PROYECTO DIUBB 055209 2/R TITULO: CARACTERIZACION MOLECULAR DE PLASMIDOS AISLADOS BACTERIAS RIZOSFERICAS DE DESCHAMPSIA ANTARCTICA DESV. Investigador Principal Leticia Barrientos Díaz Facultad/Depto. Ciencias/Ciencias Básicas E-Mail lbarrientos@roble.fdo-may.ubiobio.cl DE OBJETIVOS: - Caracterizar los plásmidos de bacterias que colonizan la rizósfera de Deschampsia antarctica Desv. mediante métodos moleculares. RESUMEN Y RESULTADOS: Los microorganismos representan el mayor reservorio de biodiversidad no descrita, y por lo tanto poseen un gran potencial para el descubrimiento de nuevos productos naturales. Se estima que la tierra sostiene entre 3 y 30 millones de especies de organismos. De estos, aproximadamente 1,4 millones han sido descritos, lo que incluye, virtualmente, todas las especies de aves y mamíferos. En contraste, sólo alrededor de 200.000, de las posibles 1,0 a 1,5 millones de especies de hongos han sido caracterizados. Para bacterias este porcentaje es aún menor con estimaciones que varían entre el 1 al 10% de probables especies que han sido descritas en cultivo. Existe un creciente interés en desarrollar la investigación acerca de procariontes en la Antártica, con el objeto de aislar nuevas bacterias, crear colecciones de cultivo, búsqueda de bioactividad, taxonomía, producción de ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs), enzimas adaptadas al frío y bioremediación. La investigación realizada, a la fecha, confirma el aislamiento de nuevas bacterias desde este ambiente extremo y está abierta la oportunidad de explotar este y otros hallazgos para desarrollar posibles nuevos productos biotecnológicos desde los microorganismos de la Antártica. Por otro lado, se sabe que D. antarctica Desv., es una de las únicas plantas vasculares, capaces de resistir las condiciones adversas de la Antártica. Esta planta ha despertado el interés de muchos especialistas debido a las condiciones extremas en que vive, por lo que cada vez son más los estudios fisiológicos y bioquímicos que se llevan a cabo para dilucidar que mecanismos le permiten colonizar el ambiente antártico. Con los antecedentes señalados anteriormente, y tomando en consideración que D. antarctica presenta una resistencia inusual al daño provocado por este conjunto de factores ambientales estresantes, es de sumo interés conocer y caracterizar molecularmente los plásmidos que presentan algunas bacterias que colonizan el suelo rizosférico de esta planta, a fin de determinar si son estas unidades extracromosomales las que le están confiriendo algún tipo de característica particular a sus microorganismos acompañantes que les permitan vivir en este ambiente extremo. Se propone caracterizar estos elementos extracromosomales mediante el análisis del mapa de restricción y la secuenciación de subclonas de éstos. Además, se realizarán ensayos fisiológicos tales como tolerancia a metales pesados, resistencia a antibióticos y tolerancia al frío. Para determinar si son estos plásmidos los responsables de alguna función biológica de acuerdo al análisis de la secuenciación, se realizarán bioensayos como curado de plásmido y transformación de bacterias por conjugación. Se espera encontrar que estos plásmidos poseen las propiedades que confieren la capacidad adaptativa, lo que nos permitiría desarrollar posibles nuevos productos biotecnológicos desde los microorganismos de la Antártica.