Taller Binacional Ecuador-Colombia Conservación de los manglares y sus recursos en la frontera Ecuador-Colombia Plan de acción regional para la conservación de manglares en el Pacífico sudeste (PAR) MANEJO DEL RECURSO CONCHA PRODUCCIÓN DE LARVAS DE CONCHA PRIETA/NEGRA EN LABORATORIO PARA REPOBLAMIENTO Y ENGORDE: EXPERIENCIAS EN ECUADOR Y PERÚ Virna Cedeño Escobar ESTRATEGIAS DE RECUPERACIÓN DEL RECURSO Anadara tuberculosa - Limitación esfuerzo de pesca vedas prevención - Producción de semillas en condiciones de laboratorio: ACUICULTURA-REPOBLAMIENTO Larva pediveliger Larva con ojo Larva umbonada Larva asentada 12 días 11 días Larva- D 6 días 18 días 48 horas Trocofora Post- larvae 20 días Ciclo biológico de la concha negra Anadara tuberculosa 12 horas 37 días semilla 1 mm Ovocitos 60 días Huevo fecundado Semilla de 3-5 mm espermas Reproductores 71-FINCYT-PITEI-2010 Experiencias en producción de semilla de A. tuberculosa concha negra con fines de repoblamamiento Ocean Farm – Ecuador y CEBAP Puerto Pizarro- Perú. FINCyT PITEI 071: Desarrollo de metodologías para la reproducción y larvicultura de la Concha negra (Anadara tuberculosa), destinada a operaciones de repoblación en el Santuario Nacional Los Manglares de Tumbes y engorde en cultivo. Diseño de laboratorio Cultivo de microalgas Fijación de larvas Tanques con semillas Laboratorio de diagnóstico Área de cultivo Acuicultura: Acondicionamiento y desove 1 2 Temperatura adecuada y estable, alimentación suficiente maduración gonadal. Inducción desove shock térmico, químico, microalgas, estrés… 3 Desove masal o separada, fecundación masal o controlada Experiencia Ecuador: Ocean Farm, Manta Experiencia Perú: Hivos y PRC en el CEBAP, Puerto Pizarro a b Desove de una hembra (a) y de un macho (b) de Anadara tuberculosa Desarrollo embrionario a 26°C de Anadara tuberculosa: Óvulo fecundado de 55µm (A); Aparición del primer glóbulo polar (B); Divisiones celulares(C, D, E y F); Larva trocófora (G y H). Desarrollo larvario de las fases planctónicas de Anadara tuberculosa a) larva tipo D, b) larva umbonada, c) larva con ojo, d) larva pediveliger Experiencia Perú: Hivos y PRC en el CEBAP, Puerto Pizarro 2.500.000 # de larvas 2.000.000 1.500.000 1.000.000 500.000 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 Sistema de acondicionamiento de reproductores de Anadara Dias de cultivo tuberculosa en un congelador para mantener una temperatura Seguimiento de las mortalidades del primer lote de larvas de de 23-24° Anadara tuberculosa obtenida en el CEBAP 9.000.000 8.000.000 # de larvas 7.000.000 larvas umbonadas y semillas de menos de 1mm de lotes de larvas de Anadara tuberculosa obtenido en el CEBAP 6.000.000 5.000.000 4.000.000 3.000.000 2.000.000 1.000.000 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 Dias de cultivo Seguimiento de las mortalidades del primer lote de larvas de Anadara tuberculosa obtenida en el CEBAP II. Enfermedades Mortalidades en reproductores Diagnóstico molecular Perkinsus sp. Bacteriosis Vibrio y Pseudomonas. Mortalidad en larvas Bacteriosis: Vibrio y Pseudomonas Géneros relacionados a mortalidades son: V. alginolyticus, V. tubiashii y V. anguillarum, V harveyi, V . parahaemoliticus (Romalde et al., 2015; Elston., 1980; Riquelme et al., 1995, 1996, 2001, 2015). microbiota nativa benéfica Microbiota nativa cultivable Tracto digestivo Agua Sangre Suelo Microbiota nativa no cultivable Explorar la composición de la microbiota nativa cultivable y no cultivable asociada a la sangre y al tracto digestivo de individuos sanos de A. tuberculosa, un candidato potencial para la producción acuícola. Microbiota cultivable Se encuentra dominada por bacterias con fácil crecimiento Vibrio, Pseudomonas, etc Alto % de las especies bacterianas no son cultivables diversidad es sub estimada. Microbiota total (Metagenómica): bacterias cultivables y no cultivables in vitro La composición microbiana global del tracto digestivo de ostras ha sido analizada en los últimos años (Kings et al., 2012; Trabal et al., 2012 y Chauhan et al., 2014). Se han direccionado estudios de la microbiota total presente en la hemolinfa en la ostra del Pacífico bajo condiciones de estrés de temperatura e infección con vibrios (Lockmer et al., 2014). La metagenómica ha demostrado que la ostra alberga un microbioma más diverso que aquel generalmente caracterizado por microbiología clásica (Garnier et al., 2007; Najiah et al., 2008). Realización de cortes congelados de concha negra para visualizar y caracterizar componentes moleculares del molusco y bacterias asociadas. Final 100 - Shots 800 - 43438; Run #10; 4271.2456(R240,S124) Label H6 M Vibrio sp. Y1-10 a s a n Staphylococcus aureus i m a nativas, aisladas a partir de TD y SG de Primeros perfiles MS de bacterias A. tuberculosa : proteómica metaproteómica l e s p Circulo de investigación en biotecnología molecular para el desarrollo y la sostenibilidad a de los sectores acuícolas r del Perú. Proyectos Canon a a • Bioenergética á 90 582.4 6161.2100(R354,S128) 80 5173.9624(R287,S105) 70 6401.2568(R348,S80) 60 50 40 7189.6821(R672,S35) 30 6460.7622(R450,S23) 9445.0225(R636,S26) 20 10 0 1996.0 4609.4 7222.8 9836.2 Mass 12449.6 15063.0 (m/z) Final - Shots 800 - CONCHA NEGRA IB 9-2 16; Run #5; Label K13 7534.2607(R558,S211) 100 2172.1 90 80 6886.9878(R454,S144) 70 60 50 40 30 Detección de genes antibacterianos a partir de bacterias nativas, aisladas a partir de TD y SG de A. tuberculosa Estudio de genética de 03 población de A. tuberculosa de Ecuador: Primera detección del patógeno intracelular Perkinsus en A. tuberculosa por diagnostico molecular 20 4424.9185(R346,S56) 3919.5210(R383,S31) 6856.2808(R674,S20) 6223.2539(R418,S33) 9526.1504(R597,S35) 10 0 1996.0 5612.4 9228.8 12845.2 16461.6 Mass (m/z) • • • Composición en FAAs Cambios estructurales (M.electronica) Transcriptomica diferencial 20078.0 GRACIAS B. DIRINGER, K. PRETELL, R. AVELLAN, A. FLORES, J. GONZALEZ, K. ZAPATA, N. RIOS, A. MARCHAN, G. HULLIN, E. MOTTE, E. MIALHE, V. CEDEÑO