Producción de plantas madre y esquejes de crisantemo ( Dendranthema x grandiflorum Kitam.) Avila, A. de L. y S. M. Pereyra. Área de Floricultura, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Univ. Nac. de Córdoba. Avda. Valparaíso s/Nº Ciudad Universitaria. CC 501. 5000 Córdoba. E-Mail: flores@agro.uncor.edu Introducción La producción de flores para corte de crisantemo requiere de la provisión continua, en tiempo y forma, de material inicial de excelente calidad fisiológica y sanitaria (Dole & Wilkins, 1999). Los esquejes de crisantemo (material inicial) provienen de plantas madres libres de infecciones sistémicas y con una genética seleccionada por sus cualidades estéticas y productivas (Dole & Wilkins, 1999). Dichas cualidades, solo pueden mantenerse en el tiempo, mediante el cultivo de plantas madre en instalaciones adecuadas y con cuidados rigurosos del estado sanitario (Fides, 1990). No obstante, es necesario la renovación permanente del stock de plantas mediante su paso por cultivo in vitro, debido al envejecimiento fisiológico de los clones, que se manifiesta en una disminución en la producción de esquejes y en la pérdida de sensibilidad al fotoperíodo (Fides, 1990). Esto último ocasiona que el cultivo de esquejes provenientes de clones envejecidos florezca en condiciones no inductoras de día largo, con la consecuente pérdida de calidad de la producción de flores. La renovación del stock de plantas madre mediante el cultivo in vitro proveniente de meristemas, provoca el rejuvenecimiento y limpieza sanitaria de las plántulas resultantes (Pierik, 1990). Esta tarea es realizada por empresas especializadas, que poseen las instalaciones necesarias para tal fin, y que pueden ser propagadores oficiales o las mismas firmas productoras de la genética de las variedades que se comercializan. En nuestro país, no existen empresas que reúnan dichas características, ya que si bien se producen esquejes de crisantemo, dicha producción no posee las características de calidad necesarias para asegurar una producción de flores rentables y de buena calidad. Por otra parte, la importación de este material resulta en un incremento sustancial de los costos de producción con la consecuente pérdida de rentabilidad. Sin embargo, se podría mejorar la situación de los productores de flores, con la puesta en marcha de un sistema de producción de esquejes, partiendo de variedades liberadas y mutiplicándolas in vitro a fin de limpiar y rejuvenecer los clones. El objetivo de este trabajo fue poner a punto una metodología de producción de plantas madre y de esquejes de crisantemo, con la finalidad de ofrecer al sector productivo la tecnología necesaria para el abastecimiento de este material. Material y métodos Se trabajó con 7 variedades de crisantemo multiflora ( Dendranthema x grandiflorum Kitam) “Sumy Lemans”, “Relinda blanca”, “ Lilac Remco”, “Redok”, “Breeze”, “Bari” y “Require”. Etapa de cultivo in vitro: Secciones de meristemas de las variedades estudiadas se colocaron en tubos de cultivo de 10 x 1,2 cm conteniendo 10 ml de medio basal de Murashige & Skoog (1962) sin reguladores de crecimiento, mas 3% de sacarosa y 7 g/litro de agar. El pH del medio fue ajustado a 5,7- 5,8. Los tubos fueron incubados en una cámara de cría a una temperatura de 22 1ºC, con una intensidad luminosa de 40μmol.m-2.s-1 y un fotoperíodo de 16 hs, acorde con Avila et al. (1998). Al cabo de 40 días las plántulas desarrolladas se cortaron en secciones nodales y se colocaron en frascos de 250 ml, con 30 ml del mismo medio de cultivo estéril, a razón de 5 explantos por frasco, con la finalidad de multiplicarlas. Las plántulas fueron subcultivadas 4 veces hasta alcanzar el número de plántulas deseadas. En esta etapa se evaluó la tasa de multiplicación. Cultivo de plantas madre: Las plántulas provenientes de cultivo in vitro fueron rusticadas en un invernadero acorde con Pierik (1990) y plantadas en camas de enraizamiento con una mezcla estéril de turba: perlita: vermiculita (1:1:1). Al cabo de 30 días las plántulas fueron transplantadas en canteros de 1 m de ancho con una mezcla de tierra y arena gruesa de río (0,1 m3. m-2) a una densidad de 63 plantas por m2 de cantero. A los 15 días posteriores al transplante las plantas se pinzaron a la altura del 5º-6º nudo. Cuando los brotes axilares alcanzaron 10 cm de largo, se cortaron esquejes de 6 cm de largo. Los esquejes cortados fueron agrupados en atados de 25 unidades y mantenidos en frío hasta el momento de plantación. Las variables evaluadas fueron: sobrevivencia (%), evaluado a los 7 días posteriores a la plantación; producción de esquejes por planta y por m2 y vida productiva de la planta madre, evaluada como meses hasta la disminución en la producción de esquejes. Resultados y discusión Tasa de multiplicación Cultivo in vitro. Las tasas de multiplicación son altas (> 4) en las variedades Sumi Lemans, Bary y Require y bajas (<2) en el resto de las variedades (Fig. 1). Estos resultados acuerdan con Avila et al. (1998) e indican que esta variable es una característica ligada al genotipo. 6 5 4 3 2 1 0 LR Rel Red S.L. Bre Bar Req Fig. 1. Tasa de multiplicación de 7 variedades de crisantemo multiplicadas in vitro. L.R = “Lilac Remco”, Rel = “Relinda blanca”, Red =“Redok”, S.L. = “Sumy Lemans”, Bre = “ Breeze”, Bar = “Bari” y Req=“Require”. Las barras verticales indican ± ES. Producción de plantas madre: La Fig. 2 muestra los porcentajes de sobrevivencia de las diferentes variedades de crisantemo provenientes de cultivo in vitro. Tal como se observa, la sobrevivencia es elevada para todas las variedades aunque muestra diferencias entre ellas, las cuales están asociadas a la genética varietal, como fuera señalado para otras especies (Avila et al., 1998). Estos resultados evidencian que las plántulas de las variedades de crisantemo estudiadas son resistentes al transplante en una etapa crítica del establecimiento del cultivo de plantas madre. La producción de esquejes por planta muestra un incremento hasta los 150 días desde plantación, a partir de los cuales comienza a disminuir en todas las variedades (Fig.3). Sin embargo, se pueden observar diferencias en la productividad entre las variedades, siendo Sumi Lemans la menos productiva. El resto de las variedades tienen un comportamiento semejante hasta los 150 días, a partir de los cuales comienzan a manifestarse las diferencias entre las variedades. A los 210 días desde plantación, todas las variedades han disminuido la productividad en un promedio del 25%. Estos resultados acuerdan con Fides (1990) y sugieren que no sería conveniente prolongar el período productivo por más tiempo. % de sobrevivencia 120 100 80 60 40 20 0 LR Rel Red S.L. Bre Bar Req Fig. 2. Porcentaje de sobrevivencia de plántulas de diferentes variedades de crisantemo provenientes de cultivo in vitro. L.R = “Lilac Remco”, Rel = “Relinda blanca”, Red =“Redok”, S.L. = “Sumy Lemans”, Bre=“Breeze”, Bar = “Bari” y Req = “Require”. Las barras verticales indican ± ES. Nº esquejes / planta 20 15 10 5 0 60 90 120 150 Días desde plantación 180 210 Fig. 3 Producción mensual de esquejes por plantas en 7 variedades de crisantemos durante 210 días de cultivo. “ Lilac Remco” (♦), “Relinda blanca” (■), “Redok” (▲), “Sumy Lemans” (□), Breeze” (◊), “Bari” (●) y “Require” (●). Las barras verticales indican ± ES. Conclusiones Las variedades de crisantemo estudiadas, no muestran dificultades para su introducción in vitro y pueden micro propagarse fácilmente. La tasa de multiplicación es una característica varietal. El cultivo de plantas madre, no presenta dificultades, y dado que la productividad es también una característica varietal, es necesario ajustar el protocolo de micropropagación y de producción de plantas madre para cada variedad. Bibliografía Avila, A., S. M. Pereyra y J. A. Arguello. Nitrogen Concentration and Proportion of NH4-N affected Cultivar Response in solid and liquid media. 1998 HortScience. 33:336-338. Dole, J.M. and H.F. Wilkins.1999. Floriculture. Principies and species. Ed. Prentice Hall. New Jersey. Pags. 613. Fides. 1990. Fides Mum manual for all year round chysanthemums. Ed. Fides Holland BV, De Lier. Murashige, T. & F. Skoog. 1962. A revised médium for rapad growth and bioassay with tobacco tissue cultures. Physiol. Plant. 15: 473-497. Pierik, R.L. Cultivo in vitro de las plantas superiores. Ed.3 Cap. 12. mundi Prensa, Madrid, España, p. 109.