5 ACTUALIZACIÓN EN EL DIAGNÓSTICO DE LAS ENFERMEDADES AUTOINMUNES ANTICUERPOS ANTI-ACTINA AUTOANTICUERPO ASOCIACIONES CLÍNICAS Los anticuerpos anti-actina (AAA) son anticuerpos antimúsculo liso que muestran especificidad por la actina (1). Son capaces de reaccionar con distintos grupos de células, como por ejemplo, de músculo liso o de glomérulo renal, entre otros. Algunos trabajos indican que una infección viral previa parece necesaria para la producción de anticuerpos anti-actina en pacientes con hepatitis autoinmune crónica activa (2). En la mayoria de los casos, los anticuerpos antiactina son del isotipo IgG. En otras patologías, como ciertas infecciones virales, pueden observarse también anticuerpos dirigidos contra el músculo liso, pero con especificidades distintas a la actina, como por ejemplo, vimentina o desmina. La patogenicidad de los anticuerpos anti-actina no está establecida, aunque su presencia es indicativa de daño tisular (3). Los anticuerpos anti-actina se encuentran en el suero del 52 – 85% de pacientes con hepatitis autoinmune crónica activa y en el 22% de pacientes con cirrosis biliar primaria (4,5) . Su presencia en otras enfermedades autoinmunes como la colangiopatía refleja el solapamiento de características de esas enfermedades. El isotipo IgA de los anticuerpos antiactina se ha correlacionado con la severidad de las lesiones intestinales pacientes celíacos (3,6). ENTIDAD ANTIGÉNICA Los monómeros de la forma globular de la proteína (actina G, 43 kDa) polimerizan en presencia de ATP para formar fibras largas y finas de alrededor de 8 nm (actina F), que constituye el autoantígeno específico para la hepatitis autoinmune. Representa un componente mayoritario en microfilamentos del citoesqueleto de la célula y forma los filamentos contráctiles en las células musculares. Los filamentos de actina intervienen, ademas de la contracción de las fibras musculares, en el movimiento de la célula y en movimientos que acontecen en el interior de la célula, así como en la transmisión intracelular de señales. Figura 1. Polimerización de actina y formación de las fibras de actina F, el autoantígeno específico para la hepatitis autoinmune. MÉTODOS DE DETECCIÓN Inmunofluorecencia indirecta sobre células HEp2 o células del epitelio intestinal IEC-6. Las células pueden tratarse con colchicina para favorecer la polimeración de las subunidades de actina e incrementar así la antigenicidad. El estómago de rata o ratón puede también ser utilizado como sustrato para la detección de AAA. Técnicas como la hemaglutinación y la cromatografía de afinidad pueden ser también utiizadas. En cuanto al ELISA para la detección de AAA, existen dos formatos distintos, uno que utiliza actina G como antígeno, y el otro que utiliza la forma polimerizada, actina F, siendo este último más específico. La sensibilidad mostrada por el ELISA de actina F se sitúa entre el 60-70% mientras que la especificidad es de entorno al 94% (7). A B BIBLIOGRAFÍA 1- Hawkins BR, O’Connor KJ, Dawkins RL, Dawkins B, Rodger B. Autoantibodies in Australian population I. Prevalence and persistence. J Clin Lab Immunol. 1979;2:211-215 2- Lidman K, Biberfeld G, Fragaeus A, Norberg R, Torstensson R, Utter G, Carlson L, Luca J, Lindberg U. Anti actin specificity of human smooth uscle sntibodies in chronic active hepatitis. Clin Exp Immunol. 1976;24:266-272 Figura 2. A. Marcaje citoplasmático fino en células HEp2, a lo largo de los haces de fibras del citoesqueleto, conocidas como stress fibers, en observación mediante inmunofluorescencia indirecta. En las células en mitosis, el marcaje puede observarse como puntos discretos en el citoplasma. B. Marcaje de la muscularis mucosae y de las fibras interglandulares del estómago de rata. 3- Granito A. Anti-actin IgA antibodies in severe coeliac disease” Clinical and Experimental Immunology 2004; 137(2): 386–392. 4. Leibovitch L, George J, Levi Y, Bakimer R, Shoenfeld Y. Anti-actin antibodies in sera from patients with autoimmune liver diseases and patients with carcinomas by ELISA. Immunol Lett. 1995;48(2):129-32 5- Hamlin AN and Berg PA. Haemagglutinating anti-actin antibodies in acute and chronic liver disease. Gut 1980;21(4):311-7. A 6- Clemente MG, Musu MP, Frau F, Brusco G, Sole G, Corazza GR, De Virgiliis S. Immune reaction against the cytoskeleton in coeliac disease. Gut 2000;47(4):520-6. 7- George J and Shoenfeld Y. Actin autoantibodies. In: Peter JB and Shoenfeld Y, eds. Autoantibodies. Elsevier, 1996: 10-12. B BioED BioSystems Educational Department Knowledge is our reason to be Figura 3. A.. El glomérulo renal y las capas musculares de los vasos sanguíneos son otras estructuras con las que también reaccionan los AAA. (IFA sobre riñón de ratón) B. Los anticuerpos anti-actina se diferencian de otros anticuerpos anti-músculo liso en que producen un marcaje en forma de espinas finas alrededor de los túbulos renales. (IFA sobre riñón de ratón). Costa Brava 30, 08030 Barcelona (España) Tel. +34-93 311 00 00 Fax +34-93 346 77 99 biosystems@biosystems.es www.biosystems.es