PROGRAMA ANALÍTICO MICROBIOLOGÍA CONTENIDOS BACTERIOLOGÍA PARTE GENERAL INTRODUCCION Concepto de Microbiología. Relación con otros cursos de la currícula. Hechos históricos más importantes. Funciones de los microorganismos en la naturaleza. Aplicación industrial de microorganismos. Importancia de los microorganismos como agentes productores de enfermedades y en Salud Pública. Glosario. UNIDAD I: REINO PROCARYOTE Características generales. División I: Gracilicutes. División II: Firmicutes. División III: Tenericutes. División IV: Mendosicutes. Taxonomía bacteriana. Taxonomía numérica. Bases genéticas de la clasificación. Categorías taxonómicas. UNIDAD II: MORFOLOGIA, ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA Eubacteriales: forma, tamaño y pleomorfismo. Agrupaciones celulares. Estructura y composición química de: cápsula, pared celular, membrana citoplasmática, mesosomas, inclusiones, ribosomas, nucleoide, esporo, flagelo, filamento axial y pili. Espiroquetales: forma y tamaño. Estructura y composición química. Rickettsiales: forma y tamaño. Estructura y composición química. Chlamidiales: forma y tamaño. Estructura y composición química. Micoplasmatales: forma y tamaño. Estructura y composición química. Diferencias estructurales de Micoplasmatales, Rickettsiales, Chlamidiales, Eubacteriales y Espiroquetales. Hongos: posición sistemática. Reino Fungi. Estructura celular: dimensiones, morfología, estructuras celulares (pared, membrana citoplasmática, citoplasma, orgánulos, núcleo) y composición química. Micelio vegetativo y de reproducción. Formaciones especiales, esporas asexuadas y sexuadas, internas y externas. Clasificación de los Eumycota (Ainsworth,1973): Mastigomycotina, Zygomycotina, Ascomycotina, Basiodiomycotina y Deuteromycotina. UNIDAD III: NUTRICION Y CRECIMIENTO BACTERIANO Requerimientos nutricionales. Factores orgánicos e inorgánicos: carbono, nitrógeno, vitaminas, aminoácidos, oligoelementos. Necesidades físicas: temperatura, oxígeno, anhídrido carbónico, potencial de óxido-reducción, presión osmótica, pH. Control del crecimiento bacteriano. Crecimiento de poblaciones bacterianas: curva de crecimiento. Métodos de determinación del número de microorganismos. 1 PROGRAMA ANALÍTICO MICROBIOLOGÍA UNIDAD IV: METABOLISMO ENERGÉTICO Fuentes de energía y carbono. Metabolismo autótrofo y heterótrofo. Fermentación: definición y tipos. Respiración: definición y tipos. Regulación genética del metabolismo. Medios de cultivos: clasificación, tipos, usos. Esterilización y desinfección: conceptos, métodos. UNIDAD V: GENETICA División bacteriana. Código genético. Mutación: definición y tipos. Transferencia de genes: transformación, conjugación y transducción. UNIDAD VI: RELACION AGENTE - HOSPEDADOR Flora normal. Mecanismos de transmisión de las enfermedades infecciosas. Fuentes de infección. Mecanismos defensivos: barreras específicas e inespecíficas. Factores de virulencia de bacterias Gram positivas: toxinas, enzimas y productos extracelulares, cápsula, factores de adherencia, parasitismo intracelular, flagelos, etc. Factores de virulencia de bacterias Gram negativas: toxinas, enzimas, cápsula y productos extracelulares, pigmentos, factores de adherencia, parasitismo intracelular, flagelos, etc.. UNIDAD VII: MECANISMOS DE ACCION DE LOS ANTIBIOTICOS: Clasificación de antibióticos. Sitio blanco de los distintos tipos de drogas antimicrobianas. Mecanismos de resistencia bacteriana a la acción de los antibióticos (base genética y modo de neutralizar los antibióticos). Métodos de laboratorio para determinar la sensibilidad antibiótica: difusión en disco (antibiograma - cualitativo) y CIM (cuantitativo) Interpretación de resultados. PARTE ESPECIAL UNIDAD VIII: División I: Gracilicutes: Grupo Espiroquetas: Género: Leptospira. Género: Borrelia. Género: Treponema. UNIDAD IX: Bacterias Gram negativas, aerobias/microaerófilas, helicoidales/vibrioides. Género: Campylobacter. Helicobacter UNIDAD X: Bacilos y cocos Gram negativos, aerobios/microaerófilos. Subgrupo A: Género: Pseudomonas. Género: Moraxella. Género: Brucella. Género: Neisseria. UNIDAD XI: Bacilos Gram negativos, anaerobios facultativos. Subgrupo 1: Familia Enterobacteriaceae. Género: Escherichia. Género: Salmonella. Género: Yersinia. Subgrupo 3: Familia Pasteurellaceae. Género: Pasteurella. Género: Haemophilus. Género: Actinobacillus. UNIDAD XII: Rickettsias y Chlamydias. Subgrupo I: Rickettsias. Subgrupo II: Chlamydias. UNIDAD XIII: División II: Firmicutes. Cocos Gram positivos, aerobios y/o anaerobios facultativos. Género: Staphylococcus. Género: Streptococcus. UNIDAD XIV: Bacilos y cocos esporógenos. Género: Bacillus. Género: Clostridium. 2 PROGRAMA ANALÍTICO MICROBIOLOGÍA UNIDAD XV: Bacilos irregulares, no esporulados, Gram positivos. Género: Actinomyces. Género: Archanobacterium. Género: Corynebacterium. Listeria. UNIDAD XVI: Las Micobacterias. Género: Mycobacterium. UNIDAD XVII: Los Actinomycetales. Actinomycetes nocardiformes. Género: Nocardia. Género: Rhodococcus. Dermatophilus. UNIDAD XVIII: División III: Tenericutes. Los Micoplasmas. Género: Micoplasma. UNIDAD XIX: Hongos de Micosis superficiales. Género: Microsporum. Género: Trichophytum. UNIDAD XX: Hongos de Micosis subcutáneas. Género: Rinosporidium. Género: Sporothrix. UNIDAD XXI: Hongos de Micosis profundas. Género: Blastomyces. Género: Coccidioides. Género: Cryptococcus. Género: Histoplasma. UNIDAD XXII: Hongos de Micosis oportunistas. Género: Cándida. Género: Aspergillus. En el caso de Bacteriología Especial se considerarán las siguientes características de cada grupo: forma, agrupación, motilidad, esporos, factores de virulencia, reacción tintorial a Gram y otras reacciones tintoriales, relación con el oxígeno, características y necesidades de cultivo, y cuando sea necesario otras características particulares. VIROLOGÍA TEMA 1: Naturaleza y estructura de los virus animales. Virología(Historia). Virus:Concepto-definición.Morfología y estructura. Simetría. Envolturas virales. Composición química de los viriones. Acidos nucleicos. Genoma. Sensibilidad. Conservación de los virus. Historia de la inmunología. Invasores del cuerpo exógenos y endógenos. Sistemas pasivos y activos. Barreras físicas. Inmunidad innata:fagocitosis, inflamación, interferón, lisozima y lectinas.Inmunidad adquirida. TEMA 2:Relación virus-célula.Replicación viral.Etapas.Efectos de la infección viral sobre las células. Antivirales.Mecanismos de acción.Priones. Aparato inmunológico:conceptos de inmunología y respuesta inmune. Ontogenia del aparato inmunológico. Organos linfoides:clasificación ermbriológica y anatómica.Sistema linfoide interno y secretor. Células linfoides. TEMA 3:Hospedadores.Sistemas de multiplicación y demostración de virus. Animales Animales de Laboratorio. Vías de inoculación.Huevos embrionados(H.E.)Técnicas poara distintas vías:cavidad alantoidea,membrana corioalantoidea,cavidad amniótica, saco vitelino.Evidencia de infección viral.Cultivos celulares(CC):Primario .Líneas celulares establecidas. Efectos de la infección viral. Aplicaciones de CC en Virología.Comparación de sistemas utilizados para multiplicación viral. Antígeno.Definición.Condiciones de antigenicidad.Clasificación de los antígenos.Determinantes antigénicos.Carriers y haptenos. Reacción cruzada. Adyuvantes. 3 PROGRAMA ANALÍTICO MICROBIOLOGÍA Antígenos de superficie celular:Complejo Mayor de Histocompatibilidad y antígenos de grupo sanguíneo. TEMA 4: Utilización de hospedadores en Virología. Muestras. Toma y remisión al Laboratorio. Conservación y almacenamiento de virus. Pasos para el procesamiento de algunos tipos de muestras en H.E. y C.C. primarios o de línea. Secuencia de pases para determinar positividad o negatividad. Identificación y caracterización viral. Muestras para Serología. Dinámica de la respuesta inmune: presentación del antígeno. Respuesta inmune humoral. Respuesta inmune celular. Tolerancia. TEMA 5: Cuantificación viral. Titulación. Diluciones. Métodos de cuantificación. Métodos Físicos, Biológicos, Químico-inmunológicos. Anticuerpos: definición. Propiedades físico-químicas. Estructura de las inmunoglobulinas. Clases de inmunoglobulinas y características. Biosíntesis y catabolismo. Actividad biológica de los anticuerpos: respuesta primaria y secundaria. Síntesis de inmunoglobulinas. Nivel de protección. Seroconversión. TEMA 6: Generalidades del Diagnóstico virológico. Pruebas (neutralización, fijación de complemento, inmunofluorescencia, inmunodifusión, etc) Técnicas rápidas y de última generación para enfermedades víricas. Complemento. Definición. Mecanismos de activación del complemento: vías clásica, alternativa y de MBL. Biosíntesis y catabolismo del complemento. Actividad biológica del complemento. TEMA 7: Ecología de los Virus. Generalidades. Agente-AmbienteHospedador. Relación virus-hospedador. Reservorio. Centinelas. Vectores. Ciclos virales: epizoótico-enzoótico. Ejemplos. Identificación y medición de la respuesta inmune humoral. Pruebas primarias, secundarias y terciarias. TEMA 8: Los virus como agentes de enfermedad: bases de la Patogénesis viral. Infección localizada y generalizada. Transmisión de las virosis animales (directa, por vectores, genética). Identificación y medición de la respuesta inmune celular: purificación de linfocitos. Identificación de linfocitos T. Identificación de linfocitos B. Prueba de función de linfocitos. TEMA 9:Taxonomía.Criterios de clasificación. Virus con genoma ARN comunes a especies (rumiantes, porcinos, equinos, caninos, felinos, aves, etc.) que afectan piel, mucosas, tejido linfoide. Principales virus de interés veterinario. Pruebas moleculares. Hibridomas. Reacción en cadena de la Polimerasa. 4 PROGRAMA ANALÍTICO MICROBIOLOGÍA TEMA 10: Virus con genoma ADN comunes a varias especies (rumiantes, porcinos, equinos, caninos, felinos, aves, etc.) que afectan piel, mucosas, intestino, aparato respiratorio, sistema nervioso, tejido linfoide. Principales virus de interés veterinario. PROGRAMA DE TRABAJOS PRÁCTICOS VIROLOGÍA T.P. Nº 1. Toma y remisión de muestras T.P. Nº 2. Hospedadores en virología: huevos embrionados T.P. Nº 3. Pruebas serológicas: Hemoaglutinación e IHA T.P. Nº 4. Pruebas moleculares de uso frecuente en virología. T.P. Nº 5. Epidemiología viral T.P. Nº 6. Monografía individual sobre una familia viral BACTERIOLOGÍA T.P. Nº 1. Reconocimiento del laboratorio de microbiología. Lavado del material. Coloración de Gram. Morfología bacteriana T.P. Nº 2. Esterilización. Preparación de los material. Desinfección: métodos T.P. Nº 3. Preparación de medios de cultivo. Técnicas de siembra. Reconocimiento de colonias T.P. Nº 4. Propiedades bioquímicas: Enterobacterias, Staphylococcus y Streptococcus: características generales, medios de cultivo, propiedades bioquímicas, métodos de diferenciación T.P. Nº 5. Hongos: mohos y levaduras. Medios de cultivo. Morfología de colonias. Coloraciones. BIBLIOGRAFÍA BÁSICA BACTERIOLOGÍA o Quinn, P.J.;Markey, B.K.;Carter, M.E.;Donnelly, W.J.;Leonard, F.C.Microbiología y enfermedades infecciosas veterinarias.1era ed. Acribia S.A.2002 o Prescott, L.M.;Harley, P.J.;Klein, A.D.Microbiología.5ta ed. Mc Graw-Hill.Interamericana.2002 o Murray, R.P.;Rosenthal, K.S.;Pfaller, A.M.Microbiología Médica.5ta ed.Elsevier-Mosby.2006 o Nicolet,J. Compendio de Bacteriología Médica Veterinaria.3era.ed. Panamericana. Buenos Aires. 1985. o Scanlan,C. Introducción a la Bacteriología Veterinaria.ed. Acribia. Zaragoza. 1988. o Davies,E.T.,Manual de investigación veterinaria.Técnicas de Acribia.Zaragoza.1989. o Merck,E. Manual de Medios de Cultivo. Merck. Rep.Fed. de Alemania.1985. 5 laboratorio.ed PROGRAMA ANALÍTICO MICROBIOLOGÍA o Holt,J.,Krieg,N.,Sneath,P.,Staley,J.,Williams,S.Bergey´s Manual of Determinative Bacteriology. Williams & Wilkins.Baltimore.1994 o Jawetz,E.,Melnick,J.,Adelberg,E.Microbiología Médica.ed. Manual Moderno. Méjico.1996. o Joklik,W.;Willet,H.;Ames,D. Zinsser Microbiología. 20ª.ed.Médica Panamericana. Buenos Aires.1994 VIROLOGÍA o Davis, B.;Dulbecco, R.-Tratado de MIcrobiología- 5ta Edición 1995. o Fenner-J." Medical Virology"-Academic Press- AP-Edit.1994. o Fraser, C.M.-The Merck Veterinary Manual- a handbook-of Diagnosis, Theraphy and Disease Prevention and control for the veterinarian.-1998- 8º Edic. Merck, Rathaway- NY. o Horzineck, M.C.-Virus infectios of vertebrates-Book series- vols 1-6-1996-Elsevier-Amsterdam. o International Commitee on Taxonomy of Viruses.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ICTV-1998. o Jewetz, E.;Melnick, J.;Adelberg, E.-Manual de Microbiología Médica- El manual moderno1997(Biblioteca). o Manual de Técnicas de Diagnóstico Virológico.-Red de Laboratorio de Diagnóstico- America Latina y el Caribe- INTA-FAO. o "Principls and Practice Virology"- Zuckerman, A.J. et.al Editors-Fifth Edition 2004. o Roitt, I.M.;Male, D.;Boustoff, J.-Immunology -4ta Edic. M.Jear Book-St. Louis-M.O. 1996 o Roth, J.A. Avances recientes en inmunología básica Bovina-Therios Vol 13-Nº 63. o Rovozo, G.;Burke, C.-A manual of Basic Virological Techniques-1986-A. Hollaender - 6