NATALIA GUADALUPE PALMA CASARRUBIAS PRUEBAS DE DIAGNOSTICO MICROBIOLÓGICO Tipo de prueba Características Técnica de toma de muestra Parámetro de resultados Microscopio Con este instrumento es posible conocer en detalle la ultraestructura de los organelos intracelulares de los microorganismos más grandes (parásitos, hongos y bacterias) además de poderse visualizar los virus. El microscopio de luz, el de campo oscuro y el de contraste de fases han sido de gran utilidad para el análisis en fresco del tamaño y de la forma, particularmente en el caso de treponemas, espiroquetas, protozoarios y para el estudio de las formas vegetativas en los microcultivos micológicos La clasificación de los microorganismos ha dependido de las diferencias morfológicas y propiedades tintoriales. Citocentrífuga Este instrumento se utiliza para concentrar especímenes, particularmente líquidos orgánicos y preparar laminillas para evaluación en el laboratorio. Las aplicaciones de esta tecnología son múltiples, ya que se puede concentrar muestras de prácticamente cualquier líquido orgánico en cuestión de minutos para estudios citológicos y microbiológicos, los cuales pueden ser sometidos a microscopia de luz, microscopia electrónica, citoquímica, clonación, etc. Después de procesar las muestras, se obtiene un sedimento de aproximadamente 6 mm de diámetro consistente en una monocapa de células y microorganismos bien preservados y desplegados. Citometría de flujo Los contadores de partículas se se han desarrollado instrumentos Los citómetros de flujo permiten utilizan en el laboratorio clínico capaces una alta predicción de los cultivos particularmente en el área de Estos instrumentos encuentran su que hematología donde sin duda han principal UFC/mL, tenido un gran impacto en la detección de piuria y bacteriuria, de contar aplicación bacterias. en la tendrán > además de de 100,000 poder discriminar los casos en los que NATALIA GUADALUPE PALMA CASARRUBIAS realización de la biometría permitiendo hacer un escrutinio de existe hemática, siendo capaces en la qué muestra. actualidad de hacer un análisis microbiológico y cuáles pueden completo roja, ser como negativas a priori con cuenta total de leucocitos, análisis una confiabilidad determinada a diferencial de la fórmula blanca, través además de número y tamaño de negativo de 99%, sobre todo plaquetas. cuando la piuria se encuentra en de la fórmula orinas ameritan del valor cultivo contaminación de la o las predictivo niveles de > 50 leucocitos/mm3 . Taxonomía por pruebas rápidas Pruebas taxonómicas Estas pruebas permiten El a géneros condiciones de cultivo dependientes del metabolismo, diferenciar capacidad síntesis y patógenos de los saprofíticos, los factores determinantes, pero si cualidades de reproducción que cuales aunque menos virulentos serán factores críticos la técnica por su rapidez, bajo costo y no deben ser subestimados, ya de suficiente que está bien demostrado que se cromosómico y la amplificación. pueden como es imprescindible la electroforesis oportunistas, particularmente en del producto de PCR en gel de casos agarosa. Debe observarse una de especificidad son ampliamente aceptadas. los medio comportar de pacientes inmunocomprometidos. de extracción incubación del ADN sola banda (perteneciente a un único amplicón) con el tamaño adecuado. Medios de cultivo Necesitan una fuente de energía, una fuente de carbono, una fuente de nitrógeno, algunas sales, oligoelementos y agua. Todos los medios de cultivo han de cumplir En los medios de cultivo las bacterias se multiplican y es necesario esperar al menos 18-24 horas para visualizarlas. Agua: recipientes dónde se almacena el agua debe ser inerte. pH: la medida a 25 oC. pH +0.2. ajuste el pH con 1 M NaOH o 1M CLH NATALIA GUADALUPE PALMA CASARRUBIAS como mínimo con estos requisitos pero en muchas ocasiones se necesitan además otras sustancias adicionales como vitaminas, factores o aminoácidos esenciales. Inmunodiagnóstico El inmunodiagnóstico generalmente es complementario al diagnóstico clínico y microbiológico, pero en ciertos casos como enfermedades virales o autoinmunes es la única clave con la que se cuenta para establecer un diagnóstico. fundir en el agua hirviente volúmenes < 6 15 ml de espesor agar en placas petri 90 mm. Secado de placas estufa 25-55 oC (20 min.) o en flujo laminar. Incubación: las pilas de platos < 6. Se necesitan sueros pareados de la fase aguda y convaleciente, por lo cual es útil guardar muestras en las primeras tomas de sangre, sobre todo si el paciente va a ser transfundido. Detección del antígeno. Cuantificación de anticuerpos (IgG/IgM) Intradermorreacciones.