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COMISIÓN DE CONTROL ANALÍTICO Y AMPLIACIÓN DE COBERTURA
Rev. No.: 0
CRITERIOS PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS FISICOQUÍMICOS
FECHA: 2011-02-16
CLAVE: CCAYAC-P-058
3.3 BLANCO DE MUESTRA: Son matrices que no contienen el analito de interés (placebo).
Son difíciles de obtener pero son necesarios para estimar las interferencias que pudieran
encontrarse durante el análisis de las muestras de prueba.
3.4 CRITERIOS DE ACEPTACIÓN: Parámetros bajo los cuales el resultado de una prueba
será considerado aceptable.
3.5 CURVA DE CALIBRACIÓN: Es la representación gráfica de la señal medida como una
función de cantidad del analito.
3.6 INCERTIDUMBRE: Estimación que caracteriza el intervalo de valores, dentro de los
cuales se encuentra el valor convencionalmente verdadero de la magnitud medida.
3.7 INTERVALO DE TRABAJO: Intervalo comprendido entre las concentraciones superior e
inferior (incluyendo dichas concentraciones) y para las que se ha demostrado que el
analito es cuantificado con un nivel satisfactorio de repetibilidad, recuperación y
linealidad.
3.8 INTERVALO LINEAL: Es la capacidad de un método analítico para dar resultados que
son directamente proporcionales a la concentración del analito dentro de un intervalo
dado.
3.9 LÍMITE DE CUANTIFICACIÓN: Es la concentración más baja a la cual el analito puede
cuantificarse con una precisión y veracidad aceptables bajo las condiciones
experimentales establecidas.
3.10 LÍMITE DE DETECCIÓN: Es la concentración más baja a la cual puede detectarse el
analito pero no necesariamente cuantificarse bajo las condiciones experimentales
establecidas.
3.11 MATRIZ O PLACEBO: Muestra que contiene todos los componentes de un producto a
excepción del analito.
3.12 MÉTODO NORMALIZADO: Proceso de medición robusto donde pequeñas variaciones
en el procedimiento no deben producir de forma imprevista grandes variaciones en los
resultados.
3.13 MÉTODO NO NORMALIZADO: Método alternativo que demuestra o estima el mismo
analito tal cual se mide utilizando el método normalizado.
3.14 MUESTRA ADICIONADA O FORTIFICADA: Porción representativa del material a
evaluar, a la que se le adicionan cantidades conocidas del analito de interés.
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3.15 PARÁMETRO DE DESEMPEÑO: Parámetro específico a evaluar en una validación.
3.16 RECUPERACIÓN O RECOBRO: Cantidad del analito recuperada en la porción de
muestra o muestra adicionada cuando esta es conducida a través del método analítico
completo, y que permite evaluar la eficiencia de la extracción, proceso de preparación e
interferencias que puedan existir al aplicarlo. Se expresa en términos de porcentaje.
3.17 REPETIBILIDAD: Grado de concordancia entre resultados analíticos individuales,
cuando el procedimiento se aplica repetidamente a diferentes porciones de una muestra
homogénea por un solo analista, usando los mismos instrumentos y método en intervalos
cortos de tiempo.
3.18 REPRODUCIBILIDAD (PRECISIÓN INTERMEDIA): Grado de concordancia entre
resultados analíticos individuales, cuando el procedimiento se aplica repetidamente a
diferentes porciones de una muestra homogénea por dos analistas o instrumentos
diferentes, usando el mismo método en diferentes días.
3.19 RESPUESTA ANALÍTICA: Lectura obtenida al aplicar un método analítico, como
pueden ser el área o altura del pico en un cromatograma, lectura de absorbancia,
cuentas de iones en un Espectro de Masas, lectura en mV, mL gastados en volumetría,
diferencia de peso en un gravimétrico, entre otros.
3.20 RESULTADO DE ENSAYO: Valor de un mensurando obtenido tras la realización de un
método de ensayo específico.
3.21 ROBUSTEZ: Es la medida de la capacidad del método analítico de permanecer
inalterado por pequeñas, pero deliberadas variaciones (efecto de cambio en las
condiciones) en los parámetros del mismo, proporcionando un índice de su confiabilidad
durante su uso normal.
3.22 SELECTIVIDAD: Es la capacidad de un método analítico para medir solamente lo qué se
pretende que se mida.
3.23 SENSIBILIDAD: Es el cambio en la respuesta del instrumento que corresponde a un
cambio en la concentración del analito. Es la pendiente del intervalo de trabajo y cuanto
mayor es esta, mayor es la sensibilidad del método.
3.24 SESGO: Es la diferencia entre el valor promedio obtenido de los resultados de prueba
con respecto a un valor de referencia aceptado o conocido.
3.25 VALIDACIÓN: Es el proceso que establece, mediante estudios de laboratorio, que las
características de desempeño del método, satisfacen los requisitos para su aplicación
analítica.
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3.26 VALIDACIÓN PARCIAL (confirmación del método): Evidencia objetiva para demostrar
que al aplicar un método normalizado, se cumple con las especificaciones del mismo y
se cuenta con la competencia técnica para realizarlo adecuadamente tomando en
consideración sus propias instalaciones, equipo y personal.
4.
DOCUMENTOS APLICABLES
1. AOAC. Guidelines for Single Laboratory Validation of Chemical Methods for Dietary
Supplements and Botanicals. December 2002.
2. CENAM. Guía para estimar la incertidumbre de la medición. Abril 2004.
3. CENAM-EMA. Guía técnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analíticas que
emplean la técnica de medición de conductividad electrolítica. Abril 2008.
4. CENAM-EMA. Guía técnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analíticas que
emplean las técnicas de Espectrofotometría de Absorción Atómica y de Emisión y Atómica con
Plasma Acoplado Inductivamente. Abril 2008.
5. CENAM-EMA. Guía técnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analíticas que
emplean las técnicas de Cromatografía de Gases (GC) y Cromatografía de Líquidos de Alta
Resolución (HPLC). Abril 2008.
6. CENAM-EMA. Guía técnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analíticas que
emplean la técnica de Gravimetría de Masa. Abril 2008.
7. CENAM-EMA. Guía técnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analíticas que
emplean la técnica de medición de pH. Abril 2008.
8. CENAM-EMA. Guía técnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analíticas que
emplean la técnica de Titulación volumétrica. Abril 2008.
9. CENAM-EMA. Guía técnica sobre trazabilidad e incertidumbre en las mediciones analíticas que
emplean la técnica de Espectrofotometría de Ultravioleta-Visible. Abril 2008.
10. Colegio Nacional de Químicos Farmacéuticos Biólogos. Guía de Validación de Métodos
Analíticos. Edición 2002.
11. Directiva 96/23/CE en cuanto al funcionamiento de los métodos analíticos y la interpretación de
los resultados. Agosto 2002.
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12. EMA. Documento MP-CA005-01. Manual de Procedimientos. Incertidumbre de mediciones.
Política.
13. Eurachem. The Fitness for Purpose of Analytical Methods. A Laboratory Guide to Method
Validation and Related Topics. First Edition 1998.
14. Eurachem-CITAC. Guide CG4 Quantifying Uncertainty and Analytical Measurements. Second
Edition. QUAM :2000.1
15. IUPAC. Harmonized Guidelines for Single Laboratory Validation of Methods of Analysis. Pure
Appl. Chem., Vol. 74, No. 5, pp. 835–855, 2002.
16. NMX-CH-140-IMNC-2002. Guía para la expresión de incertidumbre en las mediciones.
17. RILAA/INPAZ. Curso a distancia sobre Validación de Métodos Químicos. Buenos Aires,
Argentina. 2005.
18. Eurolab. Measurement Uncertainty in Testing. A short introduction on how to characterize
accuracy and reliability of results including a list of useful references. Techical Report No.
1/2002. June 2002.
5.
DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD
5.1
CRITERIO No. 1
Clasificar el método como Normalizado o no Normalizado conforme a lo siguiente:
5.1.1
Método Normalizado es aquel método publicado como primera instancia en:
1. Normas Oficiales Mexicanas (NOM)
2. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (FEUM)
3. Normas Mexicanas (NMX).
Como segunda instancia:
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
Métodos Oficiales del AOAC
Standard Methods
Environmental Protection Agency (EPA)
Pesticide Analytical Manual (PAM)
Collaborative International Pesticides Analytical Council (CIPAC)
United States Pharmacopoeia (USP)
British Pharmacopoeia (BP)
American Society for Testing Materials (ASTM)
International Standard Organization (ISO)
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13.
14.
15.
16.
17.
5.1.2
Codex Alimentarius
Food and Drug Administration (FDA)
Food and Agriculture Organization (FAO)
European Commission (CE)
United States Department of Agriculture (USDA)
Método no Normalizado es aquel:
1. Desarrollado por el laboratorio (método propio).
2. Método obtenido de publicaciones científicas (Journals, tesis, etc).
3. Método normalizado modificado, ampliado o usado fuera de su alcance.
5.2
CRITERIO No. 2
Considerar los siguientes parámetros de desempeño de acuerdo al tipo de método.
Parámetro
Métodos normalizados
Fisicoquímicos
Físicos
Cuantitativos
Cualitativos
Métodos no
normalizados
Fisicoquímicos
Intervalo lineal y de
trabajo
Límite de detección
Límite de cuantificación
Recuperación
Sesgo
Repetibilidad
Reproducibilidad
Incertidumbre
Sensibilidad
Selectividad
Robustez
Nota: Los parámetros de desempeño a considerar para los métodos fisicoquímicos dependerá del tipo de prueba
de que se trate.
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5.3
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CRITERIO No. 3
Clasificar el método por tipo de prueba
Tipo de prueba
Metodología
Espectrofotometría UV-Visible
Turbiedad
Espectrofotométrica Absorción Atómica (AA),
Plasma Inductivamente Acoplado (ICP)
Cromatográfica
Potenciométrica
Volumétrica
Gravimétrica
Física
(cuantitativa)
Cromatografía de Líquidos (HPLC),
Cromatografía de Gases (GC),
Cromatografía de Líquidos-Masas (HPLC-MS),
Cromatografía de Gases- Masas (GC-MS)
pH
Aniones y cationes por técnica de Ion selectivo
Conductimetría
Valoraciones por titulación (manual y automática)
Pérdida por secado
Residuo de ignición
Materia extraña
Densidad relativa
Disolución
Desintegración
Índice de refracción
Rotación óptica
Punto de fusión
Polarimetría
Espectrometría de Infrarrojo
Variación de volumen
Uniformidad de dosis
Osmolaridad
Temperatura de fusión
Dispositivos médicos
Color
Viscosidad
Temperatura de fusión, etc.
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Tipo de prueba
Metodología
Física
(cualitativa)
Pruebas límites de cloruros, fosfatos, hierro, fluoruros,
sulfatos, etc
Metales pesados (cualitativa)
Inhibidores (formaldehído, sales cuaternarias, oxidantes,
derivados clorados, etc.
CRITERIO No. 4
Establecer los parámetros finales de desempeño con base al tipo de prueba:
Espectrofotométrica
Cromatográfica
Potenciométrica
Volumétrica
Gravimétrica
Física
Tipo de prueba
Intervalo lineal y de trabajo
SI
SI
SI
SI
SI
NO
Límite de detección
SIa
SIa
NO
NO
NO
SIb
Límite de cuantificación
SIa
SIa
SIa
SIa
SIa
NO
Recuperación
SI
SI
NO
SI
SI
NO
Sesgo
SI
SI
SI
SI
SI
NO
Repetibilidad
SI
SI
SI
SI
SI
SIc
Reproducibilidad
SI
SI
SI
SI
SI
SIc
Incertidumbre
SI
SI
SI
SI
SI
SIc
Sensibilidad
SId
SId
SId,e
SIe
SId
NO
Selectividad
SId
SId
SId,e
SI
SI
SIb
Robustez
SId
SId
SId
SId
SId
SId
Parámetro de
desempeño
Solo para análisis a nivel de trazas (ppm, ppb, ppt)
b Solo métodos cualitativos.
c Solo métodos cuantitativos.
d Solo aplica para métodos no normalizados.
e Solo para el análisis de aniones y cationes por ión selectivo
a
Nota: Solo para métodos gravimétricos y volumétricos la selectividad se sustenta con los resultados de linealidad,
recuperación, repetibilidad y reproducibilidad, si estos cumplen con los criterios de aceptación establecidos
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CRITERIO No. 5
Seleccionar el tipo de matriz a evaluar conforme a:
1. La más solicitada.
2. La más compleja.
3. Para métodos generales que apliquen a diferentes matrices; FEUM, Residuos orgánicos,
metales contaminantes, etc. Se debe seleccionar una matriz representativa por grupo
(alimentos, principio activo, tipo de presentación, entre otros)
a. Alimentos: lácteos, cárnicos, productos de la pesca agua, cereales, frutas,
vegetales, productos de panificación, miel, productos de confitería, especias,
entre otros.
b. Medicamentos: cápsula, gragea, tableta, suspensión, jarabe, ungüento, colirio,
espuma, gel, supositorio, parche, jalea, ovulo, entre otros.
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5.6
CRITERIO No. 6
Evaluar los parámetros de desempeño correspondientes como se detalla en las siguientes tablas:
Parámetro
Muestras
Repeticiones
Calcular/determinar
Observaciones
a) Utilizar niveles establecidos en la
curva de calibración ó utilizar la tabla
guía contenida en el anexo A.
a) Graficar respuesta analítica (y) vs.
nivel de concentración adicionado (x)
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas
Intervalo lineal
Mínimo 5 niveles diferentes de
concentración
Cada nivel por
triplicado
b) Confirmar visualmente la existencia
de linealidad del intervalo.
c) Elaborar gráfico de residuales.
d) Confirmar aleatoriedad de los
residuales alrededor de la recta
Ver nota 2
Intervalo de
trabajo
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas
Mínimo 5 niveles diferentes de
concentración.
a) Considerar los niveles que cumplen
con los criterios de recuperación y
repetibilidad establecidos.
Cada nivel por
triplicado
b) Graficar la concentración obtenida
(y) vs. la concentración adicionada (x)
c) Calcular la pendiente (m) y el
coeficiente de correlación (r ).
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b) Los niveles de concentración deben
estar igualmente espaciados en el
intervalo de interés.
c) Considerar en el intervalo el valor de
la especificación y/o los valores de
aceptación y rechazo y estar en la
medida de lo posible al centro de este.
d)
Reportar
el
intervalo
de
concentraciones obtenido en las
unidades establecidas por el método.
a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimación del intervalo lineal.
b)
Reportar
el
intervalo
de
concentraciones obtenido en las
unidades establecidas por el método
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Parámetro
Límite de
detección
(pruebas
cualitativas)
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Muestras
Repeticiones
Calcular/determinar
Observaciones
10 replicas de cada nivel
Elaborar tabla de respuesta de
resultados positivos y negativos con
respecto a la concentración
Concentración mínima en la cual se
obtienen 10 resultados positivos
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.
Mínimo 5 niveles diferentes de
concentración.
a)
Límites de
detección y
cuantificación
Recuperación y
sesgo
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas
Mínimo 5 niveles diferentes de
concentración.
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.
Mínimo 5 niveles diferentes de
concentración
b)
Cada nivel por
triplicado
Cada nivel por
triplicado
Calcular la pendiente (m) y
la desviación estándar de la
ordenada al origen (sbo) de
la respuesta analítica (y) vs
nivel de concentración
adicionado (x)
Estimar los límites con las
siguientes ecuaciones:
LD =
3.3 * sbo
m
LC =
10 * sbo
m
a)
Calcular
la
concentración
recuperada para cada nivel de
concentración adicionado.
b) Para el sesgo, efectuar la resta
aritmética de la concentración añadida
menos la concentración recuperada.
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a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimación del intervalo de trabajo,
b) Reportar los límites estimados
estadísticamente en las unidades
establecidas por el método.
c) Considerar como límite práctico de
cuantificación el nivel inferior estimado
en el intervalo de trabajo.
a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimación del intervalo de trabajo
b) Reportar la recuperación como
intervalo en % y el sesgo como intervalo
en las unidades establecidas por el
método.
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Parámetro
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Muestras
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.
Repetibilidad
Tres niveles diferentes de
concentración (niveles inferior,
medio y superior estimados en
el intervalo de trabajo)
Repeticiones
Cada nivel por
sextuplicado.
Calcular/determinar
Observaciones
a) Analizar las muestras por un mismo
analista (analista 1) en 2 días
diferentes (3 niveles/triplicado /día).
a) Utilizar la información obtenida en la
estimación del intervalo de trabajo como
los datos para el día 1 (cada nivel por
triplicado por día).
b) Calcular el % de recuperación de
los 6 resultados para cada nivel
c) Calcular la media (x), desviación
estándar (sr) y el coeficiente de
variación (CVr) de los % de
recuperación obtenidos para cada
nivel adicionado.
b) Reportar la desviación estándar (sr)
o coeficiente de variación (CVr) máximos
obtenidos.
c) Si no se cuenta con dos analistas o
dos equipos para estimar la
reproducibilidad, estimar solo la
repetibilidad con el mismo analista pero
utilizando un tercer día.
a) Analizar las muestras en 2 días
diferentes (3 niveles/triplicado/día) y
por un analista diferente (analista 2)
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.
Reproducibilidad
Tres niveles diferentes de
(Precisión
concentración (niveles inferior,
intermedia)
medio y superior estimados en
el intervalo de trabajo).
Cada nivel por
sextuplicado.
b) Calcular el % de recuperación de
los 6 resultados para cada nivel
c) Combinar estos resultados con los
datos obtenidos en la estimación de la
repetibilidad y calcular la media (x),
desviación estándar (sR) y el
coeficiente de variación (CVR) de los
% de recobro para cada nivel.
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Reportar la desviación estándar (sR) o
coeficiente de variación (CVR) máximos
obtenidos
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Muestras
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas.
Sensibilidad
Selectividad
Mínimo 5 niveles diferentes de
concentración.
Blancos de muestra o
muestras adicionadas con
cantidades conocidas de
interferencias, productos de
degradación o impurezas
Repeticiones
Cada nivel por
triplicado
Por duplicado
Calcular/determinar
Observaciones
a) Graficar la respuesta analítica (y) vs
la concentración adicionada (x)
a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimación del intervalo de trabajo
b) Calcular la pendiente de la recta (m)
b) Reportar la relación entre el cambio de
respuesta analítica por unidad de
concentración.
Pueden
emplearse
técnicas
confirmatorias para asegurar la identidad
del analito como son la utilización de
detectores de espectrometría de masas,
arreglo de diodos o infrarrojo.
Evaluar si la presencia de las
interferencias, impurezas o productos
de degradación inhiben o incrementan
la detección del analito.
Cuando no se tienen estándares de
interferencias o impurezas se pueden
aplicar las siguientes condiciones de
degradación:
a) Temperatura: 70-120 °C o 20 °C por
debajo de su punto de fusión, durante 2
a 4 semanas.
b) Luz UV, luz fluorescente y/o humedad
relativa por un tiempo apropiado.
c) pH 1 a 2 y/o 10 a 12 y someterlas a
60-80 °C por un tiempo apropiado.
d) Para líquidos y semisólidos adicionar
peróxido de hidrógeno.
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Muestras
Repeticiones
Calcular/determinar
Observaciones
a) Identificar de 4 a 7 factores que
puedan tener un efecto significativo en
el desempeño del método y variar
ligeramente cada uno ellos.
b) Efectuar una serie de 8
combinaciones de valores nominales
con variaciones deliberadas
Blancos de muestra (placebos)
o muestras adicionadas
Robustez
Concentración equivalente al
nivel medio estimado en el
intervalo de trabajo
8 muestras por duplicado
c) Analizar una muestra por duplicado
con cada serie de combinaciones
d) Calcular las diferencias de las
mediciones de los subgrupos.
e) Graficar en una línea los valores de
las diferencias de menor a mayor.
f) Calcular la desviación estándar de
las diferencias (sDi).
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a) Reportar los factores que más influyen
en el resultado final.
b) Establecer si el método es robusto
frente a las variaciones establecidas.
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Muestras
Repeticiones
Observaciones
Calcular/determinar
a) Especificar el mensurando.
b) Identificar
incertidumbre
Incertidumbre
No aplica
Utilizar la información
obtenida en el proceso
de validación.
las
fuentes
de
c) Cuantificar los componentes de la
incertidumbre (u)
d) Calcular la incertidumbre estándar
combinada (uc)
e)
Calcular
expandida(Uexp)
la
Puede utilizarse como guía los criterios
establecidos en las referencias 2, 12, 14,
16 y 18.
incertidumbre
Nota 1. Cuando no sea posible adicionar de manera directa el analito en la muestra, la adición debe ser llevada a cabo en las primeras etapas.
Nota 2. Para la determinación de: intervalo lineal y de trabajo, límites de detección y cuantificación, recuperación, sesgo, repetibilidad y sensibilidad se debe aplicar el método
de ensayo específico por un mismo analista (el de más experiencia en el análisis) bajo las mismas condiciones.
Nota 3. Para métodos físicos cuantitativos la repetibilidad y reproducibilidad se calculan en base a la lectura directa.
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5.7
CRITERIO No. 7
Criterios de aceptación
Parámetro
Criterio de aceptación
a) Comportamiento lineal en la gráfica de concentración vs respuesta analítica.
Intervalo lineal
b) Datos aleatorios en el gráfico de residuales
a) Pendiente: valor cercano a 1
Intervalo de trabajo
Límite de cuantificación
práctico
Límite de cuantificación
estimado
Límite de detección
Recuperación
Repetibilidad
Reproducibilidad
Robustez
5.8
b ) Coeficiente de correlación:
r ≥ 0.98 para cuantificación de residuos e impurezas
r ≥ 0.99 para cuantificación de contenido e ingrediente activo
Nivel inferior estimado en el intervalo de trabajo
Menor o igual al nivel inferior estimado en el intervalo de trabajo
Los establecidos en la referencia original del método. Si no se dispone de estos
datos utilizar como guía las tablas contenidas en el anexo B.
Si sDi < sR el conjunto de los factores no influye en el resultado y por tanto el
método es robusto.
CRITERIO No. 8
Elaborar un protocolo de validación que incluya lo siguiente:
Título
1.Objetivo
2. Campo de aplicación
3. Método de ensayo
4. Equipo
5. Materiales
Protocolo de validación parcial o total (según aplique). Señalar asimismo el
nombre y clave del método que se pretende validar.
Considerar los parámetros de desempeño a evaluar y el analito a determinar
Indicar el tipo de producto (s) para los cuales aplica la validación
Elaborar un diagrama de flujo simplificado, que señale la metodología empleada
para cuantificar el analito (método interno)
Descripción general del equipo a utilizar en la validación.
Indicar los materiales a utilizar separando como material de uso general y material
volumétrico
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6. Reactivos
7. Muestras
8. Desarrollo experimental
9. Resultados
10. Análisis estadístico
11. Criterios de aceptación
a) Indicar el nombre de los reactivos a utilizar y su grado.
b) Señalar los patrones a utilizar con su grado de pureza o concentración.
c) Detallar la preparación de las soluciones de trabajo (soluciones que no
requieren de un valor de título exacto).
d) Detallar la preparación de la soluciones de referencia (soluciones que requieren
de un título exacto, soluciones stock, curva de calibración, etc.).
Indicar las características, forma de almacenamiento y cantidades de muestra
estimadas para llevar a cabo la validación.
Detallar la preparación de los blancos de muestra o muestras adicionadas.
Detallar las instrucciones para cada uno de los parámetros de desempeño a
ensayar.
Propuesta de formato de registro
Establecer para cada parámetro de desempeño la herramienta estadística a
utilizar para su evaluación.
Establecer los criterios de aceptación que deben cumplirse con su respectiva
referencia bibliográfica.
Nota: El protocolo debe incluir firmas de quien elaboró, revisó y aprobó.
5.9
CRITERIO No. 9
Elaborar un informe de resultados de validación que incluya lo siguiente:
Título
1.Objetivo
2. Campo de aplicación
3. Antecedentes
4. Equipo
5. Materiales
6. Reactivos
Informe de resultados de validación parcial o total (según aplique). Señalar
asimismo el nombre y clave del método que se validó.
Considerar los parámetros de desempeño evaluados y el analito determinado.
Indicar el tipo de producto (s) para los cuales aplicó la validación
Hacer una breve explicación de las características del analito, su importancia
sanitaria o nutricional, así como las especificaciones nacionales e internacionales
establecidos para este.
Descripción del nombre, marca, modelo, número de serie, número de
identificación e intervalo de trabajo del equipo utilizado en la validación
Descripción de:
a) Nombre, marca y lote del material de uso general utilizado.
b) Nombre, marca, clave, volumen nominal y volumen real del material volumétrico
empleado
a) Indicar el nombre, marca, grado, pureza, presentación y lote de los reactivos
utilizados
b) Indicar el nombre, marca, pureza o concentración, presentación y lote de los
patrones de referencia utilizados
c) Detallar la preparación de las soluciones de trabajo (soluciones que no
requieren de un valor de título exacto) que se emplearon
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d) Detallar la preparación de la soluciones de referencia (soluciones que requieren
de un título exacto, soluciones stock, curva de calibración, etc.) que se utilizaron.
7. Muestras
8. Método de ensayo
9. Desarrollo experimental
10. Resultados
11. Análisis de resultados
12. Conclusión
13. Bibliografía
Indicar las características, forma de almacenamiento, marca, presentación,
caducidad y cantidades de muestra utilizadas para llevar a cabo la validación.
Detallar la preparación de los blancos de muestra o muestras adicionadas
utilizados.
Elaborar un diagrama de flujo simplificado, que señale la metodología empleada
para cuantificar el analito (método interno)
Detallar como se llevaron a cabo los ensayos de cada uno de los parámetros de
desempeño.
Presentación de resultados en forma de tablas, señalando fechas de inicio y
término, analistas, laboratorio, analito, matriz, unidades y clave de bitácora o
registro primario
Presentar en forma de tabla los criterios de aceptación considerados y los
resultados obtenidos y hacer las observaciones correspondientes.
Efectuar una conclusión final en donde se señale que el método se ajusta al uso
propuesto (Numeral 5.4.3 17025)
Referencias utilizadas.
Los que aplique:
14. Anexos
Bases de datos utilizadas
Cromatogramas, espectros, resultados impresos, etc.
Certificados de análisis o pureza.
Certificados de trazabilidad
Certificados de calibración de material.
Formatos de verificación de material
Gráficos de control, etc.
Nota: El informe de resultados debe incluir firmas de quien elaboró, revisó y aprobó.
6.0 NOTIFICACIÓN DE VIGENCIA
Se otorga un periodo de transición de 180 días contados a partir de la fecha de publicación para que
los laboratorios que se encuentren autorizados o en proceso del mismo se apeguen a estos criterios.
Para los laboratorios que soliciten autorización posterior a la fecha de publicación, deberán cumplir
estos criterios de inicio.
Estos criterios se aplicarán en todos los procesos de evaluación que se realicen a los 180 días
naturales, a partir de la fecha de publicación del documento en la página web de la COFEPRIS.
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ANEXOS
Anexo A. Guía para considerar los niveles del intervalo lineal
Determinación
Intervalo recomendado
Contenido o principio activo
80 a 120 % del contenido del marbete o
especificación
Cuantificación de una impureza
Uniformidad de contenido
Prueba de disolución
Residuos y contaminantes
50 a 120 % el valor de la especificación
70 a 130 % la concentración declarada en el marbete
Mínimo ± 20% el intervalo establecido
0 a 150 % el valor de la especificación.
Anexo B.- Criterios de aceptación
Recuperación para contenido en alimentos y agua
Concentración del analito
0.1 a 1 %
1 a 10 %
10 a 99 %
100 %
Criterio de aceptación
90-108%
92-105%
95-102%
98-101%
Recuperación para residuos y contaminantes en alimentos y agua.
Concentración del analito
< 1 µg/kg ó µg/L
1 a 10 µg/kg ó µg/L
10 a 100 µg/kg ó µg/L
0.1 a 100 mg/kg ó mg/L
100 a 1000 mg/kg ó mg/L
Criterio de aceptación
50-120%
60-120%
70-120%
70-110%
85-110%
Recuperación en productos farmacéuticos
Prueba
Cromatográfica
Volumétrica
Espectrofotométrica
Criterio de aceptación
98-102%
98-102 %
97-103 %
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Repetibilidad y reproducibilidad para contenido en alimentos y agua.
Concentración del analito
0.1 a 1 %
1 a 10 %
10 a 99 %
100 %
Repetibilidad ( r)
Reproducibilidad (R )
CVr ≤ 3%
CVr ≤ 2%
CVr ≤ 1.5 %
CVr ≤ 1%
CVR ≤ 6%
CVR ≤ 4%
CVR ≤ 3 %
CVR ≤ 2%
Repetibilidad y reproducibilidad para residuos y contaminantes en alimentos y agua.
Concentración del analito
< 1 µg/kg ó µg/L
1 a 10 µg/kg ó µg/L
10 a 100 µg/kg ó µg/L
0.1 a 100 mg/kg ó mg/L
100 a 1000 mg/kg ó mg/L
Repetibilidad ( r)
Reproducibilidad (R )
CVr ≤ 35%
CVr ≤ 30%
CVr ≤ 20%
CVr ≤ 15%
CVr ≤ 10 %
CVR ≤ 53%
CVR ≤ 45%
CVR ≤ 32%
CVR ≤ 23%
CVR ≤ 16%
Repetibilidad y reproducibilidad en productos farmacéuticos
Prueba
Cromatográfica
Volumétrica
Espectrofotométrica
Repetibilidad
CVr ≤ 2 %
CVr ≤ 2 %
CVr ≤ 3 %
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Reproducibilidad
CVR ≤ 2 %
CVR ≤ 2 %
CVR ≤ 3 %