INSTRUCCIONES DE USO Revisión 1 Feb. 2014 AGAR SOJA Y TRIPTICASEINA (T.S.A) Agar Soja y Tripticaseina (T.S.A) presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1068 Agar Sangre (Agar Soja y Tripticaseina) presentación placas de 90 mm Caja 20 unidades. Catálogo 912 Agar Soja y Tripticaseina (T.S.A) presentación Frascos 100 ml Caja 12 unidades. Catálogo 5000 Agar Soja y Tripticaseina (T.S.A) presentación tubos 10 ml Caja 20 unidades. Catálogo 4003 Agar Soja y Tripticaseina (T.S.A) presentación tubos 20 ml Caja 20 unidades. Catálogo 4016 Agar Soja y Tripticaseina (T.S.A) presentación Frascos 200 ml Caja 10 unidades. Catálogo 5157 USO PREVISTO Agar Soja y Tripticaseina está recomendado para la determinación de reacciones hemolíticas a partir de muestras clínicas FORMULA EN g/l Digerido Pancreático de Caseína 15.00 Cloruro Sódico 5.00 Digerido Papainico de Soja 5.00 Agar Bacteriológico 15.00 Final pH 7.3 ± 0.2 a 25ºC PREPARACION Agar Soja y Tripticaseina (T.S.A) presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1068 Suspender 40 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar agitando frecuentemente. Hervir durante un minuto o hasta disolución completa. Distribuir y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Si se van a preparar volúmenes grandes se puede aumentar el tiempo de esterilización en el autoclave, pero no la temperatura. Para preparar placas de sangre para el estudio de hemólisis, agregar un 5-10% de sangre estéril desfibrinada, preferentemente de conejo o carnero, al medio estéril, y enfriado a 45°C mezclar bien evitando la formación de burbujas. Las placas preparadas deben almacenarse entre 8-15°C. El color del medio preparado sin sangre es ámbar claro ligeramente opalescente. Con sangre rojo cereza. El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar el medio. Agar Sangre (Agar TSA) placas de 90 mm Caja 20 unidades. Catálogo 912, tubos 10 ml Caja 20 unidades. Catálogo 4003, tubos 20 ml Caja 20 unidades. Catálogo 4016. Todos Medios preparados. Listo para su uso. Agar Sangre (Agar TSA) Frascos 100 ml Caja 12 unidades. Catálogo 5000 y Frascos 200 ml Caja 10 unidades. Catálogo 5157. Medio preparado. Listo para su uso. (Fundir y dispensar en placas) PRINCIPIO Y APLICACION AGAR SOJA Y TRIPTICASEINA (TSA) es un medio rico en nutrientes utilizado en microbiología clínica, para el cultivo y aislamiento de microorganismos exigentes y no exigentes a partir de nuestras clínicas. Contiene 2 peptonas ricas en fuentes de nitrógeno, obtenidas por la hidrólisis enzimática de Caseína y Soja, este medio soporta el crecimiento de una gran variedad de microorganismos, incluyendo los exigentes aerobios y anaerobios. La Peptona de soja contiene azucares naturales que promocionan el crecimiento bacteriano. El Cloruro sódico mantiene el balance osmótico, la Sangre aporta factores de crecimiento extras para el crecimiento. El Agar bacteriológico es el agente solificante. La falta de carbohidratos es muy útil en el estudio de reacciones hemolíticas. Si se desea, se pueden añadir antibióticos. TIPO DE MUESTRAS 1 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com Sangre La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en Microbiología Clínica. PROCEDIMIENTO 1. Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo. 2. Incubar en condiciones aeróbicas a 35 ± 2°C durante 18-72 horas. 3. Lectura e interpretación de los resultados Tipos de Hemolisis 1. Alpha-hemolisis: decoloración verdosa de medio 2 .Beta-hemolisis: zona clara alrededor de la colonia 4. Gamma-hemolisis: sin cambio CONTROL MICROBIOLOGICO Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de cepas patrón con el 7% de sangre desfibrinada de carnero, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 18-72 horas. Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inoculo cfu/ml 103-105 Desarrollo Bueno Recuperación % ≥70 Hemolisis Beta Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 103-105 Microorganismos Bueno ≥70 - Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 5 10 -10 Bueno ≥70 Alpha Streptococcus pyogenes ATCC 19615 103-105 Bueno ≥70 Beta 3 BIBLIOGRAFIA Altord, Wiese, and Cunter, J. Bact., 69:516. 1955. Ctapper and Parker, J. Bact. 70. 1955. Standard Methods for the Examination of Dairy Products. 11th Edition. APHA., Inc. New York, 1960. Curry, A.S., G. Joyce and G.N. Mcerven, Jr. 1993 CTFA Microbiology guideline. The Cosmetic To iletry and Fragance Association, Inc. Washington D.C. European Pharmacopoeia. 6.5 Diagnostico in vitro Solo para uso profesional Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com EP ALMACENAMIENTO Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación Utilizable hasta la fecha de caducidad. 25ºC 2ºC Placas preparadas almacenar entre 8-15°C Tubos y Frascos almacenar entre 2-8-°C Utilizable hasta la fecha de caducidad. Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 2 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com