TEMA 3 • EL DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO • FUNDAMENTOS DEL DIAGNÓSTICO DE LAS INFECCIONES DE VIAS URINARIAS METODOLOGÍA UTILIZADA PARA EL DIAGNÓSTICO DE INFECCION URINARIA DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DIAGNOSTICO DIRECTO EXAMEN MICROSCÓPICO M . CAMPO CLARO (100-1000 aumentos) DIAGNOSTICO DIRECTO EXAMEN MICROSCÓPICO M . CAMPO OSCURO Treponema pallidum DIAGNOSTICO DIRECTO EXAMEN MICROSCÓPICO M . CONTRASTE FASES DIAGNOSTICO DIRECTO EXAMEN MICROSCÓPICO M . FLUORESCENCIA DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO • DIRECTO 1. EXAMEN MICROSCÓPICO 2. CULTIVO 3. DETECCIÓN DE ESTRUCTURAS MICROBIANAS 4. MOLECULAR (ADN, RNA..) EXAMEN MICROSCÓPICO DIRECTO • Examen en fresco • Examen tras Tinción – Tinciones simples: azul de metileno… – Tinciones específicas: flagelos, esporas, cápsulas… – Tinciones diferenciales: Tinción de Gram y Ziehl-Neelsen TINCIÓN DE GRAM • Morfología bacteriana • Clasificación en – Gram positivas – Gram negativas DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DIRECTO 1. EXAMEN MICROSCÓPICO 2. CULTIVO 3. DETECCIÓN DE ESTRUCTURAS MICROBIANAS 4. MOLECULAR (ADN, RNA..) DIAGNÓSTICO DIRECTO CULTIVO DIAGNÓSTICO DIRECTO CULTIVO • MEDIOS USUALES – Agar Mueller-Hinton • MEDIOS ENRIQUECIMIENTO – Agar Sangre • MEDIOS SELECTIVOS – Agar MacConkey (Sales biliares) – Agar Sabouraud (Cloranfenicol, gentamicina) • MEDIOS DIFERENCIALES – Agar Mac Conkey DIAGNÓSTICO DIRECTO CULTIVO • INCUBACIÓN – Temperatura 35-37ºC – Atmósfera • aerobia • Anaerobia • Microaerófila Agar sangre Agar sabouraud Agar MacConkey DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DIRECTO 1. EXAMEN MICROSCÓPICO 2. CULTIVO 3. DETECCIÓN DE ESTRUCTURAS MICROBIANAS (ANTÍGENOS) 4. MOLECULAR (ADN, RNA..) DETECCIÓN DE ANTIGENOS MICROBIANOS Aglutinación látex DETECCIÓN DE ANTIGENOS MICROBIANOS Inmunocromatografía DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO • DIRECTO 1. EXAMEN MICROSCÓPICO 2. CULTIVO 3. DETECCIÓN DE ESTRUCTURAS Y METABOLITOS 4. MOLECULAR (ADN, ARN) DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO MUESTRA CLÍNICA ¡CALIDAD! DIAGNÓSTICO DE UNA ENFERMEDAD INFECCIOSA Paciente Historia clínica Sospecha de infección Recogida de muestra clínica Laboratorio de Microbiología DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO • FUNDAMENTOS DEL DIAGNÓSTICO DE LAS INFECCIONES DE VIAS URINARIAS METODOLOGÍA UTILIZADA PARA EL DIAGNÓSTICO DE INFECCION URINARIA INFECCIONES URINARIAS FRECUENCIA 10% de la población Hospital: causa mas frecuente de infección Extrahospitalario: segunda en frecuencia tras las infecciones respiratorias DEFINICIÓN. ITU “Presencia y multiplicación de microorganismos en el tracto urinario con lesión tisular” EPIDEMIOLOGÍA Población (%) SEXO-EDAD Edad Varones Mujeres INFECCIONES URINARIAS • VIA DE LLEGADA: – SANGUINEA – ASCENDENTE • Mujer: uretra mas corta • Patógenos intestinales (BGN entéricos) MECANISMOS PATOGÉNICOS Infección del riñon (pielonefritis) Infección vejiga (cistitis) Colonización uretral Flora intestinal (E. coli, Proteus spp.) Piel (S.saprophyticus) MECANISMOS PATOGÉNICOS MICROORGANISMO. FACTORES DE VIRULENCIA Fimbrias o pili - tipo “1” se unen a celulas del epitelio vesical - “P” se unen a receptores específicos en riñon Hemolisinas Antígeno capsular K MECANISMOS PATOGÉNICOS MECANISMOS DEFENSIVOS DEL HUÉSPED • ORINA : pH ácido, Urea elevada, Osmolaridad • VEJIGA: – Vaciamiento completo • PRÓSTATA – Capacidad bactericida de la secreción prostática ETIOLOGÍA • ITU no complicada: monomicrobianas – Enterobacterias: • E. coli, P. mirabilis, K. pneumoniae • ITU complicada: polimicrobianas – Enterobacterias: • Serratia spp. Enterobacter spp. – Pseudomonas spp. DIAGNÓSTICO RECOGIDA - Micción espontánea - Bolsa colectora CHORRO MICCIONAL MEDIO DIAGNÓSTICO DIAGNOSTICO GUARDAR NEVERA 4ºC DIAGNÓSTICO 1. ORIENTATIVO - SEDIMENTO URINARIO - Bacteriuria (Bacterias) - Piuria (Leucocitos) - TIRAS REACTIVAS 2. UROCULTIVO (DEFINITIVO) Sembrar un volumen conocido de orina y cuantificar tras 24 h de incubación, el número de colonias que han crecido SEDIMENTO URINARIO RECUENTO INTERPRETACIÓN - Criterios de Kass obsoletos - Sexo, clínica, sintomatología, método recogida.. - Significativos recuentos desde: 102-105 UFC/ml