Benemérita Universidad Autónoma de Puebla Escuela de Biología

Benemérita Universidad Autónoma de Puebla
Escuela de Biología
Papel de CCR9 en el Proceso Inflamatorio Asociado a Cáncer de Colon
Tesis para obtener el título de Biólogo
Presenta:
Gloria Mariana Rodríguez López
Asesor:
Dr. Eduardo A. Gracia Zepeda
PUEBLA, PUE., JULIO, 2011
CONTENIDO
1. RESUMEN................................................................................................. 5
2. INTRODUCCIÓN...................................................................................... 6
1. Sistema Inmune........................................................................................ 6
1.1. Sistema Linfoide.................................................................................... 6
1.2. Respuesta Inmune innata...................................................................... 7
1.2.1. Respuesta Inmune de mucosas.......................................................... 8
1.3. Respuesta Inmune adaptativa................................................................ 9
2. Quimiocinas........................................................................................... 11
2.1. Clasificación…….................................................................................. 11
2.1.1. Quimiocinas homeostáticas e inflamatorias..................................... 12
3. Receptores de quimiocinas..................................................................... 13
3.1. Papel de quimiocinas y receptores en inmunidad............................... 14
4. Inflamación y cáncer.............................................................................. 15
4.1. Iniciación, promoción y progresión tumoral........................................ 16
4.2. Células involucradas en la progresión tumoral.................................... 18
4.3. Citocinas tumorales.............................................................................. 19
4.4. Quimiocinas asociadas a cáncer........................................................ 20
5. Inflamación intestinal............................................................................. 24
5.1. Enfermedad inflamatoria intestinal (IBD)........................................... 25
5.1.1. Colitis ulcerativa. ............................................................................. 25
5.1.2. Enfermedad de Crohn...................................................................... 25
5.2. Cáncer de colon................................................................................... 26
5.2.1. Citocinas asociadas a CRC............................................................... 27
5.3. Modelos murinos de inflamación asociada a cáncer de colon............... 28
6. CCR9-CCL25.......................................................................................... 29
6.1. Características del ratón deficiente de CCR9 (Knock out para CCR9)... 31
7. HIPOTESIS.............................................................................................. 33
8. OBJETIVOS........................................................................................... 33
9. MATERIAL................................................................................................. 34
9.1. Material biológico.................................................................................... 34
10. MÉTODO................................................................................................ 35
10.1. Preparación de AOM.......................................................................... 35
10.2. Modelo de progresión tumoral asociada a inflamación en ratones de la
cepa Balb/c.................................................................................................. 35
11. RESULTADOS....................................................................................... 40
12. DISCUSIÓN........................................................................................... 57
13. CONCLUSIONES.................................................................................... 61
14. BIBLIOGRAFÍA......................................................................................... 62
1. RESUMEN
Se sabe que las quimiocinas y sus receptores participan de manera importante
en los procesos inflamatorios crónicos asociados al desarrollo de ciertos tipos
de cáncer. Uno de los ejemplos más claros son las enfermedades inflamatorias
de intestino (colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn) asociadas al desarrollo
del cáncer de colon. El cáncer colorectal se sitúa como la cuarta neoplasia
maligna a nivel mundial y se ha demostrado que existen varios receptores de
quimiocinas y sus respectivos ligandos, que son fundamentales para el
desarrollo, progresión y metástasis de esta neoplasia.
El objetivo de este trabajo fue investigar el papel del receptor de quimiocinas,
CCR9 en el proceso inflamatorio asociado al cáncer de colon. Para esto se
estandarizó un modelo murino de azoximetano y dextran sulfato de sodio, que
ha sido ampliamente usado para la investigación de este tipo de cáncer. Se
utilizaron dos cepas diferentes: Balb/c y C57BL/6; se cuantifico el peso de los
ratones durante todo el proceso, además de la longitud del colon y presencia
de tumores al final de este. Además se caracterizó la expresión génica del
receptor CCR9 por medio de RTPCR del tejido tumoral y se analizó el efecto de
la ausencia del receptor CCR9 en ratones de fondo génico C57BL/6.
Aunque se observó la formación de tumores en ambas cepas; los ratones
C57BL/6 fueron más susceptibles al formar tumores. Como característica de la
colitis se encontró disminución en la longitud del colon, pérdida de peso por la
diarrea e infiltrado de células inflamatorias en los ratones tratados, esto por
medio de cortes histológicos.