técnicas para la purificación y caracterización de biomoléculas

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TÉCNICAS PARA LA PURIFICACIÓN Y
CARACTERIZACIÓN DE BIOMOLÉCULAS
Créditos:
Horas semana/mes:
Departamento:
Programa:
División:
Unidad:
4
4 h prácticas.
Ciencias Químico Biológicas, CIAD
Maestría en Ciencias de la Salud.
División de Ciencias Biológicas y de la Salud
Centro
Descripción
El curso cubre temas relacionados con los métodos de separación y purificación de
biomoléculas y su transformación por métodos fisicoquímicos, químicos y bioquímicos en
muestras homogéneas y heterogéneas. Las biomoléculas se caracterizan por ser sistemas
dinámicos que evolucionan en su estructura y propiedades, al tiempo que lo hace el
medio en el que se encuentran, siendo su aislamiento y purificación un medio idóneo para
su estudio, mediante diferentes técnicas que hacen posible apreciar la dinámica que
tienen carbohidratos, lípidos, aminoácidos y péptidos, proteínas, enzimas y ácidos
nucléicos en los procesos homeostáticos y metabólicos del organismo humano.
Objetivo General
Los alumnos serán capaces de elegir y aplicar las técnicas básicas para la purificación y
caracterización de biomoléculas solubles bajo condiciones fisiológicas, además conocerán
las técnicas bioquímicas y físicas de alta resolución empleadas para la purificación y
caracterización de biomoléculas.
Objetivos Específicos
 Los alumnos manejarán los conceptos de los métodos básicos para el aislamiento y
purificación de biomoléculas.
 Los alumnos tendrán la habilidad de seleccionar y aplicar los métodos básicos para
el aislamiento y la purificación de biomoléculas solubles bajo condiciones
fisiológicas.
 Los estudiantes comprenderán los métodos bioquímicos y físicos de alta
resolución, empleados para la caracterización de los componentes químicos de las
biomoléculas.
Contenido Sintético
1. Técnicas para el aislamiento y la purificación de biomoléculas.
1.1. Técnicas de precipitación.
1.2. Técnicas para la separación por solubilidad diferencial.
1.3. Métodos basados en la centrifugación.
1.4. Métodos cromatográficos.
1.4.1. Filtración en gel en sistema de presión baja.
1.4.2. Filtración en gel por HPLC.
1.5. Métodos electroforéticos.
1.5.1. En geles de poliacrilamida nativos y desnaturalizantes y reductores.
1.5.2. En agarosa.
2. Evaluación de la pureza y masa de una biomolécula.
2.1. Por métodos cromatográficos (filtración en gel).
2.2. Por métodos electroforéticos.
2.3. Por métodos físicos.
3. Caracterización de los componentes químicos.
3.1. Análisis cualitativo.
3.2. Análisis de la secuencia.
3.3. Análisis de la composición.
Actividades de Aprendizaje
1. Sesiones teóricas a cargo del docente.
2. Sesiones de discusión de artículos originales relacionados con el contenido del
curso y previamente seleccionados por el docente y los alumnos.
3. Los alumnos aislarán un grupo de biomoléculas, a partir de un extracto soluble
bajo condiciones fisiológicas, empleando dos métodos cromatográficos en
secuencia.
4. Los alumnos purificarán una biomolécula, a partir de un aislamiento biomolecular,
empleando técnicas cromatográficas, inmunoquímicas y electroforéticas.
Criterios y Procedimientos de Evaluación y Acreditación
Una vez por semana se tendrá la discusión de artículos originales y el promedio de
participaciones de los alumnos en estas sesiones contará 30 % de la calificación final. El
restante 70% será otorgado con base en los resultados que obtenga el alumno en el
proceso de purificación y caracterización de una biomolécula.
Evaluación del Aprendizaje de los Alumnos
Se acreditará, una vez a la
espontánea de los estudiantes en
forma en la que los alumnos
inmunoquímicos y/o físicos para
biomolécula.
semana, la asistencia y participación dirigida y/o
la discusión de artículos originales. Se acreditará la
seleccionan y aplican los métodos bioquímicos,
conseguir la purificación y caracterización de una
Bibliografía:
Abelson, J.N.; M.I. Simon MI, M.M. Ziegler y T.O. Baldwin: Bioluminiscence and
Chemiluminiscence Academic Press (Methods in enzimology 305), New York, 2000.
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2000.
Shuler, M. L. y F. Kargi: Bioprocess engineering. Basic concepts Prentice Hall, New Jersey,
2002.
Revistas: Journal of Chromatography B (Analytical Technologies in the biomedical sciences,
Biomedical applications, Biomedical sciences and applications) y Electrophoresis.
Perfil Académico del Docente
Académico con Maestría en Ciencias, deseable con doctorado en área afín, con
experiencia en docencia en licenciatura o posgrado de al menos dos años. Haber realizado
investigación por un período mínimo de dos años en área afín al programa de la materia.
Horas Docente: 4/sem.
Horas Independiente: 10/sem.
Instalaciones: Laboratorio equipado para la realización de bioseparaciones y
caracterización de biomoléculas.
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