MATERIA: BIOLOGÍA PRÁCTICA DE LABORATORIO N. 1. MITOSIS INTRODUCCIÓN El ciclo celular tiene tres etapas principales, la interfase, la mitosis o división del núcleo en dos células hijas y la citocinesis o división del citoplasma. La mitosis o fase M tiene como función distribuir los cromosomas duplicados durante la interfase de modo que la nueva célula posea una dotación completa, es decir, un cromosoma de cada tipo. La mitosis es un proceso continuo, en donde una fase se fusiona imperceptiblemente con la siguiente. Sin embargo, por razones descriptivas, la mitosis se divide en cuatro etapas: profase, metafase, anafase y telofase. La división celular por mitosis produce células que son genéticamente idénticas la una a la otra y a la célula madre. El proceso tiene tres funciones básicas: la reproducción asexual, el desarrollo de organismos multicelulares y el reemplazo de células dañadas. El proceso mitótico puede ser estudiado si se elige un material biológico constituido por células que se encuentren en continua división, tal como se presenta en el meristema apical de la raíz. Un bulbo de cebolla cuya base se mantenga en contacto con agua durante 4 ó 5 días proporciona abundante cantidad de raíces jóvenes, muy apropiadas para estudiar la mitosis. OBJETIVOS • Preparar material para el estudio de la mitosis en la raíz de la cebolla. • Identificar las diferentes etapas del proceso mitótico. MATERIALES QUE DEBE LLEVAR EL ESTUDIANTE Bata de laboratorio, guantes desechables. Una hojilla nueva para bisturí o navaja para rasurar 1 bulbo de cebolla con raicilla. METODOLOGÍA 1.- Seleccionar y cortar raicillas de hasta 0,5 cm y se depositan en un vidrio de reloj. 2.- Cubrir la muestra con aceto-orceina, aproximadamente 2 mL. 3.- Tomar el vidrio de reloj por los bordes, ayudándose con una pinza y calentarlo suavemente a la llama del mechero, evitando la ebullición y esperar hasta que se emitan vapores tenues. Con unas pinzas o con un pincel tomar con cuidado una raíz y colocarla sobre un portaobjetos. Luego colocar el cubreobjetos y con la ayuda de una toalla de papel hacer un suave squash para aplastar la muestra y retirar el exceso de colorante. 4. Observación al microscopio. Llevar la muestra al microscopio y enfocar en el objetivo de 40 x, seleccionando áreas donde se encuentren células cortas y pequeñas. Luego llevar hasta 10 y 40x y recorrer varios campos visuales para reconocer las distintas fases de la mitosis. La preparación presenta el aspecto de una dispersión de células por todo el campo que abarca el microscopio. Se observarán células en distintas fases o estados de división celular, según donde estuvieran las células del tejido meristemático de la raíz cuando se separó de la cebolla. Con esta técnica de tinción se ven los cromosomas coloreados del color de la orseína: fucsia – morado. El aspecto reticulado, así como el mayor tamaño de algunos núcleos corresponde a las células que se encontraban en los procesos iniciales de la división. RESULTADOS Y DISCUSIONES Realiza dibujos de las fases de la mitosis que observaste. Para la interpretación de los resultados puede ayudarse con las fotos de Figura 1, donde se observan las diferentes etapas de mitosis en las células de tejido meristemático de la raíz de cebolla. Figura 1. CONCLUSIONES Redacte mínimo tres conclusiones del trabajo que se hizo en el laboratorio. Deben ser personales. Espacio para realizar los dibujos. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS SEXUALES MASCULINAS INTRODUCCIÓN. Espermatozoide es la célula reproductora sexual masculina o gameto masculino encargada de fecundar al óvulo, aportando la información genética complementaria a la de la célula femenina. Su tamaño es unas 10.000 veces más pequeño que el óvulo. Son microscópicas y una de las más pequeñas del cuerpo. OBJETIVO. Observar las células sexuales masculinas en montaje fresco y con tinción. MATERIALES Materiales traídos por el estudiante Microscopio Agua Destilada Guantes Colorante de Azul de Metileno Portaobjetos Cubreobjetos Pipeta Pasteur de plástico METODOLOGÍA Montaje de espermatozoides Montaje en fresco Con la ayuda del gotero tome una muestra de líquido seminal, proceda a colocar una gota sobre una lámina portaobjeto y cúbralos con una laminilla cubreobjetos. Observe la preparación al microscopio, comenzando por el de menor aumento hasta obtener el de mayor aumento. Con la presente muestra debe realizar las siguientes observaciones (figura 1 y 2): 1. Tamaño 2. Forma 3. Estructura 4. Tipo de movimiento Montaje con tinción de espermatozoides 1. Colocar una pequeña gota de líquido seminal sobre una lámina portaobjetos. 2. Prepare un frotis siguiendo las instrucciones del docente y deje secar a temperatura ambiente. 3. Proceda a realizar la tinción del frotis utilizando colorante azul de metileno. 4. Lave delicadamente con agua destilada (frasco lavador) y deje secar a temperatura ambiente. 5. Observe al microscopio y dibuje lo observado. 6. Haga sus observaciones teniendo en cuenta: Tamaño, Forma y Presencia de estructuras celulares. RESULTADOS Y CONCLUSIONES. Realiza los dibujos de lo observado y escribe una conclusión de la actividad. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EPITELIALES INTRODUCCIÓN Las células epiteliales o de la epidermis, son células que recubren las superficies internas y externas del cuerpo, formando capas celulares (epitelio), pueden estar ordenadas o carecer de orden; varían de tamaño, forma y estadio de degeneración. Las células epiteliales ayudan a proteger los órganos; algunas producen moco u otras secreciones. Los epitelios pueden derivarse de las tres capas germinales de un embrión: el ectodermo, el mesodermo y el endodermo. Existe una constante renovación de las células del epitelio por procesos de división celular. La superficie bucal está tapizada por la MUCOSA BUCAL, un tapiz de células superpuestas formando varias capas y unidas entre sí formando el EPITELIO PLANO ESTRATIFICADO NO QUERATINIZADO. Las mucosas son comunes en superficies húmedas sujetas a desgaste. Las células basales tienen forma cúbica o polimorfa y las células de la superficie son aplanadas (escamosas). MATERIALES Microscopio Mechero de alcohol Vidrio de reloj Pinzas Agua Portaobjetos Cubreobjetos Palo de madera de brocheta Azul de metileno. METODOLOGÍA 1.- Con el extremo de un palillo vamos a rasparnos suavemente la parte interior de nuestra mejilla. 2.- Después depositaremos estas células en un portaobjetos ya mojado, y lo calentaremos un poco hasta que el agua se evapore. 3.- Colocaremos el portaobjetos en un soporte de tinción (cristalizador) y echaremos un par de gotas de azul de metileno. Seguidamente lo lavaremos con cuidado hasta que quede totalmente transparente. 4.- Sin dejar que se seque colocaremos un cubreobjetos encima y ya podremos observar nuestras células bucales en el microscopio. Observa la muestra primero con el objetivo de 40X y posteriormente en el 100X con liquido de inmersión. CONCLUSIONES Y RESULTADOS Realiza los dibujos de las células y las partes que logres distinguir. Escribe una conclusión de la práctica.