Transplante de plántulas

SELECCIÓN DE PLANTAS RESISTENTES A ENFERMEDADES II
Genética y Mejora
ETSI AgrónomosEn esta práctica se trata de trasplantar las plántulas obtenidas en la práctica anterior, del
algodón a una maceta con turba.
El poder germinativo depende de las condiciones de temperatura y humedad relativa, conviene que ambos
parámetros sean bajos.
Para la selección de plantas resistentes a enfermedades, lo primero que hay que plantearse es el material a
inocular, en un estudio convencional utilizaremos variedades comerciales susceptibles a la enfermedad, ya
que son las que se pretende hacer resistentes; además probaremos también variedades silvestres. Se toman 20
entradas y 20 plantas por entrada, lo que hace un total de 400 plantas, esto supone un aumento considerable
del espacio de trabajo.
Precauciones para tener garantías para afirmar que una planta es resistente:
• Además de las 20 plantas por entrada introducimos una denominada control no inoculado, que es una
planta sana sin inocular, que si lo comparamos con las demás plantas servirá para determinar los
síntomas de la enfermedad. También introducimos lo que se denomina un control inoculado con agua
destilada y abrasivo, de esta forma puede entrar en la planta cualquier enfermedad que enmascare los
síntomas del virus; si los síntomas de este control se manifiestan en las demás plantas, significa que
no son síntomas propios del virus.
• Una de las entradas a probar será una variedad susceptible a la enfermedad, de esta forma
comprobaremos si hemos inoculado bien, es decir, si los resultados obtenidos son fiables.
• También introducimos una entrada de un control de variedad resistente a la enfermedad para evaluar
si la resistencia encontrada es mejor o peor de la que ya existe.
Una vez hemos decidido el material a emplear, inoculamos:
Entradas:
A
B
C
20 plantas
20 plantas
20 plantas
Además de los dos controles (inoculado y no inoculado) que tenemos por cada entrada, estos controles estarán
aislados o no en función del virus del que se trate, por ejemplo el ToMV es de transmisión mecánica, por eso
pondremos los controles aislados.
El principal problema que plantea la inoculación mecánica es que las condiciones de inoculación de la primera
bandeja no son las mismas que las de la última bandeja; esto se debe a que el ataque del virus es muy agresivo
en las primeras bandejas inoculadas, pero más débil en las últimas, ya que son parásitos obligados; además de
los problemas derivados del cansancio de la persona que está inoculando. Para solucionar estos problemas se
aleatorizan las plantas en todas las bandejas de todas las entradas, por tanto todas tendrán una probabilidad de
inoculación media similar. En el virus del ToMV (de transmisión mecánica) esto no es muy importante ya que
tarde o temprano las plantas se inoculan por contacto entre ellas, no obstante conviene hacerlo así.
Se hacen dos inoculaciones, la primera se realiza cuando la planta tiene de 4 a 6 hojas desarrolladas, y la
segunda 7 días después sobre las nuevas hojas desarrolladas (1 ó 2 hojas).
1
Se toman muestras a los 15, 30, 45 y 60 días después de la segunda inoculación, se compara el aspecto de las
plantas inoculadas con el control no inoculado y se evalúan de 0 (sin síntomas) a 4 (muestra síntomas muy
graves o muerte).
El fenómeno de sistemia consiste en la transmisión del virus a través de la planta. Hay ocasiones en que la
resistencia consiste en que infectando las hojas superiores el virus no se transmite por toda la planta.
Con el resultado sintomatológico obtenemos el porcentaje de plantas resistentes y susceptibles y la técnica
Dias−elisa permite determinar si el virus está presente en la planta y medir la concentración de virus en los
tejidos afectados.
2