Documento descargado de http://www.elsevier.es el 17/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. Acta Otorrinolaringol Esp. 2011;62(5):355—362 www.elsevier.es/otorrino ARTÍCULO ORIGINAL Expresión de SDHB en el tumor de Warthin Beatriz Vera-Sirera a,∗ , Judith Pérez-Rojas b , Cecilia López-Valdivia b , Enrique Jiménez b , Diego Collado-Martín c y Francisco Vera-Sempere b,d a Departamento de Estomatología, Universidad de Valencia, Valencia, España Servicio de Anatomía Patológica, Hospital Universitario La Fe, Valencia, España c Servicio de Otorrinolaringología, Hospital Universitario La Fe, Valencia, España d Departamento de Patología, Universidad de Valencia, Valencia, España b Recibido el 9 de febrero de 2011; aceptado el 27 de marzo de 2011 Disponible en Internet el 10 de mayo de 2011 PALABRAS CLAVE SDHB; Tumor de Warthin; Oncocitos; Inmunohistoquímica ∗ Resumen Introducción: El objetivo del presente estudio es analizar la expresión de la succinodeshidrogenasa B (SDHB), enzima perteneciente al complejo mitocondrial II, en el tumor de Warthin analizando su relación con los cambios oncocíticos, un dato morfológico constante en este tipo tumoral. Material y métodos: En una serie de 10 tumores de Warthin, todos parotídeos, se analizó en los especímenes de resección tumoral la expresión de SDHB utilizando un anticuerpo monoclonal comercializado. Resultados: Los 10 tumores afectaron a 10 varones (edad media: 64, 2 años; rango: 40-80), todos ellos con antecedentes de hábito tabáquico, y 2 con afectación bilateral metacrónica. Dos pacientes presentaron de forma asociada carcinomas del tracto urotelial. El estudio de la SDHB mostró en todos los casos acusada reactividad (++/+++) del componente epitelial oncocítico, así como del citoplasma de los conductos estriados del tejido parotídeo no tumoral. Esta expresión no se vio influida por el rango de edad, la intensidad del hábito tabáquico, ni por el carácter bilateral de los tumores. Uno de los tumores presentó focos de metaplasia escamosa con negatividad a la SDHB en esa localización. Discusión y conclusiones: La constante e intensa reactividad de la SDHB encontrada en nuestras observaciones, en las células oncocíticas, orienta a considerar que los cambios oncocíticos en el tumor de Warthin no se asocian a una actividad enzimática defectiva en este componente del complejo mitocondrial II. La reactividad de SDHB se conforma como un marcador adicional de la diferenciación oncocítica existente en el caso del tumor de Warthin, aspectos ambos previamente no descritos. © 2011 Elsevier España, S.L. Todos los derechos reservados. Autor para correspondencia. Correo electrónico: vera fra@gva.es (B. Vera-Sirera). 0001-6519/$ – see front matter © 2011 Elsevier España, S.L. Todos los derechos reservados. doi:10.1016/j.otorri.2011.03.007 Documento descargado de http://www.elsevier.es el 17/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. 356 KEYWORDS SDHB; Warthin’s tumour; Oncocytes; Immunohistochemistry B. Vera-Sirera et al SDHB expression in Warthin’s tumour Abstract Introduction: Succinic dehydrogenase subunit B (SDHB) is an enzyme belonging to the mitochondrial complex II. The aim of this study is to analyse SDHB expression in a series of Warthin’s tumours, studying its relationship with oncocytic changes, constantly present in this form of tumour. Material and methods: In resection tumour specimens from a series of ten Warthin’s tumours (all from the parotid gland), immunohistochemical expression of SDHB was analysed using a commercially-available monoclonal antibody. Results: The Warthin’s tumours studied affected 10 men (mean age: 64.2 yrs, range 40-80), all with smoking habits, and 2 with metachronous bilateral involvement. Two patients presented associated urothelial carcinoma. Our SDHB study showed marked reactivity (++/+++) in all cases in the oncocytic epithelial component and also in striated duct cytoplasm (+) from non-tumorous parotid tissue. Expression was not influenced by age, smoking intensity or bilateral character. One of the tumours showed squamous metaplasia foci with SDHB-negativity at this level. Discussion and conclusions: Due to the constant and intense SDHB reactivity in oncocytic cells in our observations, oncocytic changes are not considered to be associated with defective enzyme activity in the mitochondrial complex II. Strong SDHB reactivity is an additional marker of oncocytic changes in Warthin’s tumour. Neither of these facts has been described previously. © 2011 Elsevier España, S.L. All rights reserved. Introducción El tumor de Warthin es un frecuente tumor benigno de las glándulas salivales, que representa en algunas series hasta el 30% de todos los tumores epiteliales primarios de la parótida1 , que es la localización más frecuente2 . La morfología tumoral es muy característica, mostrando un componente epitelial con proyecciones papilares y con transformación quística, y un componente estromal linfoide, con centros germinales2,3 , siendo constante la presencia de células epiteliales luminales de carácter oncocítico. El término oncocítico describe un cambio celular consistente en un agradamiento de la superficie citoplasmática, acompañada de una marcada eosinofilia, con carácter granular, mostrando núcleos hipercromáticos, mostrándose como células de amplio volumen, con límites celulares bien definidos3,4 . Este cambio oncocítico es el resultado de una masiva presencia de mitocondrias, detectables ultraestructuralmente5 o mediante análisis inmunohistoquímico6 . La succinodeshidrogenesa (SDH) es una enzima mitocondrial, perteneciente al complejo enzimático II, con un papel crucial en el metabolismo energético celular, estando implicada en la cadena respiratoria aerobia y en el ciclo del ácido tricarboxílico. Existen varias subunidades (A, B, C, D) de esta enzima, conociéndose que las mutaciones del gen de la SDH condicionan la base genética de los paragangliomas/feocromocitomas7,8 . Las mutaciones en el gen de la SDH producen una pérdida de actividad enzimática con desestabilización funcional en la cadena respiratoria mitocondrial, acompañándose de alteraciones en la morfología mitocondrial con numerosas mitocondrias gigantes9 , funcionalmente ineficaces10 , que explican la opcional apariencia oncocítica de estos paragangliomas/feocromocitomas11 . Recientemente se ha demostrado que el estudio de expresión únicamente de la subunidad B de la SDH es suficiente para establecer la existencia de cambios mutacionales, susceptibles de un cribado genético, en cualquiera de las subunidades de la SDH12 . En el presente trabajo nos planteamos explorar la expresión inmunohistoquímica de la SDHB en el tumor de Warthin, analizando si la presencia de cambios oncocíticos en esta forma tumoral está relacionada con una alteración en la expresión del complejo enzimático II mitocondrial. Material y metódos Se han estudiado los especímenes procedentes de la exéresis quirúrgica de una serie de 10 tumores de Warthin, afectando todos ellos a la glándula parótida, analizados a lo largo del último año en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital Universitario La Fe de Valencia. En todos los casos se obtuvieron los siguientes datos clinicopatológicos: edad, sexo, localización, antecedente tabáquico referido a n.◦ de cigarrillos/día (estratificando según el esquema seguido en el test de dependencia de Fagerström13 ) y el n.◦ de años del hábito, carácter bilateral, tipo de cirugía realizada y enfermedades asociadas en el momento de la cirugía. Todos estos datos se obtuvieron a través de la aplicación informática de historias clínicas MIZAR 2.0 utilizando el visor Luna de la Intranet del Hospital Universitario La Fe. En todos los casos se dispuso de las preparaciones histológicas originales sobre las que se estableció el diagnóstico, así como los correspondientes bloques de parafina. En cada caso se seleccionó un bloque de parafina que contuviera representación tumoral y tejido salival parotídeo no tumoral. Para la identificación de los cambios oncocíticos presentes en las muestras estudiadas, se realizó una tinción histoquímica de PTAH (hematoxilina ácida fosfotúngstica de Mallory) utilizando el kit DiaPath® (Martinengo-Italia), Documento descargado de http://www.elsevier.es el 17/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. Expresión de SDHB en el tumor de Warthin con incubación prolongada de 16-24 h de acuerdo con las recomendaciones de otros autores14 , así como 2 tinciones inmunohistoquímicas frente al anticuerpo antimitocondrial (Ac 113.1) (Ac Mo MU213-UC, clon 113-1- BioGenex® , San Ramón, CA, USA), empleado a dilución 1/80, y frente al anticuerpo antiperoxiredoxina (Prx-I) (clon Poly Prx-1, Alexis CoEnzo Life Science, Lausen-Switzerland) empleado a dilución 1/500. El anticuerpo antimitocondrial 113-1 empleado reconoce una proteína no glucosilada de 60 kDa presente en las mitocondrias, que permite identificar las células oncocíticas en diferentes tumores15 , incluyendo los de localización salival6 . Por su parte, el anticuerpo Prx-I reconoce una isoforma de proteínas implicadas en la detoxicación de peróxidos, como mecanismo de protección frente al estrés oxidativo, y que es sobreexpresado en las lesiones oncocíticas de glándula salival16 . Posteriormente, y como objeto del estudio, se llevó a cabo una técnica inmunohistoquímica frente a una subunidad de 30 kDa del complejo enzimático mitocondrial II utilizando un anticuerpo monoclonal de ratón anti-SDHB (clon 21A 11AE7) (Molecular Probes® -Invitrogen Co, CA, USA), utilizado a dilución 1/100 a pH 9, con un tiempo de incubación de 20 min. La inmunotinción fue valorada de forma semicuantitativa como negativa (-) o positiva y esta última se califico en +/++/+++ en función de la intensidad del marcado. Todas las inmunotinciones se realizaron utilizando un sistema de visualización Dako EnVisionTM Flex Plus utilizando el inmunoteñidor automático Dako Autostainer Link Plus (Dako® Denmark), utilizando como controles positivos secciones de hígado y miocardio (dada su riqueza mitocondrial) y como control negativo se omitió el anticuerpo primario, sustituyéndolo por tampón fosfato salino. Resultados Datos clinicopatológicos En la tabla 1 se señalan los datos clinicopatológicos de los 10 pacientes incluidos en la serie estudiada, diagnosticados todos ellos de tumor de Warthin, afectando a la glándula parótida. Se trataba de 10 pacientes, todos varones, de edades comprendidas entre 45 y 80 años, edad media de 64,2 años, existiendo tan solo 3 con una edad ≤ 50 años. Todos los pacientes referían antecedentes de hábito tabáquico, indicando 6 de ellos haber consumido > 20 cigarrillos/día y de los 4 pacientes restantes, dos referían un consumo entre 11-20 cigarrillos/día y 2 un consumo de ≤ 10 cigarrillos/día, si bien todos ellos señalaban un hábito mantenido superior a 20 años, manteniendo el consumo de tabaco 4 pacientes en el momento del diagnóstico. En ninguno de los pacientes, por el contrario, existían antecedentes de irradiación del área parotídea o de la región de cabeza y cuello. En todos los casos la cirugía practicada fue una parotidectomia superficial, a excepción de 3 casos en que se realizó una parotidectomía lateral parcial, dado el reducido diámetro de la lesión y su buena delimitación. En 6 pacientes la localización tumoral fue izquierda y en 4 fue la glándula parótida derecha la afectada, siendo la ubicación más frecuente (7 casos) el polo inferior del 357 Figura 1 Detección de los cambios oncocíticos presentes en el tumor de Warthin con la tinción de PTAH. Se aprecia una tinción granular azulada marcando el citoplasma de las células oncocíticas. (PTAH, x400.) lóbulo superficial parotídeo. En 2 enfermos existía constancia de afectación tumoral bilateral, de carácter metacrónico (4 y 8 años antes de la cirugía actual). Entre la enfermedad asociada presente en el momento del diagnóstico, cabe destacar que 3 pacientes (de 66, 70 y 80 años, respectivamente) presentaban concomitantemente trastornos del tracto urinario, con tumores de células transicionales de vejiga. Cuatro pacientes eran hipertensos en tratamiento clínico, y 3 presentaban diabetes tipo 2, uno de ellos con un síndrome metabólico dislipidémico asociado. Identificación de los cambios oncocíticos en el tumor de Warthin La tinción de PTAH y el empleo de los anticuerpos antimitocondrial (113.1) y antiperoxirredoxina (Prx-1) permitió en todas las observaciones detectar la presencia de los cambios oncocíticos característicos del tumor de Warthin. La tinción con PTAH mostró una tinción granular de carácter azulado en las células oncocíticas del tumor de Warthin (fig. 1) así como en el citoplasma de los conductos estriados de la glándula parótida no tumoral. Igualmente, el empleo de los anticuerpos utilizados (113-1 y Prx-I) permitió identificar de forma selectiva los cambios oncocíticos del componente epitelial del tumor, así como la presencia de estos cambios en los conductos estriados. La inmunotinción fue mucho más selectiva y específica en el caso del anticuerpo 113.1 (fig. 2) que con la anti-Prx-I, que se mostró más inespecífica, apreciándose a menudo cierta tinción no específica de fondo (fig. 3). Con los tres procedimientos (PTAH, 113.1 Documento descargado de http://www.elsevier.es el 17/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. 358 Tabla 1 Tumor de Warthin: datos clinicopatológicos Caso Sexo Edad Hábito tabáquicoa Localización Bilateralidad Cirugía Enfermedad asociadab 1 Varón 79 Sí (15 c/d) No Parotidectomía superficial 2 Varón 63 Sí (20-30 c/d) Sí (MT) Parotidectomía lateral parcial HTA, síndrome prostático DM tipo 2 ———- 3 Varón 77 Sí (20 c/d) Sí (MT) Parotidectomía superficial HTA, DM tipo 2 4 Varón 80 Sí (20 c/d) No Parotidectomía superficial Carcinoma vesical, células transicionales 5 Varón 47 Sí (20 c/d) No Parotidectomía superficial HTA 6 Varón 65 Sí (10 c/d) No Parotidectomía lateral parcial EPOC 7 Varón 45 Sí (20 c/d) No Parotidectomía superficial 8 Varón 70 Sí (20 c/d) No Parotidectomía superficial 9 Varón 66 Sí (20 c/d) No Parotidectomía superficial DM-2, dislipidemia Síndrome metabólico Carcinoma vesical Ictus trombótico Ca. vesical células transicionales 10 Varón 50 Sí (5 c/d) G. parótida izquierda Porción inferolateral G. parótida derecha Cola de la parótida G. parótida derecha Lóbulo superficial G. parótida izquierda Porción inferolateral G. parótida izquierda Lóbulo superficial G. parótida derecha Porción inferolateral G. parótida derecha Lóbulo superficial G. parótida izquierda Porción inferolateral G. parótida izquierda Lóbulo superficial G. parótida izquierda Porción inferolateral No Parotidectomía lateral parcial HTA DM-2: diabetes mellitus tipo 2; EPOC: enfermedad pulmonar obstructiva crónica; HTA: hipertensión arterial; S. prostático: síndrome prostático. a Hábito tabáquico referido a n.◦ de cigarrillos/día. b Enfermedad asociada en el momento de la cirugía. B. Vera-Sirera et al Documento descargado de http://www.elsevier.es el 17/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. Expresión de SDHB en el tumor de Warthin 359 Figura 4 Expresión inmunohistoquímica de la SDHB en los conductos estriados de glándula parótida no tumoral. El componente mitocondrial de estas células aparece marcado de forma específica. (SDHB, x200.) Figura 2 Tinción inmunohistoquímica con el anticuerpo antimitocondrial 113.1 mostrando marcaje específico de los cambios oncocíticos presentes en el tumor de Warthin. (Ac 1131, x150.) y anti-Prx-I) se comprobaron unos resultados mucho más marcados en el componente epitelial oncocítico que en los conductos estriados de la glándula no tumoral. Expresión de la succinodeshidrogenasa B La inmunotinción con la SDHB mostró en la glándula parotídea no tumoral un marcado granular (+) en el citoplasma de las células de los conductos estriados (fig. 4). En el tumor de Warthin existía un marcado granular específico (++/+++) de todo el componente epitelial (figs. 5 A y B y 7 A). La tinción, de carácter granular fino, delimitó todas las células epiteliales de citoplasma amplio de habito oncocítico (figs. 6 A y B). Tan solo en una observación en la que existían focos de metaplasia escamosa, en el componente epitelial del tumor, se observó ausencia de reactividad (fig. 7 B). En función de la intensidad de la inmunotinción en el componente tumoral del tumor 4 casos fueron calificados como de intensidad ++ y 6 casos como +++. En ninguno de los 10 casos estudiados se comprobaron zonas epiteliales de hábito oncocítico que fueran defectivas o mudas en la expresión de la SDHB, a excepción de las zonas de metaplasia escamosa (fig. 7 B). Al comparar la intensidad de la inmunotinción con la edad de los pacientes (referida a 2 grupos de edad: pacientes < 50 años y ≥ 50 años), con la cuantía en el hábito tabáquico señalado en todos los pacientes durante más de 10 años (referido a < 10, de 10 a 20, y > 20 cigarrillos/día) y el carácter de bilateralidad (tabla 2), no encontramos diferencias aparentes en la reactividad de la SDHB encontrada en estos diferentes grupos de pacientes con tumor de Warthin parotídeo. Discusión Figura 3 Expresión de Prx-I marcando los cambios oncocíticos presentes en el tumor de Warthin. (Prx-1, x400.) El tumor de Warthin es el segundo tumor benigno por frecuencia de las glándulas salivales2 , afectando fundamentalmente a la parótida, sobre todo en pacientes varones, en la sexta década de la vida2,3 . Su incidencia es mayor en pacientes con hábito tabáquico, influyendo la edad de comienzo de este hábito, su duración e intensidad (asociación dosis-respuesta), en la incidencia de este tumor benigno salival17 . El predominio tumoral en varones se ha intentado explicar por ser más frecuente en ellos el hábito tabáquico, indicándose un aumento de la incidencia tumoral en las mujeres en los últimos 50 años2 , en relación con el incremento de mujeres consumidoras de tabaco. En nuestra serie todos los pacientes fueron varones, con una edad media de 64,2 años, y todos con un hábito tabáquico de más de 20 años de duración, con un Documento descargado de http://www.elsevier.es el 17/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. 360 B. Vera-Sirera et al Figura 5 A y B. Secciones seriadas de un tumor de Warthin teñidas con H&E y con SDHB; apréciese el marcado del epitelio oncocítico del tumor y la clara diferenciación frente al componente linfoide. (HE y SDHB, x100.) Figura 6 A y B. Detalle de la expresión de SDHB en el tumor de Warthin marcando de forma granular y específica el citoplasma del epitelio oncocítico del tumor. (HE y SDHB, x250.) consumo superior a 20 cigarrillos/día en 6 de los pacientes. En el momento de la cirugía 2 pacientes presentaban concomitantemente tumores transicionales del tracto urinario, enfermedad tumoral asimismo asociada al hábito tabáquico18 . La localización tumoral más frecuente fue el polo inferior del lóbulo superficial parotídeo, aspecto que se ha relacionado con la mayor abundancia de ganglios intraparotídeos a ese nivel19 . La cirugía realizada en todos los casos fue de carácter limitado, en consonancia con la tendencia actual en el tratamiento quirúrgico de los tumores benignos, en especial en los de pequeño tamaño20 . Dos de los pacientes (20%) presentaban lesiones tumorales bilaterales de carácter metacrónico, y esta bilateralidad ha sido referida también en asociación a pacientes con fuerte consumo crónico de tabaco21 . Ninguno de nuestros pacientes refería sin embargo antecedentes de irradiación de la parótida Figura 7 A y B. La expresión de SDHB delimita el citoplasma de las células oncocíticas del tumor de Warthin que revisten una papila tumoral (A). Los focos de metaplasia escamosa (B) que opcionalmente pueden encontrarse en el interior del tumor, a diferencia del epitelio oncocítico, son negativas a SDHB. (SDHB 400, x250.) Documento descargado de http://www.elsevier.es el 17/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. Expresión de SDHB en el tumor de Warthin Tabla 2 Caso 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 361 Reactividad de succinodeshidrogenasa B en relación con los datos clínicos Edad >50 >50 >50 >50 ≤50 >50 ≤50 >50 >50 ≤50 Uni/bilateral U B B U U U U U U U o de la región anatómica cabeza y cuello, otro factor etiológico señalado en los tumores oncocíticos de diferentes localizaciones22 , incluyendo los de glándula salival14,23 . Los factores etiológicos y epidemiológicos antes señalados, consumo de tabaco17 , irradiación23 , afectación en pacientes de edad avanzada2 , aparecen en posible relación con la presencia de un daño genético (deleción genómica de 4.977 pb), constatado en la última década24 en el ADN mitocondrial (ADNmt) de las células oncocíticas del tumor de Warthin. De este modo, el envejecimiento o senescencia celular produciría un daño oxidativo de carácter acumulativo del ADNmt. Igualmente el consumo de tabaco produce un incremento en especies de oxígeno reactivo (ROS) que originan un daño acumulativo en el ADNmt, acompañándose de una deficiencia en los fenómenos de fosforilización oxidativa (OXPHOS), asociándose todo ello a cambios morfológicos mitocondriales caracterizados por aparición de mitocondrias gigantes, de carácter hipertrófico y de disposición adosada, responsables de los denominados cambios oncocíticos5 , detectables de forma ultraestructural o mediante técnicas inmunohistoquímicas4,6 . En nuestro estudio, en primer lugar, pudimos mediante 3 procedimientos diferentes de tinción (PTAH, 113-1 y Prx-I) poner de manifiesto los cambios oncocíticos presentes en el tumor de Warthin, siendo comparativamente la metodología más precisa y específica la obtenida con el anticuerpo monoclonal 113-1, tal como ya se ha señalado previamente4,6 . La tinción con PTAH empleada en nuestro estudio, con incubación prolongada de 16 a 48 h, recomendada previamente por otros autores14 , es la metodología clásica utilizada para identificar a las células con cambios oncocíticos, produciendo una tinción citoplasmática granular azulada, si bien es evidente que la tinción con la PTAH no es totalmente específica de las estructuras mitocondriales. La inmunotinción granular grosera obtenida con la peroxirredoxina I (Prx-I), una proteína de compactación del H2 O2 , en las células oncocíticas es explicable por la acumulación de radicales libres y de ROS que tiene lugar en estas células16 , si bien la inmunotinción obtenida es menos específica que la del anticuerpo 113-1, probablemente en relación con el carácter de policlonalidad del anticuerpo Prx-I. Tras la identificación de las células oncocíticas, el objetivo principal de nuestro estudio consistió en explorar la expresión de la SDHB (subunidad B de la Tabaco 11-20c/d >20c/d >20c/d >20c/d ≤10c/d >20c/d >20c/d ≤10c/d >20c/d 11-20c/d Reactividad de SDHB Ep. oncocitico D.estriados +++ ++ +++ ++ +++ ++ ++ +++ ++ +++ + + + + + + + + + + succinodeshidrogenasa) en el componente oncocítico del tumor de Warthin. La succinodeshidrogenasa (SDH), también conocida como succinato ubiquinona oxirreductosa, es un complejo enzimático mitocondrial que cataliza la oxidación de succinato a fumarato en el ciclo del ácido cítrico, participando asimismo en la cadena de trasporte de electrones. La SDH, localizada en la membrana interna mitocondrial, consta de varias subunidades (SDHA, SDHB, SHCD y SDHD)25 y se ha demostrado que las mutaciones en el gen de la SDH subyacen en la patogenia de los paragangliomas/feocromocitomas7,8 y de síndromes tumorales asociativos (síndrome de Carney-Stratakis y tríada de Carney)26 . En estos procesos existe a menudo una ausencia de expresión inmunohistoquímica de la SDHB12,26 , y por ello el estudio inmunohistoquímico de la SDHB se ha convertido en una potente herramienta diagnóstica, ya que la ausencia de expresividad de SDHB es indicativa de forma indirecta de la presencia de probables mutaciones en el gen de una de las subunidades de la SDH. En este sentido, las mutaciones de los genes de SDHB y SDHD son las principales causantes de la aparición de paragangliomas, contribuyendo a la mayoría de los casos familiares y quizás hasta en un 8% de los aparentemente esporádicos. Por el contrario, la frecuencia en las mutaciones de SDHC es variable y en general muy baja al igual que ocurre con SDH5, a través de la flavinación de SDHA8 . En la tumorogénesis de los paragangliomas se implican por lo tanto cambios mutacionales en el gen de la SDH7,12 , probablemente asociados a alteraciones de mecanismos implicados en la proliferación celular, apoptosis y en la función sensora de oxígeno Los cambios mutacionales de la SDH se acompañan de una ineficaz actividad enzimática mitocondrial, con una deficiente producción de ATP que induce la aparición de cambios fenotípicos oncocíticos, debido a una hiperplasia mitocondrial10 . De forma interesante estudios ultraestructurales9 han demostrado cambios mitocondriales (aparición de megamitocondrias, con inclusiones paracristalinas) de carácter oncocítico en los paragangliomas, donde es conocido el papel patogenético de las mutaciones de SDH7,8,12,26 , lo cual explicaría la presencia de variantes o subtipos oncocíticos descritos en los paragangliomas/feocromocitomas9,11 . En nuestro estudio, en una serie limitada a 10 observaciones de tumor de Warthin, comprobamos sin embargo Documento descargado de http://www.elsevier.es el 17/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. 362 una expresión aumentada de la SDHB, tanto a nivel del citoplasma de los conductos estriados de la glándula parótida no tumoral, como de forma más intensa en las células oncocíticas del componente epitelial del tumor de Warthin. Estos datos, no descritos previamente en la literatura médica, nos llevan a considerar que probablemente el daño genético referido23 en el ADNmt del tumor de Warthin no implica una alteración defectiva en la actividad enzimática de la SDHB (complejo enzimático mitocondrial II), y en línea con lo descrito en otras formas de enfermedad tumoral7,8,12,26 , es muy probable que las mutaciones en el gen de la SDH no desempeñen un papel patogenético en el tumor de Warthin. Resta por confirmar, en series más amplias de tumores de Warthin, si nuestra hipótesis es cierta, aclarando además si el daño genético existente en el tumor de Warthin radica en mutaciones del ADNmt afectando a genes del complejo enzimático I, tal como se ha demostrado recientemente en los tumores tiroideos27 y renales28 de fenotipo oncocítico. Conflicto de intereses Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses. Bibliografía 1. Monk Jr JS, Church JS. Warthin’s tumor. A high incidence and no sex predominance in central Pennsylvania. Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 1992;118:477—8. 2. Simpson RHW, Eveson JW. Warthin tumour. En: Barnes L, Eveson JW, Reichart P and Sidrasnsky D, editores. Pathology & Genetics Head and Neck Tumours. World Health Organization Classification of Tumours. Lyon: IARC Press; 2005. p. 263—5. 3. Eveson JW, Cawson RA. Warthin’s tumor (cystaadenolinfoma) of salivary gland. A clinicopathological investigation of 278 cases. Oral Surg Oral Med Oral Pathol. 1986;61:256—62. 4. Shintaku M, Honda T. Identification of oncocytic lesions of salivary glands by anti-mitochondrial immunohistochemistry. Histopathology. 1997;31:408—11. 5. Tandler B, Hutter RVP, Erlandson RA. Ultrastructure of oncocytoma of the parotid gland. Lab Invest. 1970;23:567—80. 6. Vera-Sempere F, Vera-Sirera B. Utilidad del anticuerpo antimitocondrial 113-1 en el diagnóstico y categorización de los tumores de glándula salival con diferenciación oncocítica. Acta ORL Esp. 2011;62:1—9. 7. Baysal BE, Ferrell RE, Willet-Brozick JE, Lawrence EC, Myssiorek D, Bosch A, et al. Mutations in SDHB, a mitochondrial complex II gene, in hereditary paraganglioma. Science. 2000;287:848—51. 8. Bayley JP, Kunst HP, Cascon A, Sampietro ML, Gaal J, Korpershoek E, et al. SDHAF2 mutations in familial and sporadic paraganglioma and phaeochromocytoma. Lancet Oncol. 2010;11:366—72. 9. Papadimitriou JC, Drachenberg CB. Giant mitochondria with paracrystalline inclusions in paraganglioma of the urinary bladder: correlation with mitochondrial abnormalities in paragangliomas of other sites. Ultrastruct Pathol. 1994;18:559—64. 10. Gasparre G, Romeo G, Rugolo M, Porcelli AM. Learning from oncocytic tumors: why choose inefficient mitochondria? Biochim Biophys Acta. 2010. Doi: 10.1016/j.bbabio.2010.08.006. B. Vera-Sirera et al 11. Park DH, Park YH, Oh JI, Kwon TH, Chun HS, Cho HD, et al. Oncocytic paraganglioma of the cauda equina in a child. Case report and review of the literatura. Pediatr Neurosurg. 2002;36:260—5. 12. van Nederveen FH, Gaal J, Favier J, Korpershoek E, Oldenburg RA, de Bruyn EM, et al. An immunohistochemical procedure to detect patients with paraganglioma and phaeochromocytoma with germline SDHB, SDHC, or SDHD gene mutations: a retrospective and prospective analysis. Lancet Oncol. 2009;10:764—71. 13. Fagerström KO, Schneider N. Measuring nicotine dependence: a review of the FTND. J Behav Med. 1989;12:159—82. 14. Brandwein MS, Huvos AG. Oncocytic tumors of major salivary glands. A study of 68 cases with follow-up of 44 patients. Am J Surg Pathol. 1991;15:514—28. 15. Tickoo SK, Amin MB, Linden MD, Lee MW, Zarbo RJ. Antimitochondrial antibody (113-1) in the differential diagnosis of granular renal cell tumors. Am J Surg Pathol. 1997;21: 922—30. 16. Demasi AP, Furuse C, Altemani A, Junqueira JL, Oliveira PR, Araújo VC. Peroxiredoxin I is overexpressed in oncocytic lesions of salivary glands. J Oral Pathol Med. 2009;38:514—7. 17. Sadetzki S, Oberman B, Mandelzweig L, Chetrit A, Ben-Tal T, Jarus-Hakak A, et al. Smoking and risk of parotid gland tumors:a nationwide case-control study. Cancer. 2008;112:1974—82. 18. Boffetta P. Tobacco smoking and risk of bladder cancer. Scan J Urol Nephrol. 2008;Suppl 218:45-54. 19. Collea G, Biondi P, Itro A, Compilato D, Campisi G. Warthin’s tumor distribution within the parotid gland. A feasible etiologic source from lymph nodal tissue. Minerva Stomatol. 2010;59:245—9, 250-252. 20. Quer M, Pujol A, Leon X, López M, García J, Orús C, et al. Parotidectomias en tumores benignos. Clasificación Sant Pau de la extensión de la refección. Acta ORL Esp. 2010;61: 1—5. 21. Klussmann PJ, Wittekindt C, Preuss FS, Al Attab A, Schroeder U, Guntinas-Lichius O. High risk for bilateral Warthin tumor in heavy smokers — review of 185 cases. Acta Otolaryngol. 2006;126:1213—7. 22. Rouzbahman M, Serra S, Chetty R. Rectal adenocarcinoma with oncocytic features:possible relationship with preoperative chemoradiotherapy. J Clin Pathol. 2006;59:1039—43. 23. Saku T, Hayashi Y, Takahara D, Matsuura H, Tokunaga M, Tokuoka S, et al. Salivary gland tumors among atomic bomb survivors, 1950-1987. Cancer. 1997;79:1465—75. 24. Lewis PD, Baxter P, Griffiths AP, Parry JM, Skibinski DOF. Detection of damage to the mitochondrial genome in the oncocytic cells of Warthin’s tumour. J Pathol. 2000;191:274—81. 25. Lancaster CR. Succinate: quinone oxidoreductases:an overview. Biochim Biophys Acta. 2002;1553:1—6. 26. Gaal J, Stratakis CA, Carney JA, Ball ER, Korpershoek E, Lodish MB, et al. SDHB immunohistochemistry: a useful tool in the diagnosis of Carney-Stratakis and Carney triad gastrointestinal stromal tumors. Mod Pathol. 2011;24:147—51. 27. Gasparre G, Bonora E, Tallini G, Romeo G. Molecular features of thyroid oncocytic tumors. Mol Cell Endocrinol. 2010;321:67—76. 28. Gasparre G, Hervouet E, de Laplanche E, Demont J, Pennisi LF, Colombel M, et al. Clonal expansion of mutated mitochondrial DNA is associated with tumor formation and complex I deficiency in the benign renal oncocytoma. Hum Mol Genet. 2008;17:986—95.