MANUAL DE PROCEDIMIENTOS UNIDAD DE ADMINISTRACIÓN TALLERES Y LABORATORIOS PROGRAMA INDIVIDUAL DE PRÁCTICAS Código: LAB-PO-01-01 Revisión: 1 Página: 1 de 5 CICLO ESCOLAR: 2013-2014N NOMBRE DEL DOCENTE: DENYCE OYUQUI MOO PUC CARRERA(S): IIAL ASIGNATURA: Microbiología de alimentos SEMESTRE: 5 GRUPO(S): A PARCIAL: Primero NOMBRE DE LABORATORIO O DE LA INSTITUCIÓN EN CASO DE PRÁCTICA EXTERNA: NÚMERO Y NOMBRE DE LA PRÁCTICA: No 1 Determinación de microorganismos indicadores. Parte 1 “ lavado y esterilización de materiales” FECHA Y HORA PROPUESTA DE LA PRÁCTICA: 11 septiembre de 2013 de 14 a 17 horas MATERIALES REQUERIDOS: para 6 equipos Tela de gasa Papel aluminio Papel estraza Vaso de precipitado de 1000ml Sanitas Material para la higiene y desinfección de áreas de trabajo. Cerillo Espátula Probeta de 100ml Cinta maskin Cinta testigo MANUAL DE PROCEDIMIENTOS UNIDAD DE ADMINISTRACIÓN TALLERES Y LABORATORIOS PROGRAMA INDIVIDUAL DE PRÁCTICAS Código: LAB-PO-01-01 Revisión: 1 Página: 6 Cajas de petri 3 Pipetas de 1ml 3 Pipetas de 5 ml 3 Pipetas de 10 ml 1 Perilla de seguridad 24 Tubos de dilución con rosca o tapón con torunda 24 Tubos durjan 3 matraces erlenmeyer de 250ml Agitador magnético Varilla de vidrio Gradilla 2 Charolas para contener materiales EQUIPO REQUERIDO: para 6 equipos Refrigerador (para almacén de materiales y medios) Autoclave SE DEBE ANEXAR LA DESCRIPCIÓN DEL DESARROLLO DE LA PRÁCTICA. ______________________ __________________ NOMBRE Y FIRMA DEL DOCENTE. FECHA DE ENTREGA 2 de 5 MANUAL DE PROCEDIMIENTOS UNIDAD DE ADMINISTRACIÓN TALLERES Y LABORATORIOS PROGRAMA INDIVIDUAL DE PRÁCTICAS Código: LAB-PO-01-01 Revisión: 1 Página: Procedimiento a. Método para coliformes totales: Preparamos diluciones hasta 10-3. Sembramos dos, tres o cinco tubos por cada dilución, según sea el caso. o Los resultados se dan en por gr o mL 3 de 5 MANUAL DE PROCEDIMIENTOS UNIDAD DE ADMINISTRACIÓN TALLERES Y LABORATORIOS PROGRAMA INDIVIDUAL DE PRÁCTICAS Código: LAB-PO-01-01 Revisión: 1 Página: 4 de 5 o En el caso de agua se sigue de la otra forma: o Cuando se trate de aguas, los resultados se darán por 100 mL. o Luego, incubar a 35 ºC ± 1 por 24 h. o Realizar la 1ra lectura (determinar la presencia de gas). Ésta se observa en las campanas. o Los tubos que no sean positivos se incuban por otras 24 h más. o b. Métodos para coliformes fecales: o Para coliformes fecales se utilizan dos métodos: o En el Primer Método se cogen los tubos positivos del caldo Lauril Sulfato Triptosa y se lleva una asada al caldo EC utilizando una asa que tenga 3 mm de diámetro. o Luego, estos tubos se incuban a 45.5 ºC ± 0.2, en baño María con agitación constante por 24 h. o Si hay gas a las 24 o 48 h. es positivo para coliformes fecales. o El Segundo Método es la llamada prueba de Mackenzie. o En esta se usa el caldo Brila mas agua Peptonada. MANUAL DE PROCEDIMIENTOS UNIDAD DE ADMINISTRACIÓN TALLERES Y LABORATORIOS PROGRAMA INDIVIDUAL DE PRÁCTICAS o Código: LAB-PO-01-01 Revisión: 1 Página: 5 de 5 Se parte del caldo MacConkey, los tubos positivos de la prueba de coliformes totales se siembran en este caldo, si aquí vuelve a salir positivo se le realizan las dos pruebas sgtes: o Sólo se tomará esta prueba como positiva si los dos tubos (caldo Brilla y caldo Peptonado) resultan positivos. Al tubo con caldo peptonado se le agrega el reactivo de Kovacs para hacer la prueba de Indol. Para ver coliformes termorresistentes, de los tubos que hayan salido positivos se siembra una asada en agar MacConkey y se aíslan las colonias características. De los tubos positivos se los siembra en otros tubos en caldo EC con campana de Durham. Preparación de agua peptonada Peptona 1 g Cloruro de sodio 8.5 g Agua 1Litro Mezclar los ingredientes y ajustar a un ph de 7 con cloruro de sodio .1N Esterilizar por 15 minutos http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/documentos/lcf/aguilar_g_ae/apendiceC.pdf