TemaEMBARAZO Y NEONATOLOGÍA

EMBARAZO Y NEONATOLOGÍA
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Introducción
Diagnóstico del embarazo
Parámetros bioquímicos alterados durante el embarazo
Estudio del líquido amniótico para la detección y prevención de alteraciones
1. INTRODUCCIÓN
Embarazo: estado fisiológico durante el cual se producen cambios metabólicos y
bioquímicos reversibles tras el parto
Muchas de las determinaciones que vamos a comentar se efectúan por técnicas ya
descritas.
2. DIAGNÓSTICO DEL EMBARAZO
-La gonadotropina coriónica humana (hCG) es una proteína compuesta por dos
subunidades (a y ß).
-Subunidad ß: es característica de esta hormona por tanto se utiliza para el diagnostico
del embarazo.
- [hcG] aumenta rápidamente al comienzo de la gestación y más tarde disminuye,
especialmente en el tercer trimestre.
-El análisis de ß-hCG se puede hacer en orina o en suero
•
•
En orina: se puede detectar unos días después de la falta de la
mestruación
En suero: un día después de la implantación en el útero
2.1. Análisis en orina
-Determinación cualitativa: rápido, fácil y fiable
-Conviene realizarlo en la primera orina de la mañana
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Pruebas de inhibición de la aglutinación:
o Se utiliza un anticuerpo anti-ßhCG que se añade a la orina, después se
añaden unas partículas recubiertas de hCG.
o Si hay ßhCG en la muestra, ésta se une a los anticuerpos formando un
complejo antígeno-anticuerpo, no queda por tanto anticuerpo para unirse
al antígeno de las partículas por lo éstas no se aglutinan. Ausencia de
aglutinación: prueba positiva.
o Si no hay ßhCG en la muestra, o hay poca, el anticuerpo puede
reaccionar con las partículas produciendo aglutinación: prueba negativa.
•
Pruebas de aglutinación directa de partículas de látex:
o Se utilizan partículas de látex recubiertas de anticuerpo anti- hCG.
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Si la muestra contiene hCG, se produce la aglutinación (resultado
positivo).
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Pruebas de anticuerpos monoclonales inmovilizados:
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2.2. Análisis en suero
-
Análisis cuantitativos
Métodos más utilizados: RIA y ELISA
3. PARÁMETROS
EMBARAZO
BIOQUÍMICOS
ALTERADOS
DURANTE
EL
3.1. Proteínas totales
3.2. Inmunoglobulinas
3.3. Fracciones lipídicas
3.4. Fosfatasa alcalina
3.5. Hormonas: LH y FSH
T3 y T4
PTH y vitamina D
Estrógenos
3.6 Glucosa: Test de O’Sullivan
4. ESTUDIO DEL LÍQUIDO AMNIÓTICO PARA LA DETECCIÓN Y
PREVENCIÓN DE ALTERACIONES
-El líquido amniótico baña el interior de la membrana interna de la placenta, el amnios
-Amniocentesis:
• La cavidad amniótica puede someterse a punción con seguridad (amniocentesis)
a partir de la semana 14
• Procedimiento
•
Tubos de muestra: sellados y protegidos de la luz (bilirrubina).
•
Muestra: conservación en frigorífico o congelación
•
Antes del análisis centrifugar
4.1 BILIRRUBINA EN EL LÍQUIDO AMNIÓTICO
-Utilidad: prever incompatibilidad de Rh fetomaterna (enfermedad hemolítica del
recién nacido)
-Procedimiento: Barrido entre las longitudes de onda 350 y 750 nm. El líquido
amniótico sin bilirrubina tiene una absorbancia alta a 350nm que va disminuyendo
al aumentar la longitud de onda (línea basal). Si hay bilirrubina: aparece un pico
ancho alrededor de 450-455 nm. La diferencia entre la absorbancia de ese valor y la
línea basal a esa misma longitud de onda indica la concentración de bilirrubina.
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4.2. FOSFOLÍPIDOS TENSIOACTIVOS EN EL LÍQUIDO AMNIÓTICO
-Para que el niño respire tras el nacimiento es necesario que los pulmones hayan
madurado adecuadamente durante la gestación desarrollando una especie de
detergente que cubre los alvéolos, el surfactante pulmomar (disminuye la tensión
superficial permitiendo el llenado de los alvéolos).
-Principales componentes del surfactante pulmomar: fosfatidilcolina (lecitina) y
fosfatidilglicerol.
-Se sintetizan de manera apreciable, a partir de la semana 34-38 la cantidad de
surfactante es suficiente para la respiración del niño.
-Niños prematuros: síndrome de insuficiencia respiratoria.
-Los fosfolípidos tensioactivos presentes en el líquido amniótico son un indicador de
la madurez pulmonar fetal
- En lugar de calcular la concentración de lecitina, se calcula la relación
lecitina/esfingomielina (L/S). La esfingomielina es un fosfolípido cuya tasa de
producción es bastante constante durante el tercer trimestre, por ello se usa como
referencia.
Métodos analíticos:
•
Análisis cromatográfico de fosfolípidos
-Extracción de fosfolípidos de líquido tensioactivo y concentración del extracto
-Separación de los fosfolípidos de la muestra por cromatografía en capa fina, así
conseguimos que se separen la lecitina y la esfingomielina.
-Relado de la placa: pulverización con ácido sulfúrico + sulfato amónico y
revelado por calor. Aparecen manchas que corresponden a los distintos
fosfolípidos.
-
Con un densitómetro se calcula la concentración relativa de lecitina y
esfingomielina, resultado: L/S
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L/S > 2: madurez pulmonar
-
El fosfatidilglicerol contribuye a las propiedades del surfactante, su presencia
mejora el diagnóstico de la relación L/S.
•
Test de estabilidad de la espuma
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Muy utilizado: análisis cualitativo
-
Fundamento: propiedad del surfactante de formar espuma estable cuando se
agita en presencia de metanol o etanol.
-
Método: mezclar partes iguales de líquido amniótico sin centrifugar y etanol al
95%, agitar 15´´, dejar en reposo 15 minutos.
-
Si aparece un anillo completo de espuma con burbujas: madurez pulmonar.
L/S < 1,5 inmadurez pulmonar
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•
Inmunoensayo de fluorescencia de polarización (FPIA)
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Se basa en la medida de la microviscosidad de los lípidos del líquido amniótico
que está relacionada con la tensión superficial.
La fluorescencia de polarización se basa en la medida de la cantidad de luz
fluorescente polarizada que se detecta cuando un marcador fluorescente es
excitado con luz polarizada,
El grado de fluorescencia está relacionado con la velocidad de rotación del
marcador fluorescente (a menor velocidad mayor fluorescencia).
Al añadir el marcador fluorescente al líquido amniótico, su velocidad de rotación
dependerá de la viscosidad del medio.
• A más surfactante, mayor microviscosidad del líquido, más se opondrá a
la rotación del marcador por lo que éste girará más lentamente y mayor
será la fluorescencia.
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PROBLEMAS NEONATALES: BILIRRUBINA
-Existen diversas causas que favorecen la elevación de los niveles plasmáticos de
bilirrubina en los recién nacidos.
-La bilirrubina puede atravesar la barrera hematoencefálica y originar lesiones
neurológicas produciendo una alteración que se denomina kernicterus
- Determinación de bilirrubina urgente :determinación directa de la bilirrubina total
midiendo la absorbancia a 455nm mediante un espectrofotómetro dicromático
llamado bilirrubinómetro.
Preguntas de revisión
1. Complete: El diagnóstico del embarazo se basa en la presencia, en sangre
o en orina, de...
2. Suponga que está realizando una prueba de inhibición de la aglutinación
para diagnosticar un embarazo. Si se produce aglutinación el resultado
¿es positivo? Justifique su respuesta.
3. En el diagnóstico del embarazo mediante el uso de anticuerpos
inmovilizados participan tres anticuerpos diferentes. Identifíquelos.
¿Cuál de ellos está marcado con partículas de color? ¿Cuál es móvil?
4. En el diagnóstico del embarazo mediante el uso de anticuerpos
inmovilizados, debe aparecer siempre al menos una línea ¿para qué
sirve? ¿cómo se forma?
5. En el diagnóstico del embarazo mediante el uso de anticuerpos
inmovilizados ¿Cómo se forma la banda que nos indica que el resultado
es positivo?
6. ¿Cómo se lleva a cabo el análisis cromatográfico de la relación L/S?
7. ¿En qué se basa el test de estabilidad de la espuma para determinar la
madurez pulmonar?
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