Salus online 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p. 8 ARTICULO Efecto del control biológico por antagonistas sobre fitopatógenos en vegetales de consumo humano Noja Izzeddin A, Luis Medina T. Centro de Investigaciones Microbiológicas Aplicada. Departamento de Microbiología. Universidad de Carabobo Correspondencia:N oja Izzeddin. E-mail: nizzeddin@uc.edu.ve Recibido: Enero 2010. Aceptado: Junio 2011 RESUMEN Tomando en consideración el efecto adverso que provocan los pesticidas al medio ambiente y la salud y la posibilidad de al menos minimizar su uso, se investigó el efecto del control biológico de tres antagonistas microbianos (Trichoderma viride, Pseudomonas aeruginosa y Bacillus subtilis), sobre fitopatógenos causantes de enfermedades en vegetales como: tomate, cebolla y pimentón. Los ensayos se realizaron en semillas de estos tres rubros infectadas experimentalmente con tres fitopatógenos (Phytophthora spp, Fusarium monilliforme y Rhyzoctonia solani). Inicialmente, el efecto de los antagonistas sobre los fitopatógenos se determinó en medios de cultivo Sabouraud sólido (agar) y líquido (caldo). Posteriormente, 35 semillas de cada una de las especies vegetales seleccionadas se sometieron a diferentes tratamientos: I- Grupo control, sin ninguna adición; II-Grupo tratado con los antagonistas y IIIGrupo infectado con los fitopatógenos. Todos los grupos se sembraron en tierra abonada, a cielo abierto y a temperatura ambiente y regados dos veces diariamente con agua. 4 Adicionalmente, al grupo III se le agregó diariamente un inóculo de 0,1 mL de antagonista (10 UFC/mL). El desarrollo de las plantas se monitoreo por dos semanas determinándose el número de semillas germinadas, la longitud de las plántulas y el follaje. Los resultados se analizaron a través de Statistix 8.0, pruebas Tukey y Kruskal-wallis. Los antagonistas inhibieron la proliferación de los fitopatógenos en medio Sabouraud. Los experimentos con semillas demostraron una mayor estimulación de la germinación y tamaño de las plántulas en el grupo tratado con fitopatógenos y antagonistas respecto al grupo control (p<0,1). Palabras clave: control biológico, fitopatógenos, hortalizas. ABSTRACT Biological control effect by antagonist on plant pathogens in vegetables for human consumption Taking in account the negative actions of pesticides exert on natural environment and health and due to the possibility to minimize/eliminate its use, the effect of microbial antagonist (Trichoderma viride, Pseudomonas aeruginosa and Bacillus subtilis), were evaluated on tomato, onion and pimento seeds experimentally infected with three known phytopatogens (Phytophthora spp, Fusarium monilliforme and Rhyzoctonia solani). Initially, the antagonist effect on the phytopatogens were studied on Sabouraud solid (agar) and liquid (broth) media. Salus online 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p. 9 Further 35 seeds of each vegetable were treated according to the following experimented protocol group I (control): no addition and water, group II (treated): antagonist and water, group III (infected): antagonist, water and phytopathogens. All groups were grown on soil, under sun light, at room temperature and water was added twice a day. Group III was daily infected with 0,1 mL of the antagonist suspensions (104 UFC/mL). The plant development was followed for 2 weeks, determining number of germinated seeds (germination index), plantule length and foliage. The results obtained was analyzed with Statistix 8.0, Tukey and Kruskal-Wallis. The antagonist inhibited the proliferation of the phytopathogens in Sabouraud media. The seed treated and infected showed a higher index of germination and plantule respect to the control and treated groups (p<0,1). Keywords: biological control, plant pathogens, vegetables. INTRODUCCION Uno de l os méto dos má s util i zados para co ntrarrestar l as perd idas en cul tiv os agrícola s por organi smo s o pl agas cau san te s de enfe rmeda des es el uso de pes ti cid as. Estas so n s usta ncias q uími cas que produ cen i nnu merabl es ef ec tos i nde sead os sob re e l ec osi stema, i nduc iendo a l a gene ra ci ón de org ani smos resi s tentes, persi s tenci a ambi en tal de resi d uos tóxi cos , c ontami naci ón de suelos y recurs os hídri co s, l o cual al tera e l equi li bri o ec ol óg i co (1). Conoc iendo así los efec tos adv erso s que caus an l o s agroq uími c os, actu al me nte la tendencia en el á rea agroi ndustria l , s e i ncl i na cad a vez más a la di s mi nu ción tanto d e co stos en l a produ cció n co mo d e la prese ncia de res i duo s de pes ti ci da s en los p ro ducto s agrícol as y en el med i o ambi ente, si tuando as í a l c ontrol bi ol ógi co como una al tern ativ a dentro del manej o de pl a gas (2). Así, con l a f inal idad de ampli ar l os estu di os re ali zados en el uso de produ ctos bioló gi co s a niv el agroin dustri al s e sel e cci o naron al gunos mi croo rg ani s mos c ausa ntes de enf ermedad es en pl antas co mun es como tomate, pi mentón y ce boll a , a fi n de e studi ar la ca paci dad an tagón i ca de algunos mi croo rgani s mos . A tra v és de l a produc ció n de bac terioci nas o an ti bi óti cos, c iertos mi c roorgani smo s af ec tan negativ amente el desarroll o de fi topatógenos, l i mi tando a sí la in i ci aci ón y propag aci ón de la enfermed ad (3-6). Uno de esto s g éneros antagóni c os es Bacil lus, dadas s us potenci ali d ades en i nhi bi ci ó n de fi top atógenos de s uel o s y p romoc i ón de c reci mi ento d e las pl an tas (5 ). Inv estiga ciones reali zadas ha n d emos trado que el uso de Paeni baci ll us l enti morbus , Tri choderma bi oa ntagon i stas como har zi anum y T ri chod erma pol y spo rum, pue den con trol ar el fi topató geno Rhy zocton i a sol ani (7, 8). Los resul tados i ndi ca ro n qu e la apl i cación de estas cepas pod ría se r recomend ada den tro d e un programa de con tro l i ntegrad o de R. s ol ani. Además, se ha demo strado que el uso de conidia s de c iertos hon gos antagoni s tas i nhi be el creci mi ento del patógeno Phytophthora capsi ci (9). Otro e studi o mostró que l os ho ngos mi corri zógeno s promu ev en el crec i mi ento y p roduc ci ón de pl antas de i nterés agrícola , debido a que f aci l i tan l a abs orción de nu tri entes , mejoran l a es tructura de l s uelo, el bala nce hídri c o y protege n a la s pl anta s contra pa tógeno s (5). Uno de esto s hongos es Tri choderma, el cual ha demostrad o ser uno de los Salus online 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p.10 produc tos má s efi ci entes tan to para el control de pl agas en el s uel o y en cul tiv os , c omo para l a es ti mul aci ón de l a pl anta (7, 10, 11). Po r el mec ani s mo re spon sabl e de l a acti vida d anta góni ca en l a parte sub terrá nea de l a pl anta , T. ha rzi anu m i ndu ce a un a re acc ión de resi s tenci a si s témi c a f rente a patóge nos, lo que se tra duce en un reduc ci ón de l a nec rosi s c ausada por al gunos mi croo rg ani s mos c omo: P. capsi ci y A. al terna ta (6). Por l o tanto , pa ra es tudia r l a capaci dad a ntagó ni ca de al gunos mi c roorgani smo s, se sel e cci o naron tres fi topa tógeno s c omunes en cul ti v os d e tomate , p i men tón y c ebol l a, Ph ytoph thora spp ., Rhy zoc toni a sol ani y Fu sari um mon i ll iforme, l os c ual es se e nf rentaron a Tri choderma vi ri de, Bacil l us subtili s y Pseudomonas aerugin osa e n div ersos ensayos , además, se reali zó tratami en to d e semi ll as p ara obse rv ar si este proce so es b enefi c i oso para el crec i mi ento de l a s pl án tulas . As í, e l uso de prod uctos bi ol ó gi co s para el control de plag as a ni v el agrícol a p uede aportar i nforma ci ón val i osa, l ogran do di smi nui r no sól o pérd idas eco nómi cas elev adas , si no también , el exag erado u so de pe sti ci das, que pueden prov o car i mpacto adv e rs o a la salu d y ambien te (8). MATERIALES Y METODOS La mue stra estuv o rep resen tada por cepa s d e tres fi to patógenos comunes en cul tiv os d e tomate , pi men tón y ce boll a, Phy tophth ora spp., Fusa ri um moni lli fo rme y Rhy zocton i a sola ni que f ue ron donados po r l a Univ ers idad Central de Venezuela , Fac ul tad de Agrono mía, Cl íni ca de Pl antas . Es tas c epas fu eron con si gnadas e n tubos con aga r Sabouraud i ncl inado c on 72 ho ra s de sembrada s. Para v erifi c ar q ue ef ec tiv amente son l as cepas a es tudia r s e re ali zó l a i den tifi caci ón en c uanto a género y es pec i e de c ada uno de e stos mi c ro organi s mos . Culti vo d e Pa tóg enos. Los f i to patógenos s e sembraron en Erl enmeye r con 150 mL de cal do Sa bouraud (HIMED IA Sab ouraud borth and agar) esté ri l y s e i ncu baron a temp eratura ambi ente po r c inco día s. Un a v ez obs ervada l a v i abi li dad de l os p atógenos, estos se sembraron sobre pl acas de agar Sabouraud (BBL Agar De xtrosa Sabouraud 500g ) util i zando un a espá tula de Dri g al sk y por exten di do con un v ol umen de 0.1mL. Nuev a men te se i n cuba ro n a temperatura ambi ente po r c i nco días (1). L a c onse rv aci ón de esta s cepa s se reali zó util i zando agar y c al do Sabou ra ud y prepa rándol as p ara cada e nsayo c on un máxi mo de 72 horas de i ncubaci ón, es dec i r, c epas j óv enes . L uego se reali zó el recue nto de l as Uni dades formado ras de col onia por mili li tro (UFC/mL ). Culti vo de An tagonistas . El grupo mi crobio lógi c o a ntagoni sta comprend e l os géneros Tri c hoderma v i ri de, Pseu domonas aerugi no sa y Bacil lus s ubtil i s . Se prepararon 3 Erl enme yer co n 150mL de c al do nutri tiv o (HIMEDIA Nutri e nt agar) es téri l , donde se s emb ró por se parado cad a antagoni sta . Se i ncub ó a temp eratura ambi ente por cin co días (3 ). Para l a prepa ra ci ón del grupo antagonis ta en sol uci ón se sembraron 50mL de c ada c al do p re vi amente i nocu lado c on c ada antagoni sta c on un ti empo de creci mi ento de 72 h oras y s e i ncubaron a temperatura amb i ente d urante 5 días. Luego s e reali zó el re cuento de la s UFC/mL. Salus online 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p.11 Bioensay os in Vitro . En medio sólido: Para es tudi a r el efecto de los antagoni s tas sob re el creci mien to de l os f i topatógen os en medio s óli do se uti li zó el métod o Ki rby-Bauer o d ifusió n en a gar, d onde se se mbró por exten si ón c on espá tula de Dri gals ky en tres pl ac as de aga r Sabou ra ud, 0,1 mL de cada fi topatógenos c on una c oncentraci ón de 10 2 UFC/mL. Inmedi ata mente , s e toma ron dis cos d e papel de fil tro de 5 mm de di ámetro c on una pinza es téri l y s e su mergi eron en l a s uspensi ó n del antagoni s ta a una co ncen tra ción d e 10 2 UF C/mL, para l ue go sembrarse sob re la s pl ac as. Se incu baron dura nte cinc o días a temperatura amb i ente. En medio líquido: Pa ra e studi a r el ef ecto del anta goni s ta en sol uci ón sob re el desarrol lo de los fi topatóg enos , se uti l i zó e l método sus pen sión en cal do, don de se p re pararon tres Erl e nmeyer de ca l do Sabouraud, en l os q ue se s embró el f i top atógen o puro. Si mul táne ame nte se p re pararon nuev e Erl enmeye r de ca ldo Sabouraud d onde s e se mbró c ada antagoni s ta c on c ada fi topatógeno a una dil uci ón de 1:100. Luego se sumergi eron di sc os de pape l de fil tro d e 5mm de di á metro c on l a sus pensi ón de cada en sayo y se c oloca ron sob re pl aca s de aga r Sabou ra ud. Las pl acas se i nc ubaron a temperatura ambie nte durante 5 días . Bioensay os In Vitro , en semilleros . Se utili zaron 3 5 se mil la s de toma te, 35 de c ebol l a y 3 5 d e pi men tón por cada en sayo, e s deci r se util i zaron un total de 105 s emil l as por cad a rub ro. Se se lecc ionaron 2 semi ll eros de 100 posi l los, uno para semil las tratad as y s i n tratar y otro para i nf e ctada s y tratada s, se util i zó ti erra abonada adqui rid a de f orma comerci a l y una v ez s emb ra dos c on l as semi ll as a ensayar s e col o caron en un cu arto a c i el o ab ierto a f in de acon di ci onarlos a l a s con di cio nes real es de siembras s i n inv ernade ro , y se f ueron reg ando do s vec es po r día (ma ñana y tarde) c on agu a corri ente. Estas condi ci o nes s e apl i caron a l os ensa yos p osteri o re s. Cabe de stac ar, que l as semi ll as fueron man i pula das u ti li za ndo pi nzas esté ri les. T ra tamiento de las semilla s con el controlador biológico y sin controlador biológico: Para el trata mi en to de se mill a s de to mate, pi mentón y c ebol l a, se sel ecci ona ro n 35 semil las de cada rubro, l as cua les se c ol oc aron en pl ac as de Petri es téril es, do nde se ag regó una sus pensi ón del c ontrolad or bi ol ógi c o, su mergi éndose po r 24 ho ra s a temp eratura ambi ente. Lue go l as semill as tra tadas se c oloc aron sobre un pa pel de fil tro estéril dejando esc urri r u n poco el cul tiv o ex ced ente y l ueg o f ue ron s embradas en se mi ll e ro s. Ademá s, s e re ali zó l a si embra de 35 s emi ll as de tomate, pi men tón y c ebol l a que n o fue ron trata das con el produc to bi ológi co, s ino sumergida s en ag ua d esti l ada estéri l . Este ensayo s i rvi ó para co mpara r el crec i mi ento de esta s pl ántu las en rel ac ión a la s inf e ctada s co n l os fi topatógenos . Semillas in fe ctadas y tratadas : Se col ocaron, en pl ac as de Pe tri esté ri l es, 35 semill as de tomate, pi me ntón y cebo ll a a la s que se l es agregó la s usp ensi ón de cada fi to patógeno, sumergi éndose d urante 24 horas a temperatura a mbi e nte. Pos teriorme nte fuero n sembrada s en semi ll eros . A una parte de la s semil las (1 2/35) sumergid as en l a Salus online 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p.12 sus pensi ón de l os fi topatóg enos , l uego de ser s embra das, s e l es agregó di ari a mente una dos i s de 0 .1mL por s emi ll a del a ntagon i sta con una con centraci ón d e 10 4 UFC/mL. Durante dos s emanas s e fu eron real i zand o l as obs erv ac iones : Se l l evo a c abo el recue nto del núme ro de semil l as germi nadas , medi d a de l a l ong i tud de las pl á ntul as . Se co mparó el crec i mi ento entre las pla ntas tratadas y l a s i nfectadas no tratadas , tomand o en c uenta su lon gi tud, número de pl antas y f ol l aje. Cada ensa yo s e reali zó por dupli cado. Análisis de datos . Lo s resu l tados se anali zaro n con el pro grama Stati sti x 8.0, empl eando p ru ebas de medias Tuke y y a nál i si s de Krus ka l Wal li s con un ni vel de confi anza del 90 %. RESULTADOS. Figura 1. Efecto antagónico in vitro a través de la medida del halo de inhibición de tres controladores biológicos sobre fitopatógenos en medio sólido. Fusarium monilliforme Rhyzoctonia solani Phytophthora spp Las ba rra s re presen tan el hal o de i n hi bic i ón en mi límetros c uand o l os fi topatógenos son se mbrad os i n vitro medi ante enf renta mien to en me di o sól ido con c ada anta goni s ta esta medida a sí, represe nta l a s usc epti bi li dad de cada f ito patógeno f re nte a cada c ontrola dor Salus online 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p.13 bi ol ógi co , p ara mos tra r el efe cto antag óni c o que esto s poseen. En l a fi gura 1 s e observ a que los fi topatógenos mostraron s ens ibili dad ante cada antag oni s ta so bre medios de cul tiv o s ól ido s, obteni éndo se hal os de in hi bi c ión entre 2 y 1 5 mm. Se mues tra q ue R. s ol ani e s el fi topa tógeno q ue mu estra me nor sensi bil i dad en lo s tres ca sos. T. vi ri de fue el anta goni s ta más efi ci e nte por i nhi bi r en mayor grado a l os fi topatógenos (p= 0,0000). Figura 2. Efecto antagónico in vitro a través de la medida del halo de crecimiento de tres controladores biológicos sobre fitopatógenos en medio líquido. Fusarium monilliforme Rhyzoctonia solani Phytophthora spp Las pri meras tre s ba rra s rep re senta n el crec i mi e nto d el fi topa tógeno cul tiva do p uro a parti r del med i o l íquido. Las ba rra s si gui entes represe ntan el c re ci mi ento de l fi topatógeno un a vez q ue este es s embrad o c on el a ntago ni sta en me di o l íqui d o. Se puede aprec iar que el creci mi ento del f ito patóge no es mayor cu ando es te es sembrado puro. Además, cuan do s e s i embra en presenc ia del antagoni s ta este in hi be el c reci mi ento d el fi topa tógeno . Cua ndo l o s fi topa tógeno s so n enf ren tados a B. sub til i s y P. aerugi n osa e n med i o l íquid o s e apreci a c omo e l c re ci mi ento de F. mo ni lli forme y Phytophthora spp e s i nhibi do totalmente. Si n emba rgo, y coi n ci di endo con l a fi gura 1 , R. sol ani mos tró l igera resi s tenci a, obteni éndo se 3 mm y 20 mm rel a tiv amente d e creci mi ento sob re el Salus online 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p.14 agar. En el caso de T. vi ride se ap re cia que i nhi be a R. sol ani y Phytophthora spp, con l igero creci mien to de F. mo nil li forme (27mm). El anál i si s es tadís ti co arroj o que exi sten dife re ncia s si gnifi ca tiv as e ntre l os fi top atógen os cu ando s e s i embran puros e n rel ac ión a lo s se mbrados c on el a ntagon ista (p< 0,10). Figura 3. Porcentaje de germinación de las semillas tratadas y no tratadas con el grupo antagonista. Semillas tratadas Semillas no tratadas En l a fi gura 3 se obs erv a c omo exi ste un a mayor ge rmi nac i ón de semi ll as tratadas de tomate, pi mentó n y ce bol la , en comparac i ón a l as s emi ll as no tratada s (p=0,8 165). Salus online 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p.15 Figura 4. Longitud de las plántulas de semillas infectadas tratadas y semillas infectadas sin tratamiento Tomate Pimentón Cebolla En l a fi gura 4 s e ap re cia que l as plántul as de semil las tratada s pos terior a l a i nfe cció n, p re senta ron una l ong i tud mayor q ue aquell as qu e f ueron i nfectad as y no tratadas. En cuanto al análi si s esta dísti c o se ev idenci ó que exi s ten difere nci as signif i ca tivas entre l a l ongi tud de la s pl anta s tratada s en relac i ón a las no tra tadas e n cua nto a cad a rubro. Tomate (p=0,0004), p i mentón (p=0 ,0024) y ceb ol la (p=0,0006). Ademá s se obs erv ó que el c ompo rta mien to de cad a a ntagoni sta es es pec ífi co en cada cas o, e s deci r, que no s e evi denci ó dif erenci a si g nifi c ativ a en c uanto a poder antag oni s ta d e cad a uno. DISCUSION En l o s ensa yos i n vi tro, al enf renta r los mi croorg ani smos antagóni c os Tri cho derma , Bac il lus y Ps eudo mon as sob re fi topatóg enos c omu nes en cul tiv os de to mate , pi men tón y ce boll a, se demo stró que el c reci mi ento de Fus ari um, Rhy zocto ni a y Phytophthora pu ede ser i nh ibido. Resul tados si mi l ares f ueron obte ni dos por La cey y col aborad ores (10), a trav és de prueb as i n v i tro , donde d emo straron el c ontrol de fi topa tógeno s d eriv ados del s uelo al utili zar c omo antagoni s ta a Salus online 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p.16 Tri cho derma sp p. Ade más , otros i nv es ti gado re s estud iaron l os meta bol ito s no v ol átil es prod ucid os po r e ste mi croorga ni smo ca pace s de i nhi bi r f i topatógeno s co mo e s el caso de Phy tophth ora ni c oti an ae y Rhy zocton i a sola ni (11, 12). En el estu dio Tri ch oderma vi ri de mostró la mayor e fi ci en ci a en cuanto a que el ef ecto inhi bi tori o fue si gnifi ca tiv amente mayor al de Bac ill us sub tili s y Pseudomonas aerugi nosa . Al gunos autores señal an que Tri chod erma ha sido mere cedo ra de una ma yor atenc ión en temas de control biológi co, ya que s u activ i dad res ul ta de u na combinaci ón d e mi c ro paras i ti smo y una produc ció n de metab ol i tos cap aces de c ontrola r un gran número de pl ag as (11). Otros mi c roorgan i smos mostraron su efe cto antagóni co como f ue el cas o de Ps eudo mon as a erugi no sa, la cual mos tró tene r ef ecto antagóni c o so bre l o s fi to patógenos en e studi o al obten erse hal os de i nhi bi ci ó n mayo re s a 5mm de diámetro. Frías (13) en el 2006, mostró que esta bacteria i nhi be el creci mi en to de a l guno s mi croorga ni smos patógenos como Al ternari a al ternata, a tra vés d e la prod ucc ión de meta bol ito s anti mi cro bi ano s (13). Al es tudi ar el efec to an tagóni co q ue Ba cil lu s podría tene r sobre l os fi topa tógeno s, se ob serv a ron halo s de inhi bi ci ón en l o s ens ayo s i n vi tro que co nfi rma n n uestra hi pótesi s. Lagunas y c ol ab oradores (14 ) al estu di ar i n v i tro l a c apaci dad antagóni ca de Baci ll us f rente a Phytophthora cap si ci lo graron l a i nhi bi ción del crec i mi ento mi celi al de este fi topatógeno c omú n en to mate. Para pod er proteger a l a pl án tula de fu turas e nf ermed ades bioló gi ca s se trató de demo strar q ue el tra tamie nto de semi ll as es efectiv o y p uede mej orar las c ondi ci ones y des arroll o de las pl antas . As í, en l os ensa yos i n vi vo s e demostró que aqu ell as semi ll as que fu eron tratada s mostraron un po rc entaj e mayor de g ermi na ci ón en rel aci ón a l as no tra tadas . Es tos resul tados coi ncid en c on l os p resentados por Hern ández (15), d onde prueba que el trata mi ento d e s emi ll as di s min uye la mo rta li dad y esti mul a la germi nac ión de l a pl anta. En c uanto al ensayo d e s emi ll as i nf ec tadas y po steri ormente tratad as s e demostró u na ma rc ada germi naci ón y foll aj e en rel a ci ón a las in fectad as y no tratada s. Otros i nv e sti ga dores mo straron como l as planta s d e tomate, al ser trata das con Pseu domonas fl uore cse ns o Baci ll us , prese ntaron mayor al tu ra y f oll aj e en un 84% (9, 10). Es tudi o s re al i za dos por Santand er y col aborado res (8) en el 200 3 c on Tri c hode rma h ar zi a num sobre Fusa ri um obtuv i eron l a reduc ció n de la i n ci de nci a y s ev e ri dad de l a marc hi tez. Si n e mbargo , en otros e studi os re ali za dos por La gunas y col aborado res (14 ) al utili zar Bac il lus como a gente anta góni c o en un sue lo inf es tado, no se mostró l a i nhibi ción de Phy tophtho ra capsi ci , es dec i r, no reduj o la inc iden ci a y marc hi tez en el j i tomate . CONCLUSIONES - T. vi ri de, B. subti li s y P. a erugi nosa tu vi eron un ef ec to antagoni s ta f rente a c ada fi topatógeno (p< 0,1). Se observó q ue el trata mi en to de s emil l as f avorec e l a germi naci ón y c reci mi ento de l as plántulas (p <0,1). Salus online - 15-3 Diciembre 2011 Antagonistas y fitopatógenos en vegetales p.17 El antag oni s ta con mayor efi ci enci a fue Tri c hoderma vi ri d e. El mi c roorgani smo que mostró meno r s ens i bi li dad a l a acc ión de l os antago ni stas fue R. sol ani . El uso de productos bi ol ógi co s pue de recu perar la pl ántul a una v ez que e sta ha ya s i do infe ctada . Posib leme nte se puede li mi tar el us o de pe sti ci das, a trav és del uso de mi croorgani smos q ue no g eneran daños adv ersos a la sal ud y medi o ambi ente. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. Aciego J. Efecto rizosfera del cultivo de maíz sobre algunas poblaciones microbianas y características químicas de un suelo tropical. Rev Venesuelos 2006; 6: 39-45. 2. 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