COLEGIO DE POSTGRADUADOS CAMPUS SAN LUÍS POTOSÍ Ciclo de Seminarios Internos Primavera-Verano 2006 EXPRESIÓN DE STAR EN LA ESTEROIDOGÉNESIS PLACENTARIA DE BOVINOS NORMALES Y CLONADOS. Dr. Adrián Raymundo Quero Carrillo RESUMEN La producción de individuos genéticamente iguales, mediante la técnica de transferencia de embriones producidos por enucleación ofrece ventajas enormes, principalmente para la diferenciación del efecto del ambiente sobre el genotipo y la localización eficiente de genes o grupos de genes (qtl) que influencian alguna enfermedad o aspecto productivo sobresaliente. El transplante de embriones tiene bajos niveles de sobrevivencia, lo que ha reducido la tasa de integración de esta técnica a la práctica de la clínica veterinaria rutinaria en las instalaciones pecuarias de producción intensiva. Entre los diversos factores atribuidos a la reducida sobrevivencia se encuentran los epigenéticos y éstos se pueden expresar durante el desarrollo placentario, tanto morfológicamente como de balance hormonal en la regulación de la placenta. Se evaluó el desarrollo placentario de animales normales y clonados mediante morfometría, se midieron diversos atributos morfológicos: densidad, peso, grueso, largo y ancho de placentomas, peso de placenta, peso del feto, longitud de cervix (para conocer si la madre era primipara o no), peso de amnios, desarrollo del feto, ancho de torax (para definir la edad del producto), tamaño de corona, cabeza-base de cola, peso de producto, sexo, grosor de placenta, entre los de mayor importancia. Los fetos de gestación normal fueron muestreados en el rastro; mientras que los clonales fueron muestreados fueron de oportunidad (aborto), dado el valor de dichas gestaciones, los tejidos muestreados fueron preservados para su análisis en hielo, en el sitio de colecta se muestreo tejido con el fin de localizar la expresión de diversos acarreadores de colesterol o sus precursores a nivel celular y estos incluyeron: StAR, LDL, SRB1, P450scc y Tubulina como “houskeeping”, para los tejidos placentarios: amnios, cotiledón, carúncula y placentoma. Las técnicas de laboratorio incluyeron: PCR en tiempo real, a partir de RNAm; Westernblot, estandarizado mediante la reacción colorimétrica de Bradford; Inmunocitoquímica, para lograr la localización del sitio celular de expresión de la proteina de interés, para los cuatro acarreadores mencionados. Los resultados indican una menor densidad de placentomas en todas las fases de desarrollo fetal (P<0.05) entre gestaciones normales y clonales, mayor grosor de placentomas (P<0.05) en gestaciones de animales clonados, dado que los placentomas cumplen una alta demanda hormonal para la gestación, lo que promueve su atrofiamiento; similarmente, se registró un desarrollo consistentemente mayor en los parámetros de crecimiento en gestaciones clonales. La expresión de LDL fue baja (P<0.05) para gestaciones clonales, respecto a las gestaciones normales y por primera vez se reporta la detección de producción hormonal del tejido amniótico.