INSTRUCCIONES DE USO Revisión 1 Feb. 2014 CALDO SELENITO CISTINA Caldo Selenito Cistina presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1220 Caldo Selenito Cistina presentación Tubos 10 ml Caja 20 tubos. Catálogo 4210 Caldo Selenito Cistina presentación Tubos 20 ml Caja 20 tubos. Catálogo 4032 USO PREVISTO El Caldo Selenito Cistina está recomendado para el enriquecimiento selectivo de Salmonella en muestras de heces FORMULA EN g/l Fosfato Sódico 10.00 Selenito de Sodio 4.00 Mezcla de Peptonas 5.00 L-Cistina 0.01 Lactosa 4.00 Final pH 7.0 ± 0.2 a 25ºC PREPARACION Caldo Selenito Cistina presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1220 (Medio deshidratado) Suspender 23 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar ligeramente, agitando con frecuencia hasta disolver el medio. Distribuir en tubos y esterilizar exponiendo el medio al flujo de vapor durante 5 minutos. El exceso de calor es perjudicial. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Si se va a usar el caldo inmediatamente, no es necesario esterilizarlo. Los tubos esterilizados pueden almacenarse refrigerados durante varios meses. El color del medio preparado es de ámbar claro a ámbar ligeramente oscuro. Después de un gran periodo de almacenamiento del medio deshidratado, el color del medio preparado, puede cambiar de rojizo a rojo. El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar el medio. Precaución: Este medio es toxico si se inhala o se llega a poner en contacto con la piel. Llevar guantes y/o protección en los ojos, cara. Caldo Selenito Cistina Tubos 10 ml Caja 20 tubos. Catálogo 4210, Tubos 20 ml Caja 20 tubos. Catálogo 4032 (Medios preparados). Listo para su uso. PRINCIPIOS Y APLICACIÓN CALDO SELENITO CISTINA es una modificación de la formula de Leifson para el caldo selenito de sodio. Leifson descubrió que el selenito era útil para permitir el crecimiento de especies de Salmonella mientras reducía el crecimiento de enterococos y coli fecales. La adición del amino ácido cistina establece un potencial redox que parece ser muy bueno para el enriquecimiento y recuperación de Salmonella y algunas cepas de Shigella presentes en numero limitado en heces. El Caldo Selenito Cistina se recomienda para la detección de Salmonella en las etapas no agudas de enfermedad, cuando el microorganismo aparece en bajo número en heces, y para estudios epidemiológicos en la detección del microorganismo en pacientes asintomáticos y convalecientes. La mezcla de peptonas son Fuentes de nitrógeno, vitaminas y amino ácidos esencial para el crecimiento. La Lactosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía, el Selenito de sodio inhibe las bacterias Gram-positivas y la mayoría de las bacterias Gram-negativas, excepto Salmonella. El Fosfato de Sodio es el Buffer. L-Cistina se incorpora para favorecer la recuperación de Salmonella. 1 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com TIPO DE MUESTRAS Heces La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se lleva a cabo según Recomendaciones y Standards en Microbiología Clínica. PROCEDIMENTO Añadir 1-2 gramos de la muestra fecal a 10-15 ml de Caldo Selenito Cistina y mezclar bien hasta conseguir una solución homogénea. 1.- Inocular e Incubar en condiciones aeróbicas a 35 ± 2°C durante 18-24 horas. 2.- Después de incubación, Subcultivar en placas de Agar MacConkey (Cat. 1052) ó Agar SS (Cat. 1064) ó Agar XLD (Cat. 1080) ó Agar Cromogenico Salmonella (Cat.1122). 3.- Incubar a 35 ± 2°C durante 18 – 24 horas. 4.- Lectura e interpretación de resultados CONTROL MICROBIOLOGICO Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de células tipo, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y durante 18-24 horas. Después de incubación subcultivo en Placas de Agar MacConkey. Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Salmonella choleraesuis ATCC 12011 Salmonella typhi ATCC 6539 Salmonella typhimurium ATCC 14028 Inoculo CFU 102-103 102-103 102-103 102-103 Desarrollo Parcialmente inhibido Bueno Bueno Bueno Colonias en Agar MacConkey Rosa con precipitado biliar Incolora Incolora Incolora BIBLIOGRAFIA Leifson E. (1936) Am. J. Hyg 24: 423-432 American Public Health Association (1976) Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. Fricker CR. (1987) J. Appl. Bact. 63: 99-1 16. Diagnostico in vitro Solo para uso profesional Ver inst Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com ALMACENAMIENTO Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación. Utilizable hasta la fecha de caducidad. 8ºC 2ºC Tubos preparados almacenar entre 2-8°C Utilizable hasta la fecha de caducidad. Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 2 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com