Título del proyecto: “MECANISMOS CELULARES Y MOLECULARES QUE REGULAN LA HOMEOSTASIS DE LA POBLACIÓN DE CÉLULAS LACTOTROPAS” PROYECTO SUBSIDIADO POR CONICET: PIP 5839, PERÍODO 2005-2006 Director: TORRES, Alicia Inés Dra. en Bioquímica Prof. Titular (DE). Docente – Inv. Cat I Investigador Adjunto s/Director CONICET Codirector: DE PAUL, Ana Lucía: Dra. en Ciencias Biológicas Prof. Adjunto (DSE), Investigador Asistente CONICET. Docente – Inv. Cat III Integrantes: AOKI, Agustín Dr. En Medicina y Cirugía Prof. Emérito. Docente – Inv. Cat. I Investigador Superior CONICET ORGNERO DE GAISÁN, Elsa Margarita Dra. en Ciencias Biológicas. Prof. Adjunto (DE). Docente – Inv. Cat II MUKDSI, Jorge Humberto: Dr. en Medicina y Cirugía Jefe de Trabajos Prácticos (DE). Docente – Inv. Cat V. GUTIÉRREZ, Silvina: Médica Cirujana Jefe de Trabajos Prácticos (DE). Docente – Inv. Cat V. PETITI, Juan Pablo: Biólogo Jefe de Trabajos Prácticos (DS). Docente – Inv. Cat V Becario de Doctorado CONICET. PALMERI, Claudia Mariela: Médica Cirujana Jefe de Trabajos Prácticos (DE). ALVIN, Gabriela Beatriz: Lic. en Biotecnología Jefe de Trabajos Prácticos (DE). RESUMEN Numerosos trabajos realizados por nuestro grupo, estuvieron dirigidos al estudio de las células de la glándula hipofisaria, compuesta por distintas poblaciones celulares las que presentan una gran heterogeneidad morfológica y funcional en respuesta a estímulos inhibitorios o estimulatorios. Nuestros resultados permitieron abrir nuevas líneas de investigación íntimamente relacionadas al proceso secretorio y su modulación por diferentes variables tales como formas moleculares de la prolactina, dinámica de la secreción, subtipos celulares, cambios en la densidad celular de las distintas poblaciones de células hipofisarias, proliferación y muerte celular. En continuidad con las investigaciones informadas, se proponen nuevos objetivos para avanzar en el conocimiento de los mecanismos celulares y moleculares que intervienen en el mantenimiento de la homeostasis de la población de células lactotropas, como resultado del balance entre los procesos de proliferación y muerte celular. En el próximo período se propone determinar la expresión de las diferentes isoformas de la proteína quinasa C (PKC) cuyo rol central está estrechamente involucrado con la iniciación del tumor, progresión y respuesta a agentes antitumorales, siendo escasa la información sobre las funciones atribuidas para cada isoforma de PKC en la proliferación y apoptosis de células adenohipofisiarias. Estos estudios se realizarán en modelos experimentales in vivo e in vitro, en cultivos adenohipofisarios normales y en la línea tumoral somatolactotrópica GH3B6 estimulados con factores de crecimiento y agentes promotores de la formación de tumores. El desarrollo de los objetivos planteados contribuirá al conocimiento de posibles blancos terapéuticos y al esclarecimiento de los mecanismos que participan en la tumorogénesis de adenomas hipofisarios. OBJETIVO GENERAL - Establecer los mecanismos celulares y moleculares que participan en la regulación de los procesos de proliferación y muerte de células lactotropas correlacionados con su actividad de síntesis y secreción hormonal. OBJETIVOS ESPECIFICOS: 1- Determinar las isoformas de PKC involucradas en la proliferación de células lactotropas inducida por acción de éster de forbol (PMA) y factores de crecimiento (EGF y TGF) en cultivos primarios y en la línea tumoral GH3B6. Participación de la vía MAPK (ERK1/2). 2- Identificar vías de transducción de señales involucradas en el efecto antimitogénico del estrógeno en la proliferación de células lactotropas inducida por factores de crecimiento. 3- Establecer si diferentes niveles de estrógenos observados en ratas machos y hembras promueven una expresión diferencial de Pit-1 por acción de TGF y EGF en cultivo primario de adenohipófisis y su correlación con la actividad de síntesis, secreción y proliferación de células productoras de PRL. 4- Establecer la participación de las isoformas de PKC en los procesos de muerte de células lactotropas en modelos experimentales in vivo e in vitro. Analizar la vía MAPK p38. 5- Determinar la localización a nivel ultraestructural de factores de crecimiento, sus receptores y las isoformas de PKC en células adenohipofisarias, analizando los cambios morfológicos que manifiestan las células luego de los tratamientos aplicados.