Fluidos Corporales Estériles en el Diagnóstico Microbriológico MICROBIOLOGÍA E INMUNOLOGÍA SEMANA 3 2023- 2 LOGROS DEL APRENDIZAJE RESULTADOS DE APRENDIZAJE DE LA SESIÓN 1.- Conocer la importancia del Hemocultivo en el diagnóstico de las infecciones en la sangre (bacteriemia, fungemia). 2.- Entender la importancia del estudio del Líquido Cefalorraquídeo en el diagnóstico de las infecciones del Sistema Nervioso. 3.- Saber la importancia del estudio del líquido Pleural en el diagnóstico de las enfermedades que cursan con derrame pleural 4.- Aprender la importancia del estudio del líquido articular en el diagnóstico de los procesos infecciosos e inflamatorios intraarticulares. 5.- Conocer la importancia del estudio del líquido peritoneal como parte del diagnóstico diferencial de las enfermedades que cursan con ascitis. 1. Conocer la importancia del Hemocultivo en el diagnóstico de las infecciones en la sangre permitirá el diagnóstico microbiológico de las principales infecciones sistémicas 2. Entender la importancia del estudio del Líquido Cefalorraquídeo en el diagnóstico de las infecciones del Sistema Nervioso permitirá el diagnóstico rápido y oportuno de las meningitis. FLUIDOS CORPORALES ESTÉRILES Sustancias que se producen y pueden fluir en el interior de los seres vivos sin microorganismos. Liquido Pleural LCR Liquido Peritoneal Liquido Articular Hemocultivo FLUIDO CORPORAL FISICO COLOR ASPECTO QUIMICO GLUCOSA PROTEINAS ELECTROLITOS ENZIMAS CITOLÓGICO DIRECTO RECUENTO DE LEUCOCITOS FORMULA DIFERENCIAL ANÁLISIS DE UN FLUIDO CORPORAL MICROBIOLOGICO Visualización directa (GRAM) Cultivos CONCEPTOS ➢ BACTERIEMIA: Es la presencia de bacterias circulando en la sangre. ❖ FUNGEMIA: Es la presencia de hongos circulando en la sangre. ➢ SEPSIS: Disfunción orgánica potencialmente mortal causada por una respuesta anómala del huésped a la infección. ➢ SHOCK SÉPTICO: Hypotension e hipoperfusión mantenida con fracaso multiorgánico (Shock) secundario a sepsis. TIPOS DE BACTERIEMIAS FACTORES DE RIESGO RELACIONADOS CON BACTERIEMIA FUENTE DE INFECCIÓN: FACTORES DE RIESGO: ➢ ➢ ➢ ➢ ➢ ➢ ➢ ➢ ➢ ➢ ➢ ➢ Catéter intravenoso Genitourinaria Sonda de Foley Herida quirúrgica (quemadura) Abscesos Infección intraabdominal Cirugía Traumatismo Diabetes mellitus Insuficiencia Renal Neoplasia Cirrosis ETIOLOGIA DE LA BACTERIEMIA ▪ Los agentes causales de bacteriemia están cambiando. ▪Actualmente los cocos Gram + están superando en frecuencia a los bacilos Gram negativos probablemente condicionados por la amplia utilización de antibióticos de amplio espectro y el uso generalizado de catéteres intravasculares. Gram +: Estafilococo Aureus, estafilococo epidermidis y oros coagulasa negativos, Enterococo faecalis. Gram negativos: E. Coli, Klebsiella sp., P. Aeruginosa, Acinetobacter. Hongos: Cándida sp. HEMOCULTIVO ➢ Es una Técnica de laboratorio y herramienta diagnóstica, que tiene como finalidad identificar la presencia de un microorganismo (bacteria, hongo) en la sangre. ➢ El tiempo promedio de identificación: 3 - 5 días. IMPORTANCIA ❖ Diagnóstico preciso ❖ Encontrar el microorganismo causante de la bacteriemia ❖ Realizar la prueba de Sensibilidad ❖ Guiar el tratamiento Hemocultivo: Gold estándar en el diagnóstico de sepsis 12 ¿CUÁNDO SOLICITAR HEMOCULTIVOS? • Paciente febril sin foco. • Shock sin causa aparente. • Neumonía nosocomial, pielonefritis, meningitis, infección abdominal, infecciones complicadas de piel. • Leucopenia o leucocitosis no relacionada con enfermedades hematológicas. • Hipertermia (> de 39,5°C) en TODO lactante menor de 03 meses. • Síndrome febril en inmunodeprimidos. • Paciente febril portador de catéter venoso. 13 MATERIALES FRASCOS DE HEMOCULTIVO Medios: ✓ Caldo Columbia ✓ Infusión cerebro corazón ✓ Caldo de peptona suplementado ➢ Llevan incorporado un anticoagulante usualmente Polietanol sulfato sódico. HEMOCULTIVO • FASE PRE ANALÍTICA • FASE ANALÍTICA • FASE POST ANALÍTICA 16 HEMOCULTIVO FASE PRE ANALÍTICA – ORDEN DE ANÁLISIS – TOMA DE MUESTRA – FACTORES A TENER EN CUENTA – TRANSPORTE 17 TOMA DE LA MUESTRA ORDEN DE ANÁLISIS Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------H.C. ------------------ Procedencia: --------Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: -----------Correo electrónico: ------------------------Aviso en caso de emergencia: -----------------------------Antecedentes patológicos familiares: Antecedentes patológicos personales: Impresión diagnóstica: Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros deinterés: Condiciones sanitarias y epidemiológicas: Descripción detallada de las lesiones: • • Muestra: Sangre venosa periférica. Indicaciones para la toma de la muestra: _ • • Fecha Indicación: Fecha toma de muestras : Médico Firma 19 LAVADO DE MANOS Con una buena técnica aséptica el porcentaje hemocultivos contaminantes no debe sobrepasar el 3%. MOMENTO DE LA TOMA DE LA MUESTRA TÉCNICA TÉCNICA TOMA DE MUESTRA • • • • • • • • Bioseguridad. Asepsia y antisepsia. Número de muestras Adulto: 02 Volumen de muestra Adulto: 10 mL. Volumen de muestra pediátrico: 1 - 2 ml (según peso y edad). Inicio de pico febril. Sangre venosa periférica. Inocular primero la botella anaeróbica (evitar la entrada de aire) 24 RETROCULTIVO HEMOCULTIVO FASE ANALÍTICA • Aislamiento e identificación. • Sensibilidad y resistencia a los antimicrobianos. 1. Sistemas manuales 2. Sistemas automatizados 26 Fuente: Manual de bacteriología clínica SEIMC 27 PROCEDIMIENTO Del frasco que esta creciendo, se retira de 3 a 5 ml para coloración y subcultivo SUBCULTIVO ¿CÓMO DISMINUIR LA CONTAMINACIÓN? 31 IDENTIFICACIÓN POR TÉCNICAS MOLECULARES HEMOCULTIVO • FASE POST ANALÍTICA: – Reporte de resultados – Interpretación de resultados – Toma de decisiones 33 FASE POST ANALÍTICA INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS • Correlación clínica. • Falsos positivos. • Falsos negativos. 34 ESTUDIO DEL LCR ➢ El estudio del líquido cefalorraquídeo (LCR) sigue siendo de gran utilidad en el diagnóstico de enfermedades infecciosas, neurológicas y oncológicas. ➢ Los valores normales de proteínas, glucosa y células van a depender de la edad del paciente. ➢ Existen distintas pruebas de laboratorio para la identificación de agentes microbiológicos, unas de detección rápida (tinción de Gram) útiles para un diagnóstico inicial y otras más tardías (cultivo), estudios con reacción en cadena de la polimerasa para un diagnóstico definitivo. LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO NORMAL ✓ Formación: Plexos coroideos de los ventrículos cerebrales y epéndimo (500 ml/dia, recambio 3 veces al dia) ✓ Reabsorción: Granulaciones aracnoideas ✓ Volumen Normal: Adultos (100 - 150 ml), recién nacido (10 – 60 ml) ✓ Obtención: Punción Lumbar (L3 – L5) ✓ Color: Incoloro ✓ Presión Normal: Depende de la posición y edad (6-18 cm agua: adulto en decúbito lateral) ✓ Proteínas: 10 – 45 mg/dl ✓ Glucosa: 40 – 80 mg/dl (50-75% de la concentración en sangre) CAUSAS FRECUENTES DE INFECCIONES DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Fuente: Manual de bacteriología clínica SEIMC ASPECTO EXTERNO DEL LCR ❖ TURBIO: Inflamatorio, infeccioso ❖ HEMORRAGICO: Hemorragia Subaracnoidea, traumático ❖ XANTOCRÓMICO: Sangrado en evolución EXAMEN DE LCR • Coloraciones: – Gram – Wayson – Naranja de acridina – Tinta china – Ziehl Neelsen 39 40 CULTIVO DE LCR • FASE POST ANALÍTICA: – Reporte de resultados – Interpretación de resultados – Toma de decisiones 41 DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL LIQUIDO PLEURAL ✓ Formación: Pleura parietal ✓ Reabsorción: Vía linfática (pleura parietal) ✓ Volumen Normal: 5 – 15 ml. ✓ Obtención: Punción Pleural ✓ Color: Incoloro ✓ Proteínas: 1 – 1.5 g/dl ✓ Células: 1500 células /microlitro, monocitos (30-75%), células mesoteliales (3 – 70%), linfocitos (2 – 30%) LIQUIDO PLEURAL ESTUDIO BIOQUIMICO: ➢ Albumina suero y liquido pleural ➢ LDH suero y liquido pleural CRITERIOS DE LIGHT TRASUDADO Y EXUDADO ESTUDIO DEL LIQUIDO PLEURAL ESTUDIO DEL LIQUIDO SINOVIAL Importancia: ➢Diagnostico de enfermedades Reumatológicas (artritis, artropatía por cristales., artrosis etc) ➢ Procedimiento: Artrocentesis ➢ Indicación principal: Descarte de artritis séptica. CARACTERISTICAS EXTERNAS DE LIQUIDO SINOVIAL NORMAL HEMORRAGICO INFLAMATORIO SEPTICO LIQUIDO SINOVIAL Diagnóstico Diferencial LIQUIDO PERITONEAL PARACENTESIS CARACTERISTICAS NORMALES ASCITIS ESTUDIO DEL LIQUIDO ASCITICO ESTUDIO BIOQUIMICO ALBUMINA EN SUERO ALBUMINA EN LIQUIDO ASCITICO GRADIENTE DE ALBUMINA: ALBUMINA SERICA – ALBUMINA ASCITIS ALTERACIONES DEL LIQUIDO ASCITICO APLIQUEMOS LO APRENDIDO 1.- Es un factor de riesgo relacionado con bacteriemia, excepto: a.- Insuficiencia Renal b.- Diabetes Mellitus c.- Cirrosis d.- Hipertensión arterial 2.- En relación a la toma de muestra del Hemocultivo, todo es cierto, Excepto: a.- Se usan 2 frascos de hemocultivo b.- El volumen de la muestra de sangre en el adulto es de 10 ml c.- El volumen recomendado en lactantes es de 5 ml. d.- Usualmente la toma de la muestra se realiza con la presencia del pico febril 3.- En relación al procesamiento del Líquido Cefalorraquídeo todo es cierto, excepto: a.- Del sedimento se obtiene la muestra para el estudio del Gram b.- Del sobrenadante se obtiene la muestra para el estudio serológico c.- Del sobrenadante se obtiene la muestra para el estudio de cultivo d.- Del sedimento se obtiene la muestra para el estudio de tinta china INTEGREMOS LO APRENDIDO Usted plantea un diagnóstico de meningitis probablemente neumocócica y realiza una punción lumbar. ¿Cuál de los siguientes valores apoya su diagnóstico? a.- Células a predominio neutrófilos, proteínas elevadas, glucosa disminuida. b.- Células a predominio linfocitos, proteínas elevadas, glucosa normal c.- Células a predominio linfocitos, proteínas elevadas, glucosa disminuida d.- Células a predominio linfocitos, proteínas normales, glucosa disminuida ACTIVIDAD VIRTUAL ACTIVA (AVA) N° 3 Caso Clínico: Paciente varón, 70 años de edad, antecedente de Diabetes Mellitus tipo 2, HTA, fumador, Bronquitis crónica. Ingresa a la emergencia refiriendo desde hace 1 semana presentar tos húmeda con expectoración amarillenta. Hace 5 días fiebre no cuantificada. Hace 3 días la expectoración es más abundante y verdosa. Hace 2 días dificultad respiratoria. Hoy amanece somnoliento y no reconoce familiares. Durante el examen físico evidencian paciente febril (39°C), Presión arterial (80/50 mmHg), Frecuencia respiratoria (30 por minuto). Al examen Respiratorio: crepitantes en Hemitórax derecho. No responde órdenes verbales. Responda las siguientes preguntas: 1.- Diagnóstico más probable. Explique los datos más importantes para considerar su diagnóstico. 2.- ¿Usted le realizaría Hemocultivo al paciente? Si es afirmativa la respuesta indica la razón. 3.- ¿Qué examen con fines diagnósticos realizaría al paciente? 4.- El laboratorio realiza un GRAM de la secreción bronquial y se evidencia: Diplococos Gram Positivos. Responda: a.- ¿Qué pruebas bioquímicas realizaría para identificar al microorganismo? b.- ¿Qué medio de cultivo utilizaría? 5.- Indique las características más importantes desde el punto de vista microbiológico y los factores de virulencia del microorganismo causante de la enfermedad. “CAMBIAS TUS PENSAMIENTOS Y CAMBIARAS TU MUNDO” Norman Vincent Peale 57
