Lesiones Neoplásicas Tempranas (LNT) y Tumores del Colon

Lesiones Neoplásicas Tempranas (LNT) y Tumores del Colon
Inducidos con 1,2-Dimetilhidrazina (DMH) en Ratas
Sánchez Negrette, M. - Montenegro, M. de las A. - Borda, J. T. - Burna, A. N.
Cátedra Patología General y Sistemática. Facultad de Ciencias Veterinarias - UNNE Sargento Cabral 2139 - (3400) Corrientes
E-mail: patgral@vet.unne.edu.ar
Trabajo subsidiado por SGCYT-UNNE.
ANTECEDENTES
La histogénesis del carcinoma inducido químicamente en animales de laboratorio ha sido ampliamente
debatida. Algunos investigadores (10,12,14) describen que los focos carcinomatosos microscópicos se
originan en la mucosa superficial, independientemente de una lesión carcinomatosa previa ( la teoría de " de
novo" ). Por otra parte, otros investigadores (4,9,11) consignan focos microscópicos originados en pólipos ( la
teoría de " secuencia adenoma-carcinoma"). Esta misma discusión existe sobre la génesis del cáncer de colon
humano (1,3,5,7,8). Los trabajos experimentales con 1,2-dimetilhidrazina (DMH) demuestran que los
adenocarcinomas se originan en la mucosa sobre acumulos linfoides que existen a lo largo del intestino (2).
Por otra parte la existencia de los Focos de Criptas Aberrantes (FCA) con localización predominante sobre y
alrededor de los nódulos linfoides asociados al intestino (NLA) hacen suponer que los nódulos linfoides en el
colon distal desempeñan algún posible rol de promoción en la carcinogénesis (6,13). Los estudios
experimentales con animales de laboratorio han permitido corroborar gran parte de los conocimientos
obtenidos en las investigaciones epidemiológicas, en un esfuerzo por determinar el origen del cáncer del
colon humano y de los factores de riesgo involucrados. En este sentido existen varios modelos de cáncer
experimental de colon en animales de laboratorio. Estos modelos utilizan ratas, ratones y hámsters, los cuales
son sometidos a diferentes sustancias químicas carcinogénicas, siendo la más utilizada la 1,2-dimetilhidrazina
(DMH). La DMH es uno de los carcinógenos químicos más efectivos que inducen cáncer de colon en el 80 al
100% de las ratas, entre 5 y 7 meses posteriores al inicio del tratamiento. El objetivo del presente trabajo es
reportar el desarrollo de lesiones neoplásicas tempranas y su relación con los nódulos linfoides asociados así
como la localización y tipo de tumores del colon inducidos experimentalmente con la DMH.
M ATERIALES Y MÉTODOS
Fueron utilizadas 30 ratas Wistar “Cepa Instituto de Biología” obtenidas del bioterio de la cátedra de
Farmacología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional del Nordeste, de 4 meses de edad, con
un peso promedio de 250 g. Las mismas fueron alojadas en jaulas individuales en ambiente con temperatura
controlada de 21 ºC, mantenidas con agua y dieta ad-libitum. De las 30 ratas, 10 fueron utilizadas como
grupo control y 20 como grupo experimental.
Las lesiones neoplásicas tempranas y los tumores intestinales fueron inducidos mediante 1 inyección
subcutánea semanal de 1,2-dimetilhidrazina (DMH) durante 16 semanas a la dosis de 20 mg/kg de peso
corporal. La DMH fue preparada como una solución conteniendo 400 mg de DMH disuelta en 100 ml de agua
destilada estéril conteniendo 37 mg de EDTA como agente estabilizador y mantenida dicha solución a pH
6,5 usando hidróxido de sodio.
Todos los animales fueron sacrificados 3 meses posteriores a la última dosis de DMH. En cada uno de los
animales el intestino grueso en su totalidad fue extraído, abierto longitudinalmente y colocado sobre una
plancha de cartón y fijado con formol bufferado al 10 % durante 24 horas. El examen macroscópico consistió
en determinar las características, tamaño y localización de los tumores. Todos los tumores fueron cortados
transversalmente y el resto del intestino fue enrollado y procesado por las técnicas histológicas clásicas,
incluído en parafina, cortado en 5 µm y coloreado con Hematoxilina Eosina.
Macroscópicamente los tumores fueron clasificados en neoplasias de crecimiento polipoide con sus formas
pediculadas y de base sésil y neoplasias de crecimiento no polipoide de tipo plano. Microscópicamente todo el
intestino grueso fue estudiado a fin de localizar en sus diferentes partes: ciego, colon proximal, colon distal y
recto las lesiones neoplásicas tempranas y los tumores. Las neoplasias fueron clasificadas en Adenomas (Ad)
con sus variantes tubular y tubulo-velloso, Adenocarcinomas (AC), Carcinomas de células en anillo de sello
(CCAS) y Carcinomas mucinosos (CM). Todos los tumores malignos fueron estadificados de acuerdo al
grado de invasión de la pared intestinal y presencia de metástasis.
RESULTADOS
Examen macroscópico
Macroscópicamente se observaron 94 tumores en el intestino grueso (IG), localizándose 20 neoplasias en el
ciego (21,27 %), 3 en el colon proximal (3,19 %), 48 en el colon distal (51,06 %) y 23 en el recto (24,46 %).
El máximo número de tumores por rata en el IG fue de 11 y el mínimo fue de 2 tumores. El tamaño de los
tumores osciló de 1 a 21 mm. Algunos animales presentaron agrandamiento abdominal y prolapso rectal con
exteriorización de tumores.
Entre los tumores del IG 61 presentaron formas polipoides (64,89%), siendo 19 con formas pediculadas y 42
con base sésil y 32 tumores presentaron formas planas (34,04%), siendo 1 caso de forma ulceroinfiltrante.
Metastasis fue observada en ganglios linfaticos cecales (7 casos) y siembra en cavidad peritoneal y en
pulmones (2 casos). Los tumores mayores de 10 mm de diámetro provocaron frecuentemente intususcepción
del área vecina a los mismos.
Examen microscópico
Microscópicamente se pudo determinar la presencia de 5 neoplasias planas que no hacian relieve,
involucrando únicamente la mucosa y por lo tanto no observable macroscópicamente. Lesiones neoplásicas
tempranas (LNT) fueron observadas en la mayoría de los animales tratados con DMH en criptas localizadas
alrededor o sobre los nódulos linfoides asociados al intestino, localizadas tanto en ciego, colon proximal,
colon distal y en recto. Estas LNT comprometieron en ocasiones sólo grupos de 2 a 3 criptas , las mismas se
caracterizaron por marcada basofilia citoplasmática, disminución y/o ausencia de células caliciformes,
núcleos prominentes con cromocentros gruesos y evidente nucléolo, en ocasiones estratificación celular y
pérdida de la polaridad.
Las neoplasias fueron clasificadas en benignas y malignas. El total de tumores benignos fue de 27, de los
cuales 22 fueron adenomas con crecimiento polipoide y 5 de tipo plano, uno de estos últimos fue observado
sólo microscópicamente. Los tumores malignos fueron 32 AC, de los cuales 2 fueron hallados
microscópicamente, siendo 29 AC con patrón tubular y 3 de tipo tubulovelloso. Se observaron 38 CCAS, de
los cuales 2 fueron hallados microscópicamente. Por último fue observado 2 CM y 1 caso de carcinoma in
situ. De los 73 tumores malignos 33 fueron de tipo A es decir con invasión de la submucosa, 20 fueron B es
decir con invasión de la muscular, 10 de tipo C con invasión de serosa y tejido pericolónico y 9 de tipo D con
metastasis a distancia. En un caso de CCAS se observó metaplasia ósea.
Los tumores que invadian la serosa y los de la cavidad peritoneal fueron muy fibrosos conteniendo masas o
cordones de células en anillo de sello, observándose también formaciones quísticas con contenido mucinoso.
Las metastasis en ganglios linfáticos presentaron las mismas características pero con menor grado de fibrosis,
observándose frecuentes células en anillo de sello agrupadas en masas sólidas o dispersas en forma aislada
rodeadas o inmersas en cavidades con contenido mucinoso. Las metastasis pulmonares comprometieron todo
el pulmón formando estructuras adenoides. Las metastasis se localizaron preferentemente en la superficie
vecina a la pleura.
ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS Y CONCLUSIONES
El estudio anatomopatológico, macro y microscópico del intestino, permitió detectar la presencia y frecuencia
de lesiones tumorales y lesiones neoplásicas tempranas en las diferentes regiones del intestino grueso y
correlacionar el tipo histológico con los diferentes tamaños, formas de crecimiento y grado de invasión de la
pared intestinal.
Los tumores se localizaron predominantemente en el colon distal y menos frecuentemente en el recto y ciego.
Sólo se observaron tres casos en colon proximal.
Macroscópicamente predominó la forma de crecimiento polipoide con base sésil, sobre las formas planas no
polipoides.
El tamaño de los tumores osciló de 1 a 21 mm, predominando los tumores con tamaños entre 6 y 10 mm.
Microscópicamente se observaron 26 tumores benignos y 68 tumores malignos. En los Adenomas y
Adenocarcinomas predominó el patrón tubular, no se observaron tumores con patrón velloso puro.
Los tumores malignos más frecuentes fueron los CCAS, seguido por los Adenocarcinomas, encontrándo se
sólo 2 casos de Carcinomas Mucinosos.
La mayoría de los AC fueron de formas polipoides, mientras que los CCAS y CM fueron de tipo plano no
polipoide.
Únicamente los CCAS realizaron metástasis en ganglios linfáticos, pulmones y siembra en cavidad
peritoneal.
El análisis de los resultados del examen histológico demuestra que existe una correlación entre el aspecto
macroscópico y la estructura microscópica de los tumores epiteliales. Las formas de crecimiento polipoide
consistieron de Adenomas o Adenocarcinomas de tipo tubular o tubulo-velloso con mínima invasión de la
pared intestinal . Los tumores planos de crecimiento no polipoide y con características de CCAS fueron los
que más frecuentemente metastatizaron. En muchos casos, el Adenoma de tipo tubular exibió características
de Adenocarcinomas mucosecretantes con presencia de células en anillo de sello, en estos casos estas áreas de
CCAS presentaron frecuentes metastasis.
Las LNT y las neoplasias se localizaron principalmente en el colon distal en estrecha relación a los
agregados de nódulos linfoides.
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