TP 7: Tasa Metabólica Objetivos: Evidenciar los efectos que provoca un factor ambiental -la temperatura- sobre la tasa metabólica de animales poiquilotermos y homeotermos. Evaluar el consumo de oxígeno de Artemia salina (los sea monkeys!!!), así como el costo metabólico del transporte iónico de dicho tejido. Un poco de información previa Para este práctico, no estaría nada mal que repases los siguientes conceptos: . Definición de metabolismo y tasa metabólica . Métodos para estimar la tasa metabólica . Ventajas y limitaciones del método de consumo de oxígeno . Tasa metabólica estándar, de rutina y activa. Recordar que T/M estandarizada se refiere al volumen de O2 consumido a los valores estándares de presión y temperatura (760 mm Hg y 273ºK). . Factores que influyen sobre la tasa metabólica. Se los puede agrupar en dos categorías: - Factores ambientales: Temperatura, Fotoperíodo, Concentración de gases ([O2], [CO2]), Salinidad (para organismos acuáticos), etc. - Factores intrínsecos al organismo: Tamaño / masa corporal, Actividad, Especie / grupo animal, estadío del ciclo de vida, Sexo, Estado nutricional, Estado reproductivo, etc. . Concepto de Q10. Metodología: Si todo anda bien, se utilizarán tanto respirómetros a presión constante como a volumen constante. Su armado y funcionamiento se explicará durante el T.P. Claro, para medir tasa metabólica en otros tiempos no se contaba con la maravillosa e hipermoderna tecnología disponible en la materia. Por ejemplo, el calorímetro de Lavoisier (1780) medía el metabolismo de un animalito dentro de una jaula rodeada de una bolsa de hielo como la cantidad de agua recogida (considerando que 80 kcal de calor funden 1 kg de hielo, como todo el mundo sabe). El principio de funcionamiento de los respirómetros a presión constante se basa en la fijación en medio acuoso alcalino del CO2 liberado por los organismos, y la consecuente disminución del volumen gaseoso de la cámara donde aquel se encuentra, debido al consumo del O2. Estos respirómetros funcionan a presión constante, pues continuamente se nivela la presión interna con la presión externa, a través de un líquido manométrico, cuyo desplazamiento sobre una pipeta graduada equivale al volumen de oxígeno consumido. El dispositivo se sumerge en un baño de agua a fin de mantener estable la temperatura. La Figura 1 esquematiza el instrumental mencionado. Por favor, nótese la delicadeza y amplitud de recursos de los artísticamente agraciados profesor e instructor de la materia: 7 1 3 5 6 2 8 4 Figura 1: 1) Cuerpo de la jeringa 2) Embolo 3) Conducto plástico conector 4) Pipeta graduada 5) Almohadillas porosas separadoras 6) Cal sodada 7) Recipiente plástico que contiene las jeringas y el baño de agua 8) Recipiente plástico que contiene el líquido manométrico. Los respirómetros a volumen constante a utilizarse en el TP están provistos de electrodos sensibles al oxígeno, los cuales registran el descenso de la concentración de O2 disuelto en una solución acuosa (inicialmente saturada de O2) contenida en una cámara hermética, en presencia de un tejido (oxímetro, Figura 2) o bien el descenso de la concentración de O2 del aire contenido n una cámara hermética en presencia de un organismo (con captura del CO2 por cal sodada). Para realizar las mediciones, los respirómetros serán mantenidos en un baño termostatizado con agitación continua. Diseño experimental: a) Efecto de la temperatura en poiquilotermos b) Se utilizarán 5 ejemplares de Chasmagnathus granulata aclimatados a distintas temperaturas. Instrumental y variables a medir: respirómetros a presión constante, determinando la tasa de consumo de O2 en animales a distintas temperaturas. Calcular las tasas de consumo de O2 promedio correspondientes a cada temperatura. Calcular el Q10 para cada rango de temperatura. Discutir los resultados. Registro de consumo de oxígeno en una población de Artemia salina. En base a los datos registrados calcular las tasas de consumo de O2 promedio correspondientes a cada situación. Discutir los resultados. Yo ya lo traje preparado desde casa, pero ustedes señoras, pueden aprovechar para describir: factores surfactantes – bronquios extra e intrapulmonares – intercambio gaseoso 1 2 0.00 3 5 4 7 6 Figura 2: Oxímetro. 1)Electrodo sensible al O2, 2) termómetro, 3) Cánula, 4) Cámara hermética con buzo revestido de teflón, 5) baño térmico, 6) registrador, 7) agitador magnético.