Analisis de Cereales y Derivados

D O S
A N A L I T I C O S
M E T O D O S
E N
O F I C I A L E S
A L I M E N T A R I A
D E
A N A L I S I S
Cereales,
derivados
de cereales
y cerveza
PANREAC QUIMICA, S.A. publica una nueva
edición de sus folletos de Métodos Analíticos en Alimentaria, en la que podrán apreciar a simple vista
un cambio de formato respecto a las anteriores.
M E T O D O S
A N A L I T I C O S
E N
A L I M E N T A R I A
Esta nueva imagen, pretende ser una expresión de
los cambios que con el tiempo hemos experimentado
en nuestros campos de actividad, puesto que si continuamos manteniendo una importante implantación en el sector alimentario como fabricantes de
reactivos para análisis PANREAC y de los aditivos
alimentarios ADITIO, actualmente hemos aumentado nuestra aportación de productos para el análisis
alimentario con nuestras líneas de Cromatografía en
Capa Fina PANREAC-TLC y Medios de Cultivo
Deshidratados para Microbiología CULTIMED.
La colección Métodos Analíticos en Alimentaria se
compone de 6 folletos monográficos, por campos de
alimentos, que recogen una transcripción íntegra
de los métodos oficiales de análisis en España, que
a su vez son publicados en los correspondientes
B.O.E. mencionados en el índice de cada
monografía incorporando los reactivos y productos
auxiliares PANREAC en la calidad considerada
más idónea, así como los medios de cultivo
CULTIMED.
M
Los títulos de las 6 monografías son:
Aceites y grasas
Aguas potables
de consumo público
y aguas de bebida envasadas
Carne y productos cárnicos
Cereales, derivados de cereales
y cerveza
Leche y productos lácteos
Productos derivados de la uva,
aguardientes y sidras
Obviamente esta edición ha sido actualizada con las
disposiciones publicadas hasta el momento, que
establecen nuevos procedimientos o que modifican
notablemente características anteriormente establecidas.
Por último, comentarles que están a su disposición
además de esta colección, nuestros:
Catálogo General de Reactivos PANREAC
Catálogo ADITIO de Aditivos Alimentarios
Catálogo CULTIMED de Medios de Cultivo Deshidratados
Catálogo PANREAC-TLC de Placas, Folios y
Accesorios para Cromatografía en Capa Fina.
Cereales
I N D I C E
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 19-7-1977 y 20-7-1977)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
Determinación del índice de materias
celulósicas ...........................................
Humedad .............................................
Cenizas ................................................
Proteína ...............................................
Grasa ...................................................
Indice de Maltosa .................................
Acidez grasa ........................................
Agentes oxidantes (Reacción con
potasio yoduro) .....................................
Bromatos y yodatos en la harina
(Método cualitativo) ...............................
Benzoilo Peróxido (Método cualitativo
con bencidina) ......................................
Indice de Pelshenke ..............................
Gluten ..................................................
Farinógrafo Brabender ..........................
Alveógrafo Chopin (Provisional) .............
Determinación del grado de
sedimentación (según Zeleny) ...............
Acido Ascórbico (Vitamina C)
(Método cualitativo) (B.O.E. 29-8-1979)
Amonio Persulfato (Método Cualitativo)
(B.O.E. 20-7-1977) ...............................
Fósforo (B.O.E. 29-8-1979) ...................
Detección y cuantificación de harinas
de trigo común (Triticum Vulgare) en
sémolas y pastas alimenticias ...............
Detección de harinas degradadas por
el ataque de pentatomidos ...................
7
9
9
10
11
12
13
14
14
15
15
15
16
17
20
21
21
21
23
25
Cereales en copos o
expandidos
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 20-1-1988)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
Preparación de la muestra ...................
Humedad .............................................
Cenizas ................................................
Grasa ...................................................
Proteínas ..............................................
Fibra alimentaria insoluble .....................
Fibra bruta ...........................................
Azúcares ..............................................
Cloruros ...............................................
Zinc ......................................................
Plomo ...................................................
Mercurio ...............................................
27
27
27
28
29
30
31
32
34
35
36
36
13. Cobre ..................................................
14. Arsénico ...............................................
37
38
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 23-10-85)
Pastas alimenticias
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 8-9-87)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
Preparación de la muestra . ver página
Humedad ........................... ver página
Cenizas.............................. ver página
Grasas ............................... ver página
Proteínas............................ ver página
Fibra alimentaria insoluble .. ver página
Fibra bruta ......................... ver página
Azúcares............................ ver página
Cloruros ............................. ver página
Grado de Acidez ...................................
Plomo ................................ ver página
Mercurio ............................ ver página
Cobre ................................ ver página
Arsénico............................. ver página
Cerveza
27*
27*
27*
28*
29*
30*
31*
32*
34*
41*
36*
36*
37*
38*
* Coinciden exactamente con los ensayos en
Cereales en Copos o Expandidos, descritos en la
página indicada.
Galletas
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
Graduación alcohólica ..........................
Extracto real .........................................
Extracto seco primitivo .........................
Grado de fermentación .........................
Acidez total ..........................................
Anhídrido carbónico (CO2) .....................
pH ........................................................
Cenizas ................................................
Acido fosfórico ......................................
Anhídrido sulfuroso ...............................
Cobre ...................................................
Zinc .....................................................
Hidratos de carbono .............................
Color ....................................................
45
51
68
69
69
70
71
72
72
74
75
76
76
77
Relación de reactivos
y productos auxiliares
que se utilizan en los
métodos analíticos,
Cereales, derivados de
Cereales y Cerveza .... 78
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 24-11-87)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
Preparación de la muestra.. ver página
Humedad ........................... ver página
Cenizas.............................. ver página
Grasas ............................... ver página
Proteínas............................ ver página
Fibra alimentaria insoluble .. ver página
Fibra bruta ........................ ver página
Azúcares............................ ver página
Cloruros ............................. ver página
Extracción de la grasa para
su identificación ...................................
Plomo ................................ ver página
Mercurio ............................ ver página
Cobre ................................ ver página
Arsénico ............................ ver página
27*
27*
27*
28*
29*
30*
31*
32*
34*
43*
36*
36*
37*
38*
* Coinciden exactamente con los ensayos en
Cereales en Copos o Expandidos, descritos en la
página indicada.
Aditivos y
coadyuvantes
tecnológicos para
uso alimentario
industrial.....................................
82
Cereales
M
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 19-7-1977 y 20-7-1977)
1. DETERMINACION DEL INDICE DE
MATERIAS CELULOSICAS
1.1. Principio.
Las “materias celulósicas” representan las sustancias no digestibles de origen vegetal que constituyen el residuo que queda después de un ataque
ácido en condiciones bien definidas, con una mezcla de ácido acético, ácido nítrico y ácido tricloroacético. Después de hervir la muestra con la mezcla
de ácidos se separa el residuo insoluble, se seca y
se incinera.
El índice de materias celulósicas se calcula
mediante la pérdida de masa en el curso de la incineración.
La aproximación debe ser del 0,1%.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Molino de laboratorio (se puede emplear
cualquier tipo, excepto de bolas).
1.2.2. Matraces cónicos Erlenmeyer de 200 ó
300 ml de boca normalizada.
1.2.3. Refrigerador de reflujo, de boca normalizada.
1.2.4. Mechero Bunsen.
1.2.5. Tela metálica con amianto o placa de
material refractario.
1.2.6. Soporte de trípode o aparato análogo.
1.2.7. Matraz de vacío con tulipa (Kitasato).
1.2.8. Agitadores de vidrio. Un agitador de vidrio
revestido de caucho en la extremidad.
1.2.9. Crisol filtrante de cuarzo o de vidrio (porosidad de 40 a 90 mm).
1.2.10. Placas filtrantes de porcelana que cubran
totalmente la superficie filtrante.
1.2.11. Trompa de agua.
1.2.12. Desecador contenido silicagel coloreado
en azul (diámetro aproximado 25 cm).
1.2.13. Balanza de precisión (sensibilidad 0,1
mg).
1.2.14. Estufa.
1.2.15. Horno eléctrico para incineración.
1.2.16. Placa de material refractario.
1.2.17. Cartuchos deshidratantes de silicagel
coloreado de azul.
1.3. Reactivos.
131007 Acetona PA-ACS-ISO
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO
131067 Acido Tricloroacético PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP
132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO
211335 Gel de Sílice 3-6 mm con indicador QP
1.3.1. Acido Acético al 70% d. a 20°C = 1,07.
Usar Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y diluir convenientemente con Agua PA-ACS.
1.3.2. Acido Nítrico 60% PA-ISO.
1.3.3. Acido Tricloroacético PA-ACS.
1.3.4. Acetona PA-ACS-ISO.
1.3.5. Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO
1.3.6. Arena de Mar lavada, grano fino QP.
1.3.7. Fragmentos de tierra cocida (platos porosos machacados), diámetro de 0,5 a 2 mm.
1.4. Procedimiento.
1.4.1. Preparación de la solución ácida para la
hidrólisis:
Mezclar 900 ml de Acido Acético solución 70%
con 60 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO y 24 g de
Acido Tricloroacético PA-ACS ( d. 20°C =1,10).
1.4.2. Preparación de la Arena de Mar y de los
crisoles.
Hacer hervir la Arena de Mar lavada, grano fino
QP con Acido Clorhídrico 4N (diluir Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS a la concentración indicada) para eliminar el hierro, lavar con Agua
PA-ACS para eliminar el cloruro y calcinar a 550°C
durante seis horas. Preparar las placas de porcelana y el polvo de tierra cocida en la misma forma.
Antes de la primera utilización de los crisoles filtrantes de cuarzo o vidrio, limpiarlos cuidadosamente e incinerarlos durante seis horas a 550°C. Para
evitar tensiones en la parte inferior deslustrada,
colocar los crisoles filtrantes de vidrio en el horno de
incineración frío y no retirarlos hasta después de
enfriarlo alrededor de 200°C. Los crisoles de cuarzo
no experimentan tensiones y se pueden poner o
sacar con toda seguridad en el horno caliente.
Introducir en los crisoles filtrantes de 5 a 6 g de
Arena de Mar. Igualar la superficie. Introducir a continuación de 4 a 5 g de polvo de tierra cocida e igualar del mismo modo la superficie. Colocar a continuación la placa filtrante de porcelana encima de
estas dos capas y apretar ligeramente. Se puede
utilizar de nuevo el crisol así preparado, sin limpieza
especial, pero es necesario verificar la permanencia
de las capas.
1.4.3. Preparación de las muestras a ensayar.
Triturar la muestra de forma que el 95 % del producto pase a través de un tamiz de 1,0 mm. Solamente para algunas sustancias fibrosas, tales como
los granos de avena, no se alcanza tal grado de
finura.
Está prohibido el empleo de molinos de bolas.
1.4.4. Cantidad inicial de la muestra a ensayar.
La cantidad de muestra a tomar depende del contenido en materias celulósicas del producto de forma
que se obtenga finalmente una masa de materias
celulósicas del producto entre 50 y 150 mg. Para un
producto que contenga materias celulósicas en
7
8
cantidad inferior al 5%, tomar 3 g de sustancia y utilizar 60 ml de solución ácida; para un contenido en
materias celulósicas elevado, hacer hervir 102 g de
materia en 40 ml de mezcla disolvente.
1.4.5. Dosificación.
Pesar la muestra a ensayar triturada y ponerla en
suspensión en el matraz cónico Erlenmeyer con un
tercio de la solución ácida que debe corresponder a
20 veces el peso de la muestra. Deshacer los grumos con un agitador de vidrio que debe permanecer en el Erlenmeyer. Lavar cuidadosamente la
pared del Erlenmeyer con el resto de la solución
ácida para que no quede ninguna partícula de la
sustancia adherida a la pared. Para evitar que la
sustancia suba a lo largo de las paredes, acoplar
cuidadosamente el Erlenmeyer con el refrigerador
de reflujo. Calentar de forma que se alcance la temperatura de ebullición en tres minutos. Regular la
llama del mechero Bunsen para que la altura de la
espuma formada no sobrepase 10 mm. Mantener la
ebullición de la muestra durante 30 minutos exactamente, sin agitar el frasco ni la suspensión.
Filtrar a continuación bajo vacío la suspensión en
ebullición con ayuda de una trompa de agua y a través del crisol filtrante preparado. Regular el vacío
para asegurar la filtración continua. Lavar el Erlenmeyer y el agitador de vidrio con Agua PA-ACS y
caliente (de 70 a 80°C) y trasvasar totalmente los
residuos de materias celulósicas en el crisol filtrante
con ayuda de un agitador revestido de caucho. Son
necesarios, para un lavado cuidadoso y rápido, de
300 a 400 ml de Agua PA-ACS y caliente para obtener la reacción neutra (comprobar con papel tornasol en el agua de lavado filtrada).
Inmediatamente después del lavado, vaciar el
matraz de vacío. Llenar el crisol filtrante tres veces
con Acetona PA-ACS-ISO y dejar filtrar sin ayuda
del vacío (pero si el filtrado es demasiado lento,
aspirar ligeramente sin sobrepasar la velocidad de
una gota por segundo). Lavar a continuación dos
veces con Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO y aspirar fuertemente los vapores
residuales de éter. Secar previamente los crisoles filtrantes durante algunos minutos y pesarlos aproximadamente.
Secar los crisoles filtrantes en una estufa calentada a 130°C durante 60 minutos exactos, introducir a continuación cuatro crisoles como máximo en
un desecador y dejarlos enfriar algunos minutos
antes de poner la tapa. Dejar enfriar el desecador
cerrado durante una hora al lado de la balanza. En
el transcurso del enfriamiento y de la pesada, colocar dos cartuchos deshidratantes de Gel de Sílice
3-6 mm con indicador QP en la balanza de precisión. Pesar rápidamente (es por lo que hay que
conocer previamente el peso de los crisoles llenos
antes del secado).
Calcinar los crisoles filtrantes de cuarzo en el
horno eléctrico previamente calentado a 550°C,
durante 30 minutos, colocarlos a continuación
sobre una placa refractaria durante cinco minutos
por lo menos, para que se enfríen hasta 100°C,
aproximadamente. Introducir de nuevo cuatro crisoles como máximo en un desecador, dejándolos
enfriar al lado de la balanza durante una hora exactamente y pesar rápidamente.
Si se emplean crisoles filtrantes de vidrio, ponerlos en el horno frío, a fin de evitar las tensiones en la
parte inferior deslustrada. Después de alcanzar la
temperatura de 550°C, incinerar durante treinta
minutos, dejar enfriar los crisoles en el horno abierto hasta 200°C, colocarlos a continuación algunos
minutos sobre la placa refractaria para dejarlos
enfriar hasta 100°C, aproximadamente, y operar
después como para los crisoles filtrantes de cuarzo.
No es necesario hacer una prueba en vacío, ya
que todo el material filtrante es inalterable al calor
como consecuencia del tratamiento previo.
1.5. Cálculo.
El índice de materias celulósicas viene dado por
la expresión:
(a - b) x 100 x 100
C = ———————––––—
E (100 - H)
siendo:
C = índice de materias celulósicas en
porcentaje de materia seca.
a = peso, en g, del crisol y del residuo después
del ataque ácido y secado a 130°C
b = peso, en g, del crisol después de la
incineración del residuo.
E = peso, en g, de la muestra.
H = humedad de la muestra en porcentaje.
1.6. Observaciones.
1.6.1. En el caso de los cereales y productos
derivados, no es necesario extraer la grasa antes
del ataque ácido.
1.6.2. Los materiales filtrantes (crisoles filtrantes,
arena de mar, placas de porcelana, polvo de tierra
cocida) pueden ser utilizados nuevamente. Se separa
por tamizado la arena de mar del polvo de tierra cocida; no es necesario limpiar de nuevo con el ácido Clorhídrico los crisoles filtrantes, la arena de mar, el polvo
de tierra cocida y las placas filtrantes de porcelana.
1.6.3. El tiempo necesario para la determinación
del índice de materias celulósicas mediante el
empleo de crisoles filtrantes de cuarzo, es aproximadamente de cinco horas, y mediante los crisoles
filtrantes de vidrio alrededor de ocho horas.
1.7. Referencia.
1.7.1. International Association for Cereal Chemistry (I.C.C.) Standard Nr 113.
M
2. HUMEDAD
2.1. Principio.
El contenido en agua de un producto se define
convencionalmente como la pérdida de masa que
experimenta en condiciones determinadas.
El producto se seca a 130°C bajo presión atmosférica normal, durante una hora y media.
Este método de desecación a 130°C se aplica a
los granos, harinas y otros productos derivados de
los cereales, reducidos a partículas de dimensiones
inferiores o iguales a 1.700 µ, de las cuales, menos
del 10% serán superiores a 1.000 µ y más del 50%
inferiores a 500 µ.
2.2. Material y aparatos.
2.2.1. Balanza con precisión de 1 mg.
2.2.2. Aparato triturador que no provoque calentamiento, fácil de limpiar y que proporcione partículas de dimensiones especificadas en 2.1.
2.2.3. Pesafiltro metálico o de vidrio con tapadera, y con una superficie útil que permita un reparto
de la muestra de 0,3 g/cm3, como máximo.
2.2.4. Estufa isoterma de calefacción eléctrica,
regulada de tal manera que la temperatura del aire
en su interior sea de 130°C, y que tenga aireación
suficiente. La estufa tendrá una capacidad calorífica
tal que, regulada previamente a la temperatura de
130°C, puede alcanzar de nuevo esa temperatura
en menos de media hora, después de colocar
simultáneamente en su interior el número máximo
de muestras a desecar.
La eficacia de la ventilación se determinará con la
ayuda de sémola como material de ensayo que
tenga 1 mm como máximo de partícula. La ventilación será tal que secando simultáneamente a 130°C
todas las muestras que la estufa pueda contener,
primero durante dos horas y después durante tres
horas, los resultados presenten entre ellos una diferencia inferior a 0,15%.
2.2.5. Desecador provisto de placa de porcelana
o metálica perforada, conteniendo un agente deshidratante como 141154 di-Fósforo penta-Oxido
PRS, 141219 Calcio Cloruro anhidro, escoriforme
PRS o 211335 Gel de Sílice 3-6 mm con indicador
QP.
2.3. Procedimiento.
Introducir 5 g de la muestra en el pesafiltros,
tarado después de permanencia en la estufa y de
enfriamiento en el desecador. Cerrar el pesafiltros y
pesar con aproximación de 1 mg. Debe operarse
rápidamente.
Tener en la estufa durante hora y media el pesafiltros destapado con la muestra. Transcurrido este
tiempo, y operando rápidamente, retirar el pesafiltros de la estufa una vez tapado y colocarlo en el
desecador. Pesar en cuanto se enfríe en el desecador.
2.4. Cálculo.
2.4.1. El contenido en agua de la muestra, en
porcentaje, es:
(M - m) 100
Humedad % = ——————
M
en la que:
M = masa inicial, en g, de la muestra.
m = masa, en g, del producto seco.
La media de dos resultados, con una aproximación de 0,05% g, representará la humedad de la
muestra.
2.4.2. Dispersión de los resultados. La diferencia
resultante entre determinaciones duplicadas de la
misma muestra no deberá ser mayor de 0,1% en
valor absoluto. En caso contrario, se repetirá la
determinación por duplicado.
2.5. Referencia.
2.5.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una Norma Española 34.400 h 5.
2.5.2. Métodos de la Asociación Internacional de
Química Cerealista (I.C.C.).
3. CENIZAS
3.1. Principio.
3.1.1. Definición. El contenido en cenizas de un
producto es el residuo resultante después de su
incineración en condiciones determinadas.
Este método es aplicable a los granos, harinas y
otros productos derivados de los cereales.
3.2. Material y aparatos.
3.2.1. Balanza analítica con precisión de 0,1 mg.
3.2.2. Horno de mufla eléctrico, con circulación
de aire suficiente, con mecanismo de regulación y
control de temperatura.
3.2.3. Cápsulas de incineración redondas de
fondo plano, preferiblemente de aleación de oro y
platino, o bien de cuarzo o de porcelana. El diámetro de las cápsulas será de unos 5 cm, y la altura
máxima de 2 cm.
3.2.4. Desecador provisto de llave, con placa perforada de aluminio, conteniendo un agente deshidratante como 141154 di-Fósforo penta-Oxido PRS,
141219 Calcio Cloruro anhidro, escoriforme PRS ó
211335 Gel de Sílice 3-6 mm con indicador QP.
3.3. Procedimiento.
Pesar 5 g de muestra con aproximación de 10
mg; las restantes pesadas deben hacerse con una
aproximación de 0,1 mg.
Inmediatamente antes de usar las cápsulas de
incineración, calentarlas en el horno a la temperatu-
9
ra de 910°C durante 15 minutos. Enfriarlas en el
desecador y pesarlas en cuanto alcancen la temperatura ambiente.
Introducir la muestra pesada en la cápsula repartiéndola en una capa de espesor uniforme, sin comprimirla. Colocar la cápsula a la entrada del horno
con la puerta abierta, y dejar que arda. Cuando las
llamas se extingan, empujar la cápsula al interior del
horno y cerrar la puerta del mismo. Una vez cerrada la puerta del horno debe mantenerse en él una
corriente de aire suficiente, que no sea tan fuerte
como para arrastrar la sustancia fuera de las cápsulas.
La incineración se continúa hasta lograr la combustión total de la muestra, incluso de las partículas
carbonosas que pueden quedar incrustadas en las
cenizas. Dar por terminada la incineración cuando el
residuo es prácticamente blanco o gris después del
enfriamiento. Sacar las cápsulas del horno y dejarlas enfriar en el desecador. Pesarlas tan pronto
alcancen la temperatura ambiente.
La temperatura de incineración es de 910°C.
3.4. Cálculo.
3.4.1. El porcentaje de cenizas sobre materia
natural se obtiene por la formula siguiente:
(P1 - P2) 100
Cenizas % (materia natural) = ———————
P - P1
en la que:
P = peso en g de la cápsula con la muestra.
P1 = peso en g de la cápsula con las cenizas.
P2 = peso en g de la cápsula vacía.
3.4.2. El porcentaje de cenizas sobre material
seco se obtiene relacionando el valor de contenido
en cenizas obtenido sobre materia natural con el
valor de contenido en humedad, según la formula
siguiente:
Cenizas %
(materia seca)
Cenizas sobre
x 100
materia natural
4. PROTEINA
4.1. Principio.
El contenido en proteína bruta de un producto es
el resultado de multiplicar el contenido en nitrógeno,
determinado por el procedimiento Kjeldahl por un
factor de transformación del nitrógeno en proteína.
Este método es aplicable a los granos, harinas y
otros derivados de los cereales.
4.2. Material y aparatos.
4.2.1. Matraces Kjeldahl de 500 a 800 ml.
4.2.2. Batería de ataque.
4.2.3. Batería de destilación o aparato de destilación.
4.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV
131074 Agua PA-ACS
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
121085 Etanol 96% v/v PA
131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO
171618 Rojo de Metilo solución 0,1% RE
171690 Sodio Hidróxido solución 30% p/v RE
181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N)
indicador Azul de Bromofenol SV
4.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
4.3.2. Potasio Sulfato PA-ACS-ISO.
4.3.3. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO.
4.3.4. Sodio Hidróxido solución 30% p/v RE.
4.3.5. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.
4.3.6. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) indicador
Azul de Bromofenol SV.
4.3.7. Disolución de indicador. Disolver 0,3 g de
Rojo de Metilo solución 0,1% RE en 100 ml de Etanol 96% v/v PA.
= —————––––––––––––––—————
100 -
10
3.5. Referencias.
3.5.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una Norma Española 34.400 h 8.
3.5.2. Métodos de la Asociación Internacional de
Química Cerealista (I.C.C.).
humedad de
la harina
3.4.3. Límite de errores. Cuando el contenido de
cenizas no rebase el 1% de la muestra, la diferencia
de los resultados de un ensayo efectuado por duplicado no deberá ser superior al 0,02. Si el contenido
de cenizas rebasa el 1%, la diferencia no deberá ser
superior al 2% de dicho contenido. Si es superior,
se repetirá la determinación.
3.4.4. Expresión de los resultados. El contenido
de cenizas se expresa por 100 partes de sustancia
seca y con dos cifras decimales.
4.4. Procedimiento.
Pesar un g de muestra, molida de forma que las
partículas sean inferiores a 500 µ, e introducirla en
un matraz Kjeldahl. Añadir 10 g de Potasio Sulfato
PA-ACS-ISO y 0,1 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato
PA-ACS-ISO. Agregar 20 ml de Acido Sulfúrico 96%
PA-ISO y mezclar todo hasta que toda la sustancia
esté mojada por el ácido. Iniciar el ataque a fuego
lento, para evitar que la espuma arrastre el producto al cuello del matraz. Cuando desaparezca la
espuma, hacer hervir vigorosamente hasta que la
disolución quede limpia y prolongar todavía el ataque otros 30 minutos.
M
Dejar enfriar. Añadir unos 200 ml de Agua PAACS. Agregar 80 ml de Sodio Hidróxido solución
30% p/v RE y proceder al destilado. El líquido que
destila se recoge en un vaso que contiene 20 ml de
Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV y una gota de
disolución de Rojo de Metilo, añadiéndose nuevamente una cantidad conocida de Acido Sulfúrico
0,05 mol/l (0,1N) SV si virase de color durante la
destilación. La cantidad de destilado a recoger es
de unos 150 ml, dándose por acabada la destilación cuando el líquido que se destila no haga virar a
azul el papel rojo de tornasol.
Acabada la destilación, valorar el exceso de
Acido Sulfúrico con disolución valorada de Sodio
Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) indicador Azul de Bromofenol SV.
Efectuar una prueba en blanco de destilación y
valoración para controlar la pureza de los reactivos.
4.5. Cálculo.
4.5.1. El porcentaje de proteína bruta sobre sustancia natural es:
(V x f - V1 x f1) 0,014 x F x 100
Proteína bruta % = ——————————————
P
en la que:
V = volumen en ml de disolución de ácido sulfúrico 0,1N empleado para recoger el nitrógeno amoniacal destilado.
f = factor de la disolución de ácido sulfúrico
0,1N.
V1 = volumen en ml de disolución de sodio
hidróxido 0,1N necesario para neutralizar el
ácido sulfúrico existente al final de la
destilación.
f1 = factor de la disolución de sodio hidróxido
0,1N.
F = factor de transformación de nitrógeno en
proteína. Para el trigo y derivados es de 5,7
y para los restantes cereales es de 6,25.
P = peso de la muestra.
4.5.2. El porcentaje de proteína bruta sobre sustancia seca se determina teniendo en cuenta el contenido en humedad.
4.5.3. Dispersión de los resultados. Se considerarán concordantes las determinaciones duplicadas
cuando los resultados expresados en porcentaje
difieran en menos de 0,25.
4.6. Referencias.
4.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una Norma Española 24.400 h 7.
4.6.2. Métodos de la Asociación Internacional de
Química Cerealista (I.C.C.).
5. GRASA
5.1. Principio.
El contenido en grasa bruta de un producto se
define convencionalmente como la parte del mismo
extraíble por éter etílico en condiciones determinadas. Incluye, además de la grasa, otras muchas
sustancias solubles en éter etílico, como son: ceras,
pigmentos, vitaminas, etc.
Este método es aplicable a los granos, harinas y
otros productos derivados de los cereales.
5.2. Material y aparatos.
5.2.1. Extractor tipo Soxhlet.
5.2.2. Balanza analítica con precisión de 0,1 mg.
5.2.3. Estufa de desecación, graduada a 100°C.
5.2.4. Desecador con placa de porcelana o
metálica perforada, conteniendo un agente deshidratante, como anhídrido fosfórico o silicagel.
5.2.5. Cartuchos de extracción.
5.2.6. Matraces de 100 a 150 ml, adaptable al
extractor.
5.2.7. Batería de extracción, baño de agua.
5.3. Reactivos.
132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
5.4. Procedimiento.
Pesar de 5 a 10 g de muestra, molida de forma
que pase por un tamiz de 500 µ y desecada a
100°C, e introducirlos en un cartucho que se tapona con algodón. Tarar el matraz, desecado en la
estufa y enfriado en el desecador. Introducir el cartucho en el extractor, añadir Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO una vez
conectado el matraz y proceder a la extracción,
continuándola hasta que el éter sea incoloro; son
suficientes 4 horas a una velocidad de destilación
de 4 a 5 gotas/s, y 16 horas para 2 a 3 gotas/s.
Sacar el cartucho del extractor y recuperar el
éter. Llevar el matraz con el extracto y el resto del
disolvente a la estufa de desecación a 100°C y
tenerlo media hora. Dejar enfriar el matraz en el
desecador y, en cuanto alcance la temperatura
ambiente, pesarlo.
5.5. Cálculo.
El porcentaje de grasa bruta sobre sustancia
seca viene dado por la fórmula:
(P1 - P2) x 100
Grasa bruta % (materia seca) = ———————
P
en la que:
P1 = peso, en g, del matraz con el extracto
etéreo.
P2 = peso, en g, del matraz vacío.
11
P = peso, en g, de la muestra empleada.
6.2.5. Mechero Bunsen y trípode.
5.6. Referencia
5.6.1. American Association of Cereal Chemists.
Cereal Laboratory Methods, 1967. Método 30-20.
6.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
251170 Azul de Metileno (C.I. 52015) DC
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
131724 Sodio Tungstato 2-hidrato PA-ACS
6. INDICE DE MALTOSA
6.1. Principio.
El índice de maltosa es una medida relacionada
con la capacidad de producción de gas de un trigo.
6.2. Material y aparatos.
6.2.1. Matraz Erlenmeyer con tapón de 250 ml.
6.2.2. Baño de agua.
6.2.3. Bureta graduada de 50 ml de capacidad.
6.2.4. Matraz Erlenmeyer de 100 ml.
6.3.1. Acido Sulfúrico al 20%. Diluir Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS, hasta la concentración indicada.
6.3.2. Sodio Tunsgtato al 15%. Disolver Sodio
Tungstato 2-hidrato PA-ACS en Agua PA-ACS y
ajustar a la concentración indicada.
TABLA 6.1
12
Indice de maltosa
———————————————————————————————————————————————
Líquido
Indice
Líquido
Indice
vertido
de maltosa
vertido
de maltosa
———————————————————————————————————————————————
20,0
2,69
35,5
1,49
20,5
2,63
36,0
1,47
21,0
2,56
36,5
1,46
21,5
2,50
37,0
1,45
22,0
2,44
37,5
1,42
22,5
2,38
38,0
1,40
23,0
2,33
38,5
1,38
23,5
2,28
39,0
1,36
24,0
2,23
39,5
1,34
24,5
2,18
40,0
1,32
25,0
2,14
40,5
1,30
25,5
2,10
41,0
1,29
26,0
2,06
41,5
1,27
26,5
2,02
42,0
1,26
27,0
1,99
42,5
1,24
27,5
1,95
43,0
1,23
28,0
1,91
43,5
1,21
28,5
1,87
44,0
1,20
29,0
1,84
44,5
1,18
29,5
1,80
45,0
1,17
30,0
1,77
45,5
1,16
30,5
1,74
46,0
1,15
31,0
1,72
46,5
1,13
31,5
1,69
47,0
1,12
32,0
1,66
47,5
1,11
32,5
1,63
48,0
1,10
33,0
1,61
48,5
1,09
33,5
1,58
49,0
1,08
34,0
1,56
49,5
1,06
34,5
1,54
50,0
1,05
35,0
1,52
———————————————————————————————————————————————
M
6.3.3. Solución de Sulfato de Cobre (69,28 g/l).
Disolver Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS y ajustar a la concentración indicada.
6.3.4. Solución de 350 g de sal de Seignette
(Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO) y
100 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO en
1 l de Agua PA-ACS.
6.3.5. Indicador: Azul de Metileno (C.I. 52015)
DC al 1% en Agua PA-ACS.
7.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131192 Benceno PA-ACS-ISO
121085 Etanol 96% v/v PA
131315 Eter de Petróleo 40-60°C PA-ISO
131325 Fenolftaleína PA-ACS
131500 Potasio Dicromato PA-ISO
121515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA
131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
6.4. Procedimiento.
Pesar 15 g de harina y colocarlos en un matraz
Erlenmeyer con tapón. Añadir 95 ml de Agua PAACS e introducir el matraz en un baño de agua
manteniendo a 27°C de temperatura. Dejar en el
baño durante una hora, agitar bien a intervalos de
15 minutos. Sacar el matraz del baño y añadir 15 ml
de Acido Sulfúrico al 20% y 3,5 ml de Sodio Tungstato al 15%. Filtrar. Prescindir del residuo y colocar
el líquido en una bureta graduada de 50 ml de capacidad. Introducir en un matraz Erlenmeyer 5 ml de
solución de Cobre II Sulfato (69,28 g/l) y 6 ml de una
solución de 350 g de sal de Seignette (Potasio
Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO) y 100 g de
Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO en un litro de
agua. Colocar el matraz en un trípode sobre un
mechero Bunsen y verter en él desde la bureta
20 ml del líquido filtrado. Cuando hierva, añadir 5
gotas de indicador (solución acuosa de Azul de
Metileno al 1%). Verter gradualmente líquido desde
la bureta hasta que la solución del matraz ha perdido por completo la coloración azul. Observar en la
probeta la cantidad de líquido vertido y buscar en la
tabla 6.1 el índice de maltosa de la harina.
7.3.1. Eter de Petróleo 35-60°C. En su defecto,
utilícese Eter de Petróleo 40-60°C PA-ISO.
7.3.2. Benceno-alcohol-Fenolftaleína (BAF).
Mezclar partes iguales en volumen de Benceno PAACS-ISO, y de Etanol 96% v/v PA. Añadir 0,2 g de
Fenolftaleína PA-ACS por litro para obtener una
solución al 0,02%.
7.3.3. Potasio Hidróxido. Preparar una solución
0,0178N (1 ml = 1 mg de KOH) con Potasio Hidróxido 85% lentejas PA libre de CO2.
7.3.4. Patrón de color.
7.3.4.1. Colocar 50 ml de Agua PA-ACS en un
matraz del mismo tipo en que se va a hacer la valoración. Añadir gota a gota una solución de Potasio
Dicromato al 0,05% hasta que tome la coloración
de la solución que se va a valorar. Añadir 2,5 ml de
una solución recién preparada de Potasio Permanganato al 0,01% y se mezcla. El color final de la
valoración debe ser semejante a éste.
7.3.4.2. El color patrón para la valoración de la
prueba en blanco se obtiene añadiendo 2,5 ml de
Potasio Permanganato al 0,01% de 50 ml de Agua
PA-ACS.
6.5. Referencia.
6.5.1. Análisis de Cereales y Derivados. Ministerio de Agricultura, 1957, páginas 56-57.
7.4. Procedimiento.
Para que los resultados sean más precisos, el
contenido en humedad de los granos no debe
exceder del 11%. Se ha comprobado que mayores
contenidos en humedad en el momento de la
extracción aumentan significativamente los valores
de acidez grasa.
Moler por lo menos 40 g de una muestra representativa para granos pequeños, tales como el
trigo, o 200 g para granos más grandes, tales como
el maíz. Preferiblemente, moler la muestra de tal
forma que el 90% o más pase a través del tamiz de
500 m. Una vez molida la muestra se somete a
extracción antes de 1 hora para evitar cambios causados por enzimas lipolíticos. Extraer 10 g de muestra sólida, como en 5.4., utilizando Eter de Petróleo
35-60°C. Evaporar el Eter de Petróleo 35-60°C del
extracto y redisolver el extracto en el matraz de
extracción con 50 ml de solución BAF. Valorar la
solución extraída con Potasio Hidróxido 0,0178N
hasta alcanzar el punto de color patrón.
7.4.1. Hacer la prueba en blanco valorando 50 ml
de solución BAF, hasta alcanzar el punto de color
patrón 7.3.4.2.
7. ACIDEZ GRASA
7.1. Principio.
Neutralización de los ácidos grasos libres con
sodio hidróxido. Se mide la rancidez hidrolítica que
se utiliza como índice de deterioro en almacenamiento.
Aplicable a granos de cereales y harinas.
7.2. Material y aparatos.
7.2.1. Extractor tipo Soxhlet.
7.2.2. Balanza analítica con precisión de 0,1 mg.
7.2.3. Cartuchos de extracción.
7.2.4. Matraces de 100 a 150 ml adaptables al
extractor.
7.2.5. Batería de extracción con baño de agua.
7.2.6. Pipetas de 50 ml.
7.2.7. Bureta de 50 ml.
13
7.5. Cálculo.
Expresar la acidez grasa como los mg de potasio hidróxido requeridos para neutralizar los ácidos
grasos libres de 100 g de granos sobre sustancia
seca por la fórmula:
(V - V1) x 10 x 100
Valor acidez grasa = ——————————
100 - H
donde:
V = volumen en ml de potasio hidróxido
0,0178N utilizado para valorar la muestra
extraída.
V1 = volumen en ml de potasio hidróxido
0,0178N utilizado para la valoración en
blanco.
H = peso en g de agua en 100 g de muestra.
7.6. Observaciones.
En caso de granos con altos valores de acidez
grasa se forman a veces emulsiones durante la
valoración que enmascaran parcialmente el punto
de color final. Cuando aparecen emulsiones, añadir
50 ml adicionales de solución BAF para asegurar
una solución clara. En este caso el valor de la prueba en blanco es el doble del valor determinado
sobre 50 ml.
7.7. Referencia.
7.7.1. American Association of Cereal Chemistry
Cereal Laboratory Methods, 1967. Método 02-01.
8. AGENTES OXIDANTES
(Reacción con Potasio Yoduro)
8.1. Principio.
Este método detecta todos los agentes oxidantes que se adicionan generalmente a la harina, para
mejorar sus propiedades de panificación, excepto
perclorato y benzoilo peróxido.
8.2. Material y aparatos.
8.2.1. Matraz Erlenmenyer de 500 ml.
8.2.2. Centrífuga.
8.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
171543 Potasio Yoduro solución 10% p/v RE
14
8.3.1. Potasio Yoduro solución 10% p/v RE.
8.3.2. Solución de Potasio Yoduro solución 10%
p/v RE y Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (1+10) v/v.
8.4. Procedimiento.
Colocar 50 g de muestra en un matraz Erlenmeyer de 500 ml, añadir 200 ml de Agua PA-ACS a la
temperatura ambiente, agitar bien y dejar reposar 1
hora, aproximadamente, con agitados frecuentes.
Filtrar o centrifugar. A 5 ml del filtrado añadir 5 ml de
solución de Potasio Yoduro solución 10% p/v RE y
5 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (1+10) v/v.
Soluciones amarillas o pardas indican la presencia
de agentes oxidantes.
8.5. Referencia.
8.5.1. American Association of Cereal Chemistry,
Cereal Laboratory Methods. 1967. Método 48-02.
9. BROMATOS Y YODATOS EN
LA HARINA
(Método cualitativo)
9.1. Principio.
Este método sirve para determinar la presencia
de bromato y yodato en la harina, que actúan como
mejorantes.
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Placa de Petri de un área aproximada de
100 cm2.
9.2.2. Tamiz número 60.
9.3. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
131534 Potasio Tiocianato PA-ISO
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
9.3.1. Para el bromato y yodato solución de
Acido Clorhídrico 35% PA-ISO en Agua PA-ACS
(1+7) v/v y Potasio Yoduro PA-ISO (1%) mezclados
a volúmenes iguales.
9.3.2. Para yodato solución de 1 volumen de
Potasio Tiocianato PA-ISO (1%) y 4 volúmenes de
solución de Acido Clorhídrico 35% PA-ISO en Agua
PA-ACS (1+32) v/v mezclados.
9.4. Procedimiento.
9.4.1. Bromatos y yodatos.
Cubrir el fondo del recipiente con el reactivo Potasio
Yoduro-Acido Clorhídrico. Cerner uniformemente
con el tamiz número 60 sobre el reactivo, aproximadamente 4 g de harina a ensayar. Alternativamente,
cerner harina sobre la superficie del recipiente seco
y esparcir la mezcla de reactivo sobre la harina con
un frasco pulverizador hasta que todas las partículas estén humedecidas. La aparición de manchas
negras o purpúreas después de la adición del reactivo indica la presencia de bromato o yodato.
9.4.2. Yodatos.
9.4.2.1. (Aplicable a 10 ppm o más). Distribuir
suavemente, aproximadamente, 1 g de harina sobre
el fondo de una placa de Petri y cubrir completa-
M
mente con el reactivo Potasio-Sulfocianuro-Acido
Clorhídrico recientemente preparado.
9.4.2.2. (Aplicable a 1-10 ppm). Proceder como
para bromatos y yodatos, pero usar el reactivo
Potasio-Sulfocianuro-Acido Clorhídrico.
9.5. Referencia.
9.5.1. Association of Official Agricultural Chemists. Official Methods of Analysis. 1970. 14.040 y
14.041, pág. 218.
10. BENZOILO PEROXIDO
(Método cualitativo con bencidina)
10.1. Principio.
El benzoilo peróxido da con solución etánolica de
bencidina, coloración pardo-verdosa.
10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Placa de vidrio.
10.2.2. Pulverizador.
10.3. Reactivos.
121085 Etanol 96% v/v PA
Bencidina
10.3.1. Disolver 1,5 g de Bencidina (base libre)
en 50 ml de Etanol 96% v/v PA. Calentar la solución
a 50-60°C en un baño de agua antes de usarla.
10.4. Procedimiento.
Verter el reactivo sobre una capa de harina en una
placa de vidrio. Si aparecen manchas pardo-verdosas
indica que la harina está tratada con benzoilo peróxido. Observar mejor las manchas por detrás del vidrio
y, en general, verter el reactivo pulverizando.
10.5. Referencia.
10.5.1. American Association of Cereal Chemists.
Cereal Laboratory Methods, 1967. Método 48-05.
11.3.1. Suspensión de levadura panaria. Formar
una papilla espesa con 10 g de levadura y Agua PAACS, añadiendo más agua hasta completar 100 ml.
11.4. Procedimiento.
Pesar 10 g de trigo molido que pase por el tamiz
de 1 mm y colocarlo en una cápsula de porcelana.
Añadir 5,5 ml de la suspensión de levadura y amasar con una espátula. Dividir la masa en dos partes
aproximadamente iguales y darle forma de bola
compacta entre las palmas de las manos.
Introducir las bolas así formadas en sendos
vasos de forma baja de 150 ml, que contenga 75 ml
de agua a 32°C. Colocar los vasos en un baño de
agua a dicha temperatura. Por la acción de los
gases producidos en la fermentación, las bolas
suben a la superfície, en la cual permanecen un
tiempo variable, hasta que rompen y caen pedazos
al fondo del vaso.
11.5. Cálculo.
Medir el tiempo en minutos transcurridos desde
el momento de introducir la bola en el vaso hasta
que se produce la disgregación. La media de las
dos determinaciones constituye el “índice de Pelshenke”.
11.6. Referencias.
11.6.1. Análisis de Cereales y Derivados. Ministerio de Agricultura, 1057, pág. 35.
11.6.2. American Association of Cereal Chemists
Cereal Laboratory Methods, 1967. Método 56-50.
12. GLUTEN
12.1. Principio.
Complejo de proteínas insolubles en agua que
forman, por arrastre del almidón de la harina
mediante lavado, una masa gomosa muy extensible.
Este método se aplica para la determinación del
contenido en gluten de la harina de trigo y sémolas.
11. INDICE DE PELSHENKE
11.1. Principio.
El índice de Pelshenke proporciona una valoración indirecta de la calidad panadera de los trigos,
estando relacionado tanto con la capacidad de producción de gas como con la capacidad de retención del mismo.
11.2. Material y aparatos.
11.2.1. Baño de agua.
11.2.2. Vasos de forma baja de 150 ml.
11.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Levadura
12.2. Material y aparatos.
12.2.1. Balanza con precisión de 0,01 g.
12.2.2. Extractor de gluten con disco excéntrico
y mecanismo tensor para gasa de seda; velocidad
del disco excéntrico 80 r.p.m.
12.2.3. Recipiente para agua con gasto regulable.
12.2.4. Cronómetro.
12.2.5. Tamiz de madera, de 30 por 40 cm, con
gasa para sémola número 56.
12.2.6. Placa de vidrio esmerilado 40 x 40 cm.
12.2.7. Guantes de caucho delgado y de superficie lisa.
12.2.8. Prensa para gluten, sistema Berliner, con
distancia entre placas de 2,4 mm.
15
12.2.9. Cápsula de porcelana barnizada interiormente o de metal esmerilado, de 10 a 15 cm de diámetro.
12.2.10. Espátula de 18 a 20 cm de longitud.
12.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
di-Sodio Hidrógeno Fosfato 2-hidrato
141771 Yodo resublimado perlas
(USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
12.3.1. Disolución al 2% de Sodio Cloruro (pH
6,2). Disolver 200 g de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO,
en 10 litros de Agua PA-ACS. Añadir 7,54 g de
Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO y 1,40 g
de di-Sodio Hidrógeno Fosfato 2-hidrato, de calidad
reactivo para análisis. La disolución se preparará
cada día que se utilice.
12.3.2. Solución de Yodo, aproximadamente
N/1000; sirve para comprobar la presencia de almidón. Preparar diluyendo Yodo resublimado perlas
(USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX en Agua PA-ACS y
ajustar a la concentración indicada.
16
12.4. Procedimiento.
Pesar 10 g de harina con una aproximación de
± 0,01 g y colocarla en una cápsula de porcelana.
Añadir gota a gota 5,5 ml de disolución de Sodio
Cloruro removiendo continuamente la harina con la
espátula. Después de haber añadido a la harina
toda la disolución de Sodio Cloruro, comprimir la
mezcla cuidando de no perder nada de harina. La
masa adherida a la pared de la cápsula se añade a
la bola de masa.
Homogeneizar la masa enrollándola con la palma
de la mano sobre la placa de vidrio esmerilado hasta
que tenga una longitud de 7 a 8 cm, volviéndola a
dar entonces la forma de bola y se repite el amasado en la misma forma hasta un total de cinco veces.
La mano que efectúa la homogeneización estará
revestida de un guante de caucho que proteja la
masa del calor y de la transpiración de la mano.
Colocar la bola de masa sobre la gasa de seda
ligeramente tensa del extractor de gluten. Mojar la
masa con unas gotas de solución de Sodio Cloruro,
colocando luego en su sitio el disco excéntrico.
Lavar durante 10 minutos, debiéndose gastar unos
400 ml de solución de Sodio Cloruro.
Cuando no se disponga del aparato extractor de
gluten, se sustituirá el anterior paso por un lavado a
mano. Para ello, dejar caer gota a gota la solución
de Sodio Cloruro, que debe tener una temperatura
de 18°C, sobre la palma de la mano. El ritmo de
goteo debe ser tal que aproximadamente 0,75 litros
de la disolución desagüe en 8 minutos. Durante
este tiempo arrollar y prensar alternativamente la
masa y estirarla siete veces de forma que se parta
en dos trozos que se juntan enseguida. La duración
del lavado depende del contenido de la masa en
gluten; sin embargo, debe ser aproximadamente la
misma siempre y no rebasar los 8 minutos.
Al lavado mecánico del gluten sigue un lavado a
mano cuya duración, en general, no debe exceder
de 2 minutos. Se puede considerar terminada la
extracción de gluten tan pronto como el amasar la
bola de gluten con la disolución fresca de Sodio
Cloruro no se encuentren más que trazas de almidón en el agua escurrida. Para comprobar la presencia de almidón en el líquido de lavado, utilizar
una disolución de Yodo 0,001N.
Desprender de la bola de gluten la mayor parte
de la disolución de lavado adherente cogiendo el
gluten con la punta de los dedos de una mano y
sacudiéndolo tres veces brevemente, pero con fuerza. Estirar a continuación, suavemente, el gluten en
lámina delgada, manteniéndolo entre los dedos, y
llevarlo a la prensa, cerrando ésta. Abrirla a los 5
segundos y pasar la lámina de gluten a posición
seca sin deformarla. Prensarla otra vez. Hacer esta
operación quince veces, secando bien las superficies de vidrio después de cada prensada.
Pesar el gluten en la balanza con aproximación
de 0,01 g.
12.5. Cálculo.
12.5.1. Gluten húmedo. El peso obtenido multiplicado por diez da el porcentaje de gluten húmedo.
Las determinaciones duplicadas se consideran concordantes cuando no difieran en más de 0,5% de
contenido en gluten. Si la desviación es mayor,
hacer una tercera determinación y tomar la medida
de las tres efectuadas como expresión del contenido en gluten. Si la desviación hallada entre los valores más alto y más bajo en los tres ensayos es
mayor del 1%, proceder a hacer una cuarta determinación.
12.5.2. Gluten seco. La bola de gluten húmedo
obtenida en la determinación anterior se deseca en
la estufa a temperatura de 100°C hasta peso constante. Dejarla enfriar y pesar.
El peso obtenido multiplicado por diez da el porcentaje de gluten contenido en la harina.
12.6. Referencia.
12.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una Norma Española 34.400 h 6.
12.6.2. Métodos de la Asociación Internacional
de Química Cerealista (I.C.C.).
13. FARINOGRAFO BRABENDER
13.1. Principio.
El método se aplica para la determinación de la
absorción de agua y el comportamiento al amasado
M
de una harina de trigo. El farinógrafo mide y registra
la resistencia de una masa al amasado. Esta resistencia se llama consistencia. La absorción de agua
se define como el porcentaje de agua respecto al
peso de harina que es necesario añadir para obtener una masa de consistencia determinada.
13.2. Material y aparatos.
13.2.1. Farinógrafo Brabender con tanque de circulación de agua.
Calibración del farinógrafo:
Velocidad de la paleta rápida: 90 ±3 r.p.m.
Par: 100 ±2 g cm/U.B.
Velocidad del papel: 1,00 ±0,03 cm/min.
Bureta graduada de 135 ml a 225 ml.
13.2.2. Balanza de sensibilidad : ±0,1 g.
13.2.3. Espátula de plástico blanco.
13.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
13.3.1. Agua PA-ACS.
13.4. Procedimiento.
Determinar el contenido de humedad de la harina
como en 2. Hacer circular el agua por el termostato
y el farinógrafo al menos 1 hora antes de usar el instrumento. Durante el ensayo, la temperatura del
Agua PA-ACS y de la amasadora deberá ser de 30
±0,2.
Lubricar la amasadora con una gota de Agua PAACS entre la pared posterior y cada una de las paletas. Ajustar la posición de los pesos de la balanza
para obtener una deflección cero del indicador con
las paletas girando en vacío. Ajustar el brazo de la
pluma de tal forma que coincidan las lecturas en el
sector de la balanza y en el papel móvil. Ajustar el
amortiguador de tal manera que con el motor girando el tiempo requerido por el indicador de la balanza para ir de 1.000 a 100 U.B. sea de 1,0 ±0,2 s.
Poner en la amasadora el peso equivalente a 300
±0,1 g de harina con el 15% de humedad. Tapar la
amasadora. Llenar la bureta con Agua PA-ACS a
30° ±5°.
Si fuese necesario, llevar la harina a 30° ±10°.
Colocar el papel de tal manera que la pluma esté en
contacto con una línea de 9 min. Mezclar durante 1
minuto. Comenzar a añadir Agua PA-ACS de la
bureta en la esquina delantera de la derecha de la
amasadora cuando la pluma cruce la línea de 0
minutos. Añadir Agua PA-ACS en cantidad suficiente para que la consistencia máxima de la masa sea
de 500 U.B.
Cuando la masa se adhiera a las paredes de la
amasadora, rasparla con una espátula de plástico.
Cubrir la amasadora hasta el final del ensayo.
Si la cantidad de Agua PA-ACS utilizada en el
ensayo no se ha añadido en un intervalo de 25
segundos o si la consistencia máxima de la masa
difiere de 500 ±20 U.B., se repite el ensayo corri-
giendo la cantidad de Agua PA-ACS y añadiéndola
en 25 segundos de forma que la masa adquiera una
consistencia máxima de 500 ±20 U.B.
Una vez alcanzada la consistencia máxima, continuar el ensayo durante 12 minutos.
13.5. Cálculo.
13.5.1. Absorción de agua. Calcular la absorción
de agua sobre una base del 15% de humedad
como sigue:
V + P - 300
Absorción de agua % = ——————
3
V = volumen en ml de agua añadida para
obtener una masa con una consistencia
máxima de 500 U.B.
P = peso en g de harina utilizada, equivalente a
300 g con el 15% de humedad.
Determinar la absorción con una aproximación
del 0,1%.
13.5.2. Tiempo de desarrollo. Es el período comprendido desde el comienzo del amasado hasta el
punto de la curva inmediatamente anterior al primer
signo de decaimiento. Expresar este tiempo con
una aproximación de 0,5 minutos. En el caso, poco
frecuente, de que aparezcan dos máximos, emplear el segundo para medir el tiempo de desarrollo.
13.5.3. Grado de decaimiento. Es la diferencia
en U.B. entre el centro de la curva en el máximo y el
centro de la curva 12 minutos después de este
máximo. Expresar el decaimiento con una aproximación de 5 U.B.
13.6. Observaciones.
Se obtienen los siguientes valores para el coeficiente de variación de la determinación simple
correspondiente a un solo farinógrafo:
Absorción de agua ......................... 0,55 %
Tiempo de desarrollo de la masa ... 8,9 %
Grado de decaimiento .................... 7,5 %
13.7. Referencia.
13.7.1. Métodos de la Asociación Internacional
de Química Cerealista (I.C.C.).
14. ALVEOGRAFO CHOPIN
(Provisional)
14.1. Principio.
En el ensayo con el alveógrafo, la masa se
extiende bidimensionalmente formando un alveolo,
por efecto de la fuerza debida a la presión del aire
que se insufla por debajo de una lámina de masa
obtenida en condiciones normalizadas. Con este
ensayo se imita a gran escala la formación de alveolos en el seno de la masa por el anhídrido carbó-
17
nico producido por las levaduras durante la fermentación.
Las dimensiones y la forma de las curvas obtenidas y el volumen del alveolo en el momento de la
rotura son una guía de las características de panificación de la harina.
14.2. Material y aparatos.
14.2.1. Alveógrafo de Chopin (con depósito de
circulación de agua).
Calibración del alveógrafo:
Velocidad de la paleta amasadora : 60 ±3 r.p.m.
Altura de las guías : 1,2 ±0,1 cm.
Diámetro del rodillo: 3,3 ±0,07 cm; 4,0 ±0,10 cm.
Diámetro del cortador: 4,55 ±0,05 cm.
Diámetro de la pieza de masa antes del ensayo:
5,50 ±0,05 cm.
Volumen de la pera de goma : 20 ±5 ml.
Volumen de la bureta: 625 ±3 ml.
Flujo de agua en la bureta: 23,0 ±0,5 s.
Velocidad del papel, 0,30 cm: 55 ±1 s o 0,55
±0,01 cm/s.
14.2.2. Bureta de 200 ml de capacidad.
14.2.3. Balanza de la sensibilidad ±0,1 g.
14.2.4. Matraz Erlenmeyer 250 ml.
14.2.5. Reloj avisador.
14.2.6. Planímetro.
14.3. Reactivos.
Aceite de Cacahuete
131074 Agua PA-ACS
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
14.3.1. Solución de Sodio Cloruro. Disolver 25 g
de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO, en Agua PA-ACS y
llevar hasta 1 litro.
14.3.2. Aceite de cacahuete.
18
14.4. Procedimiento.
Determinar el contenido de humedad de la harina
como en 2.3.
Si fuese necesario, llevar la temperatura de la
harina a 20° ±5°. Poner el termostato en funcionamiento con antelación suficiente para asegurar que
durante el ensayo la temperatura de la amasadora y
del alveógrafo sea de 25 ° ±0,2°. Antes y durante el
ensayo, comprobar las temperaturas.
Verter de la bureta al matraz Erlenmeyer el volumen de solución de Sodio Cloruro equivalente a
50 ml por cada 1.000 g de harina con el 15,0% de
humedad. Este volumen puede encontrarse en la
tabla 14.1.
Poner en la amasadora 250 ±0,1 g de harina y
colocar el suplemento de la amasadora en su posición. Poner en marcha el motor de la amasadora en
su posición de marcha adelante, poner en marcha
el reloj y añadir a la harina la solución de Sodio Cloruro vertiéndola sobre el eje de la paleta amasadora. Esta adición deberá hacerse en 15 segundos.
Esperar a que se forme la masa. Después de 60
segundos retirar el suplemento de la amasadora y
colocar la tapa sobre la amasadora. Después de 6
minutos parar el motor de la amasadora.
Poner en marcha el motor en su posición de
marcha atrás. Abrir la ranura de extrusión y colocar
unas pocas gotas de aceite sobre la placa receptora. Desechar los 2 cm primeros de masa.
Cuando la lámina de masa alcance las muescas
de la placa receptora, cortar con dos rápidos cortes
frente a las guías. Deslizar las piezas de masa sobre
la placa de vidrio previamente aceitado.
Repetir la operación anterior tres veces más y
dejar una quinta pieza de masa sobre la placa
receptora. Parar el motor de la amasadora.
Colocar el rodillo, cuya superficie está aceitada,
entre las dos piezas de masa y moverlo a lo largo de
los railes 12 veces, primero lentamente y luego rápidamente. Repetirlo con la tercera y cuarta pieza.
Cortar cada pieza con el cortador circular y colocarlas ordenadamente sobre las bandejas aceitadas en
la cámara del alveógrafo. Pasar el rodillo y cortar la
quinta pieza en la misma forma.
Colocar el papel sobre el tambor registrador. Llenar la pluma, trazar la línea de cero y volver el tambor a la posición inicial. Comprobar que el nivel de
agua en la bureta está en el cero. Comprobar que la
manilla está en la posición 1. Aceitar el obturador y
el plano de la base de la prensa 26 minutos después del comienzo del amasado, desenroscar el
cuello de la prensa dos revoluciones. Retirar el collar
pequeño y el obturador. Con la espátula deslizar
cuidadosamente la primera pieza de masa sobre el
centro de la base de la prensa. Volver a colocar el
obturador y el collar. Girar el collar grande dos revoluciones en 20 segundos. Esperar 5 segundos.
Retirar el collar pequeño y el obturador. Girar la
manilla a la posición 2. Elevar la vasija de agua destilada. Girar la válvula de aire a su posición horizontal. Comprimir la pera de goma. Girar la válvula de
aire a su posición vertical. Soltar la pera de goma.
Girar la manilla a la posición 3, comenzando la formación del alveolo y la rotación del tambor registrador.
Cuando el alveolo se rompa, girar inmediatamente la manilla a la posición 4. Anotar el nivel de agua
destilada en la bureta. Bajar la vasija de agua destilada. Girar la manilla a la posición 1 y volver a colocar la pluma. Desenroscar el collar grande dos revoluciones y retirar la masa. Repetir el ensayo con las
cuatro piezas de masa restantes. Si un alveolo o la
curva es claramente anormal debe desecharse la
curva.
14.5. Cálculo.
14.5.1. Altura de la curva H. Es la media de las
alturas máximas en mm de las cinco curvas. El valor
P, tenacidad de la masa, puede calcularse multiplicando H por 1,1.
M
14.5.2. Longitud de la curva L. Es la longitud
media, en mm, de las cinco curvas. Se miden a lo
largo de la línea de cero, desde el comienzo de la
curva hasta el punto correspondiente a la vertical
trazada por el punto de la curva donde la presión
desciende más bruscamente debido a la ruptura del
alveolo.
14.5.3. Area de la curva S. Es el área media en
cm2 de las curvas. Para determinar esta área, trazar
una curva media de las cinco. Si las curvas son diferentes medir la altura de la curva en el máximo, en
el medio y hacia el final de cada curva. Marcar los
valores medios sobre el gráfico en los puntos apropiados y trazar la curva media también sobre el gráfico conservando la forma característica de la curva.
Dar a esta curva una longitud igual a la longitud
media L y terminar la curva con una línea vertical en
ese punto. Medir el área de la curva media dos
veces por lo menos con un planímetro y tomar el
valor medio.
14.5.4. Indice de inflamiento G. Es el valor medio
de las lecturas de la bureta tomadas cuando el
alveolo se rompe, que equivalen a la raíz cuadrada
del volumen de aire usado para inflar el alveolo.
14.5.5. Trabajo de deformación W. Es el trabajo
mecánico, en ergios, usado para inflar el alveolo. Se
calcula por la fórmula siguiente:
132 x G2 x S
W = ———————
L
14.6. Referencia.
14.6.1. Grupo de Estudio. Ensayo físico de la
masa. Asociación Internacional de Química Cerealista (I.C.C.).
TABLA 14.1
Volumen de la solución de sodio cloruro
———————————————————————————————————————————————
Humedad
Volumen
Humedad
Volumen
Porcentaje
ml
Porcentaje
ml
———————————————————————————————————————————————
8,0
156,1
14,0
129,4
8,2
155,2
14,2
128,6
8,4
154,4
14,4
127,7
8,6
153,5
14,6
126,8
8,8
152,6
14,8
125,9
9.0
151,7
15,0
125,0
9,2
150,8
15,2
124,1
9,4
149,9
15,4
123,2
9,6
149,0
15,6
122,3
9,8
148,1
15,8
121,4
10,0
147,2
16,0
120,6
10,2
146,3
16,2
119,7
10,4
145,5
16,4
110,8
10,6
144,6
16,6
117,9
10,8
143,7
16,8
117,0
11,0
142,8
17,0
116,1
11,2
141,9
17,2
115,2
11,4
141,0
17,4
114,3
11,6
140,1
17,6
113,4
11,8
139,2
17,8
112,5
12,0
138,3
18,0
111,7
12,2
137,5
18,2
110,8
12,4
136,6
18,4
109,9
12,6
135,7
18,6
109,0
12,8
134,8
18,8
108,1
13,0
133,9
19,0
107,2
13,2
133,0
19,2
106,3
13,4
132,1
19,4
105,4
13,6
131,2
19,6
104,5
13,8
130,3
19,8
103,7
———————————————————————————————————————————————
19
15. DETERMINACION DEL GRADO
DE SEDIMENTACION
(Según Zeleny)
15.1. Principio.
El esponjamiento de la fracción de gluten de harina en solución de ácido láctico afecta el grado de
sedimentación de una suspensión de harina en el
medio de ácido láctico. Más alto, contenido en gluten y mejor calidad de éste, conduce a sedimentación más lenta y a más altos valores de la prueba de
sedimentación.
El grado de sedimentación de una harina suspendida en una solución de ácido láctico durante un
intervalo de tiempo estándar se toma como medida
de su calidad panadera.
Es aplicable a harina de trigo.
15.2. Material y aparatos.
15.2.1. Pipeta de 25 ml.
15.2.2. Pipeta de 50 ml.
15.2.3. Cilindro graduado de 100 ml de vidrio o
teflón, preferiblemente hecho de vidrio de precisión
con una distancia de 180-185 mm, entre la marca
cero y la marca 100 ml.
15.2.4. Reloj avisador o medida de intervalos de
tiempo.
15.2.5. Bastidor mezclador movido por motor
(agitador de vaivén).
El bastidor es aproximadamente de 58 x 32 x 5 cm.
Se coloca en el centro de cada extremo y oscila 30°
a cada lado de la horizontal y a una velocidad de 40
oscilaciones por minuto. El bastidor está diseñado
para sujetar ocho cilindros, los cuales pueden ser
colocados en sus posiciones rápidamente y con
seguridad mientras el mezclador está en movimiento.
15.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
(o Agua Desionizada)
131034 Acido L(+)-Láctico 85% PA-ACS
131090 2-Propanol PA-ACS-ISO
171165 Azul de Bromofenol RE-ACS
181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N)
indicador Azul de Bromofenol SV
(o 181521 Potasio Hidróxido 0,1 mol/l
(0,1N) acuosa SV)
20
15.3.1. 2-Propanol PA-ACS-ISO.
15.3.2. Agua PA-ACS o Agua Desionizada. El
agua utilizada para preparar los reactivos y el agua
de hidratación no debe contener más de 2 ppm de
materia mineral.
15.3.3. Agua de hidratación (solución de Azul de
Bromofenol). Añadir Azul de Bromofenol RE-ACS al
Agua PA-ACS para conseguir una concentración de
4 mg por litro.
15.3.4. Solución de Acido Láctico.
Diluir 250 ml de Acido L(+)-Láctico 85% PA-ACS a
1 litro con Agua PA-ACS. Tener a reflujo el ácido
diluido durante 6 horas sin pérdida de agua
(15.6.2.).
15.3.5. Reactivo de prueba de sedimentación.
Mezclar íntimamente 180 ml de la solución preparada de Acido Láctico (15.3.4.) con 200 ml de 2-Propanol PA-ACS-ISO (15.3.1.) y Agua PA-ACS hasta 1
litro. Dejar reposar durante 48 horas. Estandarizar a
0,50 ±0,01N utilizando Sodio Hidróxido 0,1 mol/l
(0,1N) indicador Azul de Bromofenol SV o Potasio
Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) acuosa SV. El peso específico debe ser 0,985 ±0,001 a 15/15°C. Evitar la
evaporación.
La precisión debe ser como máximo de dos unidades.
15.4. Procedimiento.
Pesar 3,2 g de harina (14% humedad) y colocarla en un cilindro graduado y taponado. Añadir 50 ml
de Agua de hidratación con Azul de Bromofenol REACS (15.3.3.) y empezar a medir el tiempo en ese
instante. Mezclar harina y reactivo íntimamente sujetando el cilindro taponado en posición horizontal y
agitando a derecha e izquierda a una distancia de
18 cm doce veces en cada dirección, cada 5
segundos. La harina debe estar completamente
suspendida durante esta operación. Colocar el cilindro en el bastidor de mezcla y mezclar hasta que el
tiempo transcurrido sea de 5 minutos. Quitar el cilindro del bastidor de mezcla y añadir 25 ml del reactivo (15.3.5.). Volver el cilindro al bastidor hasta que
el tiempo transcurrido sea de 10 minutos. Quitar el
cilindro del bastidor y dejarlo reposar exactamente 5
minutos. Transcurridos estos 5 minutos exactos,
leer el volumen del sedimento en ml estimando con
precisión de 1/10 ml. Este es el grado de sedimentación.
15.5. Cálculo.
El grado de sedimentación es el anteriormente
hallado. Los valores de sedimentación serán desde
8 aproximadamente para tipos de gluten con muy
bajo contenido en proteína hasta 78 aproximadamente para tipo de gluten fuerte con muy alto contenido en proteína.
15.6. Observaciones.
15.6.1. El método descrito dará resultados concordantes cuando las harinas son producidas de la
misma manera. Cuando empleamos muestras de
trigo, los resultados dependen en gran manera del
método de producción de harina utilizado. En general, los métodos de molienda que envuelven trituración con cilindros ondulados darán resultados comparables y situarán series de muestras en orden
similar. Otros molinos, como el tipo de café, pueden
dar resultados esencialmente carentes de significado.
M
15.6.2. El ácido láctico concentrado contiene
moléculas asociadas, las cuales se disocian en
disolución. Para resultados consistentes, la solución
preparada de ácido láctico (15.3.4.) debe haber
alcanzado el equilibrio antes de su uso en el ensayo.
Esto se consigue por reflujo y almacenaje a temperatura ambiente.
15.6.3. Ambos, ácido láctico y 2-propanol,
deben estar esencialmente libres de materia mineral
(no más de 40 ppm).
15.6.4. La medida de los 5 minutos en el procedimiento es crítica y la lectura del grado de sedimentación debe ser hecha exactamente a los 5
minutos de reposo.
15.7. Referencia.
15.7.1. International Association for Cereal Chemistry (I.C.C.). Standard Nv. 116.
16. ACIDO ASCORBICO (VITAMINA C)
(Método cualitativo)
(B.O.E. 29-8-1979)
16.1. Principio.
Este método sirve para determinar la presencia
de vitamina C en harina y consiste en la aparición de
puntos blancos sobre fondo rosa del reactivo 2,6
diclorofenol indofenol sal sódica en medio ácido.
16.2. Material y aparatos.
16.2.1. Placa Petri de 65 cm2.
16.3. Reactivos.
Acido meta-Fosfórico
131074 Agua PA-ACS
122056 2,6-Diclorofenol Indofenol Sal Sódica
2-hidrato PA
16.3.1. Disolución acuosa al 0,05% de 2,6-Diclorofenol Indofenol Sal Sódica 2-hidrato. Disolver 2,6Diclorofenol Indofenol Sal Sódica 2-hidrato PA en
Agua PA-ACS y ajustar a la concentración indicada.
16.3.2. Disolución acuosa al 5% de Acido metaFosfórico. Disolver Acido meta-Fosfórico con Agua
PA-ACS y ajustar a la concentración indicada.
16.4. Procedimiento.
Extender 10 g de la muestra sobre una placa de
vidrio compactándola de forma que quede bien uniforme. Rociar por completo con la disolución del
Acido meta-Fosfórico y a continuación hacer lo
mismo con la disolución de 2,6-Diclorofenol Indofenol Sal Sódica. Al cabo de unos minutos aparecen
unos puntos blancos más o menos grandes sobre
el fondo rosa.
17. AMONIO PERSULFATO
(Método cualitativo)
(B.O.E. 20-7-1977)
17.1. Principio.
Este método sirve para determinar la presencia
de amonio persulfato en harina y consiste en la aparición de manchas azules con la bencidina.
17.2. Material y aparatos.
17.2.1. Placa Petri de 65 cm2.
17.3. Reactivos.
121086 Etanol absoluto PA
Bencidina
17.3.1. Disolver Bencidina para análisis en Etanol
absoluto PA al 1% (p/v).
17.4. Procedimiento.
Extender 6 g de la muestra en la cápsula Petri.
Añadir unos 3 ml de reactivos. Al cabo de unos
minutos aparecen unas manchas azules.
18. FOSFORO
(B.O.E. 29-8-1979)
18.1. Principio.
Transformación de los compuestos fosforados
en ortofosfatos y posterior valoración colorimétrica
con fosfomolibdovanadato.
18.2. Material y aparatos.
18.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro que
permita lecturas a 430 nm.
18.2.2. Crisoles de porcelana, de 35 mm de diámetro y 45 mm de altura, sin tapadera.
18.2.3. Matraces aforados de 100 y 500 ml de
capacidad.
18.2.4. Baño de agua.
18.2.5. Estufa de desecación con sensibilidad de
±1°C.
18.3 Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO
(o 121737 Acido Nítrico 53% PA )
131074 Agua PA-ACS
131129 Amoníaco 25% (en NH3) PA
131134 Amonio Molibdato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
132352 Amonio meta-Vanadato PA-ACS
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
18.3.1. Amoníaco 25% (en NH3) PA, densidad
0,910 g/ml.
21
18.3.2. Disolución de Amonio Molibdato al 10%
(p/v). Disolver 100 g de Amonio Molibdato 4-hidrato
PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS; añadir 10 ml de
Amoníaco 25% (en NH3) PA, para asegurar su conservación y completar hasta 1.000 ml con Agua PAACS.
18.3.3. Acido Nítrico 60% PA-ISO, densidad
1,38 g/ml.
18.3.4. Acido Nítrico al 10% (p/v). Disolver 16 ml
de Acido Nítrico 60% PA-ISO, hasta 100 ml con
Agua PA-ACS
18.3.5. Disolución de Amonio meta-Vanadato.Disolver 2,35 g de Amonio meta-Vanadato PA-ACS
en 400 ml de Agua PA-ACS y caliente. Añadir lentamente y agitando 20 ml de la disolución que contiene 7 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO y 13 ml de
Agua PA-ACS.
18.3.6. Reactivo Nitromolibdovanadato.- Mezclar
200 ml de la disolución de Amonio Molibdato
al 10% y 200 ml de la disolución de Amonio
meta-Vanadato, con 134 ml de Acido Nítrico
60% PA-ISO o en su lugar 192 ml de Acido
Nítrico 53% PA.
18.3.7. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO,
densidad 1,19 g/ml.
18.3.8. Disolución patrón de fósforo.- Pesar
4,394 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACSISO, previamente desecado en estufa a 100°C
durante unas doce horas. Disolver en Agua PA-ACS
y llevar a un volumen de 1.000 ml en un matraz aforado. 1 ml corresponde a 1.000 gammas de fósforo.
18.3.9. Disoluciones patrones.- Tomar 10 ml de
la disolución anterior y diluir con Agua PA-ACS
hasta el enrase en un matraz aforado de 100 ml,
obteniéndose una concentración de 100 gammas
de fósforo por ml. Tomar partes alícuotas de 0,5;
1,0; 1,5; 2,0 y 2,5 ml y llevar a un volumen de 10 ml
con Agua PA-ACS. Su concentración será de 5; 10;
15; 20 y 25 gammas/ml. Añadir 10 ml del reactivo
Nitromolibdovanadato y proceder como se describe
en el método.
22
18.4. Procedimiento.
Pesar, con una aproximación de ±0,1 mg, de 0,3
a 1,5 g de muestra en un crisol previamente calcinado y tarado. Introducir el crisol en la mufla a una
temperatura inferior a 100°C. Aumentar la temperatura paulatinamente hasta alcanzar los 550°C; mantener esta temperatura durante 2 horas. No se debe
pasar de 550°C, para evitar decrepitaciones y volatilizaciones, ya que cuando existen cloruros en el
producto a analizar, puedan afectar a los resultados.
El tiempo que debe permanecer el crisol con la
muestra en la mufla es variable y estará de acuerdo
con la naturaleza y con la cantidad de la muestra.
Suelen ser suficientes 2 horas, pero si transcurrido
este tiempo las cenizas del crisol no presentan el
color blanco grisáceo deseado, sacar el crisol de la
mufla y dejar enfriar dentro de un desecador, añadiendo posteriormente unas gotas de agua o,
mejor, unas gotas de agua oxigenada de 50 volúmenes. Introducir el crisol en la estufa de desecación a 100°C para eliminar el agua o el agua oxigenada. Eliminada la humedad, introducir nuevamente
el crisol en la mufla a 550°C. Dejar transcurrir el
tiempo necesario hasta que las cenizas contenidas
en el crisol alcancen el color deseado. Sacar el crisol de la mufla y llevar a un desecador con sustancias desecadoras. Dejar enfriar hasta la temperatura ambiente.
Obtenidas las cenizas, añadir en el crisol una
cantidad de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
(18.3.7.) hasta que las cenizas queden cubiertas.
Evaporar el Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO en
el baño de agua a ebullición, hasta sequedad, en un
dispositivo adecuado para la eliminación de vapores
ácidos. Disolver el residuo en 3 ml de Acido Nítrico
al 10% y hervir en el baño de agua durante 5 minutos, utilizando el dispositivo adecuado para la eliminación de los vapores ácidos. No se debe dejar
secar el contenido para evitar la hidrólisis de los
ortofosfatos que produciría reacciones coloreadas.
Filtrar a través de papel, sobre un matraz aforado de
500 ml, lavando con Agua PA-ACS los crisoles
donde estaban contenidas las cenizas y diluir hasta
el enrase.
Para desarrollar la reacción de color, colocar, en
una cubeta o tubo de espectrofotómetro o fotocolorímetro, 10 ml de la disolución problema y añadir
10 ml del reactivo Nitromolibdovanadato.
Agitar, dejar reposar durante diez minutos. Efectuar la lectura espectrofotométrica o fotocolorimétrica a 430 nm, utilizando como blanco la mezcla de
10 ml de Agua PA-ACS y 10 ml de reactivo Nitromolibdovanadato. La coloración amarilla desarrollada es estable durante varios días.
18.5. Cálculo.
Leer en el espectrofotómetro o fotocolorímetro y
buscar su correspondencia en fósforo en la curva
patrón.
F 0,005
Fósforo (%) = —————
P
Siendo:
F = concentración de fósforo, en gramos,
encontrada en la curva patrón/10 ml de
disolución.
P = peso, en gramos, de la muestra empleada.
18.6. Referencia.
18.6.1. Instituto de Racionalización y Normalización del Trabajo. Una Norma Española UNE 64017.
M
19. DETECCION Y CUANTIFICACION DE
HARINAS DE TRIGO COMUN
(“TRITICUM VULGARE”) EN
SEMOLAS Y PASTAS ALIMENTICIAS
19.1. Principio.
El método se basa en la detección y cuantificación de un componente designado CM1, del extracto cloroformo-alcohol metílico del endospermo de
trigo o de productos derivados de él, cuyo control
genético radica en el cromosoma 1D de “Triticum
Vulgare” y que por tanto no se encuentra en “T.
Durum”.
El mencionado extracto, al que se designa proteína CM, se fracciona por electroforesis sobre gel de
almidón, y el componente CM1 se estima visualmente o se cuantifica densitométricamente.
19.2. Material y aparatos.
19.2.1. Balanza analítica.
19.2.2. Equipo de electroforesis.- Fuente de tensión,
corriente continua 0-500 v, -100 mA. Placas de vidrio
de 20 x 20 cm, marcos de plástico de 20 x 20 cm exterior, de 18 x 18 cm interior y de 3 mm de espesor.
Depósitos de electrodos de 20 x 10 x 10 cm.
19.2.3. Densitómetro de reflexión, en el caso de
que se quiera cuantificar.
19.2.4. Tubos de 8 x 50 mm o similar, con tapones de corcho.
19.2.5. Gradilla.
19.2.6. Dos placas de 5 x 7 x 1 cm o dimensiones similares de acero inoxidable.
19.2.7. Jeringa de vidrio de 1 ml de capacidad.
19.2.8. Capilares de 10 cm de largo.
19.2.9. Placa de porcelana con pocillos.
19.2.10. Probetas de 100 ml y de 1.000 ml.
19.2.11. Vasos de 500 ml y de 1.000 ml.
19.2.12. Baño de agua con termómetro.
19.2.13. Cubeta de al menos 25 x 25 x 5 cm de
plástico.
19.3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131034 Acido L(+)-Láctico 85% PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
Etanol 70%
(o preparar con 121085 Etanol
96% v/v PA)
131091 Metanol PA-ACS-ISO
Almidón hidrolizado para electroforesis
Connauglit o similar
Aluminio Lactato
131252 Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO
132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
Nigrosina soluble
131754 Urea PA-ACS
Papel Albet número 502
Papel Filtro
19.3.1. Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO.
19.3.2. Metanol PA-ACS-ISO.
19.3.3. Eter Etílico libre de peróxidos. Usar Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.
19.3.4. Etanol 70%. En su defecto diluir Etanol
96% v/v PA en Agua PA-ACS ajustando a la concentración indicada.
19.3.5. Papel Albet número 502 o similar, y papel
de filtro.
19.3.6. Almidón hidrolizado para electroforesis
Connauglit o similar.
19.3.7. Tampón Aluminio Lactato-Acido Láctico
0,1N, pH 3,2 en Urea 3 M.- Diluir 4,9 g de Aluminio
Lactato en Agua PA-ACS, añadir 10,6 ml de Acido
L(+)-Láctico 85% PA-ACS y 180 g de Urea PA-ACS,
completando hasta 1 litro con Agua PA-ACS. Este
tampón sirve para el Gel de Almidón como para los
compartimentos de los electrodos.
19.3.8. Solución de Nigrosina soluble en agua al
0,5% en Acido Acético glacial PA-ACS-ISO - Agua
PA-ACS (1/1) (v/v).
19.3.9. Gel de Almidón.- Mezclar 24,5 g de Almidón y 180 ml de tampón en un vaso de 500 ml, agitar suavemente con una varilla en baño de agua a 80
±3°C hasta que gelifique (2-3 minutos). El gel caliente se vierte sobre una placa de vidrio a la que se ha
superpuesto un marco de plástico de las mismas
dimensiones externas que la placa y de 3 mm de
espesor, extender uniformemente con la varilla y,
finalmente, prensar suavemente con una placa de
vidrio de las mismas dimensiones sin dejar burbujas.
Dejar reposar durante al menos 3 horas.
19.4. Procedimiento.
19.4.1. Extracción y preparación para electroforesis de la proteína CM.- Pesar 50 mg de harina, sémola, grano o pasta alimenticia y transferirlos a un tubo
de 8 x 50 mm o similar. El grano y la pasta se aplastan por presión entre dos placas de acero inoxidable
antes de ser transferidas al tubo. Añadir aproximadamente 0,5 ml de Eter Dietílico estabilizado con
~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO en cada tubo y dejar
reposar durante no menos de 30 minutos, agitando
ocasionalmente. Después de la última agitación se
deja sedimentar por gravedad y el sobrenadante se
elimina con la ayuda de una jeringa. El disolvente
residual se deja evaporar a la temperatura ambiente
o en una estufa a 35°C durante 10 minutos. Agregar
aproximadamente 0,25 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO - Metanol PA-ACSISO (2/1) (v/v) a cada tubo, tapar y dejar reposar
durante 2 horas, agitando ocasionalmente.
Después de la última agitación, dejar sedimentar
por gravedad y transferir el extracto sobrenadante
23
con un capilar a una pieza de papel Albet número
502 o similar, de dimensiones 3 x 10 mm. Con el
capilar se satura el papel, que se deja evaporar
antes de una nueva adición (ver 19.6.4.), repitiendo
la operación hasta agotar el sobrenadante. Para
esta operación, las piezas de papel a las que se van
a transferir las distintas muestras se depositan en
distintos pocillos de una placa de porcelana o similar. Se recomienda realizar la transferencia entre 10
y 20 muestras simultáneamente.
19.4.2. Electroforesis sobre Gel de Almidón de la
proteína CM.- Separar cuidadosamente una de las
placas de vidrio con la ayuda de una espátula y
recubrir la superficie expuesta del gel con un plástico fino. Marcar en dicha superficie una fila de ranuras (1 cm de largo cada una) a 3 cm de uno de los
bordes del gel. Alojar en dicha ranura las piezas de
papel Albet número 502 o similar que portan las
muestras, previamente impregnadas con tampón.
Disponer el gel horizontalmente apoyado sobre las
cubetas de electrodos y establecer la conexión
eléctrica mediante puentes de papel de filtro (20
papeles de dimensiones apropiadas superpuestos).
19.5. Interpretación de resultados.
19.5.1. Detección de trigo exaploide.- La electroforesis del extracto CM de trigo exaploide (“T. Vulgare”) muestra tres bandas, designadas CM1, CM2
y CM3, mientras que la de trigo tetraploide (“T.
durum”) sólo presenta dos CM2 y CM3.
El trigo exaploide se detecta en una mezcla por
la aparición de CM1 en el perfil electroforético. Para
el tamaño de muestra anteriormente propuesto,
CM1 se detecta en mezcla de 10-15%. Usando
muestras de tamaño doble, el umbral de detección
se reduce proporcionalmente.
19.5.2. Cuantificación de trigo exaploide en mezclas.- La acotación del porcentaje de “T. Vulgare” en
una mezcla se basa en la cuantificación de la relación CM1, CM2 y en la estimación de la variabilidad
intraespecífica de CM1 y CM2.
En la figura 1-A se presenta la forma de acotar gráficamente el porcentaje de trigo exaploide en mezclas basándose en la medida de la relación CM1,
CM2 mediante densintometría de reflectancia con
luz de 620 mm. En la figura 1-B se representa la
variación de la amplitud de la acotación según el
valor obtenido.
Una estimación semicuantitativa, más imprecisa
que la anterior, puede obtenerse por comparación
visual del problema con una serie de mezclas conocidas que pueden incorporarse al mismo gel.
19.6. Observaciones.
19.6.1. Las condiciones de electroforesis son 10
V/cm durante seis horas.
19.6.2. La tinción se realiza con nigrosina al
0,05% en ácido acético glacial.- Agua destilada
(1/1) (v/v) durante 14-16 horas en una cubeta de
plástico de dimensiones apropiadas, dejando el gel
con la cara opuesta a la de inserción hacia arriba.
19.6.3. La decoloración del fondo se realiza en
pocos minutos con alcohol etílico al 70%.
19.6.4. Cuando se manejan 10-20 muestras,
después de una transferencia se devuelve el capilar
al tubo y se pasa a la muestra siguiente. Cuando se
llega a la muestra final, ya se ha evaporado la primera y está en condiciones de una nueva transferencia.
19.7. Referencia.
19.7.1. R. García Faure y F. García Olmedo: “A
New Method for the Estimation of Common Wheat
in Pasta Products”. Lebensm. Wis. U. Technol. Vol.
2. 1969.
24
Figura 1-A
Figura 1-B
M
20. DETECCION DE HARINAS
DEGRAGADAS POR EL ATAQUE DE
PENTATOMIDOS
20.1. Principio.
Se detecta la degradación de la calidad panadera de la masa de harina mediante la determinación
del exceso de actividad proteolítica.
20.2. Material y aparatos.
Como en 14.2.
20.3. Reactivos.
Como en 14.3.
20.4. Procedimiento.
Como en 14.4. con las siguientes modificaciones.
20.4.1. El número de piezas de masa serán seis.
20.4.2. Transcurrido el tiempo normal de 26
minutos del comienzo de amasado, extraer tres piezas de la cámara del alveógrafo y analizarlas, obteniendo sus correspondientes curvas. El resto de las
piezas se analizan sobre el mismo papel después
de un período de reposo de tres horas.
Si alguno de los alveolos o curvas fuera claramente anormal, debe desecharse la curva.
20.5. Expresión de los resultados.
Si existe una actividad proteolítica excesiva, la
segunda serie de curvas presentará menor extensibilidad y tenacidad, siendo mayor la diferencia entre
ellas, a mayor actividad.
Cuantificar esta actividad calculando la degradación de W y G en la forma siguiente.
Calcular los valores de estos índices por separado para la primera serie de curvas (con tiempo de
reposo normal) Wo y Go para la segunda (con tiempo de reposo de tres horas) W1 y G1
W0 - W1
% de degradación de W = ———— • 100
W0
G0 -G1
% de degradación de G = ———— • 100
G0
20.6. Referencias.
20.6.1. Harinas. Actividad proteolítica. H-80277A. Ministerio del Aire.
25
Cereales en copos
o expandidos
26
M
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 20-1-1988)
1. PREPARACION DE LA MUESTRA
1.1. Principio.
Homogeneización y reducción de la muestra al
tamaño adecuado para la correcta realización del
análisis.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Aparato triturador que no provoque calentamiento, fácil de limpiar, y que proporcione un
tamaño de partículas comprendido entre 800 y
1.200 µ.
1.2.2. Envases de capacidad suficiente, con cierre hermético, para conservar la muestra.
1.3. Procedimiento.
1.3.1. Muestra contenida en un solo envase:
Homogeneizar la muestra. Tomar un mínimo de
200 g y triturarlo en el aparato descrito en 1.2.1.
y volver a homogeneizar.
1.3.2. Muestra contenida en varios envases.Homogeneizar la porción de muestra contenida en
cada envase, tomar de cada uno cantidades iguales para obtener finalmente un mínimo de 200 g de
muestra. Triturar en el aparato descrito en 1.2.1. y
volver a homogeneizar.
1.4. Observaciones.
Preparada la muestra, ésta servirá de base a
todas las determinaciones, salvo mención expresa
en contra, procurando realizar la preparación de los
análisis en el menor tiempo posible.
2. HUMEDAD
2.1. Principio.
Se determina la pérdida de peso de la muestra al
someterla a calentamiento en estufa en condiciones
determinadas.
2.2. Material y aparatos.
2.2.1. Balanza analítica con precisión de 0,1 mg.
2.2.2. Pesasustancias metálico o de vidrio con
tapadera y con una superficie útil que permita un
reparto de la muestra de 0,3 g/cm2 como máximo.
2.2.3. Estufa isoterma de calefacción eléctrica, a
ser posible de aire forzado, regulada de tal manera
que la temperatura del aire en su interior sea de
130°C y que tenga aireación suficiente. La estufa
tendrá una capacidad calorífica tal que, regulada
previamente a la temperatura de 130°C, pueda
alcanzar de nuevo esa temperatura en menos de
media hora, después de colocar simultáneamente
en su interior el número máximo de muestras a
desecar.
La eficacia de la ventilación se determinará con la
ayuda de sémola como material de ensayo, que
tenga un milímetro como máximo de partícula. La
ventilación será tal que, secando simultáneamente a
130°C todas las muestras que la estufa pueda contener, primero durante dos horas y después durante tres horas, los resultados presenten entre ellos
una diferencia inferior a 0,15 por 100 en valor absoluto.
2.2.4. Desecador provisto de un deshidratante
eficaz.
2.3. Procedimiento.
Pesar con precisión de 1 mg, aproximadamente
5 g de muestra en pesasustancias, previamente
preparada según método número 1.
Introducir el pesasustancias en la estufa (2.2.3.) a
130°C ±1°C y destapar. Mantener en la estufa
durante una hora y treinta minutos. Tapar el pesasustancias antes de sacar de la estufa y dejar enfriar
a temperatura ambiente en desecador y pesar a
continuación.
2.4. Cálculos.
La humedad de la muestra expresada en tanto
por ciento vendrá dada por la siguiente fórmula:
(P1 - P2) 100
H % = —————–—
P
Siendo:
P1 = Peso, en g, del pesasustancias con la
muestra.
P2 = Peso, en g, del pesasustancias con la
muestra desecada.
P = Peso, en g, de la muestra.
La diferencia resultante entre determinaciones
duplicadas de la misma muestra no deberá ser
mayor de 0,1% en valor absoluto.
2.5. Referencias.
2.5.1. Métodos de la Asociación Internacional de
Química Cerealista (I.C.C.).
2.5.2. AOAC, M. 14.003 1980.
3. CENIZAS
3.1. Principio.
3.1.1. Definición. Residuo obtenido por incineración a una temperatura de 550 ±10°C hasta combustión completa de la materia orgánica y obtención de un peso constante.
3.2. Material y aparatos.
3.2.1. Crisoles no atacables en las condiciones
del ensayo, con unas dimensiones mínimas de
40 mm de altura y 45 mm de diámetro superior.
27
3.2.2. Placa calefactora.
3.2.3. Horno eléctrico (mufla) con dispositivo de
control de temperatura.
3.2.4. Desecador capaz de contener un deshidratante eficaz, como 141219 Calcio Cloruro anhidro, escoriforme PRS, 141154 di-Fósforo pentaOxido PRS o 211335 Gel de Sílice 3-6 mm con indicador QP.
3.3. Procedimiento.
Pesar con precisión de 1 mg de 2 a 6 g de muestra preparada según el método oficial número 1, en
un crisol previamente incinerado y tarado.
Colocar el crisol y su contenido sobre una placa
calefactora, teniendo cuidado de que la combustión
no sea demasiado rápida, de manera que no haya
pérdidas de materia sólida por proyección. Llevar a
continuación el crisol a la mufla (550 ±10°C) hasta
combustión completa de la sustancia (cenizas blancas o grises).
Enfriar a temperatura ambiente en un desecador.
Pesar seguidamente.
3.4. Cálculos.
3.4.1. El contenido en cenizas sobre sustancia
natural vendrá dado por la siguiente fórmula:
P1 - P2
% cenizas = ———— x 100
P
Siendo:
P1 = Peso, en gramos, del crisol con las cenizas.
P2 = Peso, en gramos, del crisol vacío.
P = Peso, en gramos, de la muestra.
3.4.2. El contenido en cenizas sobre sustancia
seca vendrá dado por la siguiente fórmula:
C x 100
% cenizas = ————
100 - H
Siendo:
C = % de cenizas obtenidas en (3.4.1.).
H = Humedad.
En ambos casos los resultados se darán considerando solamente la primera cifra decimal.
28
3.5. Observaciones.
3.5.1. En caso necesario, para obtener una incineración uniforme puede humedecerse la muestra
antes de la preincineración con etanol del 95 por
100 o aceite vegetal exento de cenizas.
3.5.2. Si la muestra a analizar contiene cloruros
añadidos, deducir del valor de cenizas obtenido por
el procedimiento anterior el porcentaje correspondiente de los mismos.
3.5.3. Límite de errores. Cuando el contenido de
cenizas no rebase el 1 por 100 de la muestra, la diferencia de los resultados de un ensayo efectuado por
duplicado no deberá ser superior al 0,02 por 100. Si
el contenido de cenizas rebasa el 1 por 100 la diferencia no deberá ser superior al 2 por 100 de dicho
contenido. Si es superior se repetirá la determinación.
3.6. Referencias.
3.6.1. AOAC, edición 1980, 14.006.
4. GRASA
4.1. Principio.
El producto es hidrolizado con ácido clorhídrico
diluido. De la masa seca resultante, las materias
grasas son extraídas con éter, el solvente evaporado y el residuo pesado.
4.2. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
211835 Piedra Pómez gránulos QP
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
4.2.1. Acido Clorhídrico 3N. Diluir Acido Clorhídrico 35% PA-ISO en Agua PA-ACS, hasta la concentración indicada.
4.2.2. Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO, exento de peróxidos.
4.2.3. Solución de Plata Nitrato. Disolver unos
gramos de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml
de Agua PA-ACS.
4.3. Material y aparatos.
4.3.1. Extractor tipo Soxhlet.
4.3.2. Estufa de desecación capaz de mantener
constante la temperatura de 100°C ±1°C.
4.3.3. Desecador provisto de un deshidratante
eficaz.
4.4. Procedimiento.
Pesar, con precisión de 1 mg, aproximadamente
10 g de muestra preparada según el método oficial
(apartado 1) en un matraz de 250 a 300 ml.
Agitando continuamente añadir 100 ml de Acido
Clorhídrico 3N (4.2.1.), añadir unas perlas de vidrio
o Piedra Pómez gránulos QP lavada y seca y cerrar
con tapón de vidrio que no ajuste herméticamente o
vidrio de reloj. Hervir unos sesenta minutos, agitando de vez en cuando, enfriar y filtrar sobre filtro previamente humedecido. Lavar el precipitado con
Agua PA-ACS hasta que el filtrado no dé precipitado con Plata Nitrato o no dé reacción ácida de
Papel de Tornasol.
Poner el filtro en una cápsula y secar en estufa a
100°C ±1°C.
M
El filtro ya seco se introduce en un cartucho para
extractor tipo Soxhlet y se tapa con algodón desengrasado. El cartucho se coloca en el extractor y se
vierte el Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO, dejándolo sifonar unas ocho
horas.
El matraz receptor debe estar secado y tarado.
Evaporar el solvente, secar en estufa y pesar.
4.5. Cálculos.
4.5.1. El contenido de grasa en sustancia natural
vendrá dado por la siguiente fórmula:
P1 - P2
% grasas = ———— x 100
P
Siendo:
P1 = Peso, en gramos, del matraz con la grasa.
P2 = Peso, en gramos, del matraz vacío.
P = Peso, en gramos, de la muestra.
4.5.2. El contenido de grasas en sustancia seca
vendrá dado por la siguiente fórmula:
G x 100
% grasas = ————
100 - H
siendo:
G = Porcentaje de grasa obtenida en 4.5.1.
H = Humedad.
4.6. Observaciones.
4.6.1. Para efectuar el procedimiento anterior
podrán utilizarse sistemas automáticos o semiautomáticos, adaptándose a las especificaciones del
equipo.
4.7. Referencias.
4.7.1. AOAC, edición 1980, 14.059.
5. PROTEINAS
5.1. Principio.
Determinación del nitrógeno, convirtiendo el
nitrógeno orgánico presente en amonio sulfato con
ácido sulfúrico. Después de alcalinizar con sodio
hidróxido, destilar recogiendo el destilado sobre
ácido bórico, titulando el amoníaco recogido con
ácido N/10.
5.2. Reactivos
172222 Acido Bórico solución 4% RE
181023 Acido Clorhídrico 0,1 mol/l (0,1N) SV
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV
131074 Agua PA-ACS
251170
121085
171327
131532
171617
141625
131687
131716
Azul de Metileno (C.I. 52015) DC
Etanol 96% v/v PA
Fenolftaleína solución 1% RE
Potasio Sulfato PA-ACS-ISO
Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS
Selenio metal polvo PRS
Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
5.2.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO libre de nitrógeno.
5.2.2. Sodio Hidróxido al 40%. Diluir Sodio
Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS
hasta la concentración indicada.
5.2.3. Catalizador. (Mezclar 5 g de Sodio Sulfato
anhidro PA-ACS-ISO o Potasio Sulfato PA-ACS-ISO
con 5 mg de Selenio metal polvo PRS). También
puede utilizarse otro catalizador adecuado.
5.2.4. Indicador de Fenolftaleína solución 1% RE.
5.2.5. Indicador Taschiro. Mezclar 20 mg de Rojo
de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS y 10 mg de Azul de
Metileno (C.I. 52015) DC en 100 ml de Etanol 96%
v/v PA. También puede utilizarse Rojo de Metilo (C.I.
13020) RE-ACS preparado en la proporción de
0,5% en Etanol 96% v/v PA.
5.2.6. Acido Bórico solución 4% RE.
5.2.7. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV o
Acido Clorhídrico 0,1 mol/l (0,1N) SV.
5.3. Material y aparatos.
5.3.1. Para digestión.
5.3.1.1. Matraces tipo Kjeldahl o similar.
5.3.1.2. Batería de mantas eléctricas o similar.
5.3.2. Para destilación.
5.3.2.1. Matraz generador de vapor.
5.3.2.2. Refrigerante.
5.3.2.3. Matraz receptor.
5.3.3. Titulación.
5.3.3.1. Bureta de vidrio o bureta automática.
5.4. Procedimiento.
Pesar, con la precisión de 1 mg, aproximadamente
0,5-2,5 g de muestra, preparada según el método
oficial número 1, introducirla en el matraz Kjeldahl
(5.3.1.1.). Añadir unos 5 g del catalizador (5.2.3.),
20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (la cantidad
varía según contenido en proteínas y grasa de la
muestra). Poner a digerir en 5.3.1.2., teniendo cuidado al principio de no elevar demasiado la temperatura hasta que cese el desprendimiento de la espuma
(añadir si fuera preciso una pequeña cantidad de
parafina). Digerir hasta que la solución esté clara.
Enfriar, diluir, añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1% RE y conectar el aparato destilador añadiendo Sodio Hidróxido al 40% (5.2.2.) hasta viraje.
En el matraz receptor poner 100 ml de Acido
Bórico solución 4% RE con unas gotas de indicador
(5.2.5.), cuidando que el extremo del refrigerante
quede bien cubierto del líquido.
29
Mantener la destilación aproximadamente 15
minutos (o más, si es preciso, hasta que no dé
reacción básica); lavar el extremo del refrigerante y
titular el destilado con Acido Sulfúrico 0,05 mol/l
(0,1N) SV o Acido Clorhídrico 0,1 mol/l (0,1N) SV.
Hacer un blanco.
5.5. Cálculos.
5.5.1. El contenido de proteínas en materia natural vendrá dado por la siguiente fórmula:
0,14 x 6,25 (V1 - V0 )
% proteínas = ——————————
P
Siendo:
V1 = Volumen, en ml, de ácido clorhídrico 0,1N o
ácido sulfúrico 0,1N utilizado en la determinación.
V0 = Volumen, en ml, de ácido clorhídrico 0,1N o
ácido sulfúrico 0,1N utilizado en blanco.
P = Peso, en gramos, de la muestra.
5.5.2. El contenido en proteínas en materia seca
vendrá dado por la siguiente fórmula:
p x 100
% proteína = ————
100 - H
Siendo:
p = % proteína obtenida en 5.5.1.
H = Humedad.
5.6. Observaciones.
5.6.1. La diferencia entre dos determinaciones
sucesivas expresada en % de proteínas no debe ser
superior al 0,25 %.
5.6.2. Para efectuar el procedimiento Kjeldahl
podrán utilizarse sistemas automáticos o semiautomáticos, adaptándose a las especificaciones del
equipo.
5.7. Referencias.
5.7.1. AOAC (1980) 2.057.
5.7.2. Pearson, 5ª edición (1962).
6. FIBRA ALIMENTARIA INSOLUBLE
30
6.1. Principio.
La muestra se extrae con una solución de detergente neutro en caliente. El residuo se incuba con
una solución amilásica y se filtra. La determinación
de las cenizas en el residuo filtrado permite conocer,
por diferencia de peso, la cantidad de celulosa,
hemicelulosa y lignina de la muestra.
6.2. Material.
6.2.1. Baño termostatizado y refrigerante de
reflujo.
6.2.2. Filtros de vidrio filtrado del número 2.
6.2.3. Sistemas de filtración por succión a vacío.
6.2.4. Desecador.
6.2.5. Estufa para 37°C y 110°C.
6.2.6. Horno eléctrico (mufla) con dispositivo de
control de temperatura.
6.2.7. Balanza de precisión.
6.3. Reactivos.
131007 Acetona PA-ACS-ISO
131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
a-Amilasa tipo VI-A
161805 Decahidronaftaleno, mezcla de
isómeros PS
141317 Eter mono-Etílico del Etilenglicol PRS
131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato
PA-ACS-ISO
122363 Sodio Dodecilo Sulfato PA
Sodio di-Hidrógeno Fosfato anhidro
131679 di-Sodio Hidrógeno Fosfato anhidro
PA-ACS
131717 Sodio Sulfito anhidro PA-ACS
6.3.1. Sodio Dodecilo Sulfato PA.
6.3.2. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.
6.3.3. di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACSISO.
6.3.4. Eter mono-Etílico del Etilenglicol PRS.
6.3.5. Decahidronaftaleno, mezcla de isómeros
PS.
6.3.6. Sodio Sulfito anhidro PA-ACS.
6.3.7. di-Sodio Hidrógeno Fosfato anhidro PAACS.
6.3.8. di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACSISO
6.3.9. Acetona PA-ACS-ISO.
6.3.10. a-Amilasa tipo VI-A (sigma A-6880 o
equivalente).
6.3.11. Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO.
6.3.12. Solución de detergente neutro: Mezclar
18,61 gramos de Acido Etilendiaminotetraacético
Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y 6,81 gramos
de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACS-ISO
con 150 ml de Agua PA-ACS y calentar hasta su
disolución. Disolver 30 g de Sodio Dodecilo Sulfato
PA y 10 ml de Eter mono-Etílico del Etilenglicol PRS
en 700 ml de Agua PA-ACS caliente y mezclar con
la solución anterior. Disolver 4,56 g de di-Sodio
Hidrógeno Fosfato anhidro PA-ACS en 150 ml de
Agua PA-ACS y mezclar con las soluciones anteriores. Ajustar a pH 6,9-7 con Acido orto-Fosfórico
85% PA-ACS-ISO, si fuera necesario.
M
6.3.13. Solución tampón 0,1N: Mezclar 39,2 ml
de Sodio di-Hidrógeno Fosfato anhidro 0,1 M (preparado disolviendo 13,6 g en 1 litro de Agua PAACS) con 60,8 ml de Sodio Fosfato di-Básico 0,1M
(preparado disolviendo 14,2 g en 1 litro de Agua PAACS).
6.4. Procedimiento.
Pesar, con precisión de 1 mg, aproximadamente
1 g de muestra preparada según método 1. Agregar ordenadamente 100 ml de solución de detergente neutro, 2 ml de Decahidronaftaleno, mezcla
de isómeros PS y 0,5 g de Sodio Sulfito anhidro PAACS (6.3.6.). Calentar hasta ebullición y mantener a
reflujo durante una hora. Filtrar a través de filtro de
vidrio fritado del número 2 (previamente calcinado a
550°C) conectado a un sistema de succión por
vacío.
Lavar sucesivamente con unos 300 ml de Agua
PA-ACS hirviendo. Añadir hasta sobrepasar el nivel
del residuo, una solución al 2,5% de amilasa en
tampón Fosfato 0,1N.
Incubar a 37°C durante 18 horas, aproximadamente. Filtrar la solución enzimática por succión a
través de un sistema de vacío y lavar el residuo con
unos 80 ml de Acetona PA-ACS-ISO. Secar el filtro
con el residuo a 110°C durante 8 horas, como mínimo. Enfriar en desecador y pesar. Mantener el filtro
con el residuo en mufla a 550°C durante tres horas.
Enfriar y pesar.
6.5. Cálculos.
El contenido en fibra alimentaria insoluble expresado en % vendrá dado por la siguiente fórmula:
P1 - P2 x 100
% fibra alimentaria insoluble = ———————
P0
Siendo:
P0 = Peso en mg de la muestra.
P1 = Peso en mg de crisol + residuo desecado
a 110°C.
P2 = Peso en mg de crisol + residuo calcinado.
6.6. Observaciones.
6.6.1. Las muestras conteniendo más de un
10% de materia grasa deberán desengrasarse previamente.
6.6.2. Para utilizar el procedimiento anterior
podrán utilizarse sistemas automáticos o semiautomáticos adaptándose a las especificaciones del
equipo.
6.7. Referencias.
6.7.1. Método AACC, 32-20 (1979).
7. FIBRA BRUTA
7.1. Principio.
Tratar la muestra, desengrasada si es necesario,
con soluciones de ácido sulfúrico y potasio hidróxido de concentraciones conocidas. Separar el residuo por filtración, lavar, desecar y pesar el residuo
insoluble, determinando posteriormente su pérdida
de masa por calcinación a 550°C.
7.2. Material y aparatos.
7.2.1. Material de vidrio de uso corriente en laboratorio.
7.2.2. Crisol filtrante número 2.
7.2.3. Horno de mufla con termostato.
7.2.4. Desecador provisto de un deshidratante
eficaz.
7.2.5. Estufa capaz de mantener constante la
temperatura de 130 ±1°C.
7.2.6. Equipo filtrante.
7.3. Reactivos.
131007 Acetona PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
121515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA
151628 Silicona líquida antiespumante PR
7.3.1. Acido Sulfúrico 0,26 N. Disolver 1,25 g de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO en 100 ml de Agua PAACS.
7.3.2. Silicona líquida antiespumante PR.
7.3.3. Potasio Hidróxido solución 0,23N: Disolver
1,52 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA en
100 ml de Agua PA-ACS.
7.3.4. Acetona PA-ACS-ISO.
7.3.5. Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO.
7.4. Procedimiento.
Pesar, con precisión de 1 mg, de 1 a 3 g de
muestra y añadir 200 ml de Acido Sulfúrico 0,26 N
y unas gotas de Silicona líquida antiespumante. Llevar a ebullición y mantenerla durante treinta minutos
en un sistema de refrigeración a reflujo.
Transcurridos los treinta minutos filtrar sobre el crisol
(7.2.2.), previamente incinerado y lavar el residuo con
Agua PA-ACS caliente hasta que no dé reacción ácida.
Transferir cuantitativamente el residuo a un
matraz adaptable al sistema de reflujo, añadir
200 ml de solución de Potasio Hidróxido 0,23N y
unas gotas de antiespumante. Llevar a ebullición y
dejar hervir durante treinta minutos. Filtrar sobre el
crisol filtrante y lavar con Agua PA-ACS caliente
hasta que no dé reacción alcalina. Deshidratar
lavando tres veces con Acetona PA-ACS-ISO usando un volumen total de unos 100 ml.
31
Llevar el crisol a la estufa y secarlo a 130°C
durante dos horas. Dejar enfriar en desecador y
pesar rápido. Introducir a continuación el crisol en el
horno (7.2.3.) y dejar calcinar durante tres horas
como mínimo a 550°C. Dejar enfriar en desecador y
pesar rápidamente.
7.5. Cálculos.
100 P1 - P2
Fibra bruta (%) = ——————
P0
Siendo:
P0 = Peso inicial de la muestra.
P1 = Peso del crisol conteniendo la muestra
desecada.
P2 = Peso del crisol conteniendo la muestra
calcinada.
7.6. Observaciones.
7.6.1. Las muestras conteniendo más de un
10% de materia grasa deben desengrasarse con
éter etílico antes del análisis.
7.6.2. Para efectuar el procedimiento anterior
podrán utilizarse sistemas automáticos o semiautomáticos, adaptándose a las especificaciones del
equipo.
7.7. Referencias.
7.7.1. Journal Officiel des Communautés Européenes, número L 83/24, 1973.
8. AZUCARES
8.1. Principio.
Eliminación de todas las materias reductoras distintas de los azúcares, mediante defecación a partir
de las soluciones Carrez I, II, previa disolución de los
azúcares en etanol diluido. Eliminación del etanol y
valoración antes y después de la inversión según el
método de Luff-Schoorl.
8.2. Material y aparatos.
8.2.1. Agitador mecánico.
8.2.2. Matraces aforados de 1.000; 300; 200;
100 y 50 ml.
32
8.3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
181023 Acido Clorhídrico 0,1mol/l (0,1N) SV
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
121085 Etanol 96% v/v PA
121428
131079
211835
131505
131542
172174
171618
131648
181694
181723
131775
Mercurio II Yoduro rojo PA
3-Metil-1-Butanol PA-ACS
Piedra Pómez gránulos QP
Potasio Hexacianoferrato II 3-hidrato
PA-ACS
Potasio Yoduro PA-ISO
Reactivo de Luff-Schoorl RE
Rojo de Metilo solución 0,1% RE
Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO
Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N)
indicador Fenolftaleína SV
Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV
Zinc Acetato 2-hidrato PA-ACS
8.3.1. Etanol 40% (v/v) d= 0,948 a 20°C. Diluir
Etanol 96% v/v PA con Agua PA-ACS hasta la concentración indicada.
8.3.2. Solución de Carrez I. Disolver en Agua PAACS 24 g de Zinc Acetato 2-hidrato PA-ACS y 3 ml
de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y añadir Agua
PA-ACS hasta 100 ml.
8.3.3. Solución de Carrez II. Disolver en Agua
PA-ACS 10,6 g de Potasio Hexacianoferrato II 3hidrato PA-ACS K4(FeCN6).3H2O y añadir Agua PAACS hasta 100 ml.
8.3.4. Rojo de Metilo solución 0,1% RE.
8.3.5. Acido Clorhídrico 4N. Diluir Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS hasta la concentración indicada.
8.3.6. Acido Clorhídrico 0,1mol/l (0,1N) SV.
8.3.7. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) indicador
Fenolftaleína SV.
8.3.8. Solución de Cobre Sulfato. Disolver 25 g
de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
CuSO4.5H2O, exento de hierro, en Agua PA-ACS y
enrasar a 100 ml.
8.3.9. Solución de Acido Cítrico. Disolver 50 g de
Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO C6H8O7.H2O
en 50 ml de Agua PA-ACS.
8.3.10. Solución de Sodio Carbonato. Disolver
143,8 g de Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO
en unos 300 ml de Agua PA-ACS caliente, dejar
enfriar y completar a 300 ml.
8.3.11. Solución de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l
(0,1N) SV.
8.3.12. Solución de Almidón. Añadir una mezcla
de 5 g de Almidón soluble RE en 30 ml de Agua PAACS a 1 l de Agua PA-ACS hirviendo. Dejar hervir
durante 3 minutos. Dejar enfriar. Añadir 10 mg de
Mercurio II Yoduro rojo PA como agente conservador.
8.3.13. Acido Sulfúrico 6N. Diluir Acido Sulfúrico
96% PA-ISO con Agua PA-ACS hasta concentración indicada.
8.3.14. Solución de Potasio Yoduro 30% (p/v).
Disolver Potasio Yoduro PA-ISO con Agua PA-ACS
hasta concentración indicada.
8.3.15. Piedra Pómez gránulos QP, lavado con
M
Acido Clorhídrico 35% PA-ISO y aclarada con Agua
PA-ACS.
8.3.16. 3-Metil-1-Butanol PA-ACS.
8.3.17. Reactivo de Luff-Schoorl RE o bien prepararlo de la siguiente forma: verter agitando cuidadosamente la solución de Acido Cítrico (8.3.9.)
en la solución de Sodio Carbonato (8.3.10.). Agitar
hasta la desaparición del desprendimiento gaseoso. A continuación añadir la solución de Cobre Sulfato (8.3.8.) y completar hasta 1 l con Agua PAACS. Dejar reposar doce horas y filtrar. Verificar la
normalidad del reactivo obtenido (Cu 0,1N;
Na2CO32N). El pH de la solución debe ser aproximadamente 9,4.
8.4. Procedimiento.
8.4.1. Preparación de la muestra. Pesar con
aproximación de 1 mg, 2,5 g de la muestra e introducirla en un matraz aforado de 250 ml. Añadir
200 ml de Etanol 40% (v/v) y mezclar durante una
hora en el agitador. Añadir 5 ml de la solución Carrez
I y agitar durante un minuto. Adicionar y agitar durante el mismo tiempo con 5 ml de la solución Carrez II.
Enrasar a 250 ml con la solución de Etanol 40%
(v/v) (8.3.1.), homogeneizar y filtrar. Tomar 200 ml de
filtrado y evaporar aproximadamente hasta la mitad
del volumen, a fin de eliminar la mayor parte del Etanol. Transvasar en su totalidad el residuo de evaporación, con ayuda de Agua PA-ACS caliente, a un
matraz aforado de 200 ml y enfriar, a continuación
enrasar con Agua PA-ACS y filtrar si es necesario.
Esta solución será utilizada para la determinación de
azúcares reductores y, después de la inversión, para
la determinación de azúcares totales.
8.4.2. Determinación de azúcares reductores.
Tomar como máximo 25 ml de la solución preparada según 8.4.1. y que contenga menos de 60 mg
de azúcares reductores, expresado en glucosa. Si
es necesario, completar el volumen hasta 25 ml con
Agua PA-ACS y determinar la cantidad de azúcares
reductores según Luff-Schoorl. El resultado será
expresado en tantos por ciento de glucosa.
8.4.3. Determinación de azúcares totales previa
inversión. Tomar 50 ml de la solución (8.4.1.) y llevar
a un matraz aforado de 100 ml. Añadir unas gotas
de Rojo de Metilo solución 0,1% RE y adicionar lentamente agitando 15 ml de la solución de Acido
Clorhídrico 0,1mol/l (0,1N) SV y sumergirlo en un
baño de agua caliente a ebullición durante 30 minutos. Refrigerar hasta 20°C y añadir a continuación
15 ml de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) indicador
Fenolftaleína SV (8.3.7.). Enrasar a 100 ml con Agua
PA-ACS y homogeneizar.
Tomar una cantidad que no exceda de 25 ml y
contenga menos de 60 mg de azúcares reductores,
expresado en glucosa. Si es necesario, completar el
volumen hasta 25 ml con Agua PA-ACS y determinar la cantidad de azúcares reductores según LuffSchoorl. El resultado será expresado en tantos por
ciento de glucosa. De expresarlo en sacarosa, se
debe multiplicar por el factor 0,95.
8.4.4. Valoración de Luff-Schoorl. Tomar 25 ml
del reactivo Luff-Schoorl (8.3.17.) y llevarlo a un
Erlenmeyer de 300 ml, añadir 25 ml exactamente
medidos de la solución defecada de azúcares, adicionar un poco de Piedra Pómez gránulos QP y
calentar agitando. Adaptar en seguida un refrigerante de reflujo sobre el Erlenmeyer, a partir de este
momento hacer hervir la solución y mantener en
ebullición durante diez minutos exactamente. Refrigerar inmediatamente al chorro de agua fría durante cinco minutos y proceder a su valoración.
Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro
(8.3.14.) inmediatamente después y, con cuidado,
25 ml de Acido Sulfúrico 6N (8.3.13.). Valorar a continuación mediante la solución de Sodio Tiosulfato
0,1 mol/l (0,1N) SV (8.3.11.) hasta la aparición de
color amarillo, añadir en ese momento la solución
de Almidón y terminar de valorar. Efectuar la misma
valoración sobre una mezcla que contenga 25 ml,
exactamente medidos, del reactivo de Luff-Schoorl,
25 ml de Agua PA-ACS, 10 ml de la solución de
Potasio Yoduro (8.3.14.) y 25 ml de la solución de
Acido Sulfúrico 6N (8.3.13.) sin llevar a ebullición.
8.5. Cálculos.
Establecer por medio de la tabla I la cantidad de
glucosa en mg correspondiente a la diferencia entre
las dos valoraciones, según los ml de sodio tiosulfato 0,1N gastados en cada una de las valoraciones.
Expresar el resultado en tanto por ciento de azúcares en la muestra.
8.6. Observaciones.
8.6.1. Es recomendable añadir aproximadamente 1 ml de alcohol iso-amílico (sin tener en cuenta el
volumen) antes de la ebullición, con el reactivo LuffSchoorl para evitar la formación de espuma.
8.6.2. La diferencia entre la cantidad de azúcares
totales después de la inversión, expresada en glucosa, y la cantidad de azúcares reductores, expresada igualmente en glucosa, multiplicada por 0,95
da la cantidad en tanto por ciento de sacarosa.
8.6.3. Para calcular la cantidad de azúcares
reductores, excluyendo la lactosa, se puede determinar de las siguientes formas:
8.6.3.1. Para un cálculo aproximado, multiplicar
por 0,675 la cantidad de lactosa obtenida, por
determinación separada y restar el resultado obtenido de la cantidad en azúcares reductores.
8.6.3.2. Para el cálculo preciso de azúcares
reductores, excluyendo la lactosa, es necesario partir de la misma muestra 8.4.1. para las dos determinaciones finales. Uno de los análisis es efectuado a
partir de la solución obtenida en 8.4.1. y el otro
sobre una parte de la solución obtenida para la valoración de la lactosa según el método para la determinación de la lactosa.
33
En los casos 8.6.3.1. y 8.6.3.2. la cantidad de
azúcares presentes se determinan según el método
de Luff-Schoorl, expresado en mg de glucosa. La
diferencia entre los dos valores se expresa en tanto
por ciento de la muestra.
8.7. Referencias.
8.7.1. Journal Officiel des Communautés
Europèennes, núm. L 155/32, 1971.
TABLA 1
Para 25 ml de reactivo Luff-Schoorl
Na2S203
0,1N
Glucosa, fructosa
azúcares invertidos
C6 H12 06
Lactosa
C12 H22 011
ml
mg
Diferencia
mg
Diferencia
mg
Diferencia
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
2,4
4,8
7,2
9,7
12,2
14,7
17,2
19,8
22,4
25,0
27,6
30,3
33,0
35,7
38,5
41,3
44,2
47,1
50,0
53,0
56,0
59,1
62,2
2,4
2,4
2,5
2,5
2,5
2,5
2,6
2,6
2,6
2,6
2,7
2,7
2,7
2,8
2,8
2,9
2,9
2,9
3,0
3,0
3,1
3,1
3,6
7,3
11,0
14,7
18,4
22,1
25,8
29,5
33,2
37,0
40,8
44,6
48,4
52,2
56,0
59,9
63,8
67,7
71,7
75,7
79,8
83,9
88,0
3,7
3,7
3,7
3,7
3,7
3,7
3,7
3,7
3,8
3,8
3,8
3,8
3,8
3,8
3,9
39
39
4,0
4,0
4,1
4,1
4,1
3,9
7,8
11,7
15,6
19,6
23,5
27,5
31,5
35 5
39,5
43.5
47,5
51,6
55,7
59,8
63,9
68,0
72,2
76,5
80,9
85,4
90,0
94,6
3,9
3,9
3,9
4,0
3,9
4,0
4,0
4,0
4,0
4,0
4,0
4,1
4,1
4,1
4,1
4,1
4,2
4,3
4,4
4,5
4,6
4,6
9. CLORUROS
9.1. Principio.
Los cloruros se solubilizan en agua, defecándose la solución si contienen materias orgánicas, posterior acidificación de la misma con ácido nítrico y
precipitación de los cloruros con plata nitrato. El
exceso de nitrato se valora con una solución de
amonio sulfocianuro.
34
Maltosa
C12 H22 011
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Agitador de 35 a 40 r.p.m.
9.3. Reactivos.
131007 Acetona PA-ACS-ISO
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
171366 Alumbre de hierro amoniacal solución
saturada RE
181144 Amoníaco Tiocianato 0,1 mol/l (0,1N) SV
121237 Carbón Activo polvo PA
132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
181464 Plata Nitrato 0,1 mol/l (0,1N) SV
131505 Potasio Hexacianoferrato II 3-hidrato
PA-ACS
131775 Zinc Acetato 2-hidrato PA-ACS
9.3.1. Solución de Amoníaco Tiocianato 0,1
mol/l (0,1N) SV.
9.3.2. Solución de Plata Nitrato 0,1 mol/l (0,1N)
SV.
M
9.3.3. Alumbre de hierro amoniacal solución
saturada RE.
9.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO.
9.3.5. Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO.
9.3.6. Acetona PA-ACS-ISO.
9.3.7. Solución de Carrez I: Disolver en Agua PAACS 24 g de Zinc Acetato 2-hidrato PA-ACS y 3 g
de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. Completar
hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.
9.3.8. Solución de Carrez II: Disolver en Agua
PA-ACS 10,6 g de Potasio Hexacianoferrato II 3hidrato PA-ACS. Completar a 100 ml con Agua PAACS.
9.3.9. Carbón Activo, exentos de cloruros. Usar
Carbón Activo polvo PA.
9.4. Procedimiento.
Pesar, con precisión de 1 mg aproximadamente, 5 g
de muestra e introducirla con 1 g de Carbón Activo
exento de cloruros en un matraz aforado de 500 ml.
Añadir 400 ml de Agua PA-ACS a 20°C aproximadamente y 5 ml de la solución de Carrez I, agitar y
añadir seguidamente 5 ml de la solución de Carrez
II. Agitar durante 30 minutos, enrasar, homogeneizar
y filtrar.
Tomar de 25 a 100 ml de filtrado (con contenido
en cloro inferior a 150 mg) e introducirlo en un Erlenmeyer, diluir si es necesario, hasta 50 ml con Agua
PA-ACS. Añadir 5 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO,
20 ml de Alumbre de hierro amoniacal solución saturada RE y dos gotas de la solución de Amoníaco Tiocianato 0,1 mol/l (0,1N) SV, añadidas mediante una
bureta llena hasta el trazo cero. Añadir seguidamente mediante una bureta la solución de Plata Nitrato
0,1 mol/l (0,1N) SV hasta un exceso de 5 ml. Añadir
5 ml de Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO y agitar fuertemente para recoger
el precipitado. Valorar el exceso de Plata Nitrato 0,1
mol/l (0,1N) SV mediante la solución de Amoníaco
Tiocianato 0,1 mol/l (0,1N) SV hasta que el viraje a
rojo oscuro persista durante un minuto.
9.5. Cálculos.
La cantidad de cloro (p) expresada en sodio cloruro presente en el volumen del filtrado separado
para la valoración viene dada por la fórmula:
p = 5,845 (V1 - V2) mg
Siendo:
V1 = Volumen, en ml, de solución de Plata Nitrato añadida.
V2 = Volumen, en ml, de solución de Amoníaco
Tiocianato 0,1 mol/l (0,1N) SV utilizados en
la valoración.
Efectuar un ensayo en blanco sin la muestra a
analizar y si consume solución de Plata Nitrato 0,1
mol/l (0,1N) SV, restar este valor al volumen (V1 - V2).
Expresar el resultado en porcentaje de la muestra.
9.6. Observaciones.
9.6.1. Para los productos ricos en materias grasas, desengrasar previamente mediante eter etílico.
9.7. Referencias.
9.7.1. Journal Officiel des Communautés Européennes Núm. L 155/23-1971.
10. ZINC
10.1. Principio.
Determinación del zinc por A.A. previa mineralización de la muestra.
10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
10.2.2. Lámpara de zinc.
10.2.3. Los utilizados para el plomo en (11.2.3.),
(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).
10.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 ±0,002 g/l AA
10.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.)
y (11.3.2.).
10.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ±0,002
g/l AA.
10.4. Procedimiento.
10.4.1. Preparación de la muestra. Como en
(11.4.1.).
10.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
partes alícuotas de la solución patrón (10.3.2.), con
el Acido Nítrico 1%, para obtener soluciones de 0,5;
1,5 y 2 mg/l.
10.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
La lectura se efectuará a 213,5 nm.
10.5. Cálculos.
Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zn para la muestra, teniendo en cuenta el factor concentración o
dilución.
10.6. Referencias.
10.6.1. H.E.Parker: “Atomic Absorption Newsletter” (1963), 13.
35
11. PLOMO
11.1. Principio.
Determinación del plomo por A.A. previa mineralización de la muestra.
11.2. Material y aparatos.
11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
11.2.2. Lámpara de plomo.
11.2.3. Cápsula de platino, cuarzo o similar.
11.2.4. Baño de arena o placa calefactora.
11.2.5. Horno eléctrico (mufla) con dispositivo de
control de temperatura.
11.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ±0,002 g/l AA
11.3.1. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
(d=1,413).
11.3.2. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS
(v/v). Diluir Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO con
Agua PA-ACS, hasta la concentración indicada.
11.3.3. Plomo solución patrón Pb = 1,000
±0,002 g/l AA.
36
11.4. Procedimiento.
11.4.1. Preparación de la muestra. Poner 10 g
de la muestra en la cápsula (11.2.3.), llevar sobre la
placa calefactora teniendo cuidado que la combustión no sea demasiado rápida de manera que no
haya pérdidas de materia sólida por proyección.
Añadir a continuación 2 ml de Acido Nítrico 70%
PA-ACS-ISO y carbonizar el residuo en el baño de
arena o placa calefactora.
Seguidamente introducir la cápsula en la mufla y
mantenerla a 450°C hasta mineralización total
(11.6.1.). Dejar enfriar. Disolver a continuación las
cenizas con Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y Agua
PA-ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml,
lavar la cápsula con Agua PA-ACS y añadir las
aguas de lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.
11.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
alícuotas apropiadas de la solución patrón (11.3.3.)
con Acido Nítrico al 1% necesario para que su concentración sea similar a la dilución final de la muestra para obtener una curva de concentraciones 1; 2
y 3 mg/l.
11.4.3. Determinación. Operar según las especificaciones del aparato; usando llama de aire-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones
a 283 nm. Si la solución está muy concentrada
diluirla con Acido Nítrico al 1%.
11.5. Cálculos.
Calcular el contenido en plomo, expresado en
mg/l mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilución.
11.6. Observaciones.
11.6.1. En caso de que la muestra no esté totalmente mineralizada añadir unas gotas de Acido
Nítrico 70% PA-ACS-ISO y repetir el proceso.
11.7. Referencias.
11.7.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.
Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.
12. MERCURIO
12.1. Principio.
Determinación de mercurio por absorción atómica con técnica de vapor frío previa digestión de la
muestra.
12.2. Material y aparatos.
12.2.1. Balanza de precisión.
12.2.2. Espectrofotómetro de absorción atómica.
12.2.3. Lámpara de mercurio.
12.2.4. Cámara de absorción con ventanas de
cuarzo acoplable al espectrofotómetro.
12.2.5. Equipo de reducción del ion mercurio a
mercurio metálico y de arrastre hasta la cámara de
absorción incluyendo sistema de desecación.
12.2.6. Registrador gráfico de voltaje y velocidad
de carta variable.
12.2.7. Material de vidrio corriente de laboratorio
lavado con Acido Nítrico (1:1) y enjuagado con agua
destilada.
12.2.8. Bloque de digestión con temperatura
programable.
12.2.9. Tubos de digestión para el bloque anterior.
12.2.10. Tubos de condensación adaptables a
los tubos de digestión.
12.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Agua Desionizada
131074 Agua PA-ACS
Estaño II Cloruro 10% (exento de Hg)
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS
313186 Mercurio solución patrón
Hg = 1,000 ±0,002 g/l AA
12.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d = 1,84 ).
12.3.2. Hidrógeno Peróxido 18% p/v. Diluir convenientemente Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100
vol.) PRS con Agua PA-ACS.
12.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (d = 1,41).
12.3.4. Estaño II Cloruro 10% (exento de Hg).
M
12.3.5. Agua PA-ACS.
12.3.6. Mercurio solución patrón Hg = 1,000
±0,002 g/l AA.
12.3.7. Solución patrón de Mercurio de 0,1 mg/l.
Se obtiene de la anterior por sucesivas diluciones
con Agua Desionizada. Debe prepararse al igual
que las soluciones intermedias, diariamente.
12.4. Procedimiento.
12.4.1. Preparación de la muestra: Colocar de 3
a 5 g de muestra en un tubo digestor (12.2.9.) acoplando éste a un tubo de condensación (12.2.10.).
Añadir 10 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO a incrementos de 1 ml (la muestra se carboniza; pero si el
ácido se añade lentamente, de modo que la temperatura de la solución permanezca baja, y se toma la
precaución de que no se formen masas de carbón,
el mercurio queda en solución). Añadir 10 ml de
Hidrógeno Peróxido 18% p/v (12.3.2.) a incrementos
de 1 ml. Dejar reaccionar antes de añadir el siguiente incremento. Añadir 10 ml de Acido Nítrico 70%
PA-ACS-ISO a incrementos de 1 ml. Lavar los condensadores con Agua PA-ACS y retirarlos.
12.4.2. Digestión de la muestra: Colocar los
tubos de digestión en el bloque calefactor y calentar a 100°C. Mantener esta temperatura durante 6
minutos, aumentarlo entonces hasta 200°C a razón
de 4°C/minuto. Retirar los tubos del bloque y dejar
enfriar. Transferir las soluciones a matraces de
100 ml y enrasar con Agua PA-ACS.
12.4.3. Determinación: Se analiza la muestra por
la técnica de vapor frío A.A. según las instrucciones
propias de cada aparato, utilizando Estaño II Cloruro 10% (exento de Hg) como agente reductor
(12.3.4.) siendo la longitud de onda de medida
254 nm.
12.4.4. Construcción de la curva patrón: Se
obtiene representando en abcisas los contenidos en
mercurio de los patrones preparados con alícuotas
de 0; 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 y 10 ml de solución patrón
de 0,1 mg/l de forma que contenga de 0 a 1 mg de
mercurio y en ordenada a la altura de los correspondientes máximos de absorción. Dichos patrones
se habrán sometido al mismo procedimiento que las
muestras.
12.5. Cálculos.
Calcular el contenido en mercurio refiriéndolos a
la curva patrón obtenida previamente y operando en
idénticas condiciones.
L
mg de Hg/Kg = ——
P
en donde:
L = La lectura obtenida a partir de la gráfica
expresada en microgramos.
P = Peso, en gramos, de la muestra.
12.6. Referencias.
12.6.1. Munns y Holland. JAOAC 60 833-837,
1977.
12.6.2. Marts y Blahc. JAOAC vol. 66, número 6
1983.
12.6.3. AOAC Métodos oficiales de análisis,
1980.
13. COBRE
13.1 Principio.
Determinación del cobre por A.A. previa mineralización de la muestra.
13.2. Material y aparatos.
13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
13.2.2. Lámpara de cobre.
13.2.3. Las utilizadas para el plomo, en (11.2.3.),
(11.2.4.) y (11.2.5.).
13.3. Reactivos
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
313178 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA
13.3.1. Los utilizados para el plomo, en (11.3.1.)
y (11.3.2.).
13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000
±0,002 g/l AA.
13.4. Procedimiento.
13.4.1. Preparación de la muestra. Como en
(11.4.1.).
13.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
parte alícuota de la solución patrón (13.3.2.) con
Acido Nítrico del 1% para obtener soluciones que
contengan de 1 a 5 mg de Cu/l.
13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
Medir a 324,7 nm.
13.5 Cálculos.
Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos para la muestra, hallar mediante la curva patrón
las concentraciones de cobre de la muestra.
13.6 Referencias.
13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption Newsletter (1963),13”.
13.6.2 F. Rousselet: “Spectrophotometrie pour
absorption atomique Boudin” Ed. Paris (1968),
págs. 59-144.
37
14. ARSENICO
14.1. Principio.
La muestra se somete a una digestión ácida con
una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
La determinación del arsénico se realiza por
espectrofotometría de absorción atómica, con
generador de hidruros.
14.2. Material y aparatos.
14.2.1. Balanza analítica con precisión de
0,1 mg.
14.2.2. Matraces Kjeldahl de 250 ml.
14.2.3. Espectrofotómetro de absorción atómica
equipado con sistema generador de hidruros.
14.2.4. Lámpara de descarga sin electrodos.
14.2.5. Fuente de alimentación para lámpara de
descarga sin electrodos.
14.2.6. Registro gráfico.
14.3. Reactivos.
Se utilizan solamente reactivos de grado de
pureza para análisis y agua destilada.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
313171 Arsénico solución patrón
As = 1,000 ±0,002 g/l AA
121515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA
123314 Sodio Borohidruro PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
38
14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
(d = 1,19 g/ml).
14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 32% v/v.
Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PAACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 1,5% v/v.
Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PAACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
1.000 ml.
14.3.4. Acido Nítrico 65% (d = 1,40). Diluir Acido
Nítrico 70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta
la concentración indicada.
14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d = 1,84).
14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%. Pesar
1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.
Pesar 3 g de Sodio Borohidruro PA y disolverlos
hasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.
14.3.8. Disolución de EDTA Sal Disódica 2-hidrato al 1%. Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.
14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA
y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%
(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
(14.3.5.) con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1%
(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000
±0,002 g/l AA.
14.3.13. Solución patrón de Arsénico de concentración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución
patrón de Arsénico (14.3.12.) en un matraz aforado
de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
14.3.14. Solución patrón de Arsénico de concentración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de
Arsénico (14.3.13.) en un matraz aforado de 100 ml.
Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
14.4. Procedimiento.
14.4.1. Preparación de la muestra.- En un
matraz Kjeldahl, de 250 ml introducir 2 g de muestra con 20 ml de Acido Nítrico 65% y 5 ml de Acido
Sulfúrico 96% PA-ISO. Llevar a ebullición hasta un
volumen aproximado de 5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml de la
solución resultante.
14.4.2. Preparación del blanco y patrones de trabajo. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml de la
solución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al
mismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solución contiene 10 ng de Arsénico. Preparar un blanco con todos los reactivos utilizados siguiendo el
tratamiento dado a la muestra.
14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.Encender la fuente de alimentación de las lámparas
de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente
para que se estabilice la energía de la lámpara.
Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitud
de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo con las condiciones del aparato.
Encender el generador de hidruros, colocando la
temperatura de la celda a 900°C, esperando hasta
que se alcance dicha temperatura. Se ajustan las
condiciones del generador de hidruros según las
especificaciones del aparato. Ajustar el flujo de
Argón de acuerdo con las características del aparato. Encender el registrador.
14.4.4. Determinación.- Las determinaciones de
la concentración de Arsénico se realizan por el
método de adición de patrones, por medio de medidas duplicadas en el espectrofotómetro en las condiciones especificadas en (14.4.3.), añadiendo al
matraz de reacción 3 ml de la solución (14.3.8.)
usando como reductor la solución (14.3.7.); como
patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.
M
Lavar los matraces antes y después de cada uso,
con Acido Clorhídrico 1,5% (14.3.3.). Al construir la
gráfica de adición hay que descontar el valor de
absorbancia del blanco obtenido en las mismas
condiciones anteriores, pero añadiendo 3 ml de la
solución en blanco. En estas condiciones el límite
de detección de la técnica es de 5 ng.
39
Pastas alimenticias
40
M
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 8-9-1987)
10. GRADO DE ACIDEZ
10.1. Principio.
La acidez del extracto alcohólico de las pastas
alimenticias se determina por titulación y se expresa
en ml de NaOH 1N.
10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Molino de laboratorio, que sin calentar la
muestra sea capaz de obtener partículas inferiores a
550 micras.
10.2.2. Filtro de filtración rápida.
10.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% v/v PA
171327 Fenolftaleína solución 1% RE
182296 Sodio Hidróxido 0,025 mol/l
(0,025N) SV
Transcurridas las tres horas, filtrar a través del filtro 10.2.2. Tomar del filtrado 50 ml y titular con
NaOH 0,02N, empleando como indicador tres
gotas de Fenolftaleína solución 1% RE.
10.5. Expresión de los resultados.
Se define el grado de acidez (G) como el número de ml de sodio hidróxido 1N necesario para neutralizar la acidez de 100 g de producto seco.
V x 100
G = ————
100 - H
Siendo:
V = Volumen, en ml, de NaOH 0,02N empleados
en la neutralización.
H = Porcentaje de humedad de la muestra.
Expresar el resultado con una cifra decimal.
10.3.1. Etanol de 95°, exento de peróxidos.
10.3.2. Etanol de 50°. Mezclar 100 ml de Etanol
de 95° con 96 ml de Agua PA-ACS.
10.3.3. Sodio Hidróxido 0,025 mol/l (0,025N) SV
o preparar disolviendo Sodio Hidróxido lentejas PAACS-ISO en Agua PA-ACS, hasta la concentración
indicada.
10.3.4. Fenolftaleína solución 1% RE.
10.4. Procedimiento.
Moler la muestra a analizar de modo que pase completamente a través de un tamiz de malla de 500
micras.
Pesar, con precisión de un miligramo, 4 g de producto, transfiriéndolo a un matraz Erlenmeyer de
500 ml con tapón esmerilado, y añadir 100 ml de
etanol de 50° previamente neutralizado a la fenolftaleína con NaOH 0,02N. Agitar vigorosamente y dejar
en contacto con la solución alcohólica durante tres
horas, agitando periódicamente.
41
Galletas
42
M
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 24-11-1987)
10. EXTRACCION DE LA GRASA PARA
SU IDENTIFICACION
10.1. Principio.
Extracción de la grasa con éter de petróleo
mediante aparato de extracción continuo.
10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Extractor tipo Soxhlet.
10.2.2. Cartuchos de extracción.
10.2.3. Matraces de 100 a 150 ml adaptables al
extractor.
10.2.4. Batería de extracción.
10.3. Reactivos.
131315 Eter de Petróleo 40-60°C PA-ISO
10.3.1. Eter de Petróleo 40-60°C PA-ISO.
10.4. Procedimiento.
Tomar de 5 a 10 g de muestra, preparada según
método 1, y efectuar la extracción con Eter de
Petróleo 40-60°C PA-ISO, en el aparato de extracción continuo (10.2.1.) a una temperatura entre 4060°C.
10.5. Observaciones.
10.5.1. En el caso de necesitarse la grasa para la
determinación de componentes que se puedan
alterar a 60°C, se podrá realizar la extracción en frío
utilizando éter etílico o cloroformo-etanol (1:1).
43
Cerveza
44
M
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 23-10-1985)
1. GRADUACION ALCOHOLICA
1.1. Principio.
Se determina por destilación de la cerveza y
medida de la densidad del destilado por picnometría.
1.4. Cálculo.
Utilizar la tabla adjunta para calcular, a partir de la
densidad del destilado, la graduación alcohólica
expresada en gramos de alcohol en 100 gramos de
cerveza.
1.5. Referencia.
1.5.1. European Brewery Convention, Analytica
EBC (3ª edición), Method 7.1. Schweizer BrauereiRundschau, Zurich, 1975.
1.2. Material y aparatos.
1.2.1. Matraz de destilación de 300 a 500 ml.
1.2.2. Refrigerante vertical de Liebig, de al
menos 400 mm de longitud útil. El tubo inferior debe
ser suficientemente largo para poder penetrar hasta
el fondo del Erlenmeyer. Debe igualmente estar provisto de una bola de seguridad por encima del nivel
del cuello del matraz.
1.2.3. Bola tipo Kjeldahl para adaptar al matraz
de destilación y al refrigerante.
1.2.4. Picnómetro aforado para contener aproximadamente 50 g de agua pura a 20°C, con las
dimensiones aproximadas siguientes: Altura total,
140 a 160 mm. Longitud del cuello, 65 a 85 mm.
Diámetro del interior del cuello, 2,5 a 4 mm. Distancia entre el trazo del aforo y el borde superior, 25 a
35 mm.
1.2.5. Termómetro graduado en 0,1°C.
1.2.6. Baño termostatizado capaz de mantener
una temperatura de 20°C ±0,1°C y de una altura tal
que los picnómetros queden sumergidos con la
marca del enrase por debajo del nivel de agua.
1.2.7. Balanza analítica sensible a 0,0001 g.
1.3. Procedimiento.
1.3.1. Preparación de la muestra. Tomar 300 a
500 ml de cerveza a una temperatura de 17° a 20°C
en un matraz Erlenmeyer, de aproximadamente
700 ml, taparlo con la mano y agitar para que se
desprenda el CO2. Filtrar seguidamente la cerveza a
tavés de un papel de filtro seco en un embudo que
se cubre con un vidrio de reloj y recoger el filtrado
en otro matraz.
1.3.2. Pesar 100 g de cerveza en un matraz
tapado de 500 ml y añadir aproximadamente 50 ml
de 131074 Agua PA-ACS. Conectar el matraz al
dispositivo de destilación. Colocar el matraz sobre
una rejilla de amianto y calentar, suavemente al principio, para destilar el alcohol. Sumergir la salida del
refrigerante en 5 ml de Agua PA-ACS contenidos en
un matraz tarado de 100 ml que se coloca en un
baño de agua con hielo. Cuando se han recogido
85 a 90 ml del destilado, detener la destilación y
completar el destilado hasta 100 gramos ±0,1
gramo. Homogeneizar bien el destilado y medir su
densidad a 20°C / 20°C con ayuda de un picnómetro, tomando precauciones para evitar toda pérdida
de alcohol.
45
TABLA 1.1
Contenido en alcohol expresado en tanto por ciento para densidades medidas a 20º / 20ºC
46
Densidad
%
1,00000
0,99998
97
95
93
91
89
87
86
84
0,00
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99982
80
78
76
75
73
71
69
67
65
Densidad
Densidad
%
%
Densidad
%
0,99926
24
22
21
19
17
15
13
11
09
0,40
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99851
49
47
45
43
41
39
37
35
33
0,80
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99777
75
73
71
70
68
66
64
62
60
1,20
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99907
05
03
02
00
0,99898
96
94
92
90
0,50
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99832
30
28
26
24
22
20
19
17
15
0,90
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99758
57
55
53
51
49
47
46
44
42
1,30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99963
61
60
58
56
54
52
50
49
47
0,20
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99888
87
85
83
81
79
77
76
74
72
0,60
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99813
11
09
08
06
04
02
00
0,99798
97
1,00
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99740
38
37
35
33
31
29
28
26
24
1,40
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99945
43
41
39
37
35
33
32
30
28
0,30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99870
68
66
64
62
60
59
57
55
53
0,70
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99795
93
91
90
88
86
84
82
80
79
1,10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99722
20
18
17
15
13
11
09
07
06
1,50
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99926
0,40
0,99851
0,80
0,99777
1,20
0,99704
1,60
M
TABLA 1.1
(continuación)
Densidad
%
Densidad
%
Densidad
%
Densidad
%
0,99704
02
00
0,99698
97
95
93
91
89
87
1,60
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99631
29
28
26
24
22
20
19
17
15
2,00
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99559
57
55
53
52
50
48
46
44
42
2,40
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99489
87
85
83
81
80
78
76
75
73
2,80
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99685
84
82
80
78
76
74
72
71
69
1,70
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99613
11
10
08
06
04
02
00
0,99599
97
2,10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99541
39
37
35
33
32
30
28
26
25
2,50
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99472
70
68
67
65
63
62
60
58
57
2,90
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99667
65
64
62
60
58
56
54
52
50
1,80
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99595
93
91
89
87
86
84
82
80
78
2,20
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99523
21
20
18
16
14
13
11
09
07
2,60
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99455
53
51
50
48
46
45
43
42
40
3,00
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99649
47
45
44
42
40
38
36
35
33
1,90
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99577
75
73
71
69
67
65
64
62
60
2,30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99506
04
02
00
0,99499
97
95
94
92
90
2,70
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99438
36
35
33
31
30
28
26
24
23
3,10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99631
2,00
0,99559
2,40
0,99489
2,80
0,99421
3,20
47
TABLA 1.1
(continuación)
48
Densidad
%
Densidad
%
Densidad
%
0,99421
19
17
16
14
12
11
09
07
05
3,20
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99352
50
49
47
45
43
42
40
38
37
3,60
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99285
83
82
80
79
77
75
74
72
70
4,00
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99220
18
16
15
13
12
10
09
07
05
4,40
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99404
02
00
0,99398
96
95
93
91
89
88
3,30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99335
33
32
30
28
27
25
23
21
19
3,70
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99269
67
65
64
62
60
59
57
55
54
4,10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99203
02
00
0,99199
97
96
94
92
90
89
4,50
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99386
84
83
81
79
77
76
74
72
70
3,40
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99318
16
14
13
11
09
08
06
04
03
3,80
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99252
51
49
47
46
44
42
41
39
37
4,20
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99187
85
84
82
81
79
77
75
74
73
4,60
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99369
67
65
64
62
60
59
57
55
54
3,50
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99301
0,99299
98
96
94
93
91
89
88
86
3,90
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99236
34
33
31
29
28
26
24
23
21
4,30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99171
69
67
66
64
63
61
59
58
56
4,70
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99352
3,60
0,99285
4,00
0,99220
4,40
0,99154
4,80
Densidad
%
M
TABLA 1.1
(continuación)
Densidad
%
Densidad
%
Densidad
%
Densidad
%
0,99154
53
51
49
47
46
44
42
41
39
4,80
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99089
87
85
84
82
81
79
77
76
74
5,20
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99026
24
23
21
19
18
16
14
13
11
5,60
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98962
61
59
58
56
55
53
52
50
49
6,00
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99138
36
34
33
31
29
27
26
24
23
4,90
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99073
71
69
68
66
64
63
61
59
58
5,30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99010
08
07
05
03
02
00
0,98999
97
85
5,70
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98947
45
44
42
41
40
38
36
34
33
6,10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99121
19
18
16
14
13
11
10
08
06
5,00
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99057
55
54
52
51
49
47
45
44
42
5,40
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98994
92
90
89
87
66
84
83
81
80
5,80
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98931
29
28
26
24
23
22
20
18
17
6,20
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99105
03
02
00
0,99098
97
95
93
92
90
5,10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99041
40
38
37
35
33
32
30
29
27
5,50
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98978
76
74
73
71
70
68
67
65
63
5,90
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98915
13
12
10
09
07
05
04
02
0,98901
6,30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,99089
5,20
0,99026
5,60
0,98962
6,00
0,98899
6,40
49
TABLA 1.1
(continuación)
50
Densidad
%
0,98899
97
96
94
92
91
89
88
86
85
6,40
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98837
35
34
32
30
29
27
26
24
23
6,80
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98777
76
75
73
72
70
68
67
65
64
0,98883
82
80
78
76
75
74
72
70
69
6,50
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98821
20
19
17
15
14
12
11
10
08
6,90
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98867
66
64
62
61
59
58
56
55
53
6,60
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98807
06
04
03
01
00
0,98798
97
95
94
0,98852
50
49
47
46
44
43
41
40
38
6,70
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98837
6,80
Densidad
%
7,20
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98717
16
14
13
11
10
08
07
05
04
7,60
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98762
60
59
57
56
55
53
52
50
49
7,30
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98702
00
0,98699
98
96
94
93
92
90
89
7,70
1
2
3
4
5
6
7
8
9
7,00
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98747
46
44
43
41
39
38
36
35
33
7,40
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98687
86
84
83
81
80
78
77
75
74
7,80
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98792
91
89
88
86
85
83
82
80
79
7,10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98732
30
29
27
26
24
23
22
20
19
7,50
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98672
71
69
68
66
65
63
62
60
59
7,90
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,98777
7,20
0,98717
7,60
0,98657
8,00
Densidad
%
Densidad
%
M
2. EXTRACTO REAL
2.1. Principio.
El extracto real se calcula a partir de la densidad del residuo de destilación sin el alcohol, una
vez restablecido su peso inicial por adición de
agua destilada.
2.2. Material y aparatos.
Los mismos empleados en 1.2.
2.3. Procedimiento.
Enfriar aproximadamente a 20°C el residuo de
destilación obtenido en 1.3.2. y completar a
100,0 g con 131074 Agua PA-ACS, mezclar bien
y determinar la densidad a 20°C, con ayuda del
picnómetro (1.2.3.). Las pesadas del picnómetro
vacío, con Agua PA-ACS y con el residuo de destilación se realizan con una aproximación de
0,0002 g.
2.4. Cálculo.
Utilizar la tabla adjunta para calcular, a partir de
la densidad obtenida, el porcentaje del extracto
(g/100 g).
2 5. Referencia.
2.5.1. European Brewery Convention, Analytica EBC (3rd ed.), Method 7.1. Schweizer Brauerei - Rundschau, Zurich, 1975.
TABLA 2.1
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
1, 00000
004
008
012
016
020
024
028
031
035
039
043
047
051
055
059
063
067
070
074
078
082
086
089
093
097
1,00101
105
0, 00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
0,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
0,20
21
22
23
24
25
26
27
0,99823
827
831
835
839
843
847
851
854
858
862
866
870
874
878
882
886
890
893
897
0,99901
905
909
912
916
920
924
928
0,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
0,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
0,20
21
22
23
24
25
26
27
109
113
117
121
125
128
132
136
140
144
148
152
156
160
164
167
172
176
180
184
187
191
195
199
1,00203
207
211
215
% de
ext.
g / 100 g
28
29
0,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
0,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
0,50
51
52
53
54
55
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
932
936
940
944
948
951
955
959
963
967
971
975
979
983
987
990
994
998
1,00002
006
009
013
017
021
025
029
033
037
28
29
0,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
0,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
0,50
51
52
53
54
55
51
TABLA 2.1
(continuación)
52
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
219
223
226
230
234
238
242
246
250
254
258
262
265
269
273
277
281
285
289
293
297
1,00301
304
308
312
316
320
324
328
332
336
340
343
347
351
355
359
363
367
371
375
379
382
386
390
56
57
58
59
0,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
0,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
0,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
0,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
1,00
041
045
048
052
056
060
064
068
072
076
080
084
087
091
095
099
1,00103
107
111
115
119
123
126
130
134
138
142
146
150
154
158
162
165
169
173
177
181
185
189
193
197
1,00201
204
208
212
56
57
58
59
0,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
0,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
0,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
0,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
1,00
394
398
1,00401
405
409
413
417
421
425
429
433
437
440
444
448
452
456
460
464
468
472
476
479
483
487
491
495
499
1,00503
508
512
516
519
523
527
531
535
539
543
547
551
555
558
562
566
01
02
03
04
05
06
07
08
09
1,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
1,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
1,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
1,40
41
42
43
44
45
216
220
223
227
231
235
239
243
247
251
255
259
262
266
270
274
278
282
286
290
294
298
1,00301
305
309
313
317
321
325
329
333
337
340
344
348
352
356
360
364
368
372
376
379
383
387
01
02
03
04
05
06
07
08
09
1,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
1,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
1,30
31
32
33
34
35
36
37
38
1,40
41
42
43
44
45
46
M
TABLA 2.1
(continuación)
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
570
574
577
581
585
589
593
597
1,00601
605
609
613
616
620
624
628
632
636
640
644
648
652
655
659
663
667
671
675
679
683
687
691
694
698
1,00702
706
710
714
718
722
726
730
733
737
741
46
47
48
49
1,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
1,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
1,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
1,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
1,90
391
395
398
1,00402
406
410
414
418
422
426
430
434
437
441
445
449
453
457
461
465
469
473
476
480
484
488
492
496
1,00500
504
508
512
515
519
523
527
531
535
539
543
547
551
554
558
562
47
48
49
1,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
1,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
1,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
1,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
1,90
91
745
749
753
757
761
765
769
773
777
781
785
789
792
796
1,00800
804
808
812
816
820
824
828
831
835
840
844
848
852
856
860
864
868
871
875
879
883
887
891
895
899
1,00903
907
910
914
918
91
92
93
94
95
96
97
98
99
2,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
2,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
2,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
2,30
31
32
33
34
35
566
570
574
578
582
586
590
594
598
1,00602
606
610
613
617
621
625
629
633
637
641
645
649
652
656
660
664
668
672
676
680
684
688
691
695
699
1,00703
707
711
715
719
723
727
730
734
738
92
93
94
95
96
97
98
99
2,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
2,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
2,20
21
23
24
25
26
27
28
29
2,30
31
32
33
34
35
36
37
53
TABLA 2.1
(continuación)
54
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
922
926
930
934
938
942
946
950
954
958
962
966
969
973
977
981
985
989
993
997
1,01001
005
008
012
016
020
024
028
032
036
040
044
048
052
056
060
064
067
071
075
079
083
087
091
095
36
37
38
39
2,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
2,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
2,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
2,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
2,80
742
746
750
754
758
762
766
770
774
778
782
786
789
793
797
1,00801
805
809
813
817
821
825
828
832
836
840
844
848
852
856
860
864
868
872
876
880
884
887
891
895
899
1,00903
907
911
915
38
39
2,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
2,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
2,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
2,70
71
72
73
74
75
76
77
78
2,80
81
82
83
099
1,01103
106
110
114
118
122
126
130
134
138
142
146
150
154
158
162
165
169
173
178
182
186
190
194
198
1,01202
206
210
214
218
222
225
229
233
237
241
245
249
253
257
261
265
269
273
81
82
83
84
85
86
87
88
89
2,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
3,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
3,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
3,20
21
22
23
24
25
919
923
926
930
934
938
942
946
950
954
958
962
966
970
974
978
982
985
989
993
997
1,01001
005
009
013
017
021
025
029
033
037
041
044
048
052
056
060
064
068
072
076
080
084
088
092
84
85
86
87
88
89
2,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
3,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
3,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
3,20
21
22
23
24
25
27
28
29
M
TABLA 2.1
(continuación)
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
277
281
285
289
293
297
1,01301
304
308
312
316
320
324
328
332
336
340
344
348
352
356
360
363
367
371
375
379
383
387
391
395
399
1,01403
407
411
415
419
423
427
431
435
439
442
446
450
26
27
28
29
3,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
3,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
3,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
3,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
3,70
096
1,01100
104
108
112
116
120
123
127
131
135
139
143
147
151
155
159
163
167
171
175
179
182
186
190
194
198
1,01202
206
210
214
218
222
226
230
234
238
242
246
250
254
258
261
265
269
3,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
3,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
3,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
3,60
61
62
63
64
65
66
68
69
3,70
71
72
73
74
75
454
458
462
466
470
474
478
482
486
490
494
498
1,01502
506
510
515
519
523
527
531
535
539
542
546
550
554
558
562
566
570
574
578
582
586
590
594
598
1,01602
606
610
614
618
622
626
630
71
72
73
74
75
76
77
78
79
3,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
3,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
4,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
4,10
11
12
13
14
15
273
277
281
285
289
293
297
1,01301
305
309
313
317
321
325
329
333
337
341
345
319
353
357
360
364
368
372
376
380
384
388
392
396
1,01400
404
408
412
416
420
424
428
432
436
440
444
448
76
77
78
79
3,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
3,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
4,00
01
02
03
05
06
07
08
09
4,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
4,20
21
55
TABLA 2.1
(continuación)
56
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
634
638
641
645
649
653
657
661
665
669
673
677
681
685
689
693
697
1,01701
705
709
713
717
721
725
729
733
737
741
745
749
753
757
760
764
768
772
776
780
784
788
792
796
1,01800
804
808
16
17
18
19
4,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
4,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
4,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
4,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
4,60
452
456
459
463
467
471
475
479
483
487
491
495
499
1,01503
507
511
515
519
523
527
531
535
539
543
547
551
555
559
563
567
571
575
578
582
586
590
594
598
1,01602
606
610
614
618
622
626
22
23
24
25
26
27
28
29
4,30
31
32
33
34
35
36
38
39
4,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
4,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
4,60
61
62
63
64
65
66
67
812
816
820
824
828
832
836
840
844
849
853
857
861
865
869
873
877
881
885
889
893
897
1,01901
905
909
913
917
921
925
929
933
937
941
945
949
953
957
960
964
968
972
976
980
984
988
61
62
63
64
65
66
67
68
69
4,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
4,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
4,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
5,00
01
02
03
04
05
630
634
638
642
646
650
654
658
662
666
670
674
678
682
686
690
694
698
1,01702
706
710
714
718
722
726
730
734
738
742
746
750
754
758
762
766
770
774
777
781
785
789
793
797
1,01801
805
69
4,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
4,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
4,90
91
92
93
94
95
96
98
99
5,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
5,10
11
12
13
14
M
TABLA 2.1
(continuación)
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
992
996
1,02000
004
008
012
016
020
024
028
032
036
040
044
048
052
056
060
064
068
072
076
080
084
088
092
096
1,02100
104
108
112
116
120
124
128
132
136
140
144
148
152
156
160
164
168
06
07
08
09
5,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
5,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
5,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
5,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
5,50
809
813
817
821
825
829
833
837
841
845
849
853
857
861
865
869
873
877
881
885
889
893
897
1,01901
905
909
913
917
921
925
929
933
937
941
945
949
953
957
961
965
969
973
977
981
985
15
16
17
18
19
5,20
21
22
23
25
26
27
28
29
5,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
5,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
5,51
52
53
54
55
56
57
58
59
5,60
61
172
176
180
185
189
193
197
1,02201
205
209
213
217
221
225
229
233
237
241
245
249
253
257
261
265
269
273
277
281
285
289
293
297
1,02301
305
309
313
317
321
325
329
333
337
341
345
349
51
52
53
54
55
56
57
58
59
5,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
5,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
5,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
5,90
91
92
93
94
95
989
993
997
1,02001
005
009
013
017
021
025
029
033
037
041
045
049
053
057
061
065
069
073
077
081
085
089
093
097
1,02101
105
109
113
117
121
125
129
133
137
141
145
149
153
157
161
165
62
63
64
65
66
67
68
69
5,70
71
72
73
74
76
77
78
79
5,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
5,90
91
92
93
94
95
96
97
98
6,00
01
02
03
04
05
06
07
08
57
TABLA 2.1
(continuación)
58
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
353
357
362
366
370
374
378
382
386
390
394
398
1,02402
406
410
414
418
422
426
430
434
438
442
446
450
454
458
462
466
470
474
478
482
486
490
494
498
1,02502
506
510
514
519
523
527
531
96
97
98
99
6,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
6,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
6,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
6,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
6,40
169
173
178
182
186
190
194
198
1,02202
206
210
214
218
222
226
230
234
238
242
246
250
254
258
262
266
270
274
278
282
286
290
294
298
1,02302
306
310
314
318
322
326
330
334
338
342
346
09
6,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
6,20
21
23
24
25
26
27
28
29
6,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
6,40
41
42
43
45
46
47
48
49
6,50
51
52
53
54
55
535
539
544
548
552
556
560
564
568
572
576
580
584
588
592
596
1,02600
604
608
612
616
620
624
628
632
636
640
644
648
652
656
660
665
669
673
677
681
685
689
693
697
1,02701
705
709
713
41
42
43
44
45
46
47
48
49
6,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
6,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
6,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
6,80
81
82
83
84
85
350
354
359
363
367
371
375
379
383
387
391
395
399
1,02403
407
411
415
419
423
427
431
435
439
443
447
451
455
459
463
467
471
475
480
484
488
492
496
1,02500
504
508
512
516
520
524
528
56
57
58
59
6,60
61
62
63
64
66
67
68
69
6,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
6,80
81
82
83
84
85
87
88
89
6,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
7,00
01
02
M
TABLA 2.1
(continuación)
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
717
721
725
729
733
737
741
745
749
753
757
761
766
770
774
778
782
786
790
794
798
1,02802
806
810
814
818
822
826
830
834
838
842
846
850
855
859
863
868
872
876
880
884
888
892
896
86
87
88
89
6,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
7,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
7,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
7,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
7,30
532
536
540
544
548
552
556
560
564
568
572
576
581
585
589
593
597
1,02601
605
609
613
617
621
625
629
633
637
641
645
649
653
657
661
665
669
673
677
682
686
690
694
698
1,02702
706
710
03
04
05
07
08
09
7,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
7,20
21
22
23
24
26
27
28
29
7,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
7,40
41
42
43
45
46
47
48
49
7,50
1,02900
904
908
912
916
920
924
928
932
936
940
944
949
953
957
961
965
969
973
977
981
985
989
993
997
1,03001
005
010
014
018
022
026
030
034
038
042
046
050
054
058
062
066
071
075
079
31
32
33
34
35
36
37
38
39
7,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
7,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
7,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
7,70
71
72
73
74
75
714
718
722
726
730
734
738
742
746
750
754
758
763
767
771
775
779
783
787
791
795
799
1,02803
807
811
815
819
824
828
832
836
840
844
848
852
856
860
864
868
872
876
880
885
889
893
51
52
53
54
55
56
57
58
59
7,60
61
62
64
65
66
67
68
69
7,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
7,80
82
83
84
85
86
87
88
89
7,90
91
92
93
94
95
96
97
59
TABLA 2.1
(continuación)
60
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
083
087
091
095
099
1,03103
107
111
115
119
123
127
132
136
140
144
148
152
156
160
164
168
172
176
180
184
189
194
198
1,03202
206
210
214
218
222
226
230
234
238
242
246
250
255
259
263
76
77
78
79
7,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
7,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
8,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
8,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
8,20
897
1,02901
905
909
913
917
921
925
929
933
937
941
946
950
954
958
962
966
970
974
978
982
986
990
994
998
1,03002
007
011
015
019
023
027
031
035
039
043
047
051
055
059
063
068
072
076
98
8,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
8,10
11
12
13
14
15
17
18
19
8,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
8,30
31
32
34
35
36
37
38
39
8,40
41
42
43
44
45
267
271
275
279
283
287
291
296
1,03300
304
308
312
316
320
324
328
332
336
340
344
348
352
357
361
365
369
373
377
381
385
389
393
398
1,03402
406
410
414
418
422
426
430
434
439
443
447
21
22
23
24
25
26
27
28
29
8,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
8,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
8,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
8,60
61
62
63
64
65
080
084
088
092
096
1,03100
104
109
113
117
121
125
129
133
137
141
145
149
153
157
161
165
170
174
178
182
186
190
194
198
1,03202
206
211
215
219
223
227
231
235
239
243
247
252
256
260
46
47
48
49
8,51
52
53
54
55
56
57
58
59
8,60
61
62
63
64
65
67
68
69
8,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
8,80
81
83
84
85
86
87
88
89
8,90
91
92
93
M
TABLA 2.1
(continuación)
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
451
455
459
463
467
471
475
479
483
487
491
495
1,03500
504
508
512
516
520
525
529
533
537
542
546
550
554
558
562
566
570
574
578
583
587
591
595
599
1,03603
607
611
615
619
624
628
632
66
67
68
69
8,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
8,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
8,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
9,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
9,10
264
268
272
276
280
284
288
292
296
1,03300
304
308
313
317
321
325
329
333
337
341
345
349
354
358
362
366
370
374
378
382
386
390
395
399
1,03403
407
411
415
419
423
427
431
436
440
444
94
95
96
97
99
9,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
9,10
11
12
13
15
16
17
18
19
9,20
21
22
23
24
25
26
27
28
9,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
9,40
41
636
640
644
648
652
656
660
665
669
673
677
681
686
690
694
698
1,03702
706
710
714
718
722
727
731
735
739
743
747
751
755
750
763
768
772
776
780
784
788
792
796
1,03800
804
809
813
817
11
12
13
14
15
16
17
18
19
9,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
9,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
9,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
9,50
51
52
53
54
55
448
452
456
460
464
468
472
477
481
485
489
493
498
1,03502
506
510
514
518
522
526
530
534
539
543
547
551
555
559
563
567
571
575
580
584
588
592
596
1,03600
604
608
612
616
621
625
629
42
43
45
46
47
48
49
9,50
51
52
53
54
55
56
57
59
9,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
9,70
71
72
74
75
76
77
78
79
9,80
81
82
83
84
85
86
88
89
9,90
61
TABLA 2.1
(continuación)
62
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
821
825
829
833
837
841
845
850
854
858
863
867
872
876
880
884
888
892
896
1,03900
904
908
913
917
921
925
929
933
937
941
945
949
954
958
962
966
970
975
979
983
987
991
995
999
1,04003
56
57
58
59
9,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
9,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
9,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
9,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
10,00
633
637
641
645
649
653
657
662
666
670
674
678
683
687
691
695
699
1,03703
707
711
715
719
724
728
732
736
740
744
748
752
756
760
765
769
773
777
781
786
790
794
798
1,03802
806
810
814
% de
ext.
g / 100 ml
91
92
93
94
95
96
97
98
99
10,00
01
03
04
05
06
07
08
09
10,10
11
12
13
14
15
17
18
19
10,20
21
22
23
24
25
26
27
28
10,30
31
32
33
34
35
36
37
38
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
007
011
016
020
024
028
032
037
041
045
049
053
057
061
065
069
073
078
082
086
090
094
099
1,04103
107
111
115
119
123
127
131
135
140
144
148
152
156
161
165
169
173
177
181
185
189
01
02
03
04
05
06
07
08
09
10,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
10,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
10,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
10,40
41
42
43
44
45
818
822
827
831
835
839
843
848
852
856
860
864
868
872
876
880
884
889
893
897
1,03901
905
910
914
918
922
926
930
934
938
942
946
951
955
959
963
967
972
976
980
984
988
992
996
1,04000
39
10,40
41
42
44
45
46
47
48
49
10,50
51
52
53
54
55
57
58
59
10,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
10,71
72
73
74
75
76
77
78
79
10,80
81
82
84
85
86
87
M
TABLA 2.1
(continuación)
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
193
198
1,04203
207
211
215
219
224
228
232
236
240
245
249
253
257
261
265
269
273
277
281
286
290
294
298
1,04302
307
311
315
319
323
328
332
336
340
344
348
352
356
360
364
369
373
377
46
47
48
49
10,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
10,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
10,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
10,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
10,90
004
008
013
017
021
025
029
034
038
042
046
050
055
059
063
067
071
075
079
083
087
091
096
1,04100
104
108
112
117
121
125
129
133
138
142
146
150
154
158
162
166
170
174
179
183
187
% de
ext.
g / 100 ml
88
89
10,90
91
92
93
94
95
97
98
99
11,00
01
02
03
04
05
06
07
08
11,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
11,20
22
23
24
25
26
27
28
29
11,30
31
32
33
35
36
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
381
385
390
394
398
1,04402
406
411
415
419
423
427
432
436
440
444
448
452
456
460
464
468
473
477
481
485
489
494
498
1,04502
506
510
515
519
523
527
532
537
541
545
549
553
558
562
566
91
92
93
94
95
96
97
98
99
11,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
11,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
11,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
11,30
31
32
33
34
35
191
195
1,04200
204
208
212
216
221
225
229
233
237
242
246
250
254
258
262
266
270
274
278
283
287
291
295
299
1,04304
308
312
316
320
325
329
333
337
341
346
350
354
358
362
367
371
375
37
38
39
11,40
41
42
43
44
45
47
48
49
11,50
51
52
53
54
55
56
57
58
11,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
11,70
72
73
74
75
76
77
78
79
11,80
81
82
84
85
63
TABLA 2.1
(continuación)
64
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
570
574
578
582
586
590
594
599
1,04603
607
611
615
620
624
628
632
636
641
645
649
653
657
662
666
670
674
678
683
687
691
695
699
1,04704
708
712
716
720
725
729
733
737
741
746
750
754
36
37
38
39
11,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
11,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
11,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
11,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
11,80
379
383
387
391
395
399
1,04403
408
412
416
420
424
429
433
437
441
445
450
454
458
462
466
471
475
479
483
487
492
496
1,04500
504
508
513
517
521
525
529
534
538
542
546
550
555
559
563
% de
ext.
g / 100 ml
86
87
88
89
11,90
91
92
93
94
96
97
98
99
12,00
01
02
03
04
05
06
08
09
12,10
11
12
13
14
15
16
17
19
12,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
12,31
32
33
34
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
758
762
766
770
774
778
782
787
791
795
799
1,04803
808
812
816
820
824
829
833
837
841
845
850
854
858
862
867
872
876
880
884
888
893
897
1,04901
905
909
914
918
922
926
930
935
939
943
81
82
83
84
85
86
87
88
89
11,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
12,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
12,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
12,20
21
22
23
24
25
567
571
575
579
583
587
591
596
1,04600
604
608
612
617
621
625
629
633
638
642
646
650
654
659
663
667
671
675
680
684
688
692
696
1,04701
705
709
713
717
722
726
730
734
738
743
747
751
35
36
37
38
39
12,40
41
43
44
45
46
47
48
49
12,50
51
52
54
55
56
57
58
59
12,60
61
62
63
65
66
67
68
69
12,70
71
72
73
74
76
77
78
79
12,80
81
82
83
M
TABLA 2.1
(continuación)
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
947
951
956
960
964
968
972
977
981
985
989
993
998
1,05002
006
010
014
019
023
027
031
035
040
044
048
052
056
061
065
069
073
077
082
086
090
094
098
1,05103
107
111
115
119
124
128
132
26
27
28
29
12,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
12,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
12,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
12,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
12,70
755
759
764
768
772
776
780
785
789
793
797
1,04801
806
810
814
818
822
827
831
835
839
843
848
852
856
860
864
869
873
877
881
885
890
894
898
1,04902
906
911
915
919
923
927
932
936
940
% de
ext.
g / 100 ml
84
85
87
88
89
12,90
91
92
93
94
95
96
97
99
13,00
01
02
03
04
05
06
07
09
13,10
11
12
13
14
15
16
17
18
13,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
13,31
32
33
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
136
140
145
149
153
157
161
166
170
174
178
182
187
191
195
199
1,05204
209
213
217
221
225
230
234
238
242
247
251
256
260
264
268
273
277
281
285
289
294
298
1,05302
306
310
315
319
323
71
72
73
74
75
76
77
78
79
12,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
12,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
13,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
13,10
11
12
13
14
15
944
948
953
957
961
965
969
974
978
982
986
990
995
999
1,05003
007
011
016
020
024
028
032
037
041
045
049
054
058
063
067
071
075
080
084
088
092
096
1,05101
105
109
113
117
122
126
130
34
35
36
37
38
39
13,40
42
43
44
45
46
47
48
49
13,50
51
53
54
55
56
57
58
59
13,60
61
63
64
65
66
67
68
69
13,70
71
73
74
75
76
77
78
79
13,80
81
82
65
TABLA 2.1
(continuación)
66
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
327
331
336
340
344
348
352
357
361
365
369
373
378
382
386
390
394
399
1,05403
407
411
416
420
425
429
433
437
442
446
450
454
458
463
467
471
475
479
484
488
492
496
1,05500
505
509
513
16
17
18
19
13,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
13,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
13,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
13,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
13,60
134
138
143
147
151
155
159
164
168
172
176
180
185
189
193
197
1,05201
206
210
214
218
223
227
232
236
240
244
249
253
257
261
265
270
274
278
282
286
291
295
299
1,05303
307
312
316
320
% de
ext.
g / 100 ml
84
85
86
87
88
89
13,90
91
92
94
95
96
97
98
99
14,00
01
02
04
05
06
07
08
09
14,10
11
12
13
15
16
17
18
19
14,20
21
22
23
25
26
27
28
29
14,30
31
32
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
517
512
526
530
534
539
544
548
553
557
561
565
570
574
578
582
586
591
595
599
1,05603
607
612
616
620
624
629
633
638
642
646
650
655
659
663
667
671
676
680
684
688
692
697
1,05701
705
61
62
63
64
65
66
67
68
69
13,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
13,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
13,90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
14,00
01
02
03
04
05
324
328
333
337
341
345
350
354
359
363
367
371
376
380
384
388
392
397
1,05401
405
409
413
418
422
426
430
435
439
444
448
452
456
461
465
469
473
477
482
486
490
494
498
1,05503
507
511
33
35
36
37
38
39
14,40
41
42
43
45
46
47
48
49
14,50
51
52
53
55
56
57
58
59
14,60
61
62
63
65
66
67
68
69
14,70
71
72
74
75
76
77
78
79
14,80
81
82
M
TABLA 2.1
(continuación)
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
709
714
718
723
727
731
735
740
744
748
752
756
761
765
769
773
777
782
786
790
794
799
1,05803
808
812
816
820
825
829
833
837
841
846
850
854
858
863
867
872
877
881
885
890
894
898
06
07
08
09
14,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
14,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
14,30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
14,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
14,50
515
520
524
529
533
537
541
546
550
554
558
562
567
571
575
579
583
588
592
596
1,05600
605
609
614
618
622
626
631
635
639
643
647
652
656
660
664
669
673
678
682
686
690
695
699
1,05703
% de
ext.
g / 100 ml
84
85
86
87
88
89
14,90
91
92
94
95
96
97
98
99
15,00
01
03
04
05
06
07
08
09
15,10
11
13
14
15
16
17
18
19
15,20
22
23
24
25
26
27
28
29
15,30
32
33
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
1,05902
906
911
915
919
923
928
932
937
941
945
949
954
958
962
966
970
975
979
983
987
992
996
1,06001
005
009
013
018
022
026
030
034
039
043
047
051
056
060
065
069
073
077
082
086
090
51
52
53
54
55
56
57
58
59
14,60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
14,70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
14,80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
14,90
91
92
93
94
95
707
711
716
720
724
728
733
737
742
746
750
754
759
763
767
771
775
780
784
788
792
797
1,05801
806
810
814
818
823
827
831
835
839
844
848
852
856
861
865
870
874
878
882
887
891
895
34
35
36
37
38
39
15,41
42
43
44
45
46
47
48
49
15,51
52
53
54
55
56
57
58
15,60
61
62
63
64
65
66
67
69
15,70
71
72
73
74
75
76
78
79
15,80
81
82
83
67
TABLA 2.1
(continuación)
68
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
094
099
1,06103
108
112
116
120
125
129
133
137
141
146
150
154
158
163
167
172
176
180
184
189
193
197
1,06201
206
211
216
220
224
228
233
237
241
96
97
98
99
15,00
01
02
03
04
05
06
07
08
09
15,10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
15,20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
15,30
899
1,05904
908
913
917
921
925
930
934
938
942
946
951
955
959
963
968
972
977
981
985
989
994
998
1,06002
006
011
015
020
024
028
032
037
041
045
% de
ext.
g / 100 ml
84
85
87
88
89
15,90
91
92
93
94
95
97
98
99
16,00
01
02
03
04
06
07
08
09
16,10
11
12
13
15
16
17
18
19
16,20
21
22
3. EXTRACTO SECO PRIMITIVO
3.1. Principio.
El extracto seco primitivo se calcula, mediante la
fórmula de Balling, a partir de la graduación alcohólica y del extracto real.
Densidad
20º / 20º
% de
ext.
g / 100 g
Densidad
real
20º / 4º
% de
ext.
g / 100 ml
245
250
254
259
263
267
271
276
280
284
288
292
297
1,06301
305
309
314
318
323
327
331
335
340
344
348
352
357
361
366
370
374
378
383
387
31
32
33
34
35
36
37
38
39
15,40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
15,50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
15,60
61
62
63
64
049
054
058
063
067
071
075
080
084
088
092
096
1,06101
105
109
113
118
122
127
131
135
139
144
148
152
156
161
165
170
174
178
182
187
191
24
25
26
27
28
29
16,30
32
33
34
35
36
37
38
39
16,41
42
43
44
45
46
47
48
16,50
51
52
53
54
55
56
57
59
16,60
61
3.2. Cálculo.
El extracto seco primitivo expresado en % peso
(gramos/100 g), viene dado por la fórmula:
2,0665 A + Er
E.S.P. = ————————
100 + 1,0665 A
M
Siendo:
A = graduación alcohólica
(gramos/100 gramos).
Er = extracto real de la cerveza
(gramos/100 gramos).
3.3. Referencia.
3.3.1. European Brewery Convention, Analytica
EBC (3ª edición), Method 7.1. Schweizer BrauereiRundschau, Zurich, 1975.
4. GRADO DE FERMENTACION
4.1. Principio.
El grado de fermentación, esto es, el porcentaje
de extracto seco primitivo que ha sido fermentado,
se determina a partir del extracto real y del extracto
seco primitivo de la cerveza.
4.2. Material y aparatos.
Los mismos que en 1.2.
4.3. Procedimiento.
El mismo que en 1.3.
4.4. Cálculo.
El grado de fermentación expresado en % (GF)
viene dado por la fórmula:
Er
1
GF = 100 ( 1 - ——— ) ————————
E.S.P.
1 - (0,005161 Er)
Siendo:
GF
= grado de fermentación en %.
Er
= extracto real.
E.S.P. = extracto seco primitivo.
4.5. Referencias.
4.5.1. Association of Official Analytical Chemist.
Official Methods of Analysis (13 edición), Method
10.028. The Association: Washington D.C.
(1980).
4.5.2. American Society of Brewing Chemists.
Methods of Analysis (7ª edición), Beer Method 6-B.
5. ACIDEZ TOTAL
5.1. Principio.
Se determina por valoración potenciométrica.
5.2. Material y aparatos.
5.2.1. Medidor de pH con electrodo de vidriocalomelano. Sirve cualquier aparato comercial standard que dé una lectura precisa a pH 8,2.
5.2.2. Vaso para valoraciones. Debe tener una
capacidad suficiente para contener 50 ml de muestra, el electrodo de calomelanos y vidrio del instrumento usado, la cuchilla de un agitador mecánico y
la punta de una bureta.
5.2.3. Agitador conveniente, eléctrico o magnético.
5.2.4. Bureta.
5.2.5. Pipeta de 50 ml (±0,1ml).
5.2.6. Termómetro.
5.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N)
indicador Azul de Bromofenol SV
272170 Solución Tampón pH 7,00 ±0,02 (20°C) ST
(o preparar con 131509 Potasio
di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO y
181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l
(0,1N) indicador Azul de Bromofenol
SV)
5.3.1. Solución Tampón pH 7,00 ±0,02 (20°C)
ST. En su defecto a 50 ml de solución 0,1 M de
Potasio Fosfato mono-Básico (13,62 g de Potasio
Fosfato mono-Básico por litro) se agregan 29,62 ml
de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) indicador Azul
de Bromofenol SV y se completa a 100 ml. También
pueden usarse soluciones tampón comerciales,
tabletas tampón, o cristales, pero en cualquier caso
la solución debe ser reciente. No se debe usar una
solución tampón que contenga mohos o cualquier
clase de sedimento.
5.3.2. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) indicador
Azul de Bromofenol SV.
5.4. Procedimiento.
Calibrar el instrumento a pH 7,0 con solución
tampón standard, haciendo los ajustes para temperatura y potencial de asimetría requeridos por el instrumento usado. Enjuagar con Agua PA-ACS el
electrodo libre de tampón.
Pipetear 50 ml de cerveza desgasificada, o cualquier otra cantidad medida previamente, en el vaso
de valoración.
Introducir dentro de la cerveza el electrodo de
vidrio y calomelanos y la cuchilla del agitador. Poner
éste en marcha y ajustar la temperatura del medidor
de pH a la temperatura de la cerveza. Valorar la cerveza con Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) indicador
Azul de Bromofenol SV hasta pH 8,2 añadiendo
reactivo en porciones de 1,5 ml hasta llegar a pH
7,6 y después en incremento más pequeños de
aproximadamente 0,15 ml hasta que se alcanza
exactamente el pH 8,2. Hay que asegurarse que se
ha alcanzado un equilibrio completo a pH 8,2 antes
de hacer la lectura de la bureta.
69
5.5. Cálculo.
La acidez expresada como % de ácido láctico
vendrá dada por la siguiente fórmula:
V1 x 10 x 0,09
Acidez total (% ácido láctico) = ———————
V2 x d
Siendo:
V1 = volumen de sodio hidróxido, en ml,
empleado en la valoración.
V2 = volumen tomado de cerveza, en ml.
0,09 = valor de 1 mili-equivalente de ácido
láctico.
d
= densidad en g/ml de la cerveza, medidas
a 20°C / 20°C.
Expresar la acidez con dos cifras decimales.
5.6. Referencias.
5.6.1. American Society of Brewing Chemists.
Report of Subcommittee on Beer. Proc. 1941, página 140.
5.6.2. American Society of Brewing Chemists.
Report of Subcommittee on Acidity and pH. Proc.
1942, página 103.
5.6.3. American Society of Brewing Chemists.
Methods of Analysis (7ª edición), Beer Method 8-A.
6. ANHIDRIDO CARBONICO (CO2)
6.1. Principio.
El contenido de dióxido de carbono disuelto en
cerveza envasada se determina midiendo con un
manómetro la presión que existe en el interior del
recipiente. El gas que escapa se recoge en una
bureta de absorción rellena de una solución de
sodio hidróxido, que absorbe el dióxido de carbono.
Tomando como datos el volumen del aire que
permanece en la bureta, el volumen del espacio de
cabeza del recipiente, la presión en el interior de
éste y la temperatura, se calcula el contenido de
dióxido de carbono de la cerveza.
70
6.2. Material y aparatos.
6.2.1. Aparatos para perforar. Consiste en un dispositivo que se puede unir y asegurar firmemente al
tapón de la botella, o sostener contra la parte superior de la lata. Una junta de goma blanda asegura el
cierre estanco y a su través pasa una espiga acanalada de acero que está conectada a un manómetro
de precisión y a una válvula de salida de gas.
Puede usarse el mismo aparato para botellas y
latas aunque en algunos tipos se requiere un adaptador cuando se usa con latas.
6.2.2. Bureta de absorción. Aunque puede variar
en algunos detalles de construcción, el tubo para
medir el gas está calibrado en divisiones de 0,05 ml
en los primeros 4 ml desde la llave hacia abajo y en
divisiones de 0,1 ml desde los 15 hasta los 25 ml.
La bureta de absorción se conecta a la válvula del
aparato perforador y a la botella de nivelación
mediante un tubo de caucho o de plástico resistente a los álcalis.
6.2.3. Botella de nivelación de unos 300 ml de
capacidad, provista de un soporte adecuado.
6.2.4. Baño de agua a 25°C.
6.2.5. Balanza de 1.000 g de capacidad, sensible a 0,1 g con carga máxima.
6.2.6. Probeta graduada de 100 ml.
6.2.7. Termómetro.
6.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
6.3.1. Solución de Hidróxido al 15%. Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejas PA-ACSISO en Agua PA-ACS.
6.4. Procedimiento.
Atemperar la cerveza a 25°C. Hacer una marca
en la botella al nivel de la cerveza o, si está envasada en lata, pesarla antes de abrirla. Llenar la botella
de nivelación y la bureta de absorción con solución
de Sodio Hidróxido al 15%. Desplazar completamente el aire del tubo de conexión con Agua PAACS o con solución de Sodio Hidróxido y conectar
el dispositivo de perforación a la botella (o lata).
Cuidar de que no quede aire en todo el sistema
porque podría pasar a la bureta durante la determinación.
Con la válvula del dispositivo de perforación
cerrada, perforar el tapón de la botella (o lata),
bajando el dispositivo acanalado. Agitar la botella (o
lata), hasta que la presión alcance un valor máximo
constante: dejar entonces de agitar y anotar la presión leída. Abrir cuidadosamente la válvula del aparato de perforación y permitir que la mezcla de
espuma y gas fluya dentro de la bureta de absorción hasta que el manómetro indique una presión
igual a cero. Cerrar la válvula y agitar o inclinar la
bureta (dependiendo de su construcción), hasta
que todo el CO2 haya sido absorbido y el volumen
de gas en la bureta alcance un valor mínimo. Ajustar
la botella de nivelación para igualar la presión
hidrostática y leer en la bureta el volumen de aire en
el espacio de cabeza.
Si se desea efectuar una determinación de aire total
continuar el desprendimiento de gas de la botella (o
lata), mediante agitación. Absorber el CO2 desprendido girando y agitando la bureta y continuar la agitación y absorción de CO2 hasta que no haya un
aumento apreciable en el volumen del gas no
absorbido en la bureta. El volumen final del gas no
absorbido se puede considerar como contenido de
aire, o aire total, del envase.
M
Desconectar del envase el dispositivo de perforación y comprobar con el termómetro que la temperatura es de 25°C.
6.5. Cálculo.
6.5.1. Cálculo del espacio de cabeza.
6.5.1.1. En botellas. Llenar completamente la
botella con agua y verter ésta en una probeta graduada de 100 ml hasta que el nivel del líquido en la
botella se corresponda con la señal puesta antes de
comenzar la determinación de CO2. El volumen en
ml del líquido vertido es el volumen del espacio de
cabeza.
6.5.1.2. En latas. Pesar la lata. Vaciar la cerveza
y dejar que escurra completamente. Pesar la lata
vacía, llenarla completamente con agua y volverla a
pesar (Incluir la anilla de cierre en todas las pesadas).
peso cerveza
Espacio de cabeza = Peso agua - —–—————
dens. cerveza
6.5.2. El contenido de CO2 expresado en gr/l
vendrá dado por la siguiente fórmula:
Va
10
CO2 g/l = (p - —— x 1,0332) x 0,137 x ——
Vc
d
Siendo:
p
= presión absoluta en kg/cm2 = presión
manométrica + 1,0332.
0,137 = g de CO2 por kg/cm2 de presión.
Va
= volumen de aire en el espacio de
cabeza determinado a la presión
atmosférica.
Vc
= volumen del espacio de cabeza.
D
= densidad, g/ ml, de la cerveza
desgasificada, medida a 20°C/20°C.
6.6. Observaciones.
A todos los efectos de este método, el aire se
define como “gases no solubles en solución de
sodio hidróxido al 15%”.
6.7. Referencias.
6.7.1. American Society of Brewing Chemists.
Report of Subcommittee on Carbon Dioxide Chart.
Proc. 1941, página 95.
6.7.2. Ibidem, Report of Subcommittee on Carbon Dioxide. Proc. 1945, página 116.
6.7.3. Ibidem, Report of Subcommittee on Carbon Dioxide in Beer. Proc. 1947, página 124.
6.7.4. Byer, A.J. Wallerstein Lab. Commun.
25:306 (1962)
6.7.5. Enders. C., Kleber, W. and Paukner, E.
Brauwissenschaft 9 (1): 1; 9 (2): 50 (1956).
6.7.6. American Society of Brewing Chemists.
Methods of Analysis (7ª edición), Beer Method 13-B.
7. pH
7.1 Principio.
Se determina la concentración de iones hidrógeno con un medidor de pH ajustado a 4,0 y a 7,0
con soluciones tampón.
7.2. Material y aparatos.
7.2.1. Medidor de pH.
7.2.2. Electrodos, de vidrio y de referencia o
combinado.
7.2.3. Termómetro.
7.2.4. Vaso para valoraciones de 100 ml.
7.3. Reactivos.
272168 Tampón, solución pH 4,00 ±0,02 (20°C) ST
272170 Tampón, solución pH 7,00 ±0,02 (20°C) ST
7.3.1. Tampón, solución pH 4,00 ±0,02 (20°C)
ST. En su defecto disolver 131481 Potasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO, en Agua PA-ACS y completar la
solución a 1 l. También puede usarse soluciones
tampón comerciales, tabletas tampón, o cristales,
pero en cualquier caso la solución debe ser reciente. No usar una solución tampón que contenga
mohos o cualquier calse de sedimento.
7.3.2. Tampón, solución pH 7,00 ±0,02 (20°C) ST.
7.4. Procedimiento.
Atemperar la cerveza a la temperatura del laboratorio y desgasificar por completo. Introducir los
electrodos previamente enjuagados en la muestra
de cerveza y leer el pH. Para lecturas muy precisas,
usando una calibración cuidadosa y un instrumento
con escala expandida, el resultado se expresa con
dos cifras decimales. En condiciones normales, el
resultado se expresará con una cifra decimal. Después de una serie de lecturas, el instrumento se
debe calibrar de nuevo a pH 4,0 y pH 7,0 para asegurar que no ha habido ninguna desviación.
7.5. Referencias.
7.5.1. American Society of Brewing Chemists.
Report of Subcommittee on Instrumentation. Proc.
1973, página 169.
7.5.2. Association of Official Analytical Chemists.
Official Methods of Analysis (12ª edición), página
942, The Association: Washington, D.C. (1975).
7.5.3. American Society of Brewing Chemists.
Method of Analysis (7ª edición). Beer Method 9.
8. CENIZAS
8.1. Principio.
Evaporar a sequedad 50 ml de cerveza y determinar el peso del residuo después de su incineración.
71
8.2. Material y aparatos.
8.2.1. Cápsula para evaporación de 100 ml de
platino, cuarzo o porcelana.
8.2.2. Baño de agua o vapor.
8.2.3. Horno de mufla.
8.2.4. Pipeta de 50 ml (±0,1 ml).
8.2.5. Balanza analítica.
8.2.6. Desecador.
8.3. Procedimiento.
Pipetear 50 ml de cerveza en una cápsula previamente tarada y evaporar a sequedad en un baño
de agua o vapor. Calcinar a temperatura moderada
no pasando del rojo de sombra (550°C), hasta
obtención de cenizas blancas. Enfriar en un desecador y pesar con una precisión de 0,0001 g.
8.4. Cálculo.
El contenido de cenizas expresado en % en
peso vendrá dado por la siguiente fórmula:
100 x p
2xp
Cenizas (% en peso) = ———— = ————
50 x d
d
siendo:
p = peso, en gramos, de las cenizas.
d = densidad en g/ml de la cerveza, medida a
20°C/20°C.
8.5. Referencia.
8.5.1. American Society of Brewing Chemists.
Methods of Analysis (7ª edición). Beer Methods 14.
9. ACIDO FOSFORICO
9.1. Principio.
El ácido fosfórico se determina por precipitación
del fósforo en medio nítrico en forma de fosfomolibdato amónico, disolución del precipitado en exceso
de sodio hidróxido y valoración del exceso de álcali
por retroceso.
72
9.2. Material y aparatos.
9.2.1. Cápsula para cenizas o crisol de platino o
porcelana.
9.2.2. Horno de mufla.
9.2.3. Agitador mecánico o magnético.
9.2.4. Papel de filtro apropiado para precipitado
de amonio molibdato.
9.2.5. Embudos, vaso de precipitados y frasco
lavador.
9.2.6. Matraz Erlenmeyer de 500 ml con tapón
de goma (si se usa agitador mecánico).
9.2.7. Baño de agua o vapor.
9.3. Reactivos.
121035 Acido Molíbdico (conteniendo amonio
molibdato) PA
131037
181059
131074
131130
121211
121086
131325
181691
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV
Agua PA-ACS
Amoníaco 30% (en NH3) PA-ACS
Calcio Acetato x-hidrato PA
Etanol absoluto PA
Fenolftaleína PA-ACS
Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
9.3.1. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
9.3.2. Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV.
9.3.3. Solución de Amonio Molibdato. Disolver
100 g de Acido Molíbdico (conteniendo amonio
molibdato) PA en una mezcla de 144 ml de Amonio
Hidróxido al 27% (densidad 0,9) y 271 ml de Agua
PA-ACS. Verter esta solución lentamente y con agitación constante en una mezcla de 489 ml de Acido
Nítrico al 68% (densidad 1,4146) y 1.148 ml de
Agua PA-ACS. Conservar la mezcla final en lugar
templado durante varios días o hasta que una porción de ella, calentada a 40°C, no deposite un precipitado amarillo de amonio fosfomolibdato. Decantar la solución para eliminar cualquier sedimiento y
guardar en una botella con tapón de vidrio. Antes
de usarla, agregar 5 ml de Acido Nítrico al 68% por
cada 100 ml de solución de amonio molibdato y filtrar inmediatamente.
9.3.4. Solución de Calcio Acetato al 2%.
9.3.5. Solución de Acido Nítrico (1:9).
9.3.6. Amonio Hidróxido al 27%.
9.3.7. Solución alcohólica de Fenolftaleína al
0,5%.
9.4. Procedimiento.
Agregar 20 ml de solución de Calcio Acetato al
2%, a 100 ml de cerveza desgasificada y evaporar
la mezcla hasta sequedad en una cápsula para
cenizas o crisol. Incinerar el residuo a temperatura
moderada hasta obtener cenizas blancas. Disolver
las cenizas en 10-15 ml de Acido Nítrico hirviente,
filtrar si es necesario y lavar el precipitado con un
poco de Acido Nítrico (9.3.5.), caliente. Recoger el
filtrado y las aguas de lavado en un Erlemeyer o
vaso de precipitados de 500 ml. Agregar Amonio
Hidróxido hasta neutralizar y continuar la adición
hasta que el precipitado que se forma se disuelva
por completo. Diluir a 75-100 ml y ajustar la temperatura a 25-30°C. Agregar un exceso de solución
de Amonio Molibdato. En cervezas normales es
suficiente 70 ml, es decir, la cantidad necesaria para
0,1 g de Fósforo V Oxido.
Agitar la solución durante treinta minutos a temperatura ambiente. Filtrar inmediatamente y lavar
dos veces el precipitado decantado con porciones
de Agua PA-ACS 25-30 ml. Agitar vigorosamente y
dejar sedimentar. Pasar el precipitado al filtro con
ayuda de agua fría hasta que una cantidad del filtrado equivalente a dos veces el contenido del embudo produzca un tinte rosado al agregarle Fenolftale-
M
ína y una gota de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
Pasar el precipitado junto con el filtro a un vaso de
precipitados y disolverlo con un ligero exceso de
Sodio Hidróxido medido exactamente.
Agregar unas gotas de Fenolftaleína y valorar por
retroceso con Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV.
9.5. Cálculo.
El contenido de fósforo V óxido expresado en %
vendrá dado por la siguiente fórmula:
0,00309 x (V1 - V2)
P2O5, % en peso = ——————————
d
Siendo:
V1 = volumen de sodio hidróxido, en ml, añadido
en exceso.
V2 = volumen de ácido sulfúrico, en ml,
empleado en la valoración.
d = densidad en g/ml de la cerveza, medida a
20°C/20°C.
Para expresar el resultado en % de ácido fosfórico multiplicar el contenido del fósforo V óxido (%)
por 0,69.
9.6. Observaciones.
El agua destilada puede causar la peptización
del precipitado de amonio fosfomolibdato y pérdida
de parte de éste, bien a través del papel de filtro, o
por rebosamiento.
Lavar con una solución de 131524 Potasio Nitrato PA-ISO para evitarlo.
9.7. Referencias.
9.7.1. Associations of Official Analytical Chemists. Official Methods of Analysis (12ª edición),
Methods 10.036 and 7.101. The Association: Washington, D.C. (1975).
9.7.2. American Society of Brewing Chemists.
Methods of Analysis (7ª edición), Beer Method 15
(1976).
10. ANHIDRIDO SULFUROSO
10.1. Principio.
El SO2 se destila en medio ácido y se lleva a una
solución tamponada de DTNB por medio de una
corriente de nitrógeno. El producto formado en la
reacción se mide por espectrofotometría.
10.2. Material y aparatos.
10.2.1. Aparato (figura 10.1.), provisto de:
Matraz fondo redondo de 250 ml, con tres
bocas, una central y dos laterales en ángulo.
Embudo de decantación de 100 ml en forma de
pera.
Tubo acodado con macho esmerilado, para
entrada de gases, longitud aproximada de vástago
de 150 ml.
Refrigerante doble superficie, longitud total
300 ml y longitud útil de 200 ml.
Bola retención proyecciones, salida inclinada.
Colector acodado largo.
Tubo filtrante.
10.2.2. Espectrofotómetro que permite lecturas
a una longitud de onda de 415 nanómetros.
10.3. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
5,5’ - Ditiobis (Acido Nitrobenzoico)
121085 Etanol 96% v/v PA
121522 Potasio Disulfito PA
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
131679 di-Sodio Hidrógeno Fosfato anhidro
PA-ACS
10.3.1. Solución Tampón de Fosfato, pH 8,0.
Disolver 2,27 g de di-Sodio Hidrógeno Fosfato anhidro PA-ACS y 0,245 g de Potasio di-Hidrógeno
Fosfato PA-ACS-ISO, ambos pesados en estado
anhidro, en 1 l de Agua PA-ACS. Comprobar el pH
y ajustar, si es necesario, con Sodio Hidróxido o un
ácido.
10.3.2. DTNB. Disolver 1 g de 5,5’ - Ditiobis (Acido Nitrobenzoico), en una mezcla de 900 ml de
solución tampón y 100 ml de Etanol 96% v/v PA.
10.3.3. Solución de Acido Clorhídrico, aproximadamente 4N. Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35% PA-ISO en Agua PA-ACS.
10.4. Procedimiento.
10.4.1. Una vez montado el equipo de destilación, introducir 50 ml de Acido Clorhídrico en el
matraz de destilación.
Calentar durante cinco minutos, aproximadamente, mientras se hace llegar al interior del matraz
una corriente de nitrógeno.
Intoducir en el matraz 25 ml de cerveza medidos
exactamente.
Recoger el SO2 desprendido en un matraz que
contiene 50 ml de reactivo. El tubo filtrante permanecerá sumergido en la solución durante todo el
proceso de destilación, que se detendrá después
de ocho minutos.
Desmontar el tubo filtrante y enjuagar con unos
milílitros de solución tampón. Trasvasar cuantitativamente el contenido del matraz (destilado, reactivo y
solución tampón), a un matraz aforado de 100 ml y
enrasar con Agua PA-ACS.
Medir la densidad óptica en una célula de 1 cm de
recorrido a una longitud de onda de 415 nanómetros
con relación a un ensayo en blanco recientemente
preparado. El ensayo en blanco se prepara diluyendo
50 ml de reactivo con 50 g de Solución Tampón.
73
11. COBRE
11.1. Principio.
Determinación directa por espectrofotometría de
absorción atómica.
11.2. Material y aparatos.
11.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica
provisto de una lámpara para cobre con sensibilidad suficiente para detectar 0,05 mg/l de cobre por
aspiración directa.
11.2.2. Matraz Erlenmeyer de 1.000 ml.
11.2.3. Matraces aforados de 100 y 1.000 ml
con tapón de vidrio.
11.2.4. Pipetas graduadas (10 ml, divididas en
0,1 ml).
11.2.5. Pipetas aforadas de 10 ml.
11.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
313178 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA
11.3.1. Cobre solución patrón Cu = 1,000
±0,002 g/l AA.
11.3.2. Agua PA-ACS.
Figura 10.1
10.4.2. Determinación de la curva patrón. Preparar soluciones acuosas patrón de Potasio Disulfito
PA, cuyo contenido de SO2 se habrá determinado
previamente por iodometría, que contengan 2; 5;
10; 15 y 20 mg de SO2 por litro.
Las soluciones patrón se tratan de la misma forma que la cerveza, esto es, destilándolas previamente.
10.5. Cálculo.
El contenido de SO2 en mg/l vendrá dado por la
siguiente fórmula:
SO2 en mg/l = A x f
74
Siendo:
A = absorbancia medida.
f = factor determinado mediante la curva
patrón.
10.6. Referencia.
10.6.1. European Brewery Convention.
11.4. Procedimiento.
11.4.1. Preparación de la muestra. Introducir la
cerveza, que estará a una temperatura próxima a
20°C, en un Erlenmeyer grande y agitar, primero suavemente y después con energía hasta que la cerveza
esté desgasificada. Si es necesario, eliminar la espuma o las partículas en suspensión filtrando a través
de un papel de filtro seco. Tapar el embudo con un
vidrio de reloj para evitar la evaporación. Después de
desgasificar y filtrar, la cerveza estará a 20°C, aproximadamente. Si se filtra, asegurarse que el papel de
filtro no contenga cobre.
11.4.2. Calibración. La solución patrón contiene
1.000 mg/l de cobre. Si se introduce 0,1 ml de esta
solución en un matraz de 100 ml y se enrasa con cerveza desgasificada, se incrementa el contenido de
cobre de esta última en 1 mg/l.
Preparar de esta forma cinco muestras de cerveza
en las que se incrementa su contenido de cobre en
0,0; 0,1; 0,2; 0,4 y 0,6 mg/l. Para ello, introducir 0,0;
0,1; 0,2; 0,4 y 0,6 ml de la solución patrón de cobre
en cinco matraces de 100 ml y enrasar con la cerveza que se va a analizar. Diluir 10 veces pipeteando
10 ml de cada una de las soluciones precedentes en
otros cinco matraces de 100 ml y enrasar de nuevo.
Se tendrá así una serie de cervezas con adiciones
medidas de cobre.
Si las cervezas que se van a analizar tienen un
contenido de cobre muy similar, bastará una sola curva de adición.
11.4.3. Determinación. Aspirar las soluciones
M
directamente al espectrofotómetro de acuerdo con el
manual de instrucciones del aparato, usar como cero
el Agua PA-ACS y medir la absorbancia de la cerveza
y de los cuatro patrones correspondientes.
11.5. Cálculo.
Dibujar la curva patrón a partir de las absorbancias obtenidas y determinar el contenido de cobre en
cerveza por extrapolación de esta curva.
Expresar la concentración de cobre en mg/l con
dos cifras decimales.
11.6. Referencias.
11.6.1. American Society of Brewing Chemists,
Proc. 1970, 212; proc. 1971, 303; proc. 1972, 133.
11.6.2. Moll, M., Bios 1977, 8, 42.
11.6.3. Moll, M., J. Inst. Braw. 1978, 84, 156.
11.6.4. Moll, M., Brauwissenschaft, 1977, 30,
347.
11.6.5. Moll, M., Flayeux, R., Bazard, D. et Lehuede, J.M., Bios 1975, 6, 245.
11.6.6. European Brewery Convention. Analytica
EBC Method 7.23. Schweizer Brauerei-Rundschau,
Zurich, 1975.
12. ZINC
12.1. Principio.
Determinación directa por espectrofotometría de
absorción atómica.
12.2. Material y aparatos.
12.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica
provisto de una lámpara para zinc.
12.2.2. Matraces aforados de 50; 100 y 1.000 ml,
con tapón de vidrio.
12.2.3. Pipetas aforadas de 1 y 2 ml.
12.3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 ±0,002 g/l AA
12.3.1. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ±0,002
g/l AA.
12.3.2. Agua PA-ACS.
12.4. Procedimiento.
12.4.1. Preparación de la muestra. Introducir la
cerveza, que estará a una temperatura próxima a
20°C, en un Erlenmeyer grande y agitar, primero
suavemente y después con energía, hasta que la
cerveza esté desgasificada. Si es necesario, eliminar la espuma o las partículas en suspensión filtrando a través de un papel de filtro seco. Tapar el
embudo con un vidrio de reloj para evitar la evaporación. Después de desgasificar y filtrar, la cerveza
estará a 20°C, aproximadamente. Si se filtra, asegurarse que el papel de filtro no contenga Zinc.
12.4.2. Calibrado. A partir de la solución de
1.000 mg/l de Zinc, preparar soluciones de 10; 20;
30 y 40 mg/l en Agua PA-ACS introduciendo 1; 2; 3
y 4 ml de esta solución en matraces de 100 ml y
enrasando con Agua PA-ACS.
Preparar adiciones de 0,0; 0,2; 0,4; 0,6 y 0,8
mg/l de Zinc en cerveza introduciendo 1 ml de Agua
PA-ACS y 1 ml de cada una de las soluciones de
10; 20; 30 y 40 mg/l de Zinc en una serie de matraces de 50 ml y enrasar con cerveza. La cerveza se
ha diluído así a 49/50.
12.4.3. Determinación. Aspirar las soluciones
directamente al espectrofotómetro de acuerdo con
el manual de instrucciones del aparato.Usar como
cero el Agua PA-ACS y medir la absorbancia de las
cinco soluciones precedentes a 213,9 nm.
12.5. Cálculo.
Dibujar la curva patrón a partir de las absorbancias obtenidas y determinar el contenido de Zinc en
cerveza por extrapolación de esta curva.
Expresar la concentración C, de la cerveza diluida, en mg/l, con tres cifras decimales.
50
C (mg/l) = C1 x ———
49
12.6. Referencias.
12.6.1. American Society of Brewing Chemists,
Proc. 1970, 212; Proc. 1971, 303; Proc, 1972, 133;
Proc. 1973, 160; Proc. 1974, 32.
12.6.2. European Brewery Convention. Analytica
EBC (3ª edición), Method 7.24. Schweizer BrauereiRundschau, Zurich, 1975.
13. HIDRATOS DE CARBONO
13.1. Principio.
El contenido de hidratos de carbono en cerveza
se determina a partir del extracto real y de su contenido en proteínas y cenizas.
13.2. Cálculo.
El contenido de hidratos de carbono/100 g de
cerveza viene dado por la fórmula:
HC = Er - Pr - Cn
Siendo:
Er = extracto real.
Pr = proteínas porcentaje.
Cn = cenizas porcentaje.
13.3. Observaciones.
Para la determinación del nitrógeno se utilizará el
75
método Kjeldahl, aplicando el factor de 6,25 para
su conversión en proteínas.
13.4. Referencia.
13.4.1. American Society of Brewing Chemists.
Methods of Analysis (7ª edición), Beer Method 6-D.
14. COLOR
14.1. Principio.
Comparar la escala de vidrios coloreados EBC
con la cerveza colocada en cubetas de vidrio óptico. Las lecturas se referirán siempre a un espesor
de cubeta de 25 mm.
14.2. Material y aparatos.
14.2.1. Cuatro discos, cada uno de ellos con
nueve vidrios coloreados EBC (de 2 a 12 en medias
unidades, de 10 a 27 en unidades).
14.2.2. Cubetas de vidrio óptico de 40; 25; 10 y
5 mm de recorrido óptico.
14.2.3. Comparador que permita colocar los discos y comparar los vidrios coloreados con el contenido de las cubetas (no es necesario usar una
cubeta con agua detrás del vidrio coloreado).
14.2.4. Fuente apropiada de luz del norte artificial (caja de luz blanca), para iluminar el comparador. (Usar bombillas adecuadas, con un voltaje
correcto y sustituirlas después de 100 horas de
uso). El aparato se debe colocar de forma que ninguna luz intensa deslumbre al observador, o penetre en la cubeta de vidrio.
14.3. Procedimiento.
La cerveza deberá estar exenta de turbidez, que
se podrá eliminar, en caso necesario, de la siguiente
manera: agitar la cerveza con 0,1% de tierra de diatomeas y filtrar sobre papel plegado de 9 cm, despreciando las primeras porciones. Si persiste un
velo fino, refiltrar sobre membrana filtrante de 0,45
micrómetros, despreciando de nuevo las primeras
porciones. También se puede clarificar la cerveza y
filtrar sobre papel, o centrifugar por encima de
5.000 revoluciones por minuto en una centrífuga
angular. En cualquier caso, reducir al máximo la
exposición de la cerveza al aire o a una luz intensa.
76
14.4. Cálculo.
Cervezas claras. La cerveza brillante se mide
normalmente en una cubeta de 25 o 40 mm, de tal
forma que la lectura esté entre 10 y 20 unidades.
Calcular el resultado para una cubeta de 25 mm.
Cervezas oscuras. Escoger una cubeta tal que la
lectura esté entre 20 y 27 unidades. Las cervezas
oscuras necesitan normalmente una cubeta de 5
mm; para cervezas más oscuras usar una cubeta
más estrecha o diluir. Calcular el resultado para la
cerveza no diluida, referido a una cubeta de 25 mm.
Normalmente, la concordancia de color se consigue en la parte baja de la escala con las cervezas
claras, de tonalidad amarillenta, y en la parte alta
con las cervezas oscuras, de tonalidad rojiza. Cuando la concordancia no es satisfactoria se escogerá
un tamaño de cubeta más adecuado. Efectuar un
control semanal con la solución de Hartong.
14.5. Control por medio de la solución de Hartong. Limpiar previamente el material de vidrio con
MC Mezcla Crómica DERQUIM, o bien preparar a
partir de 211153 Cromo VI Oxido QP y 141058 Acido Sulfúrico 95-98% (USP-NF, BP) PRS-CODEX,
para eliminar cualquier vestigio de materia orgánica.
Disolver 0,1 g de 131500 Potasio Dicromato PAISO y 3,5 g de 121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA en 131074 Agua PA-ACS libre de materia
orgánica y completar a 1 l en un matraz aforado con
tapón de vidrio. Dejar en reposo la solución durante
24 horas antes de su uso y conservarla en la oscuridad; en estas condiciones, es estable durante un
mes. Efectuar la media preferentemente en una
cubeta de 40 mm en la que la lectura debe ser 15
unidades EBC.
Ciertas personas dan valores ligeramente superiores o ligeramente inferiores. En tal caso, corregir
sus lecturas con un coeficiente calculado según su
lectura de la solución de Hartong.
14.6. Referencias.
14.6.1. Bishop, L.R., J. Inst. Brew., 1950, 56,
373; 1953, 59, 448; 1968, 72, 443.
14.6.2. European Brewery Convention. Analytica
EBC (3ª edición), Methods 3.4.1. and 7.3.).
M
77
Relación de reactivos
y productos auxiliares
que se utilizan en los
métodos analíticos,
Cereales, derivados de
Cereales y Cerveza
78
NOTA: Algunos de los reactivos recomendados en
los métodos analíticos previamente descritos han
modificado su código y mejorado su calidad. Además se han producido nuevas incorporaciones.
Por favor, consulte este anexo antes de efectuar
su pedido. Es la versión actualizada de la oferta de
productos suministrables en Mayo de 1999.
M
REACTIVOS Y PRODUCTOS AUXILIARES QUE HAN CAMBIADO DE CÓDIGO
ANTERIOR
172222 Acido Bórico solución 4% RE
171096 Almidón soluble RE
171366 Alumbre de Hierro Amoniacal
solución saturada RE
171165 Azul de Bromofenol RE-ACS
171327 Fenolftaleína solución 1% RE
171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS
171618 Rojo de Metilo solución 0,1 % RE
151628 Silicona líquida antiespumante PR
122363 Sodio Dodecilo Sulfato PA
ACTUAL
282222 Acido Bórico solución 4% RV
121096 Almidón de Patata soluble PA
281366 Alumbre de Hierro Amoniacal solución
saturada RV
131165 Azul de Bromofenol PA-ACS
281327 Fenolftaleína solución 1% RV
131617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) PA-ACS
281618 Rojo de Metilo solución 0,1% RV
211628 Silicona líquida antiespumante QP
132363 Sodio Dodecilo Sulfato PA-ACS
79
131007
131008
282222
131018
131020
131019
181023
131669
135324
131032
131034
121035
131037
131036
121737
131058
181061
181059
131067
212236
131074
121096
281366
131130
121129
131134
181144
132352
211160
313171
80
131165
251170
131192
122295
121211
141219
121237
313178
131270
Acetona
PA-ACS-ISO
Aceite de Cacahuete
Acido Acético glacial
PA-ACS-ISO
Acido Bórico solución 4%
RV
Acido Cítrico 1-hidrato
PA-ACS-ISO
Acido Clorhídrico 37%
PA-ACS-ISO
Acido Clorhídrico 35%
PA-ISO
Acido Clorhídrico 0,1 mol/l (0,1N)
SV
Acido Etilendiaminotetraacético
Sal Disódica 2-hidrato
PA-ACS-ISO
Acido meta-Fosfórico
PA-ACS
estabilizado con NaPO3
Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
Acido L(+)-Láctico 85%
PA-ACS
Acido Molíbdico
(contiene amonio molibdato)
PA
Acido Nítrico 69%
PA-ACS-ISO
Acido Nítrico 60%
PA-ISO
Acido Nítrico 53%
PA
Acido Sulfúrico 96%
PA-ISO
Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N)
SV
Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N)
SV
Acido Tricloroacético
PA-ACS
Agua Desionizada
QP
Agua
PA-ACS
Almidón hidrolizado para electroforesis
Connauglit o similar
Almidón de Patata soluble
PA
Alumbre de hierro amoniacal solución
saturada
RV
Aluminio Lactato
a-Amilasa tipo VI-A
Amoníaco 30% (en NH3)
PA-ACS
Amoníaco 25% (en NH3)
PA
Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO
Amonio Tiocianato 0,1 mol/l (0,1N) SV
Amonio meta-Vanadato
PA-ACS
Arena de Mar lavada, grano fino
QP
Arsénico solución patrón
As = 1,000 ±0,002 g/l
AA
Azul de Bromofenol
PA-ACS
Azul de Metileno (C.I. 52015)
DC
Benceno
PA-ACS-ISO
Bencidina
PA
Calcio Acetato x-hidrato
PA
Calcio Cloruro anhidro, escoriforme PRS
Carbón Activo polvo
PA
Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ±0,002 g/l
AA
Cobre (II) Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
161805
122056
471303
121086
121085
132770
141317
131315
131325
281327
141154
211335
141076
313186
121428
131091
131079
254419
211835
131459
181464
313189
131500
121522
131505
131509
131481
121515
181521
131527
131729
131532
131534
Decahidronaftaleno,
mezcla de isómeros
PS
2,6-Diclorofenol Indofenol
Sal Sódica 2-hidrato
PA
5,5’-Ditiobis (Acido Nitrobenzoico)
Estaño (II) Cloruro 2 –hidrato
(máx. 0,000005% de Hg)
PA-ACS
Etanol absoluto
PA
Etanol 96% v/v
PA
Etanol 70%
Eter Dietílico estabilizado
con ~6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO
Eter mono-Etílico de Etilenglicol
PRS
Eter de Petróleo 40-60°C
PA-ISO
Fenolftaleína
PA-ACS
Fenolftaleína solución 1%
RV
di-Fósforo penta-Oxido
PRS
Gel de Sílice 3-6 mm con indicador QP
Hidrógeno Peróxido
30% p/v (100 vol.)
PRS
Levadura
Mercurio solución patrón
Hg = 1,000 ±0,002 g/l
AA
Mercurio (II) Yoduro rojo
PA
Metanol
PA-ACS-ISO
3-Metil-1-Butanol
PA-ACS
Nigrosina soluble en agua
(C.I. 50420)
DC
Papel Albet número 502
Papel Filtro
(Ver Tarifa Panreac, Filtración MN)
Piedra Pómez gránulos
QP
Plata Nitrato
PA-ACS-ISO
Plata Nitrato 0,1 mol/l (0,1N)
SV
Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ±0,002 g/l
AA
Potasio Dicromato
PA-ISO
Potasio Disulfito
PA
Potasio Hexacianoferrato (II)
3-hidrato
PA-ACS
Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
Potasio Hidrógeno Ftalato
PA-ISO
Potasio Hidróxido 85% lentejas
PA
Potasio Hidróxido
0,1 mol/l (0,1N)
SV
Potasio Permanganato
PA-ACS-ISO
Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
Potasio Sulfato
PA-ACS-ISO
Potasio Tiocianato
PA-ACS-ISO
M
131542
171543
131090
172174
131617
281618
141625
211628
131644
123314
131648
131659
132363
131679
131687
171690
182296
181693
181694
181691
131716
131717
181723
131724
272168
272170
131252
131754
141711
313193
141782
131775
Potasio Yoduro
PA-ISO
Potasio Yoduro solución 10% p/v
RE
2-Propanol
PA-ACS-ISO
Reactivo de Luff-Schoorl
RE
Rojo de Metilo (C.I. 13020)
PA-ACS
Rojo de Metilo solución 0,1%
RV
Selenio metal polvo
PRS
Silicona líquida antiespumante
QP
di-Sodio tetra-Borato
10-hidrato
PA-ACS-ISO
Sodio Borohidruro
PA
Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO
Sodio Cloruro
PA-ACS-ISO
Sodio Dodecilo Sulfato
PA-ACS
Sodio di-Hidrógeno Fosfato anhidro
di-Sodio Hidrógeno
Fosfato anhidro
PA-ACS
di-Sodio Hidrógeno Fosfato 2-hidrato
Sodio Hidróxido lentejas
PA-ACS-ISO
Sodio Hidróxido solución 30% p/v
RE
Sodio Hidróxido 0,025 mol/l (0,025N) SV
Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N)
indicador Azul de Bromofenol
SV
Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N)
indicador Fenolftaleína
SV
Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N)
SV
Sodio Sulfato anhidro
PA-ACS-ISO
Sodio Sulfito anhidro
PA-ACS
Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N)
SV
Sodio Tungstato 2-hidrato
PA-ACS
Tampón, solución pH 4,00
±0,02 (20°C)
ST
Tampón, solución pH 7,00
±0,02 (20°C)
ST
Triclorometano estabilizado
con etanol
PA-ACS-ISO
Urea
PA-ACS
Yodo resublimado perlas
(RFE, USP, BP, Ph. Eur.)
PRS-CODEX
Zinc solución patrón
Zn = 1,000 ±0,002 g/l
AA
Zinc metal, granalla
PRS
Zinc Acetato 2-hidrato
PA-ACS
Los productos sin codificar no figuran en nuestra
Tarifa actual de Reactivos para Análisis.
81
Aditio
Aditivos y
coadyuvantes
tecnológicos para
uso alimentario
industrial
PANREAC QUIMICA, S.A., fabrica además de
los reactivos para análisis PANREAC, una línea de
aditivos y coadyuvantes tecnológicos para uso alimentario industrial, que cumplen las especificaciones de pureza prescritas por The Food Chemicals Codex 4ª ed., complementadas con las exigencias específicas fijadas por la legislación española y comunitaria de la CEE.
En relación que sigue se indica denominación
del producto, fórmula y número de identificación.
Para mayor información, solicite nuestro catálogo
ADITIO 1995.
82
M
Código Producto
201003
204333
201007
201008
202342
201013
202422
202034
201014
201808
201018
201020
202019
202785
202512
201669
201030
201029
201032
202344
202042
201034
202368
202051
202591
203389
202786
202345
201810
201055
201883
201058
201065
201066
201792
202035
202043
201081
201103
201130
201129
201119
201121
201116
201127
201126
Sinónimos
Fórmula
N.º de
identificación
ACEITE DE VASELINA
ACETOFENONA
C 8H 8O
ACETONA
CH3COCH3
ACIDO ACETICO GLACIAL
CH3COOH
E-260
ACIDO ADIPICO
(CH2CH2COOH)2
E-355
ACIDO L(+)-ASCORBICO
C 6H 8O 6
E-300
ACIDO DL-ASPARTICO
C 4H7NO4
ACIDO L-ASPARTICO
C 4H7NO4
ACIDO BENZOICO
C6H5COOH
E-210
ACIDO CITRICO anhidro
C 6H 8O 7
E-330
ACIDO CITRICO 1-hidrato
C6H8O7.H2O
E-330
ACIDO CLORHIDRICO 37%
HCl
E-507
ACIDO CLORHIDRICO 35%
HCl
E-507
ACIDO DECANOICO
C10H20O2
ACIDO ESTEARICO
C18H36O2
Mezcla de ácidos grasos
ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO SAL di-SODICA 2-hidrato
Na2H2C10H12N2O8.2H2O
ACIDO FORMICO 98%
HCOOH
E-236
ACIDO FORMICO 85%
HCOOH
E-236
ACIDO orto-FOSFORICO 85%
H3PO4
E-338
ACIDO FUMARICO
HOOCCHCHCOOH
E-297
ACIDO L-GLUTAMICO
C5H9NO4
E-620
ACIDO LACTICO 85%
CH3CHOHCOOH
E-270
ACIDO LAURICO
C12H24O2
ACIDO DL-MALICO
C 4H 6O 5
E-296
ACIDO MIRISTICO
CH3(CH2)12COOH
ACIDO NlCOTINlCO
E-375
ACIDO OCTANOICO
C8H16O2
ACIDO PALMITICO
ACIDO PROPIONICO
CH3CH2COOH
E-280
ACIDO SORBICO
C 6H 8O 2
E-200
ACIDO SUCCINICO
HOOCCH2CH2COOH
E-363
ACIDO SULFURICO 96%
H2SO4
E-513
ACIDO TANICO
ACIDO L(+)-TARTARICO
(CHOH) 2(COOH)2
E-334
AGAR
E-406
DL-ALANINA
L-ALANINA
C3H7NO2
ALCOHOL BENCILICO
C6H5CH2OH
ALUMINIO POTASIO SULFATO
12-hidrato
AlK(SO4)2.12H2O
E-522
AMONIACO 30% (en NH3)
NH4OH
E-527
AMONIACO 25% (en NH3)
NH4OH
E-527
AMONIO CARBONATO
~(NH4)3(CO3)2H+NH2COONH4 E-503i
AMONIO CLORURO
NH4Cl
E-510
AMONIO HIDROGENO CARBONATO (Amonio Bicarbonato) NH4HCO3
E-503ii
di-AMONIO HIDROGENO FOSFATO
(NH4)2HPO4
E-342ii
AMONIO di-HIDROGENO FOSFATO
NH4H2PO4
E-342i
83
Código Producto
201140
203464
204109
202357
203977
201089
201082
201429
204233
201211
201212
201213
201219
201221
201215
201232
201214
202824
201818
201224
201228
201227
201226
201225
202400
201230
203238
201235
201237
202416
204441
203922
84
203645
202825
201286
201254
201877
201303
AMONIO SULFATO
L-ARGININA
L-ASPARAGINA anhidra
BENZOILO PEROXIDO humectado
con aprox. 25% de H2O
D (+)-BIOTINA
iso-BUTANOL
1-BUTANOL
BUTANONA (Metiletilcetona)
2-ter-BUTIL-4-METOXIFENOL
CALCIO ACETATO x-hidrato
CALCIO CARBONATO precipitado
tri-CALCIO di-CITRATO 4-hidrato
CALCIO CLORURO anhidro
escoriforme
CALCIO CLORURO anhidro polvo
CALCIO CLORURO 2-hidrato
escoriforme
CALCIO CLORURO 2-hidrato polvo
CALCIO CLORURO 6-hidrato
CALCIO CLORURO solución 45%
(en CaCl2.2H2O)
CALCIO ESTEARATO
CALCIO FORMIATO
tri-CALCIO FOSFATO
CALCIO HIDROGENO FOSFATO
anhidro
CALCIO HIDROGENO FOSFATO
2-hidrato
CALCIO bis (di-HIDROGENO
FOSFATO) 1-hidrato
CALCIO HIDROXIDO polvo
CALCIO LACTATO 5-hidrato
CALCIO PROPIONATO
CALCIO SULFATO 2-hidrato
CARBON ACTIVO polvo
CARBOXIMETILCELULOSA SAL
SODICA (baja viscosidad)
CARBOXIMETILCELULOSA SAL
SODICA (media viscosidad)
CARBOXIMETLCELULOSA SAL
SODICA (alta viscosidad)
L-CISTINA
2,6-Di-ter-BUTIL-4-METILFENOL
1,2 DICLOROETANO
DICLOROMETANO
estabilizado con amileno
1-DODECANOL
ESTAÑO (II) CLORURO 2-hidrato
Sinónimos
Fórmula
(NH4)2SO4
C 6H 4N 4O 2
C4H 8N 2O 3
C14H10O4
C10H16N2O3S
C4H10O
C4H10O
C 4H 8O
(BHA, Butildroxianisol) C11H16O2
Ca(CH3COO)2.xH2O
CaCO3
Ca3(C6H5O7)2.4H2O
(Calcio Difosfato)
N.º de
identificación
E-517
E-320
E-263
E-170i
E-333iii
CaCl2
CaCl2
E-509
E-509
CaCl2.2H2O
CaCl2.2H2O
CaCl2.6H2O
E-509
E-509
E-509
~Ca(C18H35O2)2
C2H2CaO4
~Ca3(PO4)2
E-509
E-470a
E-238
E-341iii
CaHPO4
E-341ii
CaHPO4.2H2O
E-341ii
CaH4(PO4)2.H2O
Ca(OH)2
Ca(CH3CHOHCOO)2.5H2O
Ca(CH3CH2COO)2
CaSO4.2H2O
E-341i
E-526
E-327
E-282
E-516
E-466
E-466
E-466
C6H12N2O4S2
(BHT, Butilhidroxitoluol) C15H24O
ClCH2ClCH2
Cl2CH2
C12H26O
SnCl2.2H2O
E-921
E-321
E-512
M
Código Producto
201086
201085
202695
201318
201319
202047
202728
202060
201339
202329
201922
201340
201341
203140
202061
201076
201362
202045
202198
201375
202046
203385
201396
202029
201399
201927
201395
201404
201410
201413
202067
201091
203332
203209
201479
201487
201490
201492
201494
201522
201513
201505
201480
Sinónimos
ETANOL absoluto
ETANOL 96% v/v
ETANOL 70% v/v
ETILO ACETATO
ETILO S(-)-LACTATO
L-FENILALANINA
D(-)-FRUCTOSA
GELATINA 80-100 Blooms
GLICERINA
(Glicerol)
GLICERINA 87%
(Glicerol)
GLICERINA tri-ACETATO
GLICINA
D(+)-GLUCOSA
D(+)-GLUCOSA 1-hidrato
GOMA ARABIGA polvo
HIDROGENO PEROXIDO 30% p/v
(100 vol.)
HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato
L-HISTIDINA
L-HISTIDINA mono-CLORHIDRATO 1-hidrato
LACTOSA 1-hidrato
L-LEUCINA
D-(+)-LIMONENO
MAGNESIO CLORURO 6-hidrato
MAGNESIO ESTEARATO
tri-MAGNESIO di-FOSFATO
(Magnesio
5-hidrato
orto-fosfato)
MAGNESIO HIDROGENO FOSFATO
3-hidrato
MAGNESIO HIDROXI CARBONATO
5-hidrato
(Magnesio Carbonato)
MAGNESIO SULFATO 7-hidrato
MANGANESO (II) CLORURO 4-hidrato
MANGANESO (II) SULFATO 1-hidrato
D(-)-MANITA
(Manitol)
METANOL
METILO 4-HIDROXIBENZOATO
PARAFINA 51- 53 °C en lentejas
POTASIO ACETATO
POTASIO BROMATO
POTASIO CARBONATO
tri-POTASIO CITRATO 1-hidrato
POTASIO CLORURO
POTASIO DISULFITO
tri-POTASIO FOSFATO 1,5-hidrato
POTASIO HEXACIANOFERRATO (II)
3-hidrato
(Potasio Ferrocianuro)
POTASIO HIDROGENO CARBONATO (Potasio Bicarbonato)
Fórmula
N.º de
identificación
CH3CH2OH
CH3CH2OH
CH3CH2OH
CH3COOC2H5
C5H10O3
C9H11NO2
C6H12O6
C 3H 8O 3
C 3H 8O 3
C9H14O6
H2NCH2COOH
C6H12O6
C6H12O6.H2O
E-422
E-422
E-1518
E-640
E-414
H 2O 2
FeSO4.7H2O
C 6H 9N 3O 2
C6H10ClN3O2.H2O
C12H22O11.H2O
C6H13NO2
C10H16
MgCl2.6H2O
~Mg(C18H35O2)2
Mg3(PO4)2.5H2O
MgHPO4.3H2O
MgSO4.7H2O
MnCl2.4H2O
MnSO4.H2O
C6H14O6
CH3OH
C 8H 8O 3
E-511
E-470b
E-343ii
E-504ii
E-518
E-421
E-218
CH3COOK
KBrO3
K2CO3
K3C6H5O7.H2O
KCl
K 2S 2O 5
K3PO4.H2O
E-261
E-924
E-501i
E-332ii
E-508
E-224
E-340iii
K4Fe(CN)6.3H2O
KHCO3
E-536
E-501ii
85
Código Producto
86
Sinónimos
201512 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO
anhidro
(di-Potasio ortoFosfato)
202333 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO
3-hidrato
201509 POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO (mono-Potasio
orto-Fosfato)
201486 POTASIO HIDROGENO TARTRATO
201515 POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas
201524 POTASIO NITRATO
201855 POTASIO NITRITO
201729 POTASIO SODIO TARTRATO
4-hidrato
201531 POTASIO SORBATO
201532 POTASIO SULFATO
201533 POTASIO SULFITO
201537 POTASIO TARTRATO 1/2-hidrato
201540 POTASIO YODATO
201542 POTASIO YODURO
203646 L-PROLINA
201545 1,2-PROPANODIOL
201090 2-PROPANOL
201633 SODIO ACETATO anhidro
201632 SODIO ACETATO 3-hidrato
203865 SODIO L(+)-ASCORBATO
201637 SODIO BENZOATO
201648 SODIO CARBONATO anhidro
202032 SODIO CARBONATO 1-hidrato
201647 SODIO CARBONATO 10-hidrato
201655 tri-SODIO CITRATO 2-hidrato
201656 tri-SODIO CITRATO 51/2-hidrato
201659 SODIO CLORURO
201698 SODIO DISULFITO
202363 SODIO DODECILO SULFATO
(Lauril Sulfato
Sódico)
201681 tri-SODIO FOSFATO 1-hidrato
201680 tri-SODIO FOSFATO 12-hidrato
201665 SODIO HIDROGENO di-ACETATO
(Sodio Diacetato)
201638 SODIO HIDROGENO CARBONATO (Sodio Bicarbonato)
201654 di-SODIO HIDROGENO CITRATO 11/2-hidrato
201679 di-SODIO HIDROGENO FOSFATO
(di-Sodio
anhidro
orto-Fosfato)
201678 di-SODIO HIDROGENO FOSFATO
12-hidrato
201965 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO
(mono-Sodio
1-hidrato
orto-Fosfato)
201677 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO
2-hidrato
201709 di-SODIO di-HlDROGENO PIROFOSFATO
201687 SODIO HIDROXIDO lentejas
Fórmula
N.º de
identificación
K2HPO4
E-340ii
K2HPO4.3H2O
E-340ii
KH2PO4
(COO)2KH(CHOH)2
KOH
KNO3
KNO2
E-340i
E-336i
E-525
E-252
E-249
NaK(COO)2(CHOH)2.4H2O
CH3(CHCH)2COOK
K2SO4
K2SO3
K2(COO)2(CHOH)2.1/2H2O
KIO3
KI
C5H9NO2
CH2OHCHOHCH3
CH3CH2CH2OH
CH3COONa
CH3COONa.3H2O
C6H7NaO6
C6H5COONa
Na2CO3
Na2CO3.H2O
Na2CO3.10H2O
Na3C6H5O7.2H2O
Na3C6H5O7.51/2H2O
NaCl
Na2S2O5
E-337
E-202
E-515i
E-336ii
E-262i
E-262i
E-301
E-211
E-500i
E-500i
E-500i
E-331iii
E-331iii
E-223
C12H25NaO4S
Na3PO4.H2O
Na3PO4.12H2O
CH3COONaCH3COOH
NaHCO3
C6H6Na2O7.11/2H2O
E-339iii
E-339iii
E-262ii
E-500ii
E-331ii
Na2HPO4
E-339ii
Na2HPO4.12H2O
E-339ii
NaH2PO4.H2O
E-339i
NaH2PO4.2H2O
H2Na2O7P2
NaOH
E-339i
E-450i
E-524
M
Código Producto
201686
203307
201702
201703
201711
201710
201684
201716
201715
201717
201720
201719
201721
203064
201733
202475
202101
202049
202048
201786
201788
201787
Sinónimos
SODIO HIDROXIDO escamas
SODIO LACTATO sol. 50% p/p
SODIO NITRATO
SODIO NITRITO
tetra-SODIO PIROFOSFATO anhidro (tetra-Sodio
Difosfato)
tetra-SODIO PIROFOSFATO
(tetra-Sodio
10-hidrato
Difosfato)
SODIO POLIFOSFATO
SODIO SULFATO anhidro
SODIO SULFATO 10-hidrato
SODIO SULFITO anhidro
SODIO TARTRATO anhidro
SODIO TARTRATO 2-hidrato
SODIO TIOSULFATO 5-hidrato
D(-)-SORBITA
(Sorbitol)
TALCO lavado
TIERRA SILICEA purificada y calcinada
TITANIO (IV) OXIDO
L-TRIPTOFANO
VAINILLINA
ZINC OXIDO
ZINC SULFATO 1-hidrato
ZINC SULFATO 7-hidrato
Fórmula
NaOH
C3H5NaO3
NaNO3
NaNO2
N.º de
identificación
E-524
E-325
E-251
E-250
Na4P2O7
E-450iii
Na4P2O7.10H2O
(NaPO3)6
Na2SO4
Na2SO4.10H2O
Na2SO3
Na 2(COO)2(CHOH)2
Na(COO)2(CHOH)2.2H2O
Na2S2O3.5H2O
C6H14O6
E-450iii
E-452i
E-514i
E-514i
E-221
E-335ii
E-335ii
TiO2
C11H12N2O2
C 8H 8O 3
ZnO
ZnSO4.H2O
ZnSO4.7H2O
E-420i
E-553b
E-171
87
Editado por:
PANREAC QUIMICA, S.A.
043 -16 - 500 - 9/99
Diseño:
Pere Duran
Impresión:
Centre Telemàtic Editorial,
Dep. Legal:
B-43.107-83
88
SRL