100 Especificidad Capacidad de una prueba de detectar la ausencia de la enfermedad que se investiga, en todas las personas que efectivamente no la padecen. Especificidad Verdaderos negativos_________ x 100 Verdaderos negativos + Falsos positivos Detectabilidad Mínima concentración diferente de 0 que es capaz de detectar un ensayo ¿Qué es el SUMA? Sistema ultramicro analítico. Utiliza microvolúmenes Tres postulados la categorizan como Tecnología Apropiada: ser barata, efectiva y muy útil. Permiten procesar muestras biológicas o especimenes de diferentes orígenes: sangre seca sobre papel de filtro, suero, plasma, orina, líquido amniótico El uso de ultramicrovolúmenes y su producción nacional ha abaratado los costos para la implementación de programas Permite procesar un gran número de muestras, lo que la hace útil para pesquisaje masivo. Realiza de forma rápida el diagnóstico de enfermedades disminuyendo el tiempo de espera de los resultados Por el nivel de automatización los resultados se obtienen a través de una computadora acoplada al sistema que ofrece una gran seguridad al evitar errores operacionales El uso de sustrato fluorigénico hace que aumente la sensibilidad sin perder especificidad. Posibilita el seguimiento de las enfermedades Programas de Salud que abarca Certificación Vigilancia Materno de sangre epidemiológica infantil Componentes de la Tecnología SUMA Lector PR-521 Lavadores MAS-301 y MW-2001 Estuches UMELISA PR-521 Lector diseñado para realizar lecturas de fluorescencia y absorbancia en las técnicas de UMELISA y ELISA. Lavador Existen diferentes modelos pero todos conducen a un mismo fin: lavar las placas de reacción para eliminar los componentes no fijados Parámetros programables como: volumen a dispensar tiempo de enjuague cantidad de ciclos número de tiras tipo de aspiración aspiración Funciones comunes que garantizan la calidad del más exigente de los procesos de lavado lavar aspirar dispensar enjuagar Lector Este lector está diseñado para realizar lecturas de fluorescencia y absorbancia en las técnicas de UMELISA y ELISA Estuches de reactivos Tiras de reacción 12 tiras de 8 pocillos cada una en cada placa: en esta fase sólida está fijado el antígeno o el anticuerpo lo que permite que ocurran los diferentes momentos del ensayo. Control negativo: para la validación de la placa de trabajo Control positivo: para la validación de la placa de trabajo Conjugado: enlace de propiedades inmunológicas y enzimáticas Sustrato: evidencia la reacción Tampón de sustrato: garantiza el pH óptimo para la reacción enzimática Los estuches de los kit tienen incluidos el lote de producción y la fecha de vencimiento. Deberán ser almacenados a una temperatura de +2 a +8 °C Control de calidad de los ensayos: Fases pre analítica analítica post analítica Premisas para un esquema de calidad Calidad antes de Control de Calidad Evitar para luego detectar Satisfacer al paciente Ser centinelas de la calidad Lograr un impacto económico-aporte personal/social Emitir resultados confiables. TIPOS DE CONTROL DE CALIDAD Control interno Análisis externo del control interno Control externo Control de calidad interno: es responsabilidad individual de cada laboratorio Análisis externo del control interno: permite el seguimiento y monitoreo del trabajo Control externo: debe participar cada laboratorio según la metodología y sueros controladores suministrados por el Centro de Inmunoensayo. FASE PREANALITICA Muestra Solicitud Momento de la toma de muestra Cantidad de muestra a tomar Calidad de la muestra FASE ANALÍTICA Marcha técnica Control de calidad Fase post analítica Incluye la confirmación de los resultados Reporte CONFIDENCIALIDAD