Dr. Milton Cattáneo Área de Bacteriología. Departamento de Microbiología. Facultad de Veterinaria. UdelaR. Desarrollo de la clase • Enfermedades infecciosas • Remisión de material • Vacunas y vacunación Principales enfermedades infecciosas de los ovinos Enfermedades nerviosas - Tétanos - Listeriosis - Scrapie (exótica) Enfermedades entéricas - Enterotoxemia de los lanares - Diarrea Enfermedades podales - Foot rot - DD Enfermedades respiratorias - Pasteurelosis - Maedi-visna (exótica) Enfermedades cutáneas - Ectima - Linfoadenitis caseosa - Dermatofillosis - Dermatofitosis - Dermatitis estafilococosica - Podredumbre de vellón Enfermedades reproductivas - Aborto - Epididimitis - Orquitis - Balanopostitis -Carbunco bacteridiano -Mancha -Gangrena gaeosa Otras enfermedades - C. perfringens tipo A Tétanos • Clostridium tetani – Contracciones espásticas – Diagnostico clínico – DD: – listeriosis – poliencefalomalocia – enterotoxemia – coenurosis – abscesos de SNC – plantas tóxicas: duraznillo negro, senecio – scrapie (exótica) - Prevención: vacunas Listeriosis • Listeria monocytógenes – Andar en círculos, parálisis facial (aborto) – Relacionada a consumo de silos – Tratamiento: ATB (excepto cefalosporinas) – No se vacuna – DD: igual que Tétanos Scrapie (exótica) Síntomas clínicos – Prurito intenso – Síntomas nerviosos, ataxia – Pérdida de peso Diagnóstico – – – – Histopatologia cerebro Inmunoistoquimica ELISA Westernblot Luiz A. O. Ribeiro Departamento de Medicina Animal UFRGS - Brasil Diarrea • • • • Escherichia coli (ECET / K99) Salmonella dublin / thphymurium Rotavirus Crypstoporidium parvum • Remitir: - materia fecal (refrigerada) - intestino (refrigerado/formol) - ganglio mesentérico (refrigerado/formol) Enterotoxemia • Clostridium prfringens (welchii) tipo D – Toxina épsilon – Síntomas nerviosos – DD: igual que tétanos – Control: vacunas ORINA CONTENIDO INTESTINAL glucosa INTESTINO frotis centrifugar RIÑON SUERO histop. siembre AS /CM incubar 24 hs. anaerobiosis titulaciòn de antitoxina en lauchas (niveles protectores) inocular laucha IV (seroneutralización) colonias sospechosas sembrar en CM centrifugar sobrenadante sin tripsisna sin antitoxina con antitoxina con tripsina sin antitoxina inocular laucha IV con antitoxina Foot rot • Dichelobacter nodosus / Fusobacteriun necrophorum – Principal causa de enfermedad podal – DD: - Dermatitis interdigital - Abceso del pie - Separación de muralla - Manquera posbaño - Ectima contagioso - Fiebre aftosa - Dermatofilosis - Lesiones traumáticas Control y prevención • Despezuñado y baños podales • Vacunas – Polivalentes – baja eficacia – no en Uruguay Pasteurelosis • Pasteurella multocida – causante de nuemonías • Mannheimia haemolytica – causante de neumonías y septicemias de corderos • Pasteurella threalosi – causante de septicemias en adultos Sintomatologìa Necropsia Muestras: refrigeradas / formol Maedi-Visna (exótica) Virus: Familia: Retrovirus Sub fammilia: Lentivirus Síntomas 2-4 años de incubación pérdida de peso, afebril Dificultad respiratoria Parálisis progresiva del tren posterior Poliartritis y mastitis Ectima contagiosa • Parapoxvirus DD: D. congelensis Vacunación: - Viva atenuada - Por escarificación Linfoadenitis caseosa • Corynebacterium pseudotuberculosis – – – – Crónica Inflamación y supuración unilateral de linfonodulos Ocasionalmente pulmones y bazo Vacunas: • Inactivadas (60-80 % eficacia) • Atenuadas • No se vacuna en Uruguay • Dermatofilosis – Dermatophilus congolensis – Lana de palo – Costras finas y planas en cara, oreja, patas • Dermatomicosis • Podredumbre de vellón • Pseudomonas aeruginosa • Coloreado de lana • Dermatitis estafilococica • Staphylococcus aureus Epididimitis ovina • Brcuella ovis – Afecta fertilidad (aborto) – DD: • Actinobcillus seminis • Dermatobia • Orquitis Remitir • Sangre • Semen (refrigerado) Extracción de semen Balanopostitis • Corynebacterium renale – Consumo de pasturas ricas en proteínas Orquitis • Staphylococcus aureus, Corynebacterium ovis Aborto ovino Causa bacterianas Causas parasitarias Clamydophila abortus Brucella ovis y melitensis Campylobacter fetus y jejuni Salmonella abortus ovis Listeria monocytogenes Coxiella burnetii (Fiebre Q) Toxoplasma gondii Neospora caninum Causas víricas Border disease virus (Pestivirus) Bluetongue (Orbivirus) Akabane virus Causas Micóticas Aborto ovino Chlamydophila abortus Brucella ovis Brucella melitensis Campylobacter Salmonella Neospora caninum Toxoplasma gondii 1 Encarnerada 2 3 eco 4 5 Parto Aborto ovino en Uruguay • Principal causa: Toxoplasma gondii – Aislamiento y serología • C. abortus, Neospora canis, Brucella oviis - Serología: bajos títulos • Leptospira - Serología • Metabolicas ? Diagnóstico del aborto Historia Clínica Compañeras Oveja Abortada Coloración Suero Placenta Cultivo Histopatología PCR Neospora – Leptospira – Brucela – Chlamydophila Toxoplasma - Virus FETO ABORTADO Suero o exudados Neospora Leptospira Brucela Toxoplasma Chlamidia Líquido abomasal - Órganos (hígado, riñón, pulmón, corazón, SNC) Coloración de Stamp Cultivo (Bacteriología, Parasitología) IFD (Campylobacteriosis) Virus Aislamiento PCR Histopatología Muerte súbita • Carbunco bacteridiano – Bacillus anthracis – Poca prevalencia – Vacunas • No se utilizan de rutina • Vacuna viva atenuada • Mancha o carbunco sintomático – Clostridium chauvoei – Principalmente en bovinos – Poca prevalencia – Vacunas polivalentes Gangrena gaseosa o edema maligno C. chauvoei, septicum,sordelli, novyi, perfringens. Todas las especies Todas las edades Exógena Precisa puerta de entrada Afecta tejido conjuntivo 24-48 hs. Agudo Sub-agudo: Primera etapa lesión en lugar de infección Inflamación eritema / dolor / gas/exudación espumosa por herida / fiebre, claudicación, depresión Segunda etapa inflmación tensa piel oscura y tirante Hepatitis necrótica infecciosa Etiología: C. novyi tipo B (C. oedematiens) Toxina: alfa Ovinos (Bovinos) Bacteriemia y toxemia Tejido subcutáneo oscuros y sanguinolentos (“black disease”) Asociado a daños hepáticos Infartos de 1 – 2 cm (C. novyi tipo B) Diagnóstico de C. perfringens tipo A en ovinos Remisión de materiales Condiciones Para llegar a la etiología de una enfermedad es necesario que las muestras que se envíen sean tomadas y enviadas en forma correcta. Extraer el material en la forma lo mas aséptica posible. Exigir al laboratorio de diagnóstico instructivos. Es imprescindible que junto al material se adjunte una ficha clínica. Es importante para el laboratorista disponer de esta información para poder aplicar las técnicas pertinentes y obtener un resultado lo mas rápido posible. Materiales Las muestras deben ser colocadas en envases estériles y con cierre hermético. Instrumental limpio, seco, bien afilado y estériles. Para el envío de materiales tener en cuenta los siguiente: - realizar necropsia de un animal enfermo - mantener las mejores condiciones de asepsia - no enviar muestras los fines de semana o vísperas de feriados - contactar con el laboratorio para confirmar el envío - adecuar e identificar el material correctamente Para bacteriología las muestras tienen que ser enviadas refrigeradas (4-8 ºC). Se pueden utilizar medios de transporte como el AMIES o el STUART. En el diagnostico virológico se utilizan los medios de transporte HANKS o MEM o PBS con antibióticos. Para aislamiento remitir el material refrigerado (4 ºC), dentro de las 12-24-hs. posteriores a la extracción y se excede este tiempo es conveniente congelar el material. Remitir sangre con anticoagulante para aislamiento y suero para serología. Para histopatología las muestras tienen que tener un tamaño de 1 x 1 cm y ser enviadas en formol al 10 %. TOMA Y EVNÍO DE MUESTRAS Líquidos y contenidos de cavidades se toman con jeringas y agujas estériles, luego pasarlos a recipientes estériles con tapa rosca. Secreciones deben extraerse con hisopos estéril con medios de transporte o suero fisiológico estéril. Sueros: - material a utilizar debe estar seco, limpio y estéril. - rotular los tubos (utilizar marcador indeleble). - las muestras de sangre se extraerán sin anticoagulantes en tubos de 10 a 15 mL, mantenerlas durante 1 hora a 37 ºC o a temperatura ambiente al sol y luego refrigerarla durante un máximo de 48 horas. - no congelar la sangre porque se hemoliza. - luego de formado el coágulo, separar el suero y colocarlo en recipientes estériles y roturarlos. - El suero congelado puede guardarse durante un tiempo prolongado meses). Órganos Primero observar los órganos externamente y luego extrae trozos, de un tamaño de 5 x 5, bajo las máximas condiciones de asepsia. Las muestras incluirán trozos de aspecto normal y con lesiones. Los órganos de elección son el bazo, pulmón, hígado, riñón y hueso largo (descarnado). Si los órganos presentan contaminación, flamearlo superficialmente. El intestino se envasará por separado y con sus extremos ligados para mantener su contenido. Las muestras de cerebro enviarlas una parte refrigerada y otra con formol al 10%. Remisión de material Enfermedad Mancha Gangrena gaseosa Enterotoxemia Hemoglobinuria bacilar Hepatitis necrótica Botulismo Tétano Muestra Músculo con y sin lesión refrigerado y en formol al 10%. Improntas. Tejido subcutáneo y músculo con y sin lesión refrigerado y en formol al 10%. Improntas. 20-30 mL de contenido de duodeno. Cerebro y riñón en formol al 10%. Improntas. Orina. Líquidos cavidades. Trozos de hígado con y sin lesiones refrigerado y en formol al 10%. Improntas. Orina. Líquidos cavidades. Suero. Contenido intestinal. Hígado. Alimento. Tejido de áreas correspondientes a heridas refrigerado. Improntas de zonas profundas de heridas. Vacunación en ovinos • Vacunas clostridiales • • • • • • Polivalentes Acuosas (oleosas) Inactivadas Anacultivos Inmunidad humoral Seguridad, eficacia Esquema de vacunación clostridial Cordero pesado ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO JUNIO ectima JULIO encarnerada AGOSTO SETIEMBRE parición OCTUBRE NOVIEMBRE DICIEMBRE señalada Carneros primo vacunados: una dosis / Carneros no vacunados: vacunación y revacunación Ovejas primo vacunadas: una dosis pre parto / Ovejas no vacunadas: vacunación y revacunación Corderos: vacunar y revacunar Cordero pesado Cordero pesado: revacunar a los seis meses SIEMPRE REVACUNAR ANTES DE UN CAMBIO DE ALIMENTACIÓN Protección calostral en corderos contra enterotoxemia • 0,15 unidades de antitoxina Epsilon es suficiente para proteger contra infecciones a Clostridium perfringens tipo “D”. • La vida media de la antitoxina recibida pasivamente en un cordero en crecimiento es de cerca de 10 días. • Para llegar a las 13 semanas conun título de 0,15 unidades, debe recibir de su madre en el calostro entre 50-70 unidades. Inmunización de las madres para obtener protección calostral por 13 semanas • 2 inoculaciones cuando corderas • Reinocular al año • Reinocular en el flushing • Reinocular en la encarnerada • Reinocular antes del parto • Total 6 inoculaciones Bibliografía • Enfermedades de los lanares. Tomo II. – Bonino, Durán del Campo, Mari. Hemisferio Sur. 1987. • Medicina de ovinos. – Luiz Alberto Olivera Ribeiro. 2011. Ed. PACARTES. • Medicina Veterinaria – Blood – Radostitis. Novena edición / Volúmen l. Editorial McGraw – Hill – Interamericana. 2002 • Doencas Bacterianas – Franlin Riet – Correa Gracias!!!