IT-75-HEM-3B INSTRUCCIÓN TÉCNICA Revisión: A Tinción May Grünwald - Giemsa Página 1 de 3 DISTRIBUCIÓN: DEPARTAMENTO RESPONSABLE Dirección Jefe de la Unidad de Calidad Hematología Jefe de la Unidad de Hematología Enfermería Coordinadora de Enfermería SUMARIO DE MODIFICACIONES REVISIÓ N A FECHA DESCRIPCIÓN 29/01/07 Primera edición PREPARADO REVISADO Y APROBADO Nombre: Marga Alcover Cargo: Coordinadora de Enfermería Fecha: 29/01/07 Nombre: Joan Bargay Cargo: Jefe de Unidad de Hematología Fecha: 29/01/07 La documentación del Sistema de Gestión de la Calidad se encuentra en la Intranet de Hospital Son Llàtzer. Existe una única copia papel autorizada y controlada en poder del Coordinador de Calidad, por lo que cualquier otro documento papel se considerará copia no controlada. IT-75-HEM-3B Tinción May Grünwald-Giemsa INSTRUCCIÓN TÉCNICA IT-75-HEM-3B Revisión: A Tinción May Grünwald - Giemsa Página 2 de 3 DEFINICIÓN Es una reacción histoquímica para la coloración de las células hemáticas. El colorante de May-Grünwald consta de una solución de eosina y de azul de metileno en alcohol metílico, que actúa como fijador. Su disolución en agua determina la disociación parcial de sus componentes, permitiendo su actuación como colorantes. El colorante de Giemsa es una combinación de eosina y derivados del azul de metileno (azur I y azur II). La acción combinada de ambos colorantes permite la correcta tinción de todas las estructuras celulares. Los núcleos adquieren una tonalidad rojo-violeta, los citoplasmas basófilos se tiñen de color azul y los acidófilos adquieren un tono rosáceo. La granulación específica neutrófila se tiñe de marrón, la eosinófila de naranja, la basófila de violeta oscuro y la granulación azurófila de rosado-púrpura. Los hematíes toman un color rosado púrpura y el punteado basófilo de su interior un color azul cobalto. OBJETIVOS REACTIVOS Y MATERIAL REACTIVOS: • May Grünwald • Giemsa IT-75-HEM-3B Tinción May Grünwald-Giemsa MATERIAL: • Batea • Soporte de varillas de vidrio • Pinzas de disección • Pipetas pasteur de plástico • 1 cubeta de tinción vertical • 2 probetas • Agua destilada • Campana de flujo laminar • Guantes • Mascarilla si es necesario • Reloj cronómetro • Papel de filtro • Embudo • Alcohol INSTRUCCIÓN TÉCNICA IT-75-HEM-3B Revisión: A Tinción May Grünwald - Giemsa Página 3 de 3 ACCIONES PREVIAS • Lo primero que se hará será dejar secar al aire las extensiones realizadas por el Hematólogo/a durante 30 min. como mínimo. • Preparación de la tinción Giemsa: en una cubeta de tinción filtrar 7 ml de Giemsa y una vez filtrado añadir 63 ml de agua destilada. NOTA: la tinción Giemsa puede usarse durante una semana. TÉCNICA • Colocar en una batea las varillas de vidrio y poner la extensión encima. • Cubrir la extensión con la solución de May Grünwald (procurando que no se derrame) con una pipeta pasteur durante 1,5 min. • Añadir varias gotas de agua destilada encima, procurando que quede uniforme la coloración (soplar si hace falta), durante 1,5 min. • Decantar y limpiar con papel el porta por la parte de detrás. • Introducir la extensión en la cubeta con Giemsa anteriormente preparada durante 20 min. • Lavar con agua del grifo dejando caer un chorro pequeño sobre la extensión. • Limpiar la parte de detrás del porta con papel humedecido con alcohol. • Dejar secar al aire, dejando el porta vertical. BIBLIOGRAFÍA Técnicas de tinción en Hematología .LA CITOLOGÍA ÓPTICA EN EL DIAGNÓSTICO HEMATOLÓGICO. S. Woessner - L. Florensa 4ª edición, Editorial FEHH. IT-75-HEM-3B Tinción May Grünwald-Giemsa