Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca Aislamiento de Larvas de Trichinella spp . en Pecarí ( Tayassu tajacu ) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca Soria, Claudia; Mozo, Gabriela; Camaño, Cecilia; Saldaño, Belén; López, Elvira; Malandrini, Jorge; Soria, Julio F a c u lt a d d e C i e n c ia s de la S a l ud – U N C a M a e s tro Q u iro g a S /N ( C P 4 7 0 0) . C a tam ar c a – sor iacc@yahoo.com.ar Isolation of Trichinella spp. Larvae in Peccary (Tayassu tajacu) of Icaño, Departament La Paz, Catamarca Summary Trichinellosis is a zoonosis which is transmitted by a nematode which spends its cycle of life not only in domestic animals but also in wild ones. The peccary (Tayassu tajacu) is an artiodactyla which spreads from the southwesterm part of the United States to the semi‐arid Chaco. Gregarious, omnivore and carroñero animal, it represents one of the most important species in Latin America as a source of protein in the livelihoods economies (category IUCN, apendix II of CITES) Under the University Voluntary Project: “A parallel alternative in the diagnosis of trichinellosis directed to impoverished communities” component 1: Pigs and wild animal´s carriers of trichinellosis, the objetive of this work was to determine the prescence of Trichinella in muscle tissue of wild animals. According to the recommendations of the International Commission on Trichinellosis (ICT) 10g of sample material extrated from striades muscles Revista Electrónica Iberoamericana de Educación en Ciencias y Tecnología — Volumen 2, Número 1, Julio 2010. Página 153 — Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca of brazuelo of a peccary were processed by means of a method called Quick Artifical Digestion (pepsin 1:10.000), coming from the Municipality of Icaño, departament La Paz, Catamarca province. This technique allows the isolation of 0,1 1/g. From this finding the epidemiologic concepts should be modified in our province it is necesary to think this disease is not just a simplified form of infection with pork but a complex transmision pattern. Key Words: Isolation, Trichinella, Peccary, Wilderness, Icaño Resumen Trichinellosis es una zoonosis transmitida por un nemátode que comparte su ciclo de vida tanto en animales domésticos como los que habitan en silvestría. El pecarí (Tayassu tajacu) es un artiodáctilo que se distribuye desde el sudoeste de los Estados Unidos hasta el Chaco semiárido. Animal gregario, omnívoro y carroñero, constituye una de las especies más importantes en Latinoamérica como fuente de proteína en las economías de subsistencia (categoría IUCN, apéndice II del CITES). En el marco del Proyecto de Voluntariado Universitario: “Alternativa paralela al diagnóstico de trichinellosis dirigida a grupos comunitarios empobrecidos” componente 1: Cerdos y animales silvestres portadores de Trichinellosis, el objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de larvas de Trichinella en el tejido muscular de animales silvestres. De acuerdo a las recomendaciones de la International Commission on Trichinellosis (ICT) se procesaron 10g de material extraído de los músculos estriados del brazuelo de un pecarí, con el método de Digestión Artificial Rápida (Pepsina 1:10.000). La técnica permitió el aislamiento en cantidad de 0,1 l/g. A partir del hallazgo, los conceptos epidemiológicos deberán ser modificados en nuestra provincia y pensar que la enfermedad no sólo se trata de una simple forma de infección con carne de cerdo, sino que encontramos un complejo patrón de transmisión. Palabras clave: Aislamiento; Trichinella; Pecarí; Silvestría; Icaño. Revista Electrónica Iberoamericana de Educación en Ciencias y Tecnología — Volumen 2, Número 1, Julio 2010. Página 154 — Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca Introducción La Trichinellosis, es una enfermedad parasitaria causada por el nematodo que afecta a distintos animales y se trasmite de modo accidental al hombre por ingestión de carne o productos cárnicos crudos o insuficientemente cocidos, procedentes de animales infectados. La población humana del departamento se ocupa de actividades centradas en la explotación ganadera a nivel de economías de subsistencia. Cerca de las aglomeraciones periurbanas es común que, de los integrantes del núcleo familiar, el padre desempeñe algún empleo en el estado, mientras el resto lo hace de las tareas rurales(11). El consumo de carnes de distintas especies silvestres, se encuentra muy difundido en nuestra región, y la parasitación de las mismas ha sido reportada en otros países, por lo que resulta necesario conocer la situación de ésta nematodiasis para prevenir contagios en seres humanos. Es importante mencionar la baja incidencia de detección de la enfermedad, la dificultad e ineficiente control sanitario en carnes contaminadas y la práctica frecuente de matanza para consumo de animales silvestres. Los principales huéspedes domésticos de Trichinella son la rata, el cerdo y el hombre. El hombre adquiere la infección a través de la ingestión de tejido muscular crudo o mal cocido, con larvas de Trichinella. Los jugos digestivos digieren la carne y las larvas se liberan en intestino delgado, penetran la mucosa intestinal y sufren tres mudas de cutícula hasta convertirse en parásitos adultos. Se diferencian en hembras y en machos adultos, unas 30 horas después de la infección. La cópula ocurre en la mucosa intestinal (en el lumen entérico); los machos son eliminados por una reacción de hipersensibilidad inmediata y automática de la motilidad intestinal por el huésped luego de cumplida su función fértil. Las hembras fecundadas se Revista Electrónica Iberoamericana de Educación en Ciencias y Tecnología — Volumen 2, Número 1, Julio 2010. Página 155 — Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca localizan en el interior de la mucosa del duodeno, yeyuno e ileón y son eliminadas poco después de la liberación de las larvas. Esta expulsión se debe en parte a la acción de linfocitos Th2 e IgE(2). Entre el tercero y el quinto día, comienza la postura de larvas (L1). Cada hembra ovipone alrededor de 1.500 larvas. Estas miden entre 80 y 120 micras, atraviesan la mucosa intestinal, penetran a través de los capilares linfáticos y venosos y llegan a la circulación general, diseminándose por todo el organismo, pero enquistándose sólo en la musculatura esquelética. Las larvas se localizan en el interior de las fibras musculares. Así se origina el quiste larval, que mide entre 250 a 400 micras y que, en consecuencia, no es visible a simple vista. Tiene un aspecto afilado o alargado(1). El hombre es considerado un huésped accidental; la evolución del parásito, en condiciones normales, termina cuando muere el hospedero, excepto que un carnívoro susceptible ingiera la carne parasitada. Se consideran tres ciclos epidemiológicos: silvestre, doméstico y semidoméstico. En el primero de ellos intervienen muchos animales silvestres, no sólo carnívoros, entre los que se puede citar al los quirquinchos, jabalíes(13), zorros, roedores, etc., y algunas aves depredadoras como la lechuza. Generalmente Trichinella afecta carnívoros con características canibalísticas aunque recientes investigaciones(9) la reportan en caimanes, serpientes y tortugas, adquirida en forma experimental. La evaluación del estado parasitológico de las especies que serán futuras fuentes de alimentos cárnicos, su relación con la fauna silvestre y los resultados obtenidos hasta el momento son temas profundamente interrelacionados que demuestran un crecimiento importante de la casuística que de por sí justifican el estudio del problema parasitario(6). Esta zoonosis parasitaria es endémica en muchos países. En los últimos años los avances biotecnológicos han servido para re‐examinar la Revista Electrónica Iberoamericana de Educación en Ciencias y Tecnología — Volumen 2, Número 1, Julio 2010. Página 156 — Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca taxonomía, epidemiología y ciclo de vida del agente etiológico, proveyendo información adicional sobre los factores que contribuyen al mantenimiento de este parásito en la naturaleza. El antiguo concepto que los cerdos y ratas eran los únicos causantes del mantenimiento de Trichinella spp, ha sido revisado y revaluado por varios autores(10). El pecarí, Tayassu tajacu, cuya sinonimia lo reconoce como: huangana, chancho de monte, saíno, báquiras, rosillo, chancho gargantilla, chancho moro, collarejo, zaino, puerco salvaje, jabalí; tateto, taytetú, tayasú (guaraní), cuchi (quechua), es un mamífero artiodáctilo perteneciente a la familia de los tayasuidos y al género Tayassu. Se extienden desde el sur de los Estados Unidos hasta el Chaco semiárido. Animal gregario, omnívoro y carroñero, constituye una de las especies más importantes en Latinoamérica como fuente de proteína en las economías de subsistencia (categoría IUCN, apéndice II del CITES). El pecarí de collar es un ungulado mediano, de cabeza proporcionalmente grande y miembros delgados (los anteriores con cuatro dedos y los posteriores con tres). Como en los restantes artiodáctilos, los dedos tercero y cuarto son los más desarrollados y los únicos que se apoyan en el suelo. El aspecto general recuerda al de un cerdo con un cuerpo macizo y fusiforme. El pelaje es grisáceo, los pelos son largos y se caracterizan por ser negros con bandas blancas y extremo pardusco. Esta especie debe su nombre al característico collar de pelos blancos presente en la mayoría de los adultos. Las crías son de color pardo claro a rojizo hasta el cuarto mes. Posee un total de 38 dientes entre los que destacan colmillos de gran tamaño y función defensiva. A pesar del gran desarrollo de los caninos, el resto de la dentición está mejor adaptada para el consumo de vegetales que de carne. Es un animal que vive en grupos (piaras) compuestos por dos a 25 individuos, aunque normalmente son cuatro a ocho ejemplares(4). Revista Electrónica Iberoamericana de Educación en Ciencias y Tecnología — Volumen 2, Número 1, Julio 2010. Página 157 — Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca Es una de las especies más cazadas en América Latina, para alimento y fuente de ingresos. Reconciliar las necesidades de la gente pobre y la conservación de estas especies es un tema de preocupación y un desafío, ya que en muchos casos los pecaríes representan la mayor cantidad de carne consumida para subsistencia, proveyendo una fuente importante de proteína. Al igual que otras especies que requieren grandes áreas, viven en paisajes donde se entremezclan ambientes con diferentes grados de presión humana. Por ello es importante entender los factores humanos que explican la distribución y abundancia de las especies, ya que este conocimiento puede ayudarnos a enfocar los esfuerzos epidemiológicos. Son animales con una dieta muy amplia y variada depredando principalmente en frutos y aprovechando también, según los lugares en los que habita, raíces, cactáceas, tubérculos, rizomas, semillas y brotes. Entre los alimentos se encuentran insectos, arañas, lombrices, reptiles, anfibios, huevos, pequeños mamíferos y hasta carroña. Comprobado que el ciclo doméstico Trichinella spiralis se encuentra presente en los departamentos de Capayán, La Paz y Tinogasta(6) conviviendo en estrecha afinidad con animales silvestres, es necesario comprobar si estos se encuentran parasitados participando del ciclo. En el marco del Proyecto de Voluntariado Universitario: “Alternativa paralela al diagnóstico de trichinellosis dirigida a grupos comunitarios empobrecidos” el objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de Trichinella spiralis, en el tejido muscular de animales silvestres. Revista Electrónica Iberoamericana de Educación en Ciencias y Tecnología — Volumen 2, Número 1, Julio 2010. Página 158 — Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca Desarrollo El presente trabajo se llevó a cabo con carne de un animal capturado en silvestría en el departamento La Paz, provincia de Catamarca, ubicado aproximadamente en los 29º de latitud Sur y 65º de longitud oeste. De acuerdo a las recomendaciones de la International Commission on Trichinellosis (ICT)(3) se procesaron 10g de material extraído de los músculos estriados del brazuelo de un pecarí, con el método de Digestión Artificial Rápida (Pepsina 1:10.000), por ser la técnica directa más sensible para detectar cargas iguales o menores a una larva por gramo de músculo(12). La elección del método de la digestión artificial se basa en su bajo costo, su celeridad y su alta sensibilidad ya que detecta menos de una larva por gramo de carne. La sensibilidad de este método es tal que detecta en un pool de 100 muestras (un gramo por muestra), una larva por gramo y en un pool de cinco muestras (20 gramos por muestra) determina la presencia de 0,01 larvas por gramo. La sensibilidad de esta prueba aumenta considerablemente cuando grandes cantidades de tejido están disponibles para la digestión(8). Se utilizaron dos métodos para la búsqueda e identificación de las larvas. Para el uso del examen directo de carne del pecarí se tomaron submuestras de pequeño tamaño. Los fascículos se comprimieron entre placas de vidrio hasta volverlos translúcidos y se examinaron en busca de larvas utilizando microscopio óptico. Paralelamente el tejido muscular se digirió con fluido gástrico artificial para permitir la liberación de las larvas vivas de los músculos. Se colocaron 10 gramos de muestra de tejido de los músculos del brazuelo en un litro de fluido gástrico artificial, conteniendo pepsina al 1% (Anedra) (concentración 1/10.000 formulada por estándares nacionales) y ácido clorhídrico al 1% (0,12 N final). Se removió la mezcla con un agitador magnético Revista Electrónica Iberoamericana de Educación en Ciencias y Tecnología — Volumen 2, Número 1, Julio 2010. Página 159 — Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca a 44°C durante 2 horas. Después de dejar sedimentar durante otros 15‐20 minutos, se vertieron en placas de Petri y se examinaron. Resultados De las muestras procesadas mediante la técnica de digestión artificial se lograron aislar 0,1 larvas por gramo del material extraído de los músculos flexores y extensores del miembro anterior. Las muestras examinadas en forma directa entre dos placas de vidrio, dieron resultado negativo. Discusión La trichinellosis es una enfermedad endémica en Catamarca como lo demuestran los diagnósticos serológicos positivos de pobladores (n=9) y porcinos (n=14) de esta provincia encontrados por tamizaje en muestreos al azar procesados en el Instituto Malbrán(7). Este estudio reporta una nueva especie infectada con trichinellosis en Catamarca. El incremento progresivo de la casuística y especies involucradas probablemente se deba a un mejor control en áreas rurales, mayor sensibilidad en el diagnóstico y finalmente mejor acceso a centros de referencia. En vista de los excelentes resultados obtenidos con la Técnica de Digestión Rápida al compararla con otras, debería ser implementada por todos los actores de los centros de salud(3). Los animales silvestres (carnívoros u omnívoros) presentan un doble interés de estudio, primero valorar la biomasa de Trichinella y el Revista Electrónica Iberoamericana de Educación en Ciencias y Tecnología — Volumen 2, Número 1, Julio 2010. Página 160 — Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca riesgo de su introducción en el ciclo domestico y segundo estudiar la eventual presencia en las especies silvestres de una Trichinella distinta de T. spiralis, como ha sido reportada en nuestro país.(5). Conclusión Los resultados obtenidos en este estudio comprueban la existencia de larvas intramusculares de Trichinella spiralis en pecaríes (Tayassu tajacu) capturados en la provincia de Catamarca. El riesgo representado por pecaríes infectados con trichinellosis para la población humana que consume carne de caza demuestra la diseminación de la infección en distintas especies animales. A partir del hallazgo, los conceptos epidemiológicos deberán ser modificados en nuestra provincia y pensar que la enfermedad no sólo se trata de una simple forma de infección con carne de cerdo, sino que encontramos un complejo patrón de transmisión. Si trichinellosis fue considerada como una enfermedad esporádica, este estudio sugiere que la infección debe ser contemplada como una importante infección parasitaria. Debe considerarse seriamente y a corto plazo la ejecución de programas de control y prevención orientados a interrumpir el ciclo biológico del parásito, complementados con educación sanitaria de los pobladores. Agradecimientos Los autores agradecen al Señor Pablo López que obtuvo la pieza y cedió parte de la misma para realizar los estudios correspondientes. Revista Electrónica Iberoamericana de Educación en Ciencias y Tecnología — Volumen 2, Número 1, Julio 2010. Página 161 — Autor : Aislamiento de Larvas de Trichinella spp. en Pecarí (Tayassu tajacu) de Icaño, Departamento La Paz, Catamarca Referencias Bibliográficas 1. Campbell, W.C. Trichinella and Trichinellosis. Plenum Press. 1983. New York and London. 2. Cháves Guajardo, E.G., Saldivar Elías, S., Muñoz Escobedo, J.J., Moreno García. Trichinellosis una zoonosis vigente. Rev. Elect. Vet. 2006; Vol. VII (5) pp 1‐19. 3. Gamble, R.H., Bessonov, K., Cuperlovic, A.A., Gajadhar, F., Van Knapen, K., Noecker, H., Zhu, X. International Commission on Trichinellosis. Recommendations on methods for the control of Trichinella in domestic and wild animals Intended for human consumption. Veterinary Parasitology. 2006. Vol. 93 (3, 4) pp 393‐408. 4. Enciclopaedia Britannica Publishers. Macropedia. 1991. Vol XI, pp 266‐267. 5. 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