Inoculación con Azospirillum sp en cultivos comerciales. Girasol en la loma Iglesias, María C. - Cracogna, Mariano F. - Fogar, Mariela N. - Miceli, Gabriel Cátedras de Microbiología Agrícola - Facultad de Ciencias Agrarias - UNNE. Sargento Cabral 2131 - (3400) Corrientes - Argentina. E-mail: migles@agr.unne.edu.ar - mariaiglesias@ciudad.com.ar INTRODUCCION Y ANTECEDENTES Los microorganismos asimbióticos fijadores libres de nitrógeno, como Azospirillum sp, no pueden ser estudiados separadamente, sino como componentes del sistema suelo - planta. Resultados obtenidos muestran que la respuesta a la inoculación, varía en función del grado de fertilidad y la disponibilidad de agua de los suelos. La práctica de la inoculación puede ser una metodología razonable de adoptar, con la finalidad de proveer al cultivo aportes de la fijación biológica del nitrógeno y otros estimuladores biológicos del crecimiento. Varios microorganismos del suelo comunes en la rizosfera son capaces de producir cantidades de PGRs (fitohormonas), producción que tiene un pronunciado efecto sobre el crecimiento y desarrollo de las plantas y la inoculación con Azospirillum es una práctica en biotecnología. (Perotti y Pidello 1999) Tal como cita Bellone y Caarrillo de Bellone (2001). Azospirillum brasilense es una rizobacteria fijadora del nitrógeno del aire que promueve el crecimiento cuando es inoculada especialmente en gramíneas y Salamone y Nelson (2001) comprobaron efectos benéficos directos sobre el crecimiento vegetal de las rizobacterias productoras de PGPR. Los resultados obtenidos por Rodríguez Cáceres et al. (1996) mostraron que la respuesta a la inoculación varía en función del grado de fertilidad y la disponibilidad de agua de los suelos, observando la gran importancia que puede adquirir la relación cepa - cultivar. También Jaime et al. (1999) concluyeron que la inoculación con diferentes cepas de fijadores libres de nitrógeno lograba incrementos en el cultivo de maíz, en especial con Azospirillum. Y Creus et al. (1996) encontraron que la presencia de Azospirillum sp 245 mejora el estado hídrico de plántulas de trigo y Lucangelli y Bottini (1996) demostraron que la presencia de la bacteria A. lipoferum sp 33 o A. brasilense cd incrementó positivamente el largo del primer entrenudo tanto en maíz (zea mays L) como en arroz ( Oryza sativa L). También en maíz Bellone et al. (1999) registraron mejoras en el peso seco del sistema radical y en los parámetros de la parte aérea. Ruiz et al. (1996) sostienen que la inoculación con Azospirillum puede modificar parámetros del crecimiento vegetal asociados o no con el rendimiento del cultivo e Iglesias et al. (2000) en un ensayo en trigo con inoculante mixto conteniendo Azotobacteriaceas, Saccharomyces spp y Endogone spp marcó diferencias favorables a partir de los 100 días y el mayor desarrollo radicular mostró su efecto en lo que hace a estado general de la planta y a las perspectivas futuras de rendimiento. Con el objetivo de determinar la influencia de la inoculación con Azospirillum Az 39 INTA en el cultivo del girasol se llevó a cabo un ensayo en un lote ubicado en la loma. MATERIALES Y METODOS El ensayo se realizó en la zona de Villa Ocampo, Santa Fe, en un lote de 50 has, perteneciente a una zona de loma, cuyo suelo presentó un pH de 5.1, MO 1.72 % y 19, 79 mg Kg -1 de P,. El lote tenía como antecesores cultivos de caña de azúcar y soja, fue preparado con dos pasadas de doble acción y una de cincel. Por falta de precipitaciones no se realizó una adecuada preparación de la cama de siembra y retrazó la misma. La precipitación anterior a la siembra, fue de 23 mm y se produjo el 09/08/2000. Se sembró el 16 de agosto de 2000 con una sembradora de 9 surcos con cajón de fertilización. Se utilizó un inoculante conteniendo Azospirillum Az 39 INTA concentración de 1,2 x 108 ufc mL-1 en una dosis de 1 L x 100 Kg-1 de semillas Se aplicó un diseño en franjas alternando los tratamientos: 1. testigo, 2. inoculado, 3. fertilizado con fosfato diamónico 75 Kg ha -1 y 4. fertilizado e inoculado. Se realizaron controles a los 40 días de la siembra de: número de hojas, número de nudos, altura de las plantas y área radical, y a cosecha se registró el diámetro, el peso de los capítulos y peso de los granos por capítulos. El muestreo se efectuó al azar sistemático y se determinaron los distintos parámetros de posición y de dispersión. Se calculó la LSD (P<0,05) utilizando la prueba de t., para la comparación los tratamientos. RESULTADOS En el muestreo de los 40 días, las precipitaciones no se habían producido para favorecer el desarrollo inicial de las plantas. Para el área radicular (Figura 1) las diferencias alcanzaron significación y se destaca el tratamiento fertilizado. En esta oportunidad los resultados no marcaron la influencia de la inoculación con relación al estímulo del crecimiento radicular tal como lo citan Bellone et al. (1999). 75.00 Area Radicular ab a ab b 50.00 25.00 0.00 Testigo Inoculado Fertilizado Fert + Inoc Figura 1: Area radicular. * Letras iguales no difieren estadísticamente Número de nudos por plantas 10.00 8.00 ab b a 6.00 b 4.00 2.00 0.00 Testigo Inoculado Fertilizado Fert + Inoc Figura 2: Número de nudos por planta.* Letras iguales no difieren estadísticamente. Número de Hojas 15.00 a 10.00 b a a 5.00 0.00 Testigo Inoculado Fertilizado Figura 3: Número de hojas. * Letras iguales no difieren estadísticamente. Fert + Inoc En el control de número de nudos por planta (Figura 2) y número de hojas (Figura 3) los tratamientos inoculado e inoculado más fertilizado fueron menores a los dos restantes, y en la altura de las plantas (Figura 4), solo se destaca el tratamiento fertilizado, no mostrando diferencias los otros. En estas consideraciones no se presentaron las situaciones de estímulos como lo citan: Arshad y Frankenberger (1992), Glick (1995) diciendo que las rizobacterias productoras de PGPR tienen un pronunciado efecto sobre el crecimiento y desarrollo de las plantas. cm Altura de plantas a 25.0 20.0 15.0 10.0 5.0 0.0 b b b Testigo Inoculado Fertilizado Fert + Inoc Figura 4: altura de plantas * Letras iguales no difieren estadísticamente. Para la etapa de cosecha las precipitaciones del período habían sido normales no faltando humedad para el desarrollo en las etapas de floración y fructificación Peso de capítulos g 80.0 a a a a 60.0 40.0 20.0 0.0 Testigo Inoculado Fertilizado Fert + Inoc Figura 5: Peso de los capítulos * Letras iguales no difieren estadísticamente. g 60 50 40 a Peso de granos a a a 30 20 10 0 Testigo Inoculado Fertilizado Fert + Inoc Figura 6: Peso de los granos por capítulos. * Letras iguales no difieren estadísticamente. A la cosecha la medición del diámetro de los capítulos no marcó diferencias, pero cuando se realizó el peso de los capítulos y el peso de los granos por capítulo muestreado (Figura 5 y 6), el tratamiento inoculado superó al testigo con diferencias del 20 %, y en el tratamiento inoculado y fertilizado la diferencia fue de 11 %, pero no alcanzan a manifestar una diferencia estadística. De la observación de los capítulos se pudo apreciar que en los tratamientos inoculado e inoculado más fertilizado estaban con llenado más uniforme y hasta el centro. Para esta situación la inoculación marcó un efecto favorable, incluso plantea la necesidad de realizar los costos para comparar en la toma de decisiones en relación con la fertilización. Considerando estos resultados y comparando con el ensayo realizado en la media loma, Iglesias et al. (2001) las condiciones del suelo marcan influencia en la efectividad de la inoculación en el cultivo de Girasol, tal como lo afirman para otros cultivos Rodríguez Cáceres et al. (1996). También Jiménez et al. (2001) manifiestan la necesidad de intensificar los estudios con las bacterias endofíticas en relación con la competencia por el espacio (densidad de la población) y por los nutrientes. CONCLUSIONES En este ensayo los efectos de la inoculación se vieron reflejados en las últimas etapas del cultivo. Para el tratamiento inoculado con el testigo, los resultados en el peso del capítulo y el peso de los granos por capítulo marcaron incrementos del 20 %, y para el inoculado y fertilizado con relación al fertilizado la diferencia fue de 11 %. REFERENCIAS Arshad M Frankenberger W T 1992. Microbial producction of plant grow th regulators. Blaine Metting F. Jr. Soil Microbial Ecology. p 309-348 Bellone C H; Carrizo de Bellone S. 2001.Azospirillum brasilense induce la producción de jasmonatos en raíces de caña de azúcar. III Reunión Nacional Científico Técnica de biología del Suelo- Fijación biológica del Nitrógeno. Universidad Nacional de Salta, facultad de Ciencias Naturales.. Actas y CD ROM. Bellone C H; Carrizo de Bellone S; Jaime M A; Manlla A M y Monzón de Ascorregui M A: 1999. Respuesta de dos cultivares de maíz (Zea mays L) a la inoculación con distintos aislamientos de Azospirillum spp. II Reunión Científico Técnica- Biología del Suelo- Fijación biológica del Nitrógeno. 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Influencia de la inoculación con Azospirillum brasiliense en trigo cultivado en suelos de la provincia de la Pampa, Argentina. Ciencia del Suelo 14: 110-112. Ruiz RA, Sánchez Serra AP, Garcia IE, Satorre E H. 1996. Actas de la .XXI Reunión Argentina de Fisiología Vegetal. p 310-311 (*)Trabajo realizado en el marco del convenio Cátedra de Microbiología –BPF Argentina S.A. Agradecimiento al Establecimiento de la Familia STECHINA.