Neurodegeneracion cambios conformacionales de proteinas Pedro

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Enfermedades priónicas (en qué estamos hoy?)
Neurodegeneración
Pedro Piccardo
University of Edinburgh
Agosto de 2010
Inst Neurol MVD Agosto 2010 vs Inst Neurol
Introduccion
Salud Publica
Investigacion
Futuro
Idiopatica (esporadica) Enfermedad de Creuzfeldt-Jakob (CJD), insomnia fatal (IF)
Familiar
CJD, Gerstmann-Sträussler-Scheinker (GSS), IFF
Iatrogenica
CJD
Zoonosis
vCJD
sCJD 60 aňos -
Demencia, mioclonias (4 meses)
vCJD 28 aňos -
Sintomas neuropsiquiatricos, parestesias, ataxia (14 meses) [madre/hijo]
GSS 20- >60 aňos - Ataxia, demencia (meses / aňos)
- EEG
- LCR (14.3.3)
- Imagenes
MRI - Updated clinical diagnosis criteria for sCJD (Brain 2009)
PET- Visualization of prion aggregates in the living brain of GSS pts (Brain Pathol 2010)
- Estudio genetico
(PRNP)
- Estudio bioquimico
(WB)
- Histopatologia
(biopsia, autopsia)
CJD mimicking CBD – J Neurol 2005
Atypical CJD mimicking FTD - J Neurol Sci 2008
Stoke-like presentation of CJD – Cerebrovasc Dis 2004
CJD in two adolescents – J N N Psych 2006
Alzheimer’s-type neuropathology 28 yrs dural graft (iCJD) - J N N Psych 2006
IADC – 17 pacientes con GSS presentacion atipica:
10 diag. AD, PD, OPCA, CBD, PSP
8 sin degeneracion espongiforme
MELAS that induces subacute dementia mimics CJD - Int Med 2004
The Tower of Babel' by Pieter Brueghel the Elder, 1563
porteina prion normal PrPC
poteina prion anormal PrPSc - PrPRes - PrPCJD - PrPGSS - PrPD - PrP* - PrPTSE
degeneracion espongiforme (HE)
proteina prion (PrP) “tipo sinaptico”
amiloide (tioflavina-s)
sin degeneracion espongiforme (HE)
NO SPONGIFORM DEGENERATION
deposito PrP “placa”
vCJD
transfundido
portador asintomatico
donador de sangre / f-VIII
vCJD
Que diferencia a estas enfermedades de otras neurodegenerativas?
Teoria prion: proteina infectante
PrPTSE es el agente
PrPTSE insoluble / resistente a proteasas
PrPC
PrPTSE
PrPTSE (agente) implica la presencia de enfermedad
Test diagnosticos basados en la deteccion de PrPTSE
Enfermedades de baja prevalencia - test diag alta sensibilidad y especificidad
PrPTSE correlaciona con infectividad
… pero no siempre……
Nature 1992, Science 1997, J.Virol 1993, EMBO 1999, PNAS 2007, JBC 2007
Hipotesis
Grupo heterogeneo de enfermedad - diverso mecanismo patogenico
PrPC fundamental para el desarrollo de enfermedad
Existen isoformas de PrPTSE no asociadas a infectividad?
ADN transcripcion ARN
translacion
PROTEINA
plegamiento proteinas proceso seleccion biologico para lograr mejor funcion
principio de evolucion basado en conservacion de energia
CONTROL DE CALIDAD
chaperones
proteasoma
(ubiquitina)
lisosoma
(autofagia)
(REPARACION)
(DEGRADACION)
Proteinopatias
ER (serpinopathies)
Intranuclear (ubiquitin-huntingtin)
Citoplasmatico (synucleinopathies)
(tauopathies)
Extracelular (Aβ – PrPTSE)
• Perdida de funcion?
•Ganancia de funcion toxica ?
• Cual es la molecula neurotoxica?
• Amiloidogenesis mecanismo protector?
• Que produce la muerte neuronal?
• Cual es la participacion de la glia en lam patogenia de la enfermedad?
• Neurodegeneracion - Infeccion - uno o dos mecanismos patogenicos?
• Prionopatias? (enfermedades infecciosas)
• Proteinopatias? (enfermedades degenerativas)
todos los modelos son malos - algunos son utiles
modelos celulares vs modelos animales
Transgenesis
PrP rec
PrP-Ko
integracion multiple
PrP endo PrP endo
PrP endo
PrP rec
recombinacion homologa
PrP rec
PrP 102L integracion multiple
PrP 102L normo-expresion
PrPTSE
Sobre-expresion de PrPP102L produce enfermedad – expresion normal de PrPP102L no
Enfermedad por expresion de PrP P102L ? Por sobre-expresion de PrP (mutada o no) ?
PrPTSE
Tg P102L
sobre-expresion
PrPTSE
PrPTSE
Tg P102L
normo-expresion
Amiloidogenesis, sin enfermedad neurologica, sin degeneracion espongiforme
Probablemente sobre-expresion de PrP, NO la mutacion producen enfermedad en este modelo
Que efecto produce la sobre-expresion - PrP “normal” (PrPC) ?
PrPTSE
Sobre-expresion PrPC (sin mutacion) produce enfermedad neurologica no transmisible
Precausion con la interpretacion de resultados en modelos con sobre-expresion
Reproducen los modelos animales la enfermedad humana?
J. Neuroscience 2008
Intento de transmision de enfermedad prionica (humana) a modelo Tg - (I)
GSS P102L
NO SPONGIFORM DEGENERATION
Amyloidogenesis, sin enfermedad neurologica, sin degeneracion espongiforme
Modelo para estudiar la formacion de amiloide – pero NO para estudiar GSS
PNAS 2007
Intento de transmision de enfermedad prionica (HUMANA ) a modelo Tg - (II)
GSS P102L
Tranmision de enfermedad neurologica con degeneracion espongiforme
Es posible reproducir enfermedad - degeneracion espongiforme
Por-que algunas enfermedades prionicas son transmisible y otras no?
- Modelo animal usado no es el adecuado?
- Bajo titulo de infectividad en algunas variantes?
- PrPTSE no infeccioso?
IMPLICANCIA para el desarrollo de tests diagnosticos basados en deteccion de PrPTSE
Son las enfermedades prionicas con degeneracion espongiforme “mas” transmisibles?
Modelo de enfermedad familiar sin degeneracion espongiforme
familias con insercion de extra repeticiones en PrP – fenotipo GSS
A
C
PG14
B
D
PG14
E
PG14
PG14
Encefalopatia no transmisible con acumulacion de PrPTSE
PrPTSE se acumula en SNC sin formar placas de amiloide
Que pasa a nivel sistemico?
Neuron 1998, J Virol 2003, PNAS 2005
Expresion de PrP mutada (PG14) y patologia periferica
expresion
insolubilidad
resistencia a proteasas
PrPC soluble, sensible a proteasa
PrPTSE insoluble, resistente a proteasa
Acumulacion de PrPTSE a lo largo de la vida
control
Nervio periferico
sin deg. axonal
sin desmielinizacion
control
miopatia primaria - control (A,B) - nucleos centrales (C-F) fibras necroticas (D,E) - variacion tamaňo fibras (E)
PG14
- Evaluacion musculo en pacientes c/enfermedades prionicas
- Formacion de PrPTSE en la periferia
satellite cell
myofibers
PrPC
macrophage
PrP00 myoblast
PrP00 < cytokines
< differentiation
Mol Cell Biol-August 2010 (Stella R et al.) “Cellular prion protein promotes regeneration of adult muscle tissue”
Que utilidad tienen estos modelos experimentales?
- Estudiar neurodegeneracion sin infeccion
(muerte neuronal, gliosis reaccional, perdida sinaptica)
- Modelos con sobre-expresion
(cuidado en interpretacion de datos)
- Formacion de amiloide como posible mecanismo protector…
- Oligomeros las moleculas mas toxicas?
- Disociacion de amiloide podria ser contraproducente como terapeutica
- Patologia periferica
• PrPTSE no siempre asociado a infectividad
• Cual es la funcion de PrPC
Funcion de PrPC
- Neuroproteccion
Prion protein with an octapeptide insertion has impaired neuroprotective
activity in transgenic mice
Li A, Piccardo P, Barmada SJ, Ghetti B and Harris DA
THE EMBO JOURNAL (2007) 26, 2777 - 2785
Futuro
Role de PrPC en neurodegeneracion
Expresion condicional de PrPC en neuronas
Dextran sulfato
Pentosan sulfate
Heparan sulfato
Rojo Congo
Suranim
Antibioticos
Inmunomodulacion
Ningun tratamiento efectivo hasta el momento
Indiana University, US
Washington University, US
University of Kentucky, US
University of Edinburgh, UK
University of Leeds, UK
NIH, USA
BBSRC, UK
MRC, UK
Alzheimer’s Trust, UK
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