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Expresión de la subunidad 6 de los receptores GABAA en la médula
espinal de la tortuga: caracterización funcional e inmunolocalización en
las motoneuronas
Andrés- Barrera M1, Aguilar J1, Canto MB1, González-Ramírez R3, Felix R2, Delgado-Lezama R1
1Departamento
de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, Cinvestav-IPN; 2Departamento de Biología
Celular, Cinvestav-IPN.3 Departamento de Biología Molecular e Histocompatibilidad Hospital General Dr.
Manuel Gea González, Secretaria de Salud, México.
El ácido -aminobutírico (GABA) es uno de los principales neurotransmisores
inhibitorios del sistema nervioso central. El GABA ejerce sus efectos a través
de los receptores GABAA, los cuales son blanco de fármacos que actúan como
antiepilépticos, ansiolíticos y sedantes. Mediante estudios electrofisiológicos se
ha encontrado que los receptores GABAA median dos tipos de inhibición: una
fásica que se produce por activación de receptores postsinápticos; y una tónica
que resulta de la activación sostenida de receptores GABAA que se localizan
preferentemente en sitios extrasinápticos. Aunque se ha demostrado la
presencia de algunas subunidades de los receptores GABAA en la médula
espinal, así como también se han identificado terminales GABAérgicas
rodeando y contactando el soma y las dendritas proximales de las
motoneuronas, existen pocos estudios sobre la función y caracterización de las
diferentes subunidades que conforman a los receptores. Delgado-Lezama y
colaboradores (2004) demostraron por primera vez, mediante técnicas
electrofisiológicas y farmacológicas la presencia de una inhibición tónica
GABAérgica en las motoneuronas de la tortuga adulta, que además modula el
reflejo monosináptico (Bautista et al., 2010 J Physiol;
en prensa).
Posteriormente, Castro (2009) demostró la presencia de receptores GABAA
sensibles a bicuculina (100 M) que median una inhibición tónica en las
motoneuronas. Sin embargo, no investigó el tipo de subunidades que
conforman estos receptores. Con base a lo anterior, el objetivo de este trabajo
fue determinar mediante técnicas electrofisiológicas y farmacológicas si la
subunidad 6 de los receptores GABAA está presente en las motoneuronas de
la médula espinal de la tortuga adulta. Para ello, se registraron
intracelularmente 14 motoneuronas en el modo de fijación de corriente.
Furosemida (200M), un antagonista de los receptores GABAA que contienen
la subunidad 6, produjo un incremento en la resistencia de entrada de 73% en
8 neuronas, en las 6 restantes no se observó ningún cambio. Adicionalmente,
furosemida disminuyó el umbral del potencial de acción en 38% en promedio
en 6 de 8 neuronas. Adicionalmente, empleando un anticuerpo específico
contra la subunidad 6 de los receptores GABAA, se evidenció la expresión de
está subunidad en las motoneuronas. Así, con la ayuda de un microscopio
confocal, se observó que la subunidad 6 se encuentra distribuida en el soma,
axones y dendritas de las motoneuronas y en otros cuerpos neuronales. Estos
resultados permiten sugerir, la posible presencia de una corriente tónica en las
motoneuronas, mediada por receptores GABAA conformados que contienen a
la subunidad 6 y que podrían estar modulando su excitabilidad. La subunidad
6 podría además formar parte de receptores GABAA en otros tipos neuronales
del asta ventral de médula espinal de la tortuga adulta.