Universidad Técnica de Oruro Facultad Nacional de Ingeniería Ingeniería Química TÍTULO Autor Fecha de Defensa : HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA DEL ALMIDÓN DE QUINUA : Lisset Cortez Borda : 28 de Noviembre de 2007 Palabras clave : Enzimas, Almidón, Hidrólisis, Quinua, Jarabes de Glucosa Asesor : Ing. Jorge Amusquivar Fernández Nº de Página del Proyecto de Grado: 89 RESUMEN El presente trabajo aborda la aplicación del proceso de hidrólisis enzimático al almidón de quinua en la obtención de jarabes de glucosa, basados en la degradación del almidón, el almidón es convertido en azúcar reducido por Hidrólisis por reacción con enzimas, tal como la diastasa. El desarrollo del presente trabajo pretende constituirse como base teórico-práctica para la obtención de jarabe de glucosa en base de la quinua. El planteamiento del problema se enuncia de la siguiente manera: ¿Cuáles son las características de las variables y del proceso que posibilitan la reacción de hidrólisis enzimática a partir del almidón que proviene del grano de quinua? OBJETIVO GENERAL Aplicar el proceso de hidrólisis enzimática al almidón de quinua en la obtención de jarabe de glucosa. OBJETIVOS ESPECÍFICOS Caracterizar las variables influyentes en la cinética enzimática. Determinar las constantes características de la ecuación cinética en la reacción de hidrólisis enzimática. Validar el modelo cinético enzimático experimental Para realizar el proceso de hidrólisis se toman como materias primas al almidón de la quinua y las enzimas inmersas dentro de la cebada, el desarrollo experimental del presente proyecto inicia en la estimación y evaluación de la materia prima que contiene enzimas que se utilizarán, siguiendo con la caracterización de las variables que influyen en la etapa de hidrólisis, para después realizar la determinación de las constantes características de la cinética enzimática. Inicialmente para conocer y caracterizar las variables con mayor influencia dentro del proceso de hidrólisis se realizaron varias pruebas experimentales, tomando como variable respuesta la concentración de producto; variando primeramente los valores de pH y tomando como valores constantes la Temperatura, la concentración de almidón y la cantidad de enzima, de estas pruebas se determino una valor optimo de pH con el cual se trabajó para pruebas posteriores, esta vez teniendo como variable a la temperatura, dichas pruebas experimentales nos sirvieron para determinar un valor optimo de temperatura. El trabajo reveló como valores óptimos de pH y Temperatura a: pH=3.81 T= 50ºC En estas condiciones óptimas de pH y temperatura para determinar la cinética que rige nuestra reacción de hidrólisis enzimática, se realizaron varias pruebas experimentales variando las concentraciones iniciales de almidón, teniendo también como variable respuesta la concentración de producto en función del tiempo. Con estas pruebas se realizó una curva de velocidades iniciales en función de las concentraciones de almidón la cual nos sirvió para determinar las constantes características de cinética enzimática propuesta por Michaelis – Menten tomando como método a la regresión no lineal, la cual viene representada por la siguiente ecuación. v Vmax S 10.6319S K m S 229.9623 S El trabajo se realizó a escala laboratorio (volumen 250 ml). Posteriormente para la validación de nuestra ecuación se realizó el cálculo del coeficiente de determinación en base a los valores de la ecuación ajustada y los valores experimentales de velocidades de reacción hallados, del cual se calculó que el mismo tiene un valor de 0.9549 con lo cual se considera valida nuestra ecuación cinética hallada, posteriormente para un estudio más minucioso se realizaron varias pruebas experimentales a escala mayor 10 [Lt] para distintos valores de concentración inicial de almidón, de las cuales se obtuvieron curvas de concentración de producto en función del tiempo; así mismo se realizó el cálculo de las concentraciones de producto en base a nuestra ecuación cinética, con las cuales se compararon valores experimentales y teóricos. Dicha comparación nos sirvió para concluir que nuestra ecuación es valida para concentraciones menores a 55 [g/Lt] a cualquier tiempo de reacción pero que para concentraciones a mayores a la mencionada solo es valida hasta un tiempo de 25 minutos.