TIEMPO DE OBTURACIÓN

TIEMPO DE OBTURACIÓN (PRUEBA PFA-100)
Significado diagnóstico:
Simulación “in vitro” del proceso de adhesión y agregación de las plaquetas, que ocurre
después de una lesión vascular. Permite el reconocimiento de anomalías de la función
plaquetaria. Las causas más frecuentes de una alteración de la función plaquetaria son la
uremia, la enfermedad de von Willebrand (EVW) y fármacos, como el ácido acetilsalicílico
(AAS).
El sistema PFA-100 permite la evaluación rápida de la función plaquetaria en muestras
pequeñas de sangre total citratada. El cartucho de prueba de un sólo uso, está compuesto
por un capilar, el depósito para la muestra y una membrana biológica con un orificio
central. La muestra de sangre va a ser aspirada del depósito de muestras a través del capilar
y del orificio. La membrana está recubierta con colágeno, de la cual se forma la matriz
inicial para la adhesión de las plaquetas. El acoplamiento de las plaquetas al colágeno sirve
como estímulo fisiológico para la activación plaquetaria. La membrana además está
recubierta con epinefrina o ADP, los cuales son usados para la activación de las plaquetas.
Durante la prueba, las plaquetas se van a adherir a la membrana recubierta con colágeno.
Las plaquetas se activan y por contacto con la epinefrina o la ADP van a liberar el
contenido de sus gránulos.
Finalmente ocurre la formación de agregados por adhesión de las plaquetas. Por medio de
esta adhesión, se forma en el orificio, un tapón plaquetario, que va disminuyendo el flujo
de sangre hasta llegar finalmente a una obstrucción total del paso.
El sistema PFA-100 determina el tiempo desde el inicio de la prueba hasta que la
membrana se obtura completamente. Este tiempo se conoce como tiempo de obturación
(TO). El TO es un indicador de la función plaquetaria de la muestra de sangre total
analizada. La formación del tapón plaquetario va a estar influenciada por un número
disminuido de plaquetas y/o actividad plaquetaria y por un nivel disminuido de factor de
von Willebrand en plasma.
El cartucho de prueba colágeno/epinefrina (Col/EPI) es utilizado para reconocer una
alteración de la función plaquetaria.
Con el cartucho de prueba colágeno/ADP (Col/ADP) se comprueba si los resultados
anormales obtenidos con el cartucho Col/EPI pueden ser causados por el ácido
acetilsalicílico o por medicamentos que lo contienen.
Procedimiento:
1. Preparación de los cartuchos de prueba.
 Dejar que el/los cartucho/s alcancen la temperatura ambiente.
 Retirar y desechar la lámina protectora del cartucho de prueba.
 Colocar y encajar correctamente el/los cartucho/s de prueba en el soporte.
2. Pipeteo de las muestras de sangre total en el cartucho de prueba.
 Mezclar cuidadosamente las muestras de sangre. Colocar el/los cartucho/s de
prueba y agregar 1 ml de sangre en la pequeña abertura del cartucho (abertura del
depósito de muestras). Para evitar la formación de burbujas de aire en el depósito de
muestras colocar la punta de la pipeta en diagonal a la pared interna del cartucho de
prueba y dejar fluir la sangre lentamente.
 Identificar la muestra.
 Empezar la prueba, en la función “Run” y siguiendo los pasos que van apareciendo
en la pantalla.
3. Eliminación de los cartuchos de prueba utilizados.
 Aflojar y retirar el/los cartucho/s de prueba y eliminarlos en el cubo para residuos
infecciosos.
Control de calidad:
Por lo menos una vez al inicio de cada serie de trabajo, se debe utilizar la función
“Autochequeo” del menú “Mantenimiento”.
Interpretación de los resultados:
El resultado se da como tiempo de obturación (TO) en segundos (seg). El ensayo PFA-100
suministra información sobre la función plaquetaria.
Los siguientes valores son modelos esperados al realizar el ensayo PFA-100 en individuos
normales (sin anomalías) o con anomalías de la función plaquetaria:
Tipo de cartucho
de prueba
Col/EPI
Col/ADP
Normal (sin
anomalías)
normal
normal
AAS
EVW
anormal
normal
anormal
anormal
Valores esperados:
Los siguientes intervalos de referencia fueron determinados a partir de la media de los
resultados de determinaciones por duplicado en 127 personas:
Tipo de cartucho de prueba
Col/EPI
Col/ADP
Rango de referencia (seg)
84 - 160
68 - 121
Freddy Jesús Huayllaquispe Minchola