Pseudomonas Agar Base (King`s B)

Pseudomonas Agar Base
(King’s B)
obtenido de un cultivo puro de cultivos de18-24 horas
de especies Pseudomonas.
7. Incubar a 35-37°C durante 18-24 horas.
DM484. Un medio para la detección y diferenciación de
Pseudomonas aeruginosa de otras Pseudomonas
basado en la producción de fluorescina.
Interpretación de resultados
Contenido: Ver la etiqueta del envase.
Composición*
Concentración del
medio:
Mezcla de peptona
20.0g/litro
Fosfato di-potasio
1.5g/litro
Sulfato de magnesio
1.5g/litro
Agar
15.0g/litro
Final pH: 7.0 ± 0.2
Almacenamiento y caducidad
Todos los contenedores deben ser almacenados bien
cerrados en un lugar seco a 25°C o por debajo hasta la
fecha de caducidad mostrada en la etiqueta del envase.
Algunos medios pueden requerir almacenamiento a 28°C, referirse a la etiqueta del envase.
Precauciones
Exclusivamente para uso diagnóstico in vitro. Respetar
las precauciones de seguridad y utilizar técnicas
asépticas. Debe ser utilizado solo por personal de
laboratorio cualificado y con experiencia. Antes del
desecho, esterilizar todo el material biológico. Referirse a
la hoja de seguridad del producto(disponible si se
requiere o a través de la página web de MAST).
Materiales requeridos pero no proporcionados
Accesorios y productos para análisis microbiológico de
base, por ejemplo: lazos, suplementos selectivos MAST,
hisopos, palillos aplicadores, incineradores e
incubadores, etc.... así como reagentes bioquímicos y
aditivos como sangre).
Después de la incubación examinar las colonias bajo una
luz ultravioleta ligera. Tener cuidado usando luz UV ya
que puede tener un efecto bactericida. Un color ligero,
verde brillante / amarillo difundiéndose en el agar, con
una zona fluorescente rodeando el crecimiento, indica un
resultado positivo. Una piocianina produciendo especies
de Pseudomonas producirá normalmente fluorescina.
Aquí la temperatura puede ser un factor determinante ya
que la mayoría de otras cepas fluorescente no crecerán a
35-37°C; crecerán a 25-30°C.
NB: La formación de colonias no pigmentadas cancela
completamente los aislados de Pseudomonas
aeruginosa.
Control de calidad
Comprobar si hay signos de deterioro. Se recomienda
que el control de calidad se lleve a cabo con al menos un
microorganismo que demuestre una reacción esperada.
No usar el producto si la reacción con el microorganismo
de control es incorrecta. La lista de abajo ilustra una
variedad de actuaciones de las cepas de control de uso
rutinario, que el usuario final puede obtener facilmente.
Microorganismos
Resultado
Pseudomonas aeruginosa
ATCC 27853
Pseudomonas putida
ATCC 49128
Escherichia coli
ATCC 25922
Positivo
Negativo
Negativo
Referencias
Bibliografía disponible si se requiere.
Procedimiento
1. Referirse a la etiqueta del envase para volúmenes y
cantidades requeridas. Preparar MAST
Pseudomonas Agar Base (King’s B) (DM484)
suspendiendo los polvos en agua destilada o
desionizada. Para los envases de sobre, disolver el
contenido entero del sobre en el volumen mostrado
en la etiqueta.
2. Añadir 10ml de glicerol por litro de medio.
3. Autoclave a 121°C (15 p.s.i.) durante 15 minutos.
4. Mezclar bien, verter en las placas de cultivo, (15-20ml
en cada placa) y dejar solidificar.
5. Los medios de cultivo preparados deben ser usados
inmediatamente o almacenados en posición vertical
en bolsas de plástico a 2-8°C hasta una semana
antes de su uso.
6. Inocular las placas directamente mediante el método
de rayado en superficie, rayando para buscar
colonias simples. Inocular usando un inóculo
IFU389 MM 07/08 V2
MAST es una marca registrada
ATCC es una marca registrada de la American
Type Culture Collection, Manassas, Virginia, USA
*La composición puede cambiar para seguir los criterios de actuación