Guía TP Nº 1 Biol. Cel. I

GUÍAS DE AUTOAPRENDIZAJE Y AUTO EVALUACIÓN DE BIOLOGÍA CELULAR, HISTOLOGÍA Y EMBRIOLOGÍA. FCM. UNC. 2ª ED. 2016
TRABAJO PRÁCTICO N° 1
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS, CELULARES Y MOLECULARES. MICROSCOPÍA.
BIOLOGÍA CELULAR I: FUNCIONES ANABÓLICAS Y CATABÓLICAS. MEMBRANAS,
DIFERENCIACIONES DE MEMBRANA Y COMPONENTES CITOPLASMÁTICOS
Biól. María Josefina Lantieri & Méd. Carla Ambrosi
EMBRIOLOGÍA I: FECUNDACIÓN
Dra. Mariana Piegari & Dra. Luciana Mezzano
Objetivos:
o
Adquirir habilidades en el uso del microscopio de luz que permitan identificar e
interpretar estructuras histológicas en su conjunto e individualmente.
o
Conocer los fundamentos químicos de las técnicas de coloración que ayudan a
interpretar al preparado histológico.
o
Describir y analizar los distintos componentes histológicos a nivel celular y
subcelular al microscopio de luz y en las microfotografías ópticas y electrónicas.
o
Inferir la presencia de diferentes organoides puesta de manifiesto por
coloraciones especiales.
o
Comprender la incidencia de los cortes.
o
Identificar las fases del ciclo celular.
o
Analizar el proceso de unión de las gametas.
Contenidos Prácticos:
o
o
Técnica histológica: Obtención de material. Fijación. Inclusión. Corte. Coloración.
Técnica de coloración con Hematoxilina y Eosina (H/E). Aplicación médica y
fundamento de las coloraciones especiales: Azul de Toluidina (ATO), PAS (ácido
Peryódico-Schiff), Impregnación Argéntica, Tinta China, Weigert.
Preparados histológicos que se estudiarán:




Riñón (H/E), Riñón (PAS): Membrana basal, Glucocáliz y Ribete en cepillo
Intestino delgado (H/E) e Intestino delgado (PAS/H): Chapa estriada
Tráquea (H/E): Cilios
Epidídimo (H/E): Espermatozoides - Flagelo
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 Páncreas (ATO): Ergastoplasma
 Cerebelo (I/A): Aparato de Golgi
 Hígado (PAS/H): Inclusiones (glucógeno)
o
Micrografías electrónicas e imágenes Digitalizadas de PC.
FUNCIONES ANABÓLICAS Y CATABÓLICAS
Todos los procesos vitales son consecuencia de reacciones metabólicas
llevadas a cabo en las células del organismo. Hay dos grandes
grupos de reacciones: Catabólicas y Anabólicas. Aquellas reacciones
químicas que liberan energía por degradación de nutrientes se les
denomina reacciones catabólicas, produciendo energía (ATP), la
cual es utilizada por las reacciones anabólicas para la construcción
de los distintos componentes de las células. Se llaman rutas
anfibólicas las que tienen carácter anabólico y catabólico.
ACTIVIDADES PARA REALIZAR EN EL AULA
SUGERENCIAS PARA EL ESTUDIO DE CORTES HISTOLÓGICOS CON
MICROSCOPIO ÓPTICO (MO)
Para el estudio de preparados histológicos con MO (o de luz), siga
siempre los siguientes pasos:
1. Verifique que el cubreobjeto se encuentre hacia arriba.
2. Coloque siempre, para comenzar, el objetivo de menor aumento.
3. Enfoque hasta obtener una imagen nítida.
4. Recorra todo el preparado haciendo uso del movimiento de la platina
(En los microscopios más antiguos – color negro -, deberá mover el
preparado manualmente).
5. Realice un esquema del órgano en estudio tal como se ve con este menor
aumento.
6. Coloree la imagen utilizando los tonos más similares a lo que observa.
7. Coloque el nombre del órgano en estudio, la incidencia del corte, la técnica
de coloración, el aumento y todos los nombres de lo observado.
8. Cambie a mayor aumento sólo luego de haber ubicado el sector, estructura,
células que desea estudiar con más detalle. Recuerde tomar nota del nuevo
aumento.
9. Observe detenidamente el objeto de estudio del momento, realice un
esquema de lo observado con este nuevo aumento, coloree y coloque
nombres.
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1. TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. COLORACIONES DE RUTINA Y ESPECIALES
a. Explique qué significan los siguientes términos:
Biopsia______________________________________________________________________________________
Necropsia___________________________________________________________________________________
Basófilo_______________________________________________________________________________________
Acidófilo______________________________________________________________________________________
Técnica Supravital _________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
Artificios de Técnica________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________
b. Describa brevemente qué tipo de estructuras, células, organoides, compuestos
químicos ponen en evidencia las siguientes técnicas de coloración:
H-E ___________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
PAS ___________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
ATO __________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
I/A ____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
Tinta China __________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
Weigert ______________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
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2. ESTUDIO DE PREPARADOS HISTOLÓGICOS
RIÑÓN (H/E) y RIÑON (PAS/H)
1.
Enfoque un preparado de riñón H/E e intente identificar distintos tipos de células,
por su forma y su color.
2. Realice un esquema de una célula acidófila y una basófila.
3. Enfoque un preparado de riñón PAS/H, ubique una estructura con componentes
PAS positivos y mencione la incidencia del corte.
4. Realice un esquema de la estructura donde pudo ubicarlos y coloque el nombre
de cada uno de los componentes PAS (+).
INTESTINO DELGADO (H/E) e INTESTINO DELGADO (PAS/H)
1.
Enfoque preparados de intestino delgado teñidos con H/E y PAS/H.
2. Realice un esquema de un pequeño sector donde se manifiestan las diferencias.
3. Ubique células acidófilas, basófilas y PAS (+)
4. Mencione en cuál de los dos preparados se pone en evidencia la presencia de
chapa estriada y membrana basal.
5. Realice esquema de todo lo observado con ambas técnicas y coloque nombres.
HÍGADO (PAS/H)
1.
Enfoque el preparado de hígado.
2. Identifique grumos rojizos de diversos tamaños y dispersos irregularmente en el
citoplasma de una de las células ¿a qué corresponden esas granulaciones?
3. Justifique la tinción con PAS.
4. Realice esquema de todo lo observado y coloque nombres.
TRÁQUEA (H/E)
1.
Enfoque el preparado de tráquea e indique cuál es la incidencia del corte.
2. Observe la coloración y la variedad de formatos de los citoplasmas celulares.
3. Identifique células acidófilas y basófilas.
4. Ubique dónde se encuentran las células ciliadas.
5. Realice esquema de todo lo observado y coloque nombres.
EPIDÍDIMO (H/E)
1.
Enfoque el preparado de epidídimo teñido con H/E a menor aumento.
2. Realice un esquema de lo que observa y mencione la incidencia del corte.
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3. Identifique distintos tipos celulares y ubique dónde se encuentran las células con
flagelo.
4. Realice un esquema de cada tipo celular y coloque nombres.
PANCREAS (ATO)
1.
Enfoque el preparado de Páncreas con ATO.
2. Observe e identifique células con diferente intensidad de coloración.
3. Ubíquese en células teñidas fuertemente con ATO y mencione qué organoides
pone en evidencia.
4. Justifique esta tinción.
5. Realice esquema de todo lo observado y coloque nombres.
CEREBELO (I/A)
1.
Enfoque el preparado de Cerebelo con I/A.
2. Observe las estructuras puestas de manifiesto con esta técnica de coloración.
3. Identifique y señale qué organoides son posibles de identificar en una célula
nerviosa teñida con IA.
4. Realice esquema de todo lo observado y coloque nombres.
3. OBSERVACIÓN Y ANÁLISIS DE MICROGRAFÍAS ELECTRÓNICAS E IMÁGENES
DIGITALIZADAS DE VIDEOS MICROSCOPIOS
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ACTIVIDADES DE AUTOEVALUACIÓN
1. Complete con el nombre de la organela correspondiente: retículo endoplasmático
(RE), retículo endoplasmático liso (REL), retículo endoplasmático rugoso (RER),
mitocondrias, peroxisomas, lisosomas, polirribosomas, aparato de Golgi.
Compartimiento multimembranoso que permite la disposición de cisternas para el
depósito, modificación y vehiculización molecular:_________________________________
Ribosomas enlazados por RNA mensajero, que se desarrollan como estructuras
libres en el citoplasma o asociados al RE: …………………., dándole el carácter
de……………………….
Lugar donde los polipéptidos sintetizados se transforman adquiriendo una
molécula señal que direcciona a la proteína hacia un compartimento u organoide, ó
hacia el exterior celular: ………………….
Vesículas enriquecidas en enzimas digestivas, que permiten la digestión
intracelular:………………………………….
Organela capaz de neutralizar los efectos citotóxicos de los peróxidos, por medio
de catalasas y otras enzimas:……………………………………..
Participan en la oxidación de nutrientes primarios utilizando oxígeno, con el fin de
obtener energía (ATP):…………………………………
2. Complete el siguiente cuadro dibujando en la segunda columna, la organela
mencionada en la primer columna y en la tercera columna, nombre la tinción o
tinciones que permiten una buena visualización de dicha organela.
Organela
Gráfico
Tinción
Impregnación
argéntica
Aparato de Golgi
Retículo endoplasmático liso (REL)
Retículo endoplasmático rugoso
(RER)
Lisosoma
Mitocondria
Peroxisoma
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3. Responda:
¿Cuál es el fundamento de la tinción con azul de toluidina (ATO)?
……………………………………………………………………………………………………………………………...
……………………………………………………………………………………………………………………………...
¿A qué se llama METACROMASIA?................………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………..
¿A qué se llama ORTOCROMASIA?.................................................………………………………………
……………………………………………………………………………………………………………………………..
¿En qué tipo de células se observa un gran desarrollo del RER? Justifique.
……………………………………………………………………………………………………………………………..
……………………………………………………………………………………………………………………………..
¿Cómo es el mecanismo de liberación del Aparato de Golgi? Explique.
……………………………………………………………………………………………………………………………..
…………………………………………………………………………………………………………………………….
Nombre 4 enzimas hidrolíticas que se encuentren en los lisosomas………………………...
……………………………………………………………………………………………………………………………..
Los peroxisomas en sus oxidaciones ¿generan ATP?……………………………………………….
En la mitocondria ¿qué nos indica un gran desarrollo de sus crestas?
……………………………………………………………………………………………………………………………
Los genes del DNA mitocondrial (mt DNA) ¿a qué progenitor corresponden?
……………………………………………………………………………………………………………………………
Para conocer un poco más…
La teoría endosimbiótica fue popularizada por Lynn Margulis en 1967, con el
nombre de endosimbiosis en serie, quien describió el origen simbiogenético de
las células eucariotas. También se conoce por el acrónimo inglés SET (Serial
Endosymbiosis Theory).
Según esta hipótesis, hace unos 2500 millones de años la atmósfera ya contenía
suficiente oxígeno como consecuencia de la fotosíntesis de las Cianobacterias,
ciertas procariotas habrían adquirido la capacidad de usar el oxígeno para
obtener energía y fueron fagocitados por células de mayor tamaño, sin que
existiera una digestión posterior. Así la pequeña célula aeróbica se transformó en
la mitocondria y esta asociación pudo conquistar nuevos ambientes. De forma
análoga, procariotas fotosintéticos fueron ingeridos por células no fotosintéticas
de mayor tamaño, y fueron los precursores de los cloroplastos
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ACTIVIDADES DE AUTOEVALUACIÓN
EMBRIOLOGÍA I: FECUNDACIÓN
Dra. Luciana Mezzano & Dra. Mariana Piegari
1. Observe los esquemas sobre las distintas etapas del proceso de Fecundación y
coloque nombres en las estructuras señaladas con flechas.
2. Indique qué etapa de la Fecundación ocurre en cada una de las figuras.
3. ¿A qué se denomina “Reacción acrosómica” y qué enzimas intervienen en este
proceso?
(A)
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(B)
(C)
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(D)
(E)
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