Curso: “Métodos de Purificación de Proteínas y su Aplicación en Biotecnología”. 5 de abril – 16 abril del 2010 PROGRAMA PROGRAMA TEORICO: Profesora Dra. Adriana Seixas. Horario de 16 a 19 hs. Salón a confirmar. 05/04 - Purificación de proteínas abordando diferentes métodos cromatográficos como cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de exclusión en gel, cromatografía de fase reversa, cromatografía de interacción hidrofóbica, covalente y de afinidad en iones metálicos inmobilizados y cromatografía de afinidad. 06/04 – Purificación de extractos naturales y de proteínas recombinantes. Estrategias de purificación de proteínas recombinantes, solubilización de corpúsculos de inclusión 07/04 - Diferentes equipamientos utilizados FPLC / HPLC / UPLC. Tampones. Que material debemos escoger para trabajar con nuestro sistema. Como minimizar la inactivación de proteínas. 08/04 - Ensayos para trabajar con las proteína de interés, métodos de cuantificación de proteínas, métodos de estudios cualitativos de proteínas. Estudios de actividades específicas de las proteínas. Diálisis y otras técnicas de remoción de moléculas contaminantes y detergentes, métodos de concentración y técnicas de precipitación. 09/04 - Electroforesis (uni y bidimensional) e electro-focalización, criterios de pureza, espectrometría de masa. 1 SEMINARIOS: Prof. Adriana Seixas Prof. Uruguaysito Benavides Prof. Jacqueline Maisonnave. Horario de 14-16 hs. Salón de post-grado. Presentación y discusión de artículos científicos que se le entregarán a los estudiantes en la primer semana de clases teóricas. 12/04 -Purificación de proteínas recombinantes: Métodos, problemas y soluciones. 13/04 – Purificación de proteínas nativas (extrato): Métodos, problemas y soluciones. 14/04 - Determinación de la concentración de proteínas y métodos de diálisis para diferentes proteínas, problemas y soluciones. 15/04 – Métodos de estudios de las fracciones purificadas. Problemas y soluciones. 16/04 – Planteamientos de problemas en los diferentes trabajos de investigación llevado a cabo por los estudiantes y discusión de la resolución. CURSO PRACTICO Prof. Adriana Seixas Prof. Uruguaysito Benavides Horario de 16-20 hs. Laboratorio de Inmunología. 12/04 – Purificación de proteína recombinante por Glutationa-sepharose. 13/04 – Purificación de proteína nativa (extrato) por Hitrap-Q. 14/04 - Determinación de la concentraciones de las proteínas purificadas y de diálisis. 15/04 - Electroforesis de las fracciones purificadas. 16/04 – Análisis de los resultados de la práctica y evaluación final. EVALUACIÓN 1) Asistencia a 75% de las actividades presenciales. (Requisito para tener derecho a dar el exámen final). 2) Asistencia de 100% del Curso Práctico. (Requisito para tener derecho a dar el exámen final). 3) Asistencia del 100% de los Seminarios. (Requisito para tener derecho a dar el exámen final). 4) Evaluación Continua: Seminarios de exposición y discusión de trabajos científicos y trabajo práctico (50 % del puntaje total final) 2 5) Prueba Final escrita: (50% del puntaje final total) EXAMEN FINAL: 16./05 Hora 18:00. Salón de Post/grado. DURACIÓN Conferencias: 15 hs Seminarios: 10 hs. Trabajos prácticos: 35 hs. Trabajo no presencial : 15 hs. Prueba final: 2 hs. TRIBUNAL EXAMINADOR: Dra. Adriana Seixas Dr. Uruguaysito Benavides Dra. Jacqueline Maisonnave. CREDITOS: 5 3