EXAMEN DE HECES EN FRESCO Y COPROCULTIVO Práctica 9 1. Observación directa • Consistencia: ▫ Formada ▫ Semiformada ▫ Pastosa ▫ Líquida • Trozos duros separados F o r m a d a • Cilíndrica compuesta de fragmentos. • Cilíndrica con grietas en la superficie. • Cilíndrica lisa y suave. Semiformada Pastosa Líquida • Bultos blandos con bordes definidos • Fragmentos blandos, bordes irregulares y consistencia pastosa. • Acuosa, sin pedazos sólidos, totalmente líquida. 1. Observación directa • Consistencia: ▫ Formada ▫ Semiformada ▫ Pastosa ▫ Líquida • Color ▫ Café ▫ Marrón ▫ Negro ▫ Amarillo • Restos alimenticios • Moco • Sangre 2. Determinación de pH Portaobjetos + papel pH + 1 Muestra Ácido 1 – 6 Neutro 7 Básico 8-14 3. Preparación de la emulsión Tubo split 3. Preparación de la emulsión Tubo split + 2 mL SS 0.5 Mx Limpiar el tubo con algodón y cloro 0.5 g de heces 2 mL Solución salina Homogenizar con el vortex Centrifugar 5 min Descartar sobrenadante (beaker con cloro) 4. Siembra en medios de cultivo • Agar XLD • Agar SS • Agar McConkey • Sembrar los microorganismos, utilizando un asa • Incubar a 37°C / 24-48 h 5.1 Preparación del frotis (lamina 1) Colocar una gota de la suspensión de heces Colocar un portaobjetos Observar en 40x Material vegetal Bacterias Jabones Cristales 5.2 Preparación del frotis (Lamina 2) Hacer un frote delgado con la suspensión de heces Dejar secar al aire Fijar al mechero Teñir con Gram Tinción de Gram • Cristal violeta (1 minuto) ▫ Lavar • Lugol (1 minuto) ▫ Lavar • Alcohol-acetona (3-5 segundos) ▫ Lavar • Safranina (1 minuto) ▫ Lavar Observación • Muestra de heces (características macroscópicas) • Siembra de las cajas (McConkey, XLD y SS) • Frote 1: 40x • Frote 2: 100x (teñido con Gram)