Toma de muestras - Ministerio de Salud

Fiebre Amarilla
Toma de muestras para diagnóstico
de laboratorio
PROVINCIA DE JUJUY
Ministerio de Salud
Secretaría de Planificación y Políticas Sanitarias
Dirección Provincial de Programas Sanitarios
Dirección General de Epidemiología
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NORMATIVA DEL LABORATORIO DE ARBOVIRUS, INSTITUTO NACIONAL DE
ENFERMEDADES VIRALES HUMANAS (INEVH) “DR. JULIO I. MAIZTEGUI”
VIGILANCIA DE LABORATORIO DE LA FIEBRE AMARILLA EN LA ARGENTINA
INTRODUCCIÓN:
Durante el mes de Enero de 2008 se ha confirmado en la provincia de Misiones la ocurrencia de una epizootia en monos Aluatta caraya por el virus de la Fiebre Amarilla. En el pasado se han reconocido en la
Argentina la existencia tanto de transmisión urbana como selvática.
El virus de la Fiebre Amarilla pertenece a la Familia Flaviviridae y resulta importante destacar que estos
agentes virales tienen la particularidad de poseer sitios antigénicos comunes que determinan la existencia de
amplia reactividad cruzada en la mayoría de las técnicas serológicas.
Cuando se produce una situación de brote epidémico o la aparición de casos aislados por un flavivirus no
identificado, es necesario ser muy estrictos con los criterios diagnósticos para identificar específicamente el
flavivirus circulante. Esta situación es particularmente crítica en regiones donde circulan simultáneamente más
de un flavivirus (Ej: dengue, fiebre Amarilla, Encefalitis de San Luis, etc.). Por lo tanto, se requiere reunir la
mayor cantidad de evidencias antes de determinar con precisión el flavivirus que genera la enfermedad
(aislamiento viral identificado con el empleo de anticuerpos monoclonales específicos e identificación molecular de genoma viral y secuenciación del material genético, fundamentalmente).
CRITERIOS DIAGNÓSTICOS DE FIEBRE AMARILLA:
Caso sospechoso:
Toda persona procedente o residente de zona de transmisión que presenta: fiebre de inicio agudo, acompañada de mialgias y cefalea, o fiebre seguida de ictericia.
Caso probable:
Caso sospechoso con al menos uno de los siguientes resultados de laboratorio:
IgM positiva en suero1.
Título elevado de IgG en muestra de la fase convaleciente
IgM e IgG en una única muestra de suero.
Caso confirmado:
Caso sospechoso con al menos uno de los siguientes resultados de laboratorio:
Aislamiento viral de suero o tejido2
Detección de antígeno viral en tejido2
Detección de genoma viral en suero o tejido2.
Seroconversión por técnica de Neutralización (NT)3 en muestras pareadas de suero.
En vacunados recientes de áreas de riesgo que cumplan la definición de caso es imprescindible el estudio de
una muestra aguda para diferenciar infección natural de reacciones post-vacunales.
Notas:
1
Los anticuerpos IgM pueden ser detectables muy tempranamente en el curso de la infección por flavivirus (a partir
del 7º día para virus de Fiebre Amarilla) y pueden perdurar en la circulación por varios meses hasta un año en los
vacunados. Por lo tanto debe confirmarse este resultado mediante la detección de una conversión serológica en
muestras obtenidas en la fase aguda y convaleciente.
2
Aunque el estudio de los tejidos o fluidos por aislamiento, detección de antígeno o genoma viral pueden ser usados
para confirmar los casos, un resultado negativo por estas técnicas no descarta un caso ya que se desconocen los
valores predictivos negativos de las mismas, y se solicitará una segunda muestra para serología.
3
Técnica de Neutralización: ésta es la más específica de las técnicas serológicas disponibles, pero igualmente presenta
cierto grado de reactividad cruzada. En infecciones primarias por flavivirus, la prueba de neutralización con un panel de
flavivirus, usualmente permite identificar el virus infectante. En infecciones secundarias o con antecedentes de vacunación con flavivirus (por ej. vacuna antiamarílica), la reactividad cruzada entre flavivirus resultará exacerbada por los altos
títulos de anticuerpos existentes y en esos casos, no es posible identificar el virus que generó la infección mediante ésta u
otras técnicas serológicas. Esta técnica no discrimina entre anticuerpos vacunales e inducidos por infección natural.
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INSTRUCCIONES PARA LA TOMA Y EL ENVÍO DE MUESTRAS
PARA DIAGNÓSTICO DE FIEBRE AMARILLA (Humanas – Animales)
1. SUERO: Obtenido en forma estéril, sin aditivos. Para aislamiento viral, detección de genoma viral y
detección de anticuerpos.
a)
Período Agudo: 1 a 6 días
b)
Convalecencia: 7 a 21 días.
Volumen: Mínimo 2 ml
Condiciones de envío: Enviar las muestras inmediatamente después de obtenidas, refrigeradas a
4ºC. En caso de que el envío deba ser demorado más de 72 hs, conservarlas
a -20ºC y remitir en hielo seco.
2. TEJIDOS: El órgano de elección es el HÍGADO. Los tejidos deben fraccionarse en dos partes:
a) Tejido a -70ºC o hielo seco: para PCR y aislamiento viral
b) Tejido fijado en formol bufferado* o incluído en parafina (Para tinción inmunohistoquímica) a
temperatura ambiente . Los tejidos pueden permanecer en formol bufferado hasta 24 horas. En caso
de remitirse al laboratorio con posterioridad, deberán ser pasados a alcohol 70o
* FORMOL BUFFERADO (pH:
7.4): Formol puro (40 vol.)
Agua destilada
Fosfato monosodico
Fosfato disodico
10,0 ml
900,0 ml
4,0 gr
6,5 gr
3. LCR: en caso de pacientes con síntomas neurológicos remitir muestra estéril.
Condiciones de envío: Enviar las muestras inmediatamente después de obtenidas,
refrigeradas a 4ºC. En caso de que el envío deba ser demorado más de 72 hs,
conservarlas a -20º C y remitir
en hielo seco.
PARA TODOS LOS TIPOS DE MUESTRAS ES IMPORTANTE EVITAR CICLOS DE CONGELAMIENTODESCONGELAMIENTO
Condiciones de envío de muestras: En recipientes de bioseguridad (Triple Envase), rotulados con los
siguientes datos:
Apellido y Nombres
Tipo de muestra
Fecha de obtención.
Acompañar las muestras con ficha epidemiológica correspondiente. Dado que la elección del método de
diagnóstico a emplear depende de los días de evolución de los síntomas, las muestras no podrán ser procesadas si carecen de los siguientes datos:
Identificación del paciente.
Fecha de comienzo de los síntomas
Fecha de recolección de la muestra
Historia de viajes recientes del paciente
Antecedente de vacunación contra la fiebre amarilla y fecha.
Enviar las muestras a Dra. María Cristina Ubeid, Laboratorio Central de Salud Pública, calle
Alberdi número 619, San Salvador de Jujuy, teléfono: 0388-4221308. Las muestras serán
acondicionadas para su reenvío al INEVH.
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PARA MAYOR INFORMACIÓN
DIRIGIRSE A LA DIRECCIÓN GENERAL DE
EPIDEMIOLOGÍA DEL MINISTERIO DE SALUD DE LA PROVINCIA
SAN MARTÍN 41
TELÉFONO: 0388-4221300
FAX: 0388-4221239
Correos electrónicos:
cripoll@msaludjujuy.gov.ar
amartínez@msaludjujuy.gov.ar
PÁGINA WEB:
www.msaludjujuy.gov.ar
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